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相似文献
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1.
阿尔茨海默病是一种中枢神经系统进行性变性疾病,为痴呆的常见原因,其较明确的病理变化是前脑胆碱能投射系统胆碱能神经元变性、细胞数量减少。神经干细胞具有自我更新和多分化潜能属性,可分化成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。神经干细胞移植后可分化成胆碱能神经元,有潜力替代AD病程中丢失的细胞,从而达到治疗疾病的目的。  相似文献   

2.
目的 观察胆碱能神经干细胞移植对阿尔茨海默病(AD)小鼠的治疗效果.方法 C57BL/6小鼠基底巨细胞核注射Ibotenic酸制成AD模型.4周后于额叶和顶叶皮质移植小鼠胚胎干细胞源性胆碱能神经干细胞.存移植术后12周,应用HE染色和且日碱乙酰转移酶-绿色荧光蛋白免疫双标染色观察神经干细胞存活和分化情况,以8方向迷宫试验评价小鼠近事记忆的改善程度.结果 胆碱能神经十细胞移植至AD小鼠顶叶和额叶皮质后主要分化为成熟胆碱能神经元,并移行和整合至移植区周围皮质,该区皮质β-淀粉样蛋白表达明显减少,且小鼠的近事记忆明显改善.结论 胆碱能神经十细胞移植可部分重建AD小鼠的胆碱能支配,改善近事记忆损害.  相似文献   

3.
神经干细胞具有自我更新和多分化潜能属性,可分化成具有替代阿尔茨海默病(AD)病程中丢失细胞潜力的胆碱能神经元.AD病理微环境对神经干细胞的影响是细胞替代治疗策略的关键问题.  相似文献   

4.
背景:前期实验已证实,移植入阿尔茨海默病大鼠脑内的神经干细胞能够存活、增殖,但其是否可替代损伤或坏死的神经细胞而重建神经通路,改善学习记忆能力尚不清楚。突触素是突触重建的重要标记之一。 目的:观察神经干细胞移植对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力及突触表达的影响。 方法:SD大鼠随机数字表法分为正常对照组、阿尔茨海默病模型组、2周移植组和4周移植组,除正常对照组外制备阿尔茨海默病模型。另取新生24 h SD大鼠海马齿状回分离、培养神经干细胞,经Hoechst33258标记后植入2周和4周移植组海马CA1区,行Y迷宫实验检测大鼠的学习记忆能力,然后取脑进行尼氏染色和突触素免疫组织化学染色。阿尔茨海默病模型组则以同样的方法、同样的位点注入等量无菌生理盐水。正常对照组不施以任何处理。 结果与结论:①2周和4周移植组海马CA1区细胞比阿尔茨海默病模型组增多,但仍少于正常对照组(P < 0.05),平均吸光度与正常对照组相比差异无显著性意义(P > 0.05)。②2周移植组和4周移植组大鼠海马结构内突触素吸光度值明显高于正常对照组和阿尔茨海默病模型组(P < 0.05)。③与阿尔茨海默病模型组相比,2周和4周移植组大鼠学习能力和记忆能力均显著增强,正确反应率明显提高(P < 0.05),而与正常对照组相比,差异无显著性意义(P > 0.05)。提示移植入脑内的神经干细胞可促进突触形成,改善学习记忆能力。  相似文献   

5.
背景: 迄今为止阿尔茨海默病(AD)的发病机制尚不明了。没有任何药物可以阻止疾病的发展,这就需要人们发现新的方法来对其进行治疗。神经干细胞(NSCs)是具有自我再生能力的细胞。人们希望通过NSCs移植来治疗AD。我们的实验将对此进行研究。目标:通过实验对胎鼠NSCs移植对AD模型大鼠的保护效应进行研究。设计,时间及地点:体外培养、体内移植及蛋白质组学等实验均在吉林大学第一临床医院完成(时间2007.07-2009.03)。材料:细胞培养基及神经生长因子均来自sigma。方法:NSCs是从胎鼠海马中获得。通过切断双侧海马制备AD模型大鼠,此后2周,将NSCs移植入AD模型大鼠脑内进行试验。主要方法:通过蛋白质组学对不同实验组(正常组、移植组、模型组)海马的蛋白水平进行测定。同时应用原位杂交技术和免疫组织化学方法对实验鼠海马及额叶的胆碱乙酰转移酶(Chat)mRNA,胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和S100β进行测定。结果:蛋白质组学方法发现,通过不同实验组间对比GFAP、热休克蛋白90(Hsps90)、热休克蛋白70(Hsps70)、丝状肌动蛋白(F-actin)及肌动蛋白(actin)等均发生改变。所有结果显示,与AD模型组大鼠相比ChatmRNA、 Hsps、 F-actin和Actin的表达在NSCs移植组均升高;而在相同区域GFAP和S100β的阳性细胞表达在NSCs移植组却相对减少。结论:我们的试验结果显示NSCs对损伤的海马产生重要的影响。  相似文献   

6.
背景:移植神经干细胞的分化受移植部位微环境、各种生长及细胞因子的影响。 目的:实验拟观察神经干细胞移植与脑源性神经营养因子联合应用对老年性痴呆鼠行为学恢复及海马线粒体膜的影响。 设计、时间及地点:随机对照动物实验,于 2006-09/2007-09在重庆医科大学动物实验室及细胞实验室完成。 材料:神经干细胞来源于新生1 d龄SD大鼠。Y迷宫筛选对电击敏感并逃避迅速的三四月龄健康雄性SD大鼠,随机分成4组:正常对照组、神经干细胞组、脑源性神经营养因子组、联合组移植,每组10只。 方法:分离培养大鼠神经干细胞。参照包新民等的大鼠脑立体定位图谱制备老年性痴呆大鼠模型。造模后,神经干细胞组双侧海马区注射神经干细胞, 脑源性神经营养因子组双侧海马区注射脑源性神经营养因子,联合移植组注射神经干细胞同时持续侧脑室注射脑源性神经营养因子。 主要观察指标:用分子生物学检测老年性痴呆大鼠海马线粒体膜电位的变化,行Y迷宫试验观察大鼠行为学中学习记忆能力。 结果:联合移植组老年性痴呆大鼠海马线粒体膜电位明显升高, 并高于神经干细胞组、脑源性神经营养因子(P < 0.05), 与正常对照组比较无明显差异。脑源性神经营养因子组、神经干细胞组学习记忆能力虽有明显恢复,但与联合移植组和正常对照组比较还有一定的距离(P < 0.05)。 结论:神经干细胞与脑源性神经营养因子联合应用能能稳定海马线粒体功能,从而抑制神经细胞凋亡,能改善老年性痴呆鼠的学习记忆功能障碍。  相似文献   

7.
神经干细胞能够在体外持续扩增,具有较强的增殖能力和较强的可塑性,能够在成年宿主中枢神经系统中存活、迁移、分化以及与宿主组织整合较好。 目的:分析神经干细胞移植对侧脑室注射192-IgG-saporin 老年性阿尔茨海默病模型鼠基底前脑神经元p75NGFR阳性神经元和行为学的影响。 方法:24只SD大鼠随机数字表法均分为3组:对照组、模型组、移植组。10只新生SD鼠(<24 h)用于神经干细胞分离培养。模型组及移植组192-IgG-saporin侧脑室注射SD大鼠建立阿尔茨海默病模型。造模后,移植组行基底前脑神经干细胞移植。4周后行Y迷宫检测,结合图像分析技术观察大鼠基底前脑p75NGFR阳性神经元数目和形态学参数的变化。 结果与结论:注射192-IgG-saporin 1个月,模型组损伤侧基底前脑内侧隔核和斜角带垂直支p75NGFR阳性神经元数明显减少(P < 0.01),移植组分别恢复到对照组的74.85%和71.66%,与模型组损伤侧相比较,差异显著(P < 0.01)。Y迷宫测试结果显示,移植组大鼠的空间学习能力和记忆能力有改善(P < 0.05),基底前脑p75NGFR阳性神经元细胞数与大鼠的空间学习记忆能力呈正相关。提示,神经干细胞移植对注射192-IgG-saporin致阿尔茨海默病鼠基底前脑胆碱能神经元有明显的补充和保护作用,可改善大鼠的学习记忆能力。  相似文献   

8.
目的探讨神经干细胞与雪旺细胞共移植后对阿尔茨海默病(AD)大鼠行为学及脑组织形态学的影响。方法建立AD大鼠模型,分别将神经干细胞、神经干细胞与雪旺细胞以及等量的生理盐水注入AD模型大鼠脑内。1个月后,与正常组一起进行morris水迷宫实验观察实验大鼠学习记忆能力的改变。35d后,处死实验鼠,通过HE染色观察各组实验鼠脑组织形态学改变。结果细胞移植后AD大鼠的学习记忆能力明显改善,与生理盐水对照组相比差异显著(P<0.01),具有统计学意义。共移植组表现最为明显,与正常组相比无明显差异(P>0.05)。与生理盐水对照组相比神经干细胞移植后海马与额叶受损细胞的恢复明显减轻,以共移植组的改变尤为明显,其形态学表现接近于正常组。结论雪旺细胞与神经干细胞共移植后AD大鼠的学习记忆能力增强,脑组织病理改变减轻,学习记忆能力明显改善,对AD大鼠的治疗作用优于神经干细胞单独移植组。  相似文献   

9.
目的:探讨经TH基因修饰的神经干细胞脑内移植后,PD模型动物脑内TH表达和神经递质的变化。方法:构建pN2ATH逆转录病毒载体质粒,用PA317细胞包装,G418筛选阳性克隆,病毒上清感染神经干细胞,将神经干细胞和表达TH的神经干细胞植入PD大鼠纹状体内,观察移植后TH的表达情况以及DA和DOPAC含量变化。结果:TH基因修饰的神经干细胞移植2月内,TH在纹状体内的表达增加,纹状体DA和DOPAC含量增高,好于单纯神经干细胞移植组和对照组,但比正常水平低,结论:TH基因修饰的神经干细胞,脑内移植能增加纹状体内TH的表达以及DA和DOPAC含量,为其脑内移植治疗PD提供了理论基础。  相似文献   

10.
目的 研究神经干细胞移植治疗AD的可行性。方法 将从新生大鼠海马齿状回分离、培养的神经干细胞注入AD模型大鼠海马 ,4周后研究干细胞在体内存活和分化的情况。结果 神经干细胞在体内可以存活 ,部分可以分化 ,大部分分化为胶质细胞 ,小部分分化为神经元。结论 神经干细胞移植对AD有治疗作用。  相似文献   

11.
背景:目前面神经损伤后的修复主要集中在外周神经干,但面神经损伤后会导致部分中枢运动神经元凋亡。现阶段关于干细胞植入面神经损伤大鼠脑后对面神经核团内凋亡神经元的影响相关报道甚少。 目的:观察大鼠面神经损伤后,脑内移植绿色荧光蛋白转基因胎鼠的神经干细胞的成活和迁移情况。 设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-07/12在昆明医学院神经科学研究所完成。 材料:孕14~16 d的绿色荧光蛋白转基因蛋白小鼠1只,用于制备转基因神经干细胞。清洁级SD雄性大鼠24只,随机分为3组:面神经损伤转基因细胞组12只、面神经损伤细胞培养液组6只、面神经正常转基因细胞组6只。 方法:面神经损伤转基因细胞组、面神经损伤细胞培养液组大鼠建立面神经切断模型。造模后1周,行转基因神经干细胞立体定向移植,注射点为前囟后方11.30 mm、背侧9.00 mm、正中线位置。面神经损伤转基因细胞组、面神经正常转基因细胞组各注入10 μL转基因神经干细胞悬液(含5×106 个细胞),面神经损伤细胞培养液组注入10 μL神经干细胞培养液,4周后制作脑组织冰冻切片。 主要观察指标:荧光显微镜观察移植部位绿色荧光蛋白阳性神经干细胞的存活情况,及其向损伤侧面神经核团周围迁移的情况。 结果:①移植处:面神经损伤转基因细胞组、面神经正常转基因细胞组均可见数量不等的绿色荧光蛋白阳性细胞,其中部分绿色荧光蛋白阳性细胞位于血管内;面神经损伤细胞培养液组未见绿色荧光蛋白阳性细胞。②面神经核团周围:仅面神经损伤转基因细胞组可见数量不等的绿色荧光蛋白阳性细胞迁移于损伤侧面神经核团周围,而健侧面神经核周围未见绿色荧光蛋白阳性细胞;余2组双侧面神经核周围均未见绿色荧光蛋白阳性细胞。③移植处与面神经核团周围之间:未见绿色荧光蛋白阳性细胞相连。 结论:神经干细胞移植入面神经损伤大鼠脑内后,可以向损伤侧面神经核周围迁移。  相似文献   

12.
目的:评估人羊膜间充质干细胞静脉移植治疗阿尔茨海默病APP转基因鼠的有效性和安全性。 方法:饲养转基因APP+胎鼠,定期合笼,利用PCR技术快速鉴定转基因鼠,以刚果红染色法观察脑组织切片中的β-淀粉样蛋白沉积。严格无菌条件下取正常足月剖腹产胎儿的羊膜,体外分离培养羊膜间充质干细胞,至第3代经尾静脉移植。Morris水迷宫测试移植前后小鼠学习、记忆能力。移植当天开始称重,每隔三天一次,持续三周。移植后解剖小鼠,收集全血并分离血清,进行心、肝、肾功能的血液生化和12项肿瘤标记物检测,对该细胞治疗的安全性作综合评价。 结果:移植后小鼠学习、记忆能力明显增强。移植组动物的体重增长趋势与对照组相比无明显差异(P>0.05),未见肿瘤和死亡发生。血液生化和12项肿瘤标记物各指标无明显差异(P>0.05)。 结论:人羊膜间充质干细胞尾静脉移植治疗阿尔茨海默氏症小鼠明显促进小鼠学习、记忆能力,未见致死致瘤现象发生,心、肝、肾功能未受影响。利用该种干细胞移植治疗阿尔茨海默氏病是安全可行的。  相似文献   

13.
目的 观察胚胎干细胞移植至AD小鼠脑内后的分化情况和小鼠学习、记忆能力变化情况.方法 C57BL/6AD小鼠按随机数字表法分4组:(1)痴呆组(n=14),采用Ibotenic毁损右侧基底巨细胞核(NBM);(2)假手术组(n=14),于右侧NBM注射PBS;(3)移植组(n=12),于NBM毁损后4周移植胚胎干细胞;(4)正常对照组(n=14),不作任何处理.移植组额叶和顶叶皮质移植小鼠胚胎干细胞,术后12周应用HE染色和HuC/D-绿色荧光蛋白、GFAP-绿色荧光蛋白免疫双标染色观察胚胎干细胞的分化情况,以8方向迷宫评价小鼠的学习、记忆变化情况.结果 HE染色结果显示,各移植点胚胎干细胞均发展为恶性畸胎瘤,以额叶部位最为巨大;免疫双标染色未见HuC/D、GFPA表达.痴呆组小鼠的工作记忆错误(WME)值较正常对照组明显升高,比较差异有统计学意义(t=6.130,P=0.000).而移植组小鼠的WME值又较痴呆组小鼠明显升高,比较差异有统计学意义(t=6.460,P=0.000).各组小鼠的参考记忆错误(RWE)值差异无统计学意义(F=0.144,P=0.065).结论 胚胎干细胞移植至AD小鼠脑内移植未分化为神经元或胶质细胞,相反均发展为恶性畸胎瘤,小鼠的近事记忆损害明显加重.
Abstract:
Objective To elucidate the differentiation of embryonic stem cells (ESCs) after their transplantation into mouse models of Alzheimer's disease (AD), and observe the changes of learning and memory abilities of the mice. Methods The C57BL/6 AD mice were randomly divided into 4 groups:dementia group (n=14), enjoying the dementia in the mouse models of right nucleus basalis of Meynert (NBM) lesion destroyed by Ibotenic; sham-operated group (n=14), injecting PBS in the right NBM;transplantation group (n=12), enjoying the dementia in the mouse models of right NBM lesion destroyed by Ibotenic and performing transplantation with ESCs in the frontal and parietal cortices; and normal control group (n=12), without giving any treatment. Behavioral tests by eight-arm radial maze were conducted to evaluate the changes of learning and memory abilities of the mice 12 weeks after the transplantation. HE staining and double staining of HuC/D-green fluorescent protein (GFP) and glial fibrillary acid protein (GFAP)-GFP were performed to observe the differentiation of ESCs in the cortices 12 weeks after their transplantation. Results It was demonstrated by HE staining that the ESCs transplanted into the cortices developed into malignant teratoma in all AD mice and the frontal lobe had the largest one;no expressions of HuC/D and GFPA were noted. The value of working memory error (WME) in mice of the dementia group was significantly higher than that in the normal controls (t=6.130,P=0.000), while the WME value in the mice of transplantation group was obviously higher than that in the mice of dementia group (t=6.460, P=0.000). The value of reference memory error between each 2 groups was not significantly different (F=0.144, P=0.065). Conclusion ESCs transplanted into the frontal and parietal cortices cannot be differentiated into neurons or glias but into tetratoma, and recent memory disruption of AD mice even worsen.  相似文献   

14.
大鼠胎脑不同部位神经干细胞比较性培养的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的取16d胎龄大鼠的不同部位来源的神经干细胞进行体外培养,比较其增殖、传代和分化的差别。方法分别取16d胎龄大鼠的大脑皮层、海马、纹状体和脑室下区的神经干细胞进行原代和传代培养,比较不同部位来源的神经干细胞增殖和传代能力。结果取材于脑室下区的神经干细胞可传代10~15次;取材于大脑皮层的神经干细胞可传代6~10次,海马及纹状体的神经干细胞传代次数界于两者之间。结论相同胎龄,从脑室下区分离的神经干细胞传代次数和增殖活性明显强于从海马、纹状体、皮层分离的神经干细胞。  相似文献   

15.
目的 观察胚胎干细胞移植至AD小鼠脑内后的分化情况和小鼠学习、记忆能力变化情况.方法 C57BL/6AD小鼠按随机数字表法分4组:(1)痴呆组(n=14),采用Ibotenic毁损右侧基底巨细胞核(NBM);(2)假手术组(n=14),于右侧NBM注射PBS;(3)移植组(n=12),于NBM毁损后4周移植胚胎干细胞;(4)正常对照组(n=14),不作任何处理.移植组额叶和顶叶皮质移植小鼠胚胎干细胞,术后12周应用HE染色和HuC/D-绿色荧光蛋白、GFAP-绿色荧光蛋白免疫双标染色观察胚胎干细胞的分化情况,以8方向迷宫评价小鼠的学习、记忆变化情况.结果 HE染色结果显示,各移植点胚胎干细胞均发展为恶性畸胎瘤,以额叶部位最为巨大;免疫双标染色未见HuC/D、GFPA表达.痴呆组小鼠的工作记忆错误(WME)值较正常对照组明显升高,比较差异有统计学意义(t=6.130,P=0.000).而移植组小鼠的WME值又较痴呆组小鼠明显升高,比较差异有统计学意义(t=6.460,P=0.000).各组小鼠的参考记忆错误(RWE)值差异无统计学意义(F=0.144,P=0.065).结论 胚胎干细胞移植至AD小鼠脑内移植未分化为神经元或胶质细胞,相反均发展为恶性畸胎瘤,小鼠的近事记忆损害明显加重.  相似文献   

16.
目的 观察胚胎干细胞移植至AD小鼠脑内后的分化情况和小鼠学习、记忆能力变化情况.方法 C57BL/6AD小鼠按随机数字表法分4组:(1)痴呆组(n=14),采用Ibotenic毁损右侧基底巨细胞核(NBM);(2)假手术组(n=14),于右侧NBM注射PBS;(3)移植组(n=12),于NBM毁损后4周移植胚胎干细胞;(4)正常对照组(n=14),不作任何处理.移植组额叶和顶叶皮质移植小鼠胚胎干细胞,术后12周应用HE染色和HuC/D-绿色荧光蛋白、GFAP-绿色荧光蛋白免疫双标染色观察胚胎干细胞的分化情况,以8方向迷宫评价小鼠的学习、记忆变化情况.结果 HE染色结果显示,各移植点胚胎干细胞均发展为恶性畸胎瘤,以额叶部位最为巨大;免疫双标染色未见HuC/D、GFPA表达.痴呆组小鼠的工作记忆错误(WME)值较正常对照组明显升高,比较差异有统计学意义(t=6.130,P=0.000).而移植组小鼠的WME值又较痴呆组小鼠明显升高,比较差异有统计学意义(t=6.460,P=0.000).各组小鼠的参考记忆错误(RWE)值差异无统计学意义(F=0.144,P=0.065).结论 胚胎干细胞移植至AD小鼠脑内移植未分化为神经元或胶质细胞,相反均发展为恶性畸胎瘤,小鼠的近事记忆损害明显加重.  相似文献   

17.
脂肪间充质干细胞移植治疗阿尔茨海默病   总被引:1,自引:0,他引:1  
阿尔茨海默病是一种神经退行性疾病,其典型特征是进行性神经元缺失,迄今为止还没有一种药物和治疗方法对其彻底根治。随着干细胞技术与理论的发展和完善,阿尔茨海默病的治疗研究主要集中在神经干细胞移植方面。为避免免疫反应,最好用自体干细胞进行移植,而获取自体神经干细胞是非常困难的。与神经干细胞相比,间充质干细胞具有更广泛的来源,可以从肝脏、骨髓、脂肪等多种组织中获得,且具有多向分化潜能的特质,在一定诱导条件下可分化为骨、肌肉、脂肪等多种组织,其中脂肪间充质干细胞因其具有容易获得、对患者损伤小等特性而备受关注。新近研究显示,脂肪间充质干细胞具有神经分化潜能,预测其很可能在阿尔茨海默病治疗中发挥重要作用。  相似文献   

18.
目的:探讨红景天苷和脑源性神经营养因子(BDNF)、神经干细胞(NSCs)共移植对致鼠NSCs定向分化影响。方法:将戊四氮致大鼠分为模型组、NSCs组、NSCs+BDNF组和NSCs+BDNF+红景天苷组。取新生大鼠海马组织,将培养的NSCs与BDNF+红景天苷+BDNF和基础培养基分别移植至致鼠海马组织中,苏木精-伊红染色及免疫组化检测不同时间点5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)、谷氨酸脱羧酶(GAD65)阳性细胞数,并观察大鼠行为学改变。结果:NSCs+BDNF+红景天苷共移植组与其他组比较,各时间点BrdU、GAD65阳性细胞数均增多(P〈0.05)。第3周开始,大鼠癫发作次数最少(P〈0.05)。结论:BDNF与红景天苷联合有利于神经干细胞向γ-氨基丁酸能神经元分化。两者联合移植至致鼠后能减少大鼠的癫发作次数。  相似文献   

19.
目的探讨小鼠神经干细胞体外原代培养的生长特性.方法用无血清与单细胞克隆技术对小鼠胚胎脑组织进行分离、培养,用光镜、免疫组织化学进行鉴定,并对其不同生长时期的生物学特性进行透射电镜观察.结果鼠胚胎分离细胞具有连续分化及克隆能力,克隆球和早期的原始细胞神经上皮干细胞蛋白(nestin)抗原呈阳性.成熟分化后胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及神经丝-200(NF-200)抗原呈阳性.不同期电镜结果:培养2周的神经干细胞较原始,核大,细胞质少,细胞器不发达.将其继续培养到4周,部分细胞内可见到发达的细胞器,并在分化细胞中观察到神经微管、微丝、胶样丝和细胞间连接样结构.结论胚胎脑组织在体外培养并克隆成神经球,具有很强的增殖能力,是多分化潜能干细胞.  相似文献   

20.
神经干细胞(Neural stem cell,NSC)移植后,如何监测其在宿主体内的存活、迁移以及与宿主组织的整合情况一直是NSC移植中的一项关键技术难题。传统的方法是采用荧光染料标记并行免疫组化切片分析鉴定,不能动态观测移植NSC的生化、分化情况。近年来,超顺氧化铁、放射性核素、荧光蛋白等开始用于NSC移植示踪,实现了移植后的NSC在活体内无创性地动态监测。  相似文献   

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