卵巢癌p53抑癌基因非同位素PCR－SSCP检测方法的研究

卵巢癌ｐ５３抑癌基因非同位素ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测方法的研究２５００３１济南济南军区总医院王宝成，狄剑时，师秋丽，陈诵芬，杨道理中国图书资料分类号Ｒ４４６ｐ５３基因的改变被认为是目前人类恶性肿瘤中最常见的基因变化［１］。卵巢癌的ｐ５３基因改变也比较普遍...     

p53和C-erbB-2癌基因蛋白在乳腺良性病变中的表达及意义

ｐ５３和Ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因蛋白在乳腺良性病变中的表达及意义２５００３１济南解放军第４５６医院桂开林张恒兴李全义关键词基因；乳腺肿瘤中国图书资料分类号Ｒ７３０．２采用免疫组化ＳＰ和ＡＢＣ两种方法观察乳腺良、恶性肿瘤癌基因蛋白ｐ５３和Ｃ－ｅｒｂＢ－２...     

p53基因cDNA突变及其蛋白高表达与大肠癌预后关系

１００份大肠癌组织，用ＲＴ－ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测Ｐ５３基因ＣＤＮＡ突变；ＰＡｂ１８０１单抗免疫组化检测Ｐ５３基因蛋白搞表达并对大肠癌术对后病人作５年生存随访，比较上述２结果与大肠癌预后的关系，１００例大肠癌中，ＲＴ－ＰＣＲ－ＳＳＣＰ显示５１例大肠癌Ｐ５３基因ＣＤＮＡ突变，ＰＡｂ１８０１阳性率６２％，Ｐ５３基因ＣＤＮＡ突变和Ｐ５３基因蛋白高表达与Ｄｕｋｅｓ分期无关，Ｐ５３基因ＣＤＮＡ突变与Ｐ５３基因     

辐射敏感性与p53基因突变关系的研究进展

：ｐ５３基因具有Ｇ１期检查站功能，该功能使受损伤的ＤＮＡ获得充裕的时间进行修复。ｐ５３基因突变则丧失了检查站的功能，从而导致细胞对电离辐射的敏感性发生变化。研究ｐ５３基因突变与辐射敏感性变化的关系对肿瘤的发生、发展、治疗及预后具有重要意义     

p53基因状态与辐射诱导的G_1期阻滞

Ｇ１期阻滞是细胞对ＤＮＡ损伤作出的一种保护性反应，它与ｐ５３基因状态密切相关。本文对Ｇ１期阻滞的发生机制、生物学意义及ｐ５３突变对辐射诱导Ｇ１期阻滞的影响进行综述。     

p53基因状态与辐射诱导的G1期阻滞

Ｇ１期阻滞是细胞对ＤＮＡ损伤作出的一种保护性反应，它与ｐ５３基因状态密切相关，本文对Ｇ１期阻滞的发生机制，生物学意义及ｐ５３突变对辐射诱导Ｇ１期阻滞的影响进行综述。     

食管癌ras,P^53基因突变的研究

目的通过检测食管鳞状细胞癌ｒａｓ、ｐ５３基因的突变状况,探讨基因突变在食管癌发生、发展过程中的意义及对预后的影响。方法采用银染—ＰＣＲ—ＳＳＣＰ法检测４２例食管鳞癌组织中Ｈ—ｒａｓ第１２位密码子及ｐ５３基因５、６、７、８外显子突变的状况。结果２例出现ｒａｓ基因突变。１６例出现ｐ５３基因突变（３８１％）。基因突变与癌的分化程度,淋巴结转移和预后关系密切。结论突变的ｒａｓ、ｐ５３基因可能共同参与了食管癌的发生与进展。突变的ｐ５３基因与食管癌的发展与转移有关并影响预后。     

骨髓增生异常综合征和急非淋白血病中癌基因及抑癌基因扩增的研究

应用核酸杂交技术（ｄｏｔ－ｂｌｏｔ）分析了癌基因。－ｍｙｃ、 Ｎ－ｒａｓ和抑癌基因 ｐ５３在骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）和急非淋白血病（ＡＮＬＬ）中的扩增情况。结果发现，有 ３ 例（３３％）的 ＭＤＳ存在 ｐ５３抑癌基因的 ２倍扩增，本实验中 ｐ５３抑癌基因的扩增发生在 ＭＤＳ的较晚期阶段； １例 ＡＮＬＬ中存在癌基因 ｃ－ｍｙｃ和抑癌基因 ｐ５３的共扩增，且发现扩增与 ＭＤＳ的分型及 ＡＮＬＬ的临床病情有一定的相关性。     

银染PCR—SSCP法检测横纹肌肉瘤p53基因点突变

应用银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法和免疫组织化学ＡＢＣ法，检测３０例横纹肌肉瘤（ＲＭＳ）中ｐ５３基因突变及其蛋白表达。结果显示：３０例ＲＭＳ中，７例ＳＳＣＰ阳性（２３．３％）。表明这些病例相应ＤＮＡ片段中发生了点突变，其中第５、６、７、８外显子ＳＳＣＰ阳性出现的例次分别为０、０、５、４次。ｐ５３蛋白表达率６６．７％（二者符合率５６．７％）。ｐ５３基因突变及蛋白表达与年龄、性别、肿瘤组织类型无关。而与肿瘤     

p53在肿瘤基因治疗中的应用进展

ｐ５３基因在机体组织细胞的生长发育分化等过程中起重作用。其主要生物学功能是维持细胞基因组的稳定,负调节细胞生长,诱导细胞凋亡。研究发现人类恶性肿瘤中至少有５０％发生了ｐ５３基因改变,因此以ｐ５３基因治疗肿瘤的研究发展非常迅速。最近,有学者引入介入技术经肿瘤供血动脉直接灌注重组ｐ５３,为ｐ５３基因治疗肿瘤开辟了一条新途径。本文就肿瘤中ｐ５３基因突变情况以及ｐ５３用于基因治疗的研究进展予以综述。一、ｐ５３基因及其产物的结构和特性人类ｐ５３基因位于１７号染色体的短臂上（１７ｐ１３．１）,全长１６～２…     

PCR-SSCP技术检测辐射诱发的恶转细胞p53突变

目的确定α粒子诱发的恶性转化大鼠气管上皮（ｒａｔｔｒａｃｈｅａｌｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ，ＲＴＥ）细胞中是否存在ｐ５３基因突变。方法根据大鼠ｐ５３ｃＤＮＡ序列，合成４对引物分别覆盖大鼠ｐ５３基因外显子５，６，７和８，利用聚合酶链反应－单链构象多态方法分析转化细胞中的ｐ５３突变情况。结果在转化细胞，ｐ５３基因外显子８的单链条带与正常细胞相比出现泳动变位，经测序证实为２６５密码子Ｇ→Ｃ突变，使其编码氨基酸由精氨酸→脯氨酸。结论在α粒子诱发的恶性转化ＲＴＥ细胞中存在ｐ５３基因突变，提示ｐ５３基因变异在辐射致癌过程中可能起重要作用     

凋亡相关基因与食管鳞状细胞癌放射敏感性相关关系的研究

目的 探讨凋亡相关基因ｂｃｌ－２,ｃ－ｍｙｃ,ｐ５３与食管鳞癌放疗敏感性的关系。方法 采用免疫组化ＬＳＡＢ方法检测食管癌活检组织中ｂｃｌ－２,ｃ－ｍｙｃ,ｐ５３基因表达水平,病人接受放射治疗观察疗效,分析基因表达与放射敏感性的关系。结果 ｂｃｌ－２蛋白表达阳性者放射敏感性明显低于表达阴性者,ｐ５３蛋白表达阳性者略差于阴性者;ｃ－ｍｙｃ基因表达与放射敏感性无关。结论 ｂｃｌ－２,ｃ－ｍｙｃ,ｐ５３等凋亡相关基因表达产物的检测及综合分析有助于食管鳞癌放疗疗效的预测。     

015 细胞周期调控在小鼠精原干细胞辐射增敏中的作用

目的 :研究细胞周期阻滞在小剂量Ｘ射线照射诱导小鼠精原干细胞辐射增敏中的可能作用及与ｐ５３基因的关系。方法 :①动物 :选用Ｓｗｉｓｓ小鼠 (８～１０周龄 )和三种 ｐ５３不同基因型 ( ｐ５３-／ - ,ｐ５３+/ - ，ｐ５３+/ +)Ｃ５７ＢＬ/６小鼠 (８～１４周龄 )。②照射 :单次１～１０Ｇｙ或分次１ＧｙＸ射线预照射后２４ｈ给予８～１０Ｇｙ攻击剂量照射。③分组 :分别应用细胞周期阻滞逃逸因子３＿氨基苯甲酰胺 (３＿ＡＢ)和咖啡因检测细胞周期调控在精原干细胞辐射增敏中的作用 ,用 ｐ５３不同基因型Ｃ５７ＢＬ／６小鼠分析辐射增敏中…     

聚合酶链反应单链构象多态性分析对人非小细胞肺癌p53基因突变的检测

目的：探讨ｐ５３ 基因突变在中国人非小细胞肺癌发生中的作用。方法：利用聚合酶链反应单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法,对４８ 例临床肺癌标本（以相应远离肺癌的正常肺组织为对照）进行ｐ５３ 基因突变检测。结果：（１）ｐ５３ 基因突变频率为５６．２５％ （２７／４８）;（２） ｐ５３ 基因突变频率与肿瘤组织类型、淋巴结转移、年龄及性别无统计学相关;（３） ｐ５３ 基因突变频率与肿瘤分化程度存在明显负相关（Ｐ＜ ０．０５）;（４）吸烟者ｐ５３ 突变频率高于非吸烟者（分别为５８．３％ 和３３．３％ ）,但无统计学差异;（５） ６／７ 具有组织浸润及远处转移的肿瘤标本存在ｐ５３ 突变。结论：ｐ５３ 基因突变在中国人肺癌发生过程中发挥重要作用,在肺癌中存在ｐ５３ 基因突变提示患者预后不良;而且ｐ５３基因突变与吸咽及肺癌高转移性相关。     

p53蛋白调节射线所致细胞凋亡

细胞凋亡的形态学特证明确，但具体生化过程尚不很清楚。抑癌基因ｐ５３的蛋白产物在射线所致的凋亡中起重要作用，它的作用机制可能与ｐ５３蛋白的①同特异的ＤＮＡ一致顺序结合，激活或抑制某些基因的表达；②使射线损伤的细胞停滞在Ｇ１期和Ｇ２期；③同其它原癌基因的蛋白相互作用，影响细胞寿命等功能相关。     

聚合酶链反应单链构象多态性分析对人非小细胞肺癌p53？…

目的：探讨ｐ５３基因突变在中国人非小细胞肺癌发生中的作用。方法;利用聚合酶链反应单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法,对４８例临床肺癌标本（以相应远离肺癌的正常肺组织为对照）进行ｐ５３基因突变检测。结果：（１）ｐ５３基因突变频率为５６．２５％（２７／４８）;（２）ｐ５３基因突变频率与肿瘤组织类型,淋巴细结转移,年龄及性别２无统计学相关;（３）ｐ５３基因突变频率与肿瘤分化程度存在明显负相关;（     

人β—干扰素在杆状病毒载体与Sf细胞体系中的表达

采用苜蓿尺蠖核多角体病毒ＤＮＡ中多角体蛋白基因启动子及其前后序列作为转移载体，将人β－干扰素（ＨｕＩＦＮ－β）基因插入转移载体ｐＵＡｃ－５，构建成ｐＡｃ－ＩＦＮ－β载体。该质粒ＤＮＡ与野生型ＡｃＮＰＶ ＤＮＡ经ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ共转染秋粘虫传代细胞（Ｓｆ９细胞），利用重组病毒不产生多角体蛋白的特征，进行病毒空斑筛选。用核酸杂交方法鉴定出携带ＨｕＩＦＮ－β基因的重组病毒。用重组病毒感染Ｓｆ９细胞，     

p53基因状态与电脑辐射效应

抑癌基因ｐ５３在细胞周期调控、ＤＮＡ修复和复制、细胞分化、基因组的稳定以及细胞凋亡过程中起着重要作用。本文就ｐ５３诱导细胞周期Ｇ１期阻滞和细胞凋亡两大生物功能与电离辐射效应作一概述。     

p53基因状态与电离辐射效应

抑癌基因ｐ５３在细胞周期调控、ＤＮＡ修复和复制、细胞分化、基因组的稳定以及细胞凋亡过程中起着重要作用。本文就ｐ５３诱导细胞周期Ｇ１期阻滞和细胞凋亡两大生物功能与电离辐射效应作一概述     

p53和bcl-2表达与BT325细胞辐射性凋亡的关系

目的探讨癌基因表达的变化与辐射诱导肿瘤细胞凋亡的关系。方法采用免疫组化技术检测人多形性胶质母细胞瘤细胞系，经Ｘ射线处理前后ｐ５３、ｂｃｌ－２基因表达的变化；原位杂交方法检测ｐ５３基因在ｍＲＮＡ水平表达的变化。结果①凋亡组内ｐ５３蛋白表达率明显高于对照组，ｂｃｌ－２表达显著减弱，ｐ５３与ｂｃｌ－２蛋白表达呈显著性负相关。②凋亡组内ｐ５３在ｍＲＮＡ水平表达量明显高于对照组，ｐ５３基因在蛋白水平与ｍＲＮＡ水平表达呈显著性正相关。结论ｐ５３和ｂｃｌ－２基因在Ｘ射线诱导的细胞凋亡过程中具有重要作用