重组白细胞介素-2直接增强人单核细胞的胞毒活性

白细胞介素-2(IL-2)过去认为主要是一种T细胞生长因子,后来发现对B细胞、大颗粒淋巴细胞(LGL,即NK细胞)也起反应。本文作者发现:重组产生的IL-2可直接增强人单核细胞的胞毒活性。这是IL-2的一种新功能,提示了单核细胞-T细胞相互作用的可能途径。Rosenberg等人已报道IL-2可以激活淋巴细胞活化的杀伤性T细胞(LAK)。活化的LAK可以裂解新鲜自身和同种异体     

人重组IL-3和GM-CSF促进IL-2衍生的T细胞的增殖

最近,作者报道了人重组多集落刺激因子(IL-3)和粒细胞-单核细胞集落刺激因子(Gm-CSF)能独立维持儿童急性T 淋巴细胞白血病细胞系的生长,这一发现提示这两种因子可能作用于正常的造血系统中极早期     

IL-2诱导单核细胞产生IL-6

能刺激T 细胞有丝分裂活性的IL-2是人单核细胞发挥效应细胞活性和分泌细胞因子的主要激活物,新鲜人单核细胞可表达P75IL-2β受体,IL-2与P75相互作用时,可触发单核细胞活化。因单核细胞是IL-6的主要来源,故探讨了IL-2对人单核细胞     

IL-2 重组毒素的克隆、表达及对IL-2R+淋巴细胞的特异性细胞毒效应

目的 :为了探讨肿瘤细胞的靶向性杀伤途径。方法 :采用PCR Cloning技术和DNA重组技术 ,构建了 2类IL 2 PE40’嵌合基因的表达载体 ,分别由IPTG和温度 (42℃ )诱导表达 ,并对表达产物进行了酶切片段大小、电泳迁移率、分子量、IL 2和PE40’组分抗原性及细胞学效应的检测。结果 :发现重组毒素对表面表达IL 2受体的活化T淋巴细胞具有明显杀伤效应 ,并有抑制混合淋巴细胞反应的作用。结论 :该IL 2 PE40’融合蛋白确实具有明显的特异性免疫抑制效应。     

IL-2对B淋巴细胞的直接作用

由于 IL2在免疫应答和免疫监视中的重要调节作用,它已成为当今免疫学研究的最重要内容之一。人们已经认识到,IL2与自身免疫性疾病和肿瘤的发生发展有密切关系,它对 T 细胞和 NK 细胞的作用是人们熟知的。然而,IL2对 B 淋巴细胞的作用方式     

硬皮病人IL-6促进高亲和力IL-2R的表达

硬皮病是以组织纤维化和累及器官的血管周围单个核细胞浸润为特征的疾病.已证明该病可促进IL-2的产生.通过体外试验证明硬皮病病人产生IL-2能力比正常对照明显强,其原因是对高亲和力IL-2R的调节,而促进IL-2发挥促进细胞生长的作用.采用~(125)I标记IL-2结合检验法,检查13名硬皮病患者和11例配对的正常对照者的淋巴细胞人IL-2受体的表达,结果表明,硬皮病淋巴细胞表达人IL-2显著高于正常对照,进一步又通过IL-6抑制试验证     

人单核细胞介导的细胞毒作用:用具有Ig的杂交瘤细胞作为靶细胞探测单核细胞表面触发分子

单克隆抗体32.2(MC32.2)是人单核细胞表面高亲和性IgG Fc段受体(FcgRI)的特异性抗体。作者从产生这种抗体的杂交瘤细胞中以流动细胞计数器选择出稳定表达大量32.2Ig的细胞(HC32.2)作为靶细胞,利用~(51)Cr释放测定单核细胞介导的细胞毒作用。结果表明单核细胞能有效地杀伤HC32.2。     

重组IL-2与正常IL-2的功能比较

白细胞介素2(IL-2)是活化的T细胞产物,它是控制效应性和调节性T细胞增殖的重要因子。从大肠扦菌中表达的重组IL-2(γIL-2)由于纯度高、产量大而广泛应用于实验室、并有可能用于临床。重组IL-2与正常细胞来源的IL-2有所不同,例如γIL-2不经过翻释后修饰的糖基化过程,     

LPS直接诱导人单核细胞产生负氧离子

ＬＰＳ直接诱导人单核细胞产生负氧离子（英）／ＬａｎｄｍａｎｎＲ…∥ＪＬｅｕｋＯｃＢｉｏｌ．—１９９５，５７．－４４０～４４９人单核细胞在抗菌应答中产生负氧离子，负氧离子本身具有抗菌活性，同时也可引起炎症反应中的组织损伤。该文探讨了ＬＰＳ直接诱导人单核...     

IL-2活化人NK细胞的作用机理

淋巴因子激活的杀伤细胞可以杀伤NK细胞耐受的靶细胞[1 ] ,用足量的IL 2处理NK细胞可加强其细胞毒作用 ,因此IL 2广泛应用于肿瘤等疾病的治疗。对IL 2促进NK细胞毒作用的分子机制 ,尤其是活化NK细胞后激活信号传导的过程知之甚少。国外许多研究已表明[2 ] ,Ca2 和蛋白激酶C (Proteinkinasec ,PKC)对调节NK细胞的活性起主导作用。本研究目的旨在探讨IL 2是否触发了NK细胞由Ca2 介导的信号传导途径 ,以初步探讨IL 2活化NK细胞的分子机制 ,为临床更好地应用IL 2治疗肿瘤及病毒性疾病提供理论依据。1　材料与方法1.1　主要试…     

重组人IL-18在大肠杆菌中的表达及其抗肿瘤作用

目的：获取rhIL-18原核表达产物并研究其活性。方法：用本室构建的含基因重组表达载体PBV220-IL-18的大肠杆菌DHSot，经42℃热诱导表达和包涵体提取纯化后获取rhIL-18蛋白；采用ELISA试剂盒检测rhIL-18刺激PBMC分泌IFN-γ的活性及MTT法检测其对NK细胞杀伤K562细胞自然杀伤活性；同时用荷瘤小鼠模型检测其体内抗瘤功能。结果：诱导含重组表达载体PBV220-IL-18的大肠杆菌D145ct后，蛋白电泳显示出一条相对分子量（Mτ）为18000的蛋白条带；10μg rhIL-18蛋白体外刺激PBMC后，其分泌IFN-γ的能力与对照组相比提高了8倍，细胞毒性提高3倍；同时rhIL-18蛋白能明显抑制肿瘤生长和延长荷瘤鼠生存期。结论：获得了有免疫调节功能和抗肿瘤活性的rhIL-18蛋白。为今后IL-18重组产物的研制和开展肿瘤的生物治疗提供了实验依据。     

复制缺陷型人IL-2重组腺病毒的制备与鉴定

目的将人ＩＬ－２的重组腺病毒载体与Ａｄ５腺病毒ＤＮＡ末端肽复合物同源重组，高效制备人ＩＬ－２的复制缺陷型重组腺病毒，并进行体外表达和活性检测。方法将含全部编码序列的人ＩＬ－２ｃＤＮＡ置于真核表达载体ｐＣＩｃｃ的ＣＭＶ启动子下游，切出含ＣＭＶ启动子、人ＩＬ－２ｃＤＮＡ和ＳＶ４０ｐｏｌｙＡ信号肽序列的ＣｌａＩ片段，插入Ｅ１区替代的腺病毒载体ｐＡｘｌｏｗ，选择左向转录的人ＩＬ－２重组腺病毒载体ｐＡｘｌｃｗ．ＣＩｈＩＬ－２与经ＥｃｏＴ２２Ⅰ酶切的Ａｄ５腺病毒ＤＮＡ－末端肽复合物共转染２９３细胞；通过同源重组获得人ＩＬ－２的复制缺陷型重组腺病毒；体外转染人宫颈癌ＨｅＬａ细胞、人Ｔ细胞淋巴瘤Ｈｕｔ７８细胞和原代人皮肤成纤维细胞。结果扩增到的病毒滴度达２．１×１０９ＰＦＵ／ｍｌ；体外转染的人肿瘤细胞均检测到ＩＬ－２的表达（４００～２６００Ｕ／１０６细胞／２４小时）。结论所制备的复制缺陷型重组腺病毒能有效介导人ＩＬ－２的基因转移，可望用于肿瘤基因治疗的临床研究。     

人疱疹病毒6型诱导单核细胞产生IL-10

目的探讨人疱疹病毒６型（ＨＨＶ－６）感染的免疫发病机理。方法用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测白细胞介素－１０（ＩＬ－１０）等细胞因子的产生。结果ＨＨＶ－６诱导单核细胞表达和产生ＩＬ－１０，细胞因子ｍＲＮＡ动力学研究发现ＴＮＦ－α（肿瘤坏死因子）、ＩＬ－１β及ＩＬ－６随ＩＬ－１０ｍＲＮＡ积累而减少，用抗人ＩＬ－１０单克隆抗体阻断ＨＨＶ－６诱导的内源性ＩＬ－１０，ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达和因子产生明显增加，表明ＨＨＶ－６诱导的内源性ＩＬ－１０在转录水平能抑制单核细胞因子产生。结论ＩＬ－１０具有抑制Ｉ类辅助性Ｔ细胞（Ｔｈ１）反应、下调单核巨噬细胞功能等多种生物作用，推测ＨＨＶ－６诱导产生的内源性ＩＬ－１０与该病毒长期潜伏感染及其参予的免疫功能紊乱有关。     

人IL-2重组痘苗病毒转染的肿瘤细胞破碎物小鼠体内抗肺转移作用

人ＩＬ－２重组痘苗病毒转染的肿瘤细胞破碎物小鼠体内抗肺转移作用万涛曹雪涛鞠佃文陈国友章卫平陶群于益芝如何提高瘤苗的免疫原性，刺激机体产生ＣＴＬ是肿瘤主动性免疫治疗研究的重要环节。利用逆转录病毒载体等将细胞因子基因导入肿瘤细胞已被证实在一定程度上增强了...     

重组人IL-4抗血清的特异性评价

白细胞介素 4(ＩＬ 4)在参与机体免疫调节方面有重要作用 ,临床上与过敏性哮喘、皮炎等疾病有关。美国Ｇｅｎ ｚｙｍｅ公司已研制开发ＥＬＩＳＡ试剂盒检测ＩＬ 4水平 ,但价格昂贵[1,2 ] 。本实验制备ｒｈＩＬ 4抗血清以应用于ＩＬ 4的生物学活性研究及临床检测ＩＬ 4水平。1　材料和方法1 1　动物及主要试剂　日本大耳白家兔 (雄性 2 0ｋｇ左右 ) ,由本院动物中心提供 ;ＩＬ 4细胞依赖株ＣＴＬＬ 2 /ＩＬ 4Ｒ由本室保存。免疫用ｒｈＩＬ 4抗原为本课题组制备 ;标准ｒｈＩＬ 4购于ＧＩＢＣＯ ;弗氏完全佐剂购自Ｓｉｇｍａ ;羊抗兔酶标抗血…     

IL-2对人胚胎胸腺细胞的增殖作用

对胚胎胸腺细胞的研究有助于了解在不同发育阶段中此细胞的特性,且对个体发育的认识,以及有关的应用均是重要的。近年来的研究证明,这种不成熟的胚胎胸腺细胞表达有IL-2受体,而且这种细胞在IL-2存在的条件下则能增殖与分化。但在这些研究中,多以动物的胚胎胸腺或小儿胸腺进行的。本文报道用人胚胎胸腺细胞(HFT)为IL-2的靶细胞,研究了其增殖反应性。     

人重组C3片段通过IL-2自分泌效应对CTLL-2细胞产生促增殖作用

目的研究补体Ｃ３片段的体外生物学活性及其作用机理，进一步探讨Ｃ３片段与免疫细胞的关联。方法利用重组ＤＮＡ技术表达纯化Ｃ３活性片段（命名为Ｃ３３），观察其对ＩＬ－２依赖性的小鼠杀伤性Ｔ细胞株ＣＴＬＬ－２细胞的促增殖效应，并通过抗体封闭途径和分子杂交技术研究Ｃ３３作用的机理。结果发现Ｃ３３蛋白对ＣＴＬＬ－２细胞具有明显的促增殖作用，并呈剂量依赖关系；这一作用能够部分地被抗小鼠ＣＤ１１ｂ抗体所封闭，能够完全被抗小鼠ＩＬ－２抗体所封闭；分子杂交显示Ｃ３３蛋白能够明显刺激ＣＴＬＬ－２细胞的ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达。结论人重组Ｃ３片段Ｃ３３可通过ＩＬ－２的自分泌效应对ＣＴＬＬ细胞产生促增殖作用，补体受体ＣＲ３参与这一作用。     

人单核细胞对产生BSF-2/IL-6的调节作用——T细胞合成BSF-2/IL-6对巨噬细胞的依赖性

业已明确白细胞介素6(IL-6)是一种由多种组织细胞产生的、多功能的白细胞介素。尽管IL-6开始是在HTLV-Ⅰ病毒转化的T 细胞系中获得的,但迄今为止尚无直接的证据表明正常T 细胞确实产生IL-6.本文作者在分子及细胞水平证实,外周血T、B 淋巴细胞和Mφ细胞均可产生IL-6.以IL-6 cDNA 的Taq Ⅰ-Ban Ⅱ酶切片     

腺病毒诱导人淋巴细胞的细胞毒作用的实验研究

以腺病毒感染的Hela细胞作为靶细胞,以腺病毒致敏的长期培养的人淋巴细胞作为效应细胞,进行了淋巴细胞介导的细胞毒实验研究。首次得出以下结论:1.腺病毒可诱导产生特异性人杀伤性T淋巴细胞,对感染腺病毒的宿主细胞有明显杀伤作用,显示出明显损伤作用的时间是在效应细胞与靶细胞按触后10小时左右。此结果为腺病毒感染的免疫损伤假说首次提供了直接证据。2.腺病毒致敏的人杀伤性T淋巴细胞不产生型间的细胞毒交叉反应,其作用具有型特异性。3.效应细胞与靶细胞接触后4小时,出现轻度靶细胞死亡现象,这种细胞毒作用是非特异性的,很可能是NK细胞或LAK细胞介导的细胞毒作用所致。