PARP-1在脱氧胆酸钠促结肠癌细胞增殖中的作用

结肠癌的发生与肠腔内脱氧胆酸引起的DNA损伤有关,聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1（PARP-1）对DNA损伤具有修复作用.目的：探讨PARP-1在脱氧胆酸钠促结肠癌细胞增殖中的作用及其可能机制.方法：选用不同浓度的脱氧胆酸钠、PARP-1抑制剂5-氨基异喹啉酮（5-AIQ）或两者联合分别作用于人结肠腺癌细胞株HT-29.MTT实验检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,免疫细胞化学染色检测环氧合酶-2（COX-2）、caspase-3、PARP-1蛋白表达.结果：10～50 μmol/L脱氧胆酸钠能促进HT-29细胞增殖,增加COX-2、PARP-1蛋白表达,减低caspaae-3蛋自表达.100μmol/L 5-AIQ单独作用对HT-29细胞增殖无明显影响,但能减低COX-2、PARP-1蛋白表达.与单独作用相比,10μmol/L脱氧胆酸钠与100 μmol/L 5-AIQ联合能显著抑制HT-29细胞生长,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,COX-2、PARP-1蛋白表达减低,caspase-3蛋白表达无明显变化.结论：COX-2与PARP-1在脱氧胆酸钠促结肠癌细胞增殖的过程中可能存在相互作用,PARP-1抑制剂5-AIQ可能用于预防脱氧胆酸诱发的结肠癌.     

环氧合酶-2抑制剂吡罗昔康对结肠癌细胞生长的影响

目的观察非甾体类抗炎药、环氧合酶(COX)-2抑制剂吡罗昔康(Piroxicam)对结肠癌细胞的影响，并结合COX-2蛋白表达和细胞凋亡情况探讨结肠癌的预防。方法细胞株选用SW1116结肠腺癌细胞；细胞增殖实验时，用MTT法测定细胞增殖活性；用免疫组化及Western Blot方法检测细胞内COX-2蛋白表达；用DNA云梯电泳法检测细胞凋亡。结果吡罗昔康能够抑制结肠腺癌细胞的增殖，其效应与浓度呈正相关；浓度≥1．0mmol／L时呈现细胞毒作用。吡罗昔康作用12h即可显著抑制COX-2蛋白的表达；作用24h后，蛋白水平恢复程度与浓度成负相关。吡罗昔康浓度≥0．1mmol／L时可以诱导SW1116细胞的凋亡。结论吡罗昔康抑制结肠腺癌细胞的增殖与抑制COX-2过度表达和促进细胞凋亡有关，由于吡罗昔康的效应呈现浓度和时间依赖性，在进行预防或治疗结肠癌的临床研究时，要考虑其有效剂量和用药间隔。     

黄连素对脱氧胆酸诱导的HT-29人结肠癌细胞增殖的抑制作用及机制研究

目的观察黄连素对脱氧胆酸(DCA)诱导的人结肠癌HT-29细胞增殖的抑制作用,探讨其可能的机制。方法200/μmol/LDCA加到HT-29细胞培养液中,同时给予不同浓度黄连素(1、5、10和20μmol/L),采用MTT法测定细胞增殖；RT-PCR法检测环氧合酶-2(COX-2)mRNA,免疫组化染色法检测细胞COX-2表达,放免法检测前列腺素E2(PGE2)含量。采用t检验和单因素方差分析。结果DCA作用HT-29细胞6 h,COX-2蛋白表达阳性率较对照组明显升高(65．5%±5．6%比6．2%±1．1%),PGE2合成增加(24．1 ng/L±1．4 ng/L比10．6 ng/L±0．8 ng/L),1μmol/L黄连素对DCA诱导的HT-29细胞作用6 h可抑制细胞增殖,抑制率为7．4%±3．5%。黄连素浓度≥1μmol/L时,可抑制DCA诱导的COX-2 mRNA表达,并抑制PGE2合成,上述作用均呈浓度-时间依赖性。结论黄连素可抑制DCA诱导的HT-29人结肠癌细胞增殖,抑制COX-2 mRNA和蛋白表达及PGE2合成,这可能是黄连素抑制HT-29细胞增殖的机制之一。     

COX-2抑制剂NS398调控PPARs信号转导通路抑制结肠癌细胞增殖的分子机制

目的:观察选择性COX-2抑制剂NS-398对结肠癌细胞系SW480中PPARs信号转导通路的影响,以期初步阐明选择性COX-2抑制剂抗结直肠癌非COX-2依赖性途径的作用机制．方法:应用RT-PCR检测结肠癌细胞系SW480中COX-2 mRNA表达水平,用选择性COX-2抑制剂NS-398处理结肠癌细胞系SW480．Western blot检测PPARs信号转导通路成员表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖状态,流式细胞技术检测细胞周期与凋亡情况．结果:结肠癌细胞系SW480中未检测到COX-2 mRNA表达,NS-398(75μmol／L)作用于SW480细胞72 h后,G1期细胞比率由31．2％上升至40．6％,S期细胞比率由52．8％下降至41．2％,细胞增殖受抑制．PPARα,PPARδ,PPARγ,cyclin D1与Bcl-xl表达水平随NS-398作用时间延长而下降．结论:选择性COX-2抑制剂NS-398可能通过非COX-2依赖途径影响结肠癌细胞的增殖．     

FTY720通过miR-494/MST1抑制结肠癌细胞并增加吉西他滨敏感性的分子机制

背景结肠癌在我国恶性肿瘤中发病率和死亡率均居第5位,化疗是其主要治疗方式,有研究表明免疫抑制剂FT Y720对癌症细胞增殖起一定的抑制作用,抑制剂联合化疗药物可提高癌症治疗效果.本研究使用免疫抑制剂FTY720与吉西他滨联合处理结肠癌细胞,并探索miR-494/哺乳动物Ste20样激酶1 (mammalian Ste20-like kinase 1,MST1)对在此过程中对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响,以期为结肠癌的治疗提供新的思路.目的研究FT Y720和吉西他滨对结肠癌细胞存活率和凋亡的影响和潜在的分子机制.方法用0.0001μg/mL、0.001μg/mL、0.01μg/mL、0.1μg/mL、1μg/mL的吉西他滨和2.5μmol/L、5μmol/L、7.5μmol/L、10μmol/L、12.5μmol/L的FTY720处理结肠癌SW1116细胞,CCK8法和流式细胞术检测SW1116细胞存活率和凋亡率,实时定量聚合酶链式反应检测miR-494和MST1 mRNA的含量,Western blot检测MST1、p21和Caspase-3蛋白表达水平,双荧光素酶报告系统验证miR-494与MST1的调控关系.结果吉西他滨(0.0001μg/mL、0.001μg/mL、0.01μg/mL、0.1μg/mL、1μg/mL)和FTY720 (2.5μmol/L、5μmol/L、7.5μmol/L、10μmol/L、12.5μmol/L)均可降低结肠癌SW1116细胞的存活率,且具有浓度依赖性,根据结果选取抑制率约为50%的0.1μg/mL吉西他滨和10μmol/L的FTY720进行后续实验,吉西他滨和FT Y720均可抑制细胞存活并促进细胞凋亡,且联合使用比单独使用效果更好;过表达miR-494可逆转FTY720、吉西他滨对SW1116细胞存活率和凋亡的作用;miR-494靶向调控MST1;抑制MST1可逆转FTY720和吉西他滨对SW1116细胞存活率和凋亡的影响.结论FTY720和吉西他滨通过miR-494/MST1抑制SW1116细胞存活,促进细胞凋亡.FTY720和吉西他滨对结肠癌SW1116具有抑制作用,且联合使用效果更佳.     

毛钩藤碱调控IL-6/STAT3信号通路抑制结肠癌细胞增殖、迁移及诱导细胞凋亡的体外实验

目的探讨毛钩藤碱对结肠癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其作用机制。方法用终浓度为150μmol/L、300μmol/L、600μmol/L的毛钩藤碱处理结肠癌细胞SW480,未经任何处理的SW480细胞作空白对照(NC)组,DMSO处理SW480细胞作为DMSO组,5 mg/L紫杉醇处理SW480细胞作为TAX 5 mg/L组。噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;qRT-PCR检测白细胞介素(IL)-6、信号转录和转录活化因子(STAT)3和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达水平;Western印迹检测蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-6的含量。结果不同浓度的毛钩藤碱可抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡;抑制细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)2蛋白的表达,促进半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3蛋白的表达;抑制IL-6、STAT3和VEGF的表达。结论毛钩藤碱可抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡,其机制可能是与IL-6/STAT3相关,将为结肠癌的治疗提供新思路和新靶点。     

血管生成素-1对SW1116细胞的作用及其机制

目的探讨血管生成素-1(Angiopoietin-1,Ang-1)蛋白对无血清DMEM培养基培养的结肠癌细胞(SW 1116)存活率的影响及其与PI3-′k inase/Akt通路的关系。方法将不同浓度的Ang-1蛋白作用于SW 1116细胞,用MTT法检测细胞增殖,根据实验结果选定Ang-1蛋白的后续实验浓度,设计出SW 1116细胞增殖抑制模型,分别向该模型中加入Ang-1及LY294002,应用免疫印记法分析相关蛋白(Tie-2、PI3K、Akt)的变化。结果 Ang-1组与无血清DMEM培养基组比较,Tie-2、PI3K、Akt三种蛋白在SW 1116细胞中的表达均增强,但仅Tie-2的表达有显著差异(P<0.01),LY294002组三种蛋白的表达均减弱(P<0.01,P<0.05)。结论较低浓度(0.05 mg/L)的Ang-1蛋白在结肠癌细胞中即有抗凋亡作用,且随着浓度的增加抗凋亡作用逐渐加强,当高于0.2 mg/L时,作用逐渐减弱,其诱导凋亡的机制可能与Tie-2/PI3-′k inase/Akt调节的通路有关,应用该途径的抑制剂LY294002可抑制结肠癌细胞的生长,实现抗肿瘤作用。     

姜黄素对胆汁酸诱导的人结肠癌细胞HT-29增殖的抑制作用

/L、作用6 h时和浓度≥0.5μmol/L、作用12 h时,即可抑制DCA诱导的COX-2 mRNA表达;姜黄素浓度≥1μmol/L、作用24～48 h和浓度>5 μmol/L、作用6～12 h,即可抑制DCA诱导的COX-2蛋白表达和PGE2合成.结论 姜黄素可以浓度和时间依赖模式抑制DCA诱导的HT-29细胞的增殖、COX-2 mRNA和蛋白的表达以及PGE2的合成,这可能是姜黄素抑制HT-29细胞增殖的机制之一.     

肝素酶抑制剂对结肠癌细胞侵袭迁移及MMP-2、MMP-9表达的影响

目的探讨肝素酶(Hpa)抑制剂对结肠癌细胞侵袭迁移及基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达的影响。方法用不同浓度的Hpa抑制剂OGT2115作用于结肠癌细胞SW480,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,计算半数抑制浓度。用半数抑制浓度的OGT2115作用于SW480细胞,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室检测细胞侵袭,酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养液上清Hpa活性,Western印迹检测细胞MMP-2、MMP-9表达水平。结果 Hpa抑制剂能够呈浓度依赖地抑制结肠癌细胞增殖活力,其半数抑制浓度为(5.82±0.34)μmol/L。6μmol/L的OGT2115作用后结肠癌细胞迁移率从(46.84±3.54)%降至(25.11±1.32)%,侵袭细胞数目从(153.24±11.84)个减少到(96.87±8.26)个,培养液上清Hpa活性明显降低,细胞中MMP-2、MMP-9表达水平明显下降。结论 Hpa抑制剂OGT2115可以抑制结肠癌细胞侵袭迁移和MMP-2、MMP-9表达。     

氧化苦参碱对人结肠癌细胞株SW1116细胞周期通路相关调控因子的影响

背景：氧化苦参碱为中药苦参的主要有效成分，研究显示其对结肠癌细胞具有杀伤作用。目的：观察氧化苦参碱对人结肠癌细胞株SW1116细胞周期通路相关调控因子的影响，阐明其抗结肠癌作用的分子机制。方法：分别以2、3、4mg／m1氧化苦参碱干预SW1116细胞24h或48h，以流式细胞仪检测细胞周期，以逆转录聚合酶链反应（RTPCR）和蛋白质印迹法检测细胞周期蛋白（cyclin）D1、细胞周期蛋白依赖性激酶4（CDK4）、CDK抑制剂p53、核转录岗子E2F1和S期激酶相关蛋白2（Skp2）mRNA和蛋白水平的表达。结果：氧化苦参碱干预可使SW1116细胞周期阻滞于G0／G1期，cyc1inD1、CDK4、E2F1和Skp2mRNA和蛋白表达显著下降，p53mRNA和蛋白表达显著上升，作用呈剂量和时间依赖性（P〈0．05）。结论：氧化苦参碱可通过影响细胞周期相关通路以抑制人结肠癌细胞增殖。     

Pathogenesis of carcinoma of the papilla of Vater

Most adenomas and carcinomas of the small intestine and extrahepatic bile ducts arise in the region of the papilla of Vater. In familial adenomatous polyposis (FAP) it is the main location for carcinomas after proctocolectomy. In many cases symptoms due to stenosis lead to diagnosis at an early tumor stage. In about 80%, curative intended resection is possible. Operability is the most relevant prognostic factor. Most ampullary carcinomas resp. carcinomas of the papilla of Vater develop from adenomatous or flat dysplastic precursor lesions. They can be sited in the ampulloduodenal part of the papilla of Vater, which is lined by intestinal mucosa. They also can develop in deeper parts of the ampulla, which are lined by pancreaticobiliary duct mucosa. Intestinal-type adenocarcinoma and pancreaticobiliary-type adenocarcinoma represent the main histological types of ampullary carcinoma. Furthermore, there exist unusual types and undifferentiated carcinomas. Many carcinomas of intestinal type express the immunohistochemical marker profile of intestinal mucosa (keratin 7?, keratin 20+, MUC2+). Carcinomas of pancreaticobiliary type usually show the immunohistochemical profile of pancreaticobiliary duct mucosa (keratin 7+, keratin 20?, MUC2?). Even poorly differentiated carcinomas, as well as unusual histological types, may conserve the marker profile of the mucosa they developed from. These findings underline the concept of histogenetically different carcinomas of the papilla of Vater which develop either from intestinal- or from pancreaticobiliary-type mucosa of the papilla of Vater. Molecular alterations in ampullary carcinomas are similar to those of colorectal as well as pancreatic carcinomas, although they appear at different frequencies. In future studies, molecular alterations in ampullary carcinomas should be correlated closely with the different histologic tumor types. Consequently, the histologic classification should reflect the histogenesis of ampullary tumors from the two different types of papillary mucosa.     

Demonstration of the mechanism of action of biguanides

Summary Palmitic acid oxidation in rat diaphragm homogenate is depressed by biguanide concentrations that are still incapable of inhibiting oxidative phosphorylation. Glucose oxidation is not directly effected by the same biguanide concentrations: however, the inhibitory effect of palmitic acid on glucose oxidation is partly removed by biguanides. Inhibition of fatty acid oxidation, which accounts for most of the metabolic effects caused by these drugs, can be regarded as the fundamental mechanism of action of biguanides. There is some evidence suggesting that these drugs might interact with carnitine, thus preventing long-chain fatty acids from being transported across the mitochondrial membrane to the site of oxidation. Traduzione a cura degli AA.     

胰岛素瘤的解剖分布特点分析

目的胰岛素瘤是最常见的胰腺神经内分泌肿瘤，因其临床表现多样，导致诊断困难。影像学诊断尤其是超声内镜(EUS)在胰岛素瘤的诊断中起着重要作用，拥有较高的敏感性和特异性。本研究拟通过明确胰岛素瘤的解剖分布特点，以期有助于提高影像学的诊断准确率和降低漏诊率，尤其是在教育和培训实践中对于EUS的学习者更具有指导价值。 方法回顾性分析解放军总医院第一医学中心病案资料数据库1993年1月至2019年11月经外科手术、病理确诊为胰岛素瘤的患者的临床资料，检索方法采取搜索术后病理诊断为"胰岛素瘤"的病例，通过查阅病例的方法，提取出胰岛素瘤的大小和解剖分布等数据，进一步分析其特点。 结果共检索到确诊为胰岛素瘤的患者116例，其中，男45例、女71例，年龄13～76岁，平均年龄(44.4±14.85)岁。胰岛素瘤单发110例(94.8%)、多发6例(5.2%)。位置分布：头颈部46例(39.7%)，单发45例、多发1例；体尾部68例(58.6%)，单发65例、多发3例；全胰腺多发2例(1.7%)。病变大小特点：最大径0.4～3.4 cm，平均大小(1.53±0.58)cm。≤1 cm 29例、>1 cm而≤1.5 cm41例、>1.5 cm而≤2.0 cm28例，≤3 cm 15例，>3 cm 3例。年龄与肿瘤的大小相关，≤44岁患者肿瘤平均大小为(1.36±0.51)cm、>44岁患者肿瘤平均大小为(1.70±0.60)cm，P<0.05。头颈部的肿瘤大于体尾部的肿瘤，头颈部肿瘤平均大小(1.66±0.63)cm，体尾部(1.42±0.52)cm，P<0.05。 结论胰岛素瘤在胰腺体尾部较头颈部更好发；绝大多数单发，但可以全胰腺多发；多数小于1.5 cm，肿瘤的大小与患者年龄和肿瘤的解剖分布相关。     

氯硝柳胺悬浮剂的毒性评价

目的评价氯硝柳胺悬浮剂的毒性，为现场大规模应用灭螺提供依据。方法按照中华人民共和国国家标准GB 15670-1995《农药登记毒理学试验方法》和鱼类毒性试验方法进行。结果经口、经皮肤的LDso雌、雄性大鼠均>5 000 mg/kg，经呼吸道的LCso雌、雄性大鼠均>5 000mg/m3，该药经口、经皮肤、经呼吸道毒性均属微毒类药物；兔眼用药后，观察期内无不良反应，对眼无刺激性；皮肤用药后对皮肤无刺激性。与氯硝柳胺原药、氯硝柳胺乙醇胺盐原药和氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉剂相比，氯硝柳胺悬浮剂对鱼急性毒性最低。结论氯硝柳胺悬浮剂属微毒类药物，对鱼的毒性低于其乙醇胺盐可湿性粉剂，适合于现场应用。     

Lack of correlation of degree of villous atrophy with severity of clinical presentation of coeliac disease

BACKGROUND AND AIM: Both the clinical presentation and the degree of mucosal damage in coeliac disease vary greatly. In view of conflicting information as to whether the mode of presentation correlates with the degree of villous atrophy, we reviewed a large cohort of patients with coeliac disease. PATIENTS AND METHODS: We correlated mode of presentation (classical, diarrhoea predominant or atypical/silent) with histology of duodenal biopsies and examined their trends over time. RESULTS: The cohort consisted of 499 adults, mean age 44.1 years, 68% females. The majority had silent coeliac disease (56%) and total villous atrophy (65%). There was no correlation of mode of presentation with the degree of villous atrophy (p=0.25). Sixty-eight percent of females and 58% of males had a severe villous atrophy (p=0.052). There was a significant trend over time for a greater proportion of patients presenting as atypical/silent coeliac disease and having partial villous atrophy, though the majority still had total villous atrophy. CONCLUSIONS: Among our patients the degree of villous atrophy in duodenal biopsies did not correlate with the mode of presentation, indicating that factors other than the degree of villous atrophy must account for diarrhoea in coeliac disease.     

血吸虫童虫生长发育及其机制的研究进展

血吸虫童虫是宿主免疫系统攻击的重要靶标,包括皮肤型、肺型和肝门型童虫。宿主分子对童虫生长发育具有重要作用。童虫生长发育机制包括免疫调节、信号转导、性别发育及凋亡等。肌动蛋白、组织蛋白酶、烯醇化酶和葡萄糖基转移酶等分子为血吸虫童虫生长发育的重要分子。本文对血吸虫童虫生长发育及其机制的研究进展做一综述。     

124例耐多药结核分枝杆菌基因突变特征分析

目的对临床分离的耐多药结核分枝杆菌相关基因的突变特征进行分析。方法对124例耐多药结核分枝杆菌以及50株敏感株的耐药相关基因(包括异烟肼inh A、kat G、oxyR-ahp C间隔区以及利福平rpo B)进行序列测定,分析其基因突变情况。结果异烟肼耐药inh A基因突变率为14.5%;kat G基因突变率为70.2%(87/124),主要位于315位;oxyR-ahp C间隔区突变率为15.3%;inh A、kat G两种基因同时突变率75.0%,三种基因同时突变率为89.5%。利福平rpo B基因突变的检出率高达95.2%,突变主要发生在531、526、516位点。结论我省耐多药菌异烟肼耐药相关基因最常见突变为kat G 315、inh A C-T(-15)、axyR-ahp C间隔区(-10)C-T,利福平为rpo B531、526、516。结合MDR-TB耐药相关基因的特征分析,可以建立一种快速、准确、特异的适合于我省的检测结核菌耐多药性的新方法。     

Assessment of quality of life of parents of children with juvenile chronic arthritis

The aim of the study was to assess the quality of life (QOL) and the psychological status of parents of children with juvenile chronic arthritis (JCA). The QOL, anxiety and depression of the parents of 28 children with JCA were evaluated and compared to those of the parents of 28 healthy children. Mothers of JCA children and mothers of healthy children reported similar QOL. The reported anxiety and depression levels were similar for mothers and fathers in both groups. The parents of children with pauciarticular-type JCA reported lower QOL and higher levels of anxiety and depression than the parents of children with other types, namely polyarticular and systemic JCA. These findings may be explained by the fact that the pauciarticular patients had shorter disease duration and were less frequently seen in the outpatient clinic. The QOL of mothers of children with JCA was found to be slightly impaired in the group of children with pauciarticular JCA. Future larger studies are needed to confirm these results, as the number of subjects in the three groups was rather low. Received: 26 September 2001 / Accepted: 8 February 2002     

CagA-Hp抗体IgG与胃炎的组织学分析

研究幽门螺杆菌(Hp)感染与胃炎的关系。方法对204例慢性胃炎患者胃粘膜进行观察分析,并测定其中137例Hp阳性患者血清CagA-Hp抗体IgG水平,与组织学对照。结果慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生患者血清CagA抗体IgG明显高于对照组(P＜0.01);其他类型胃炎患者血清CagA抗体IgG水平无明显增高(P＞0.05)。结论CagA-Hp可能是导致慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生的因素之一,对这类患者应密切随访观察。     

慢阻肺急性加重期患者预后的影响因素分析

目的探讨慢性阻塞性肺病急性加重期(AECOPD)患者预后的相关危险因素。方法回顾性调查、收集58例AECOPD患者可能影响其预后的相关因素,并对其分别进行单因素分析。并进行Logistic多元逐步回归进行多因素分析,筛选影响AECOPD患者预后的独立危险因素。结果单因素分析后将结果 P0.1的因素纳入多因素Logistic回归,分析发现是否合并呼吸衰竭、气促程度、白细胞计数、APACHEⅡ、应用抗氧化剂、慢阻肺治疗依从性为影响AECOPD患者预后不佳的独立因素(P0.05)。结论根据AECOPD患者预后的独立危险因素,及早判断,选择合适的后续治疗方案,对提高其生存率及生存质量具有重要意义。