吸烟与温石棉单独及联合作用对人胚肺细胞DNA链断裂的影响

目的研究吸烟与温石棉对细胞的遗传毒性。方法采用单细胞凝胶电泳技术（ＳＣＧＥ），在体外实验中测定了香烟烟雾溶液（ＣＳＳ）与温石棉（ＣＨ）单独及联合作用于人胚肺（ＨＥＬ）细胞时ＤＮＡ链断裂的情况。结果ＣＳＳ与ＣＨ单独与ＨＥＬ细胞作用１小时，均可使ＤＮＡ链断裂明显增多，当二者以３种不同的剂量组合联合作用时，均可协同增加ＤＮＡ链断裂。结论ＣＳＳ和ＣＨ单独作用均为肿瘤启动剂；当二者联合作用时可协同启动肿瘤的发生。     

烟溶液与温石棉对细胞增殖活性的影响

目的　探讨香烟烟雾溶液与温石棉单独及联合作用对细胞增殖活性的影响。方法　将人胚肺（ Ｈ Ｅ Ｌ） 成纤维细胞用不同浓度的烟溶液和温石棉单独及联合作用一定时间后,应用［３ Ｈ］ Ｔｄ Ｒ参入法测定了细胞的增殖能力。结果　低剂量的烟溶液与温石棉单独作用时均可促进细胞的增殖,但较高剂量的烟溶液和温石棉则可抑制细胞的增殖;当二者联合作用时,低剂量的烟溶液与温石棉可协同增加细胞的增殖,而较高剂量的烟溶液与温石棉则只表现为相加作用。结论　烟溶液与温石棉单独及联合作用均可影响 Ｈ Ｅ Ｌ细胞的增殖活性,但其促增殖和抑制增殖能力则随剂量不同而不同。     

石棉与烟雾溶液对人胚肺细胞DNA的损伤作用

目的探讨石棉与烟雾溶液联合作用对人胚肺细胞ＤＮＡ的损伤作用。方法采用非程序ＤＮＡ合成试验，对石棉与烟雾溶液单独及联合作用时人胚肺细胞ＤＮＡ修复合成情况进行了观察。结果石棉与烟溶液单独作用时，均能诱导人胚肺细胞的非程序ＤＮＡ合成试验，且均有明显的剂量反应关系；当二者联合作用时，其造成的细胞３Ｈ标记的胸腺嘧啶核苷（［３Ｈ］－ＴｄＲ）参入量的增加量明显高于二者单独作用时引起的［３Ｈ］－ＴｄＲ参入量的增加量之和。此外，ＯＨ的清除剂二甲基亚砜可部分阻止石棉引起的［３Ｈ］－ＴｄＲ参入。结论石棉与烟溶液联合对人胚肺细胞ＤＮＡ的损伤具有协同作用，ＯＨ在石棉引起的细胞ＤＮＡ损伤中起一定作用。     

温石棉与香烟烟雾对人胚肺细胞产生H2O2的联合作用研究

观察了温石棉与香烟烟雾溶液单独作用对人胚肺（ＨＥＬ）细胞Ｈ２Ｏ２产生的影响，还采用３个析因设计，观察了不同剂量石棉与烟溶液同时作用下ＨＥＬ细胞产生Ｈ２Ｏ２的变化情况。结果表明，当石棉与烟溶液单独作用时，均可使ＨＥＬ细胞产生的Ｈ２Ｏ２量增多，当二者同时作用时，有两种联合方式表现为加强作用，另一种联合方式表现为相加作用，提示石棉为烟溶液联合作用剂量不同时，其联合作用结果也不同。     

几种化合物对石棉诱发人胚肺细胞非程序DNA合成的影响

目的探讨几种化合物对温石棉诱发人胚肺（ＨＥＬ）细胞非程序ＤＮＡ合成（ＵＤＳ）的影响。方法用不同浓度的柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠溶液浸泡温石棉１小时后，再将其与ＨＥＬ细胞共同孵育，通过３Ｈ－ＴｄＲ掺入法，测定了ＨＥＬ细胞的ＵＤＳ。结果温石棉可使ＨＥＬ细胞的ＵＤＳ显著增高，并呈明显的剂量－反应关系。与未处理温石棉组相比，经三种化合物处理的温石棉所致ＵＤＳ量均明显下降。结论采用适当化合物溶液浸泡温石棉，有可能减轻温石棉对人类的致癌危害性。     

温石棉与烟溶液作用后人肺泡上皮细胞DNA的损伤及修复

目的　了解温石棉与烟溶液单独及联合作用对细胞DNA损伤后的修复影响。方法将人肺泡上皮细胞用温石棉或烟溶液作用 1h ,即刻去毒培养不同时间后 ,用单细胞凝胶电泳技术测定DNA链断裂情况 ,从而分析DNA的修复功能。结果　 4 0 μg ml温石棉与 2 5× 10 - 4 支 ml烟溶液作用 1h后 ,均可明显引起DNA链断裂 ,温石棉染毒组在继续培养 3h后 ,DNA可出现明显修复 ,4h的修复率达 3 0 6% ;烟溶液染毒组在继续培养 2h后即可出现明显修复 ,4h的修复率达 65 2 % ;二者联合作用后的修复情况与烟溶液单独作用相似。结论　石棉所致的DNA损伤比烟溶液所致的损伤更难修复。     

几种化合物对石诱发人胚肺细胞非程序DNA合成的影响

探讨几种化合物对温石棉诱发人胚肺细胞非程序ＤＮＡ合成的影响。方法，用不同浓度的柠檬酸铝，混合稀土或亚硒酸钠溶液浸泡温石棉１小时后，再将其与ＨＥＬ细胞共同孵育，通过＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法，测定了ＨＥＬ细胞的ＵＤＳ。结果 温石棉可使ＨＥＬ细胞的ＵＤＳ显著增高，并呈明显的剂量－反应关系。     

混合稀土和柠檬酸铝对温石棉致人胚肺细胞谷胱甘肽含量改变的影响

目的寻求一种适宜的石棉表面改性剂。方法用不同浓度的混合稀土或柠檬酸铝溶液浸泡温石棉１小时后,再将其与人胚肺（ＨＥＬ）细胞共同孵育,测定ＨＥＬ细胞的谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量。结果随着石棉剂量的增加或染毒时间的延长,ＨＥＬ细胞的ＧＳＨ含量明显降低。经混合稀土或柠檬酸铝预处理的石棉,其所诱导的ＨＥＬ细胞ＧＳＨ下降的程度明显减弱。结论用混合稀土或柠檬酸铝预处理温石棉,均可降低温石棉对ＨＥＬ细胞的毒性作用。     

人造矿物纤维对细胞DNA损伤作用的体外研究

目的比较研究１０种人造矿物纤维（ＭＭＭＦ）对人肺泡上皮细胞（Ａ５４９细胞）ＤＮＡ的损伤及修复作用。方法选用日本纤维状物质研究协会提供的１０种标准人造矿物纤维（ＪＦＭ）,用单细胞凝胶电泳法,以Ａ５４９细胞作为靶细胞,测定了细胞ＤＮＡ链断裂、损伤后修复及ＤＮＡＤＮＡ链间交联。结果１０种ＪＦＭ纤维都可引起不同程度的ＤＮＡ链断裂、ＤＮＡＤＮＡ链间交联及抑制ＤＮＡ损伤后的修复功能。综合分析发现：微细玻璃纤维的遗传毒性最强,硅灰石的遗传毒性最低。它们的作用程度均低于温石棉。结论ＪＦＭ纤维均具有一定程度的体外遗传毒性,但均低于ＵＩＣＣ温石棉Ｂ。     

烟溶液与温石棉对人胚肺细胞芳香烃羟化酶活性的影响

为探讨吸烟与温石棉在致癌过程中的联合作用，用已建株的人胚肺（ＨＥＬ）细胞在体外测定了烟溶液与温石棉单独及联合作用对细胞内芳香烃羟化酶（（ＡＨＨ）活性的影响。结果表明：烟溶液在剂量间虽也有一定的梯度变化，但在统计学上无显著性意义，而温石棉则可明显地诱导ＨＥＬ细胞内ＡＨＨ的活性升高，且有剂量－反应关系；当烟溶液与温石棉联合作用时对细胞ＡＨＨ活性的升高呈明显的相加作用，提示在吸烟与温石棉的联合作用过程中，温石棉可通过诱导ＡＨＨ活性升高，促使烟中的多环芳烃更易代谢为终致癌物，从而导致肺癌的发生     

石棉与烟雾溶液对人肺肺细胞DNA的损伤作用

目的 探讨石棉与烟雾溶液联合作用对人胚肺细胞ＤＮＡ的损伤作用。方法 采用非程序ＤＮＡ合成试验，对石棉与烟雾溶液单独及联合作用时人胚肺细胞ＤＮＡ修复合成情况进行了观察。     

三种化合物对石棉致HEL细胞增殖周期及c-fos癌基因转录活性改变的影响

目的寻求一种适宜的石棉表面改性剂。方法利用流式细胞技术测定细胞周期以及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术测定ｃｆｏｓ癌基因转录活性,观察几种化合物对温石棉促人胚肺（ＨＥＬ）细胞增殖作用的影响。结果将ＨＥＬ细胞与温石棉共同孵育后,其Ｓ期细胞所占比例增加,ｃｆｏｓ癌基因的转录活性也明显增强。用３种化合物预处理的石棉组,其Ｓ期细胞所占比例以及ｃｆｏｓ癌基因的转录活性均低于未处理石棉组。结论用上述３种化合物预处理石棉,均可不同程度地抑制石棉的促细胞增殖作用。     

DNA链断裂作为石棉接触的生物标志物的研究

为研究接触石棉粉尘工人的生物监测指标，利用简便、快速、敏感、经济的单细胞凝胶电泳法（ＳＣＧＥ，又称彗星试验），检测了某石棉制品厂５５名石棉作业工人和３０名对照人群的外周血白细胞ＤＮＡ断裂水平。结果表明：接尘组外周血白细胞ＤＮＡ链断裂的水平显著高于对照组（Ｐ＜０．０１）；性别、年龄、工龄和石棉尘浓度与ＤＮＡ迁移水平有关。     

硒对苯并芘所致细胞DNA链断裂损伤效应的保护

用缺口翻译分析技术检测了苯并芘对人胚肺细胞ＤＮＡ链断裂的损伤效应，并观察了微量元素硒对苯并芘所致细胞ＤＮＡ链断裂损伤效应的保护作用。经０．２５～５μｇ／ｍｌ苯并芘作用后的人胚肺细胞３Ｈ－ｄＴＴＰ掺入量明显增加（Ｐ＜０．０１），表明苯并芘造成了人胚肺细胞ＤＮＡ链断裂损伤。且损伤效应随着苯并芘作用剂量的增加而逐渐增加。经硒保护处理后的人胚肺细胞３Ｈ－ｄＴＴＰ掺入量与单纯苯并芘作用的细胞比较明显下降（Ｐ＜０．０１），证明硒对苯并芘所致人胚肺细胞ＤＮＡ链断裂损伤效应具有保护作用。     

石英和温石棉致兔肺泡巨噬细胞谷胱甘肽过氧化物酶活性改变的比较研究

为了探讨石英、石棉对抗氧化酶活性的影响,利用改良Ｍｙｖｉｒｋ 法收集兔肺泡巨噬细胞进行体外培养,采用酶－ 底物反应形成有色物来测定巨噬细胞的细胞裂解液中谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰｘ）的酶活性。结果发现,随着粉尘浓度的增加,石英组和温石棉组巨噬细胞内的ＧＳＨＰｘ的酶活性相应降低,存在显著的剂量反应关系（Ｐ＜ ０．０１）。在不同的粉尘剂量组,温石棉组和石英组的ＧＳＨＰｘ 酶活性均显著低于二氧化钛组（Ｐ＜ ０．０５）,温石棉组低于石英组,但未发现显著的统计学差异。石英组和温石棉组的巨噬细胞死亡率均随粉尘浓度的增加而增大,存在着剂量反应关系,且温石棉组的死亡率高于石英组。石英组、温石棉组巨噬细胞内ＧＳＨＰｘ 酶活性和巨噬细胞的死亡率之间的相关系数分别为－ ０．９３１８ 和－ ０．８９８４,而二氧化钛组只有－ ０．３６３７。这说明石英、温石棉均可致巨噬细胞内ＧＳＨＰｘ 酶活性呈剂量反应关系的降低,使得胞内自由基Ｈ２Ｏ２ 不能正常消除,促使脂质过氧化加重,损害细胞;且温石棉的效应强于石英。提示ＧＳＨＰｘ 酶活性的降低在石英、温石棉致病中具有一定的作用     

柠檬酸铝对温石棉诱发巨噬细胞活性氧抑制作用的研究

利用电子自旋共振自旋捕获技术、细胞色素Ｃ还原法及酚红氧化法，分别探讨了茫崖及沫源温石棉诱发肺泡巨噬细胞活性氧及柠檬酸铝的抑制作用。结果表明，两种温石棉在一定条件下，均可刺激巨噬细胞产生ＯＨ、Ｏ＿２及Ｈ＿２Ｏ＿２，并具有剂量依赖关系。经柠檬酸铝溶液室温下浸泡１ｈ，茫崖及涞源温石棉诱发活性氧产生的能力明显减弱。     

人造矿物纤维对肺泡巨噬细胞的毒作用研究

目的比较１０种人造矿物纤维对肺泡巨噬细胞毒作用的差异。方法选用日本纤维状物质研究协会提供的１０种标准人造矿物纤维（ＪＦＭ纤维），在体外用豚鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）作为靶细胞，分别对ＪＦＭ纤维作用于ＡＭ后超氧阴离子自由基（Ｏ－２）、过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）的产生，谷胱甘肽（ＧＳＨ）及细胞内游离Ｃａ２＋浓度的变化进行了测定。结果１０种ＪＦＭ纤维中，大多数都可引起Ｏ－２和Ｈ２Ｏ２的产生增多、ＧＳＨ含量下降及细胞内游离Ｃａ２＋浓度升高，但其作用均低于温石棉。结论ＪＦＭ纤维的一般细胞毒性均低于温石棉。这些人造矿物纤维虽然作为石棉的代用品使用，但对机体仍会产生一定的有害作用。     

三种化合物对温石棉促人胚肺细胞增殖作用的影响

为了探讨几种化合物对温石棉促人胚肺（ＨＥＬ）细胞增殖作用的影响,用不同浓度的柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠溶液浸泡温石棉１小时后,再将其与人胚肺细胞共同孵育,通过测定［３Ｈ］ＴｄＲ掺入量,来了解人胚肺细胞的增殖状况。结果显示,２．５～１０μｇ／ｍｌ的温石棉、时间作用在２４小时之内,或２０～８０μｇ／ｍｌ温石棉、时间作用在６小时之内均可促使人胚肺细胞增殖。与未处理温石棉组相比,经三种化合物处理的温石棉其促细胞增殖作用明显下降。提示,采用三种化合物溶液浸泡温石棉,有可能减轻温石棉的致癌危害性     

三种化合物对石棉致HEL细胞增殖周期及C—fos癌基因转录活性 …

目的 寻求一种适宜的石棉表面改性剂。方法 利用流式细胞技术测定细胞周期以及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术测定ｃ－ｆｏｓ癌基因转录活性,观察几种化合物对温石棉人胚肺（ＨＥＬ）细胞增殖作用的影响。结果 将ＨＥＬ细胞与温石棉共同孵育后,其Ｓ期细胞所占比例增加,ｃ－ｆｏｓ癌基因的转录活性也明显增强,用３种化合物预处理的石棉组,其Ｓ期细胞所占比例以及ｃ－ｆｏｓ癌基因的转录生均优于未处理石棉组,结论 用上述３种化合     

几种化合物对石棉诱导人胚肺细胞产生超氧阴离子的抑制作用

用不同浓度的柠檬酸铝、混合稀土或硒酸钠溶液浸泡温石棉１小时后,再将其与人胚肺（ＨＥＬ）细胞共同孵育,测定培养液中超氧阴离子（Ｏ２＾－）含量。结果显示,温石棉可诱导ＨＥＬ细胞产生Ｏ２＾－。但与未处理温石棉组相比,经３种化合物预处理的温石棉所致ＨＥＬ细胞产生的Ｏ２＾－量明显降低,其抑制率随化合物浓度的增加而增高,呈一定的剂量依赖性。表明用上述３种化合物预处理温石棉,均可抑制其诱导ＨＥＬ细胞产生Ｏ２＾－