巨细胞病毒宫内感染的诊断及对胎儿的影响

采用地高辛探针斑点杂交技术和聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，对５１例人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）血清学抗体ＩｇＭ阳性孕妇的羊水、脐血和产后两周内的新生儿尿液，进行ＨＣＭＶＤＮＡ检测。同时与酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测脐血、羊水中ＨＣＭＶ－ＩｇＭ的结果相比较。结果，地高辛探针斑点杂交检测ＨＣＭＶ－ＤＮＡ的阳性率分别为：羊水２１．５７％，脐血３３．３３％，新生儿尿液２７．４５％。ＰＣＲ检测ＨＣＭＶ－ＤＮＡ的阳性率分别为：羊水２９．４１％，脐血４３．１４％，新生儿尿液３Ｓ，２９％。羊水ＨＣＭＶ－ＩｇＭ阳性率为１１．７６％，脐血ＨＣＭＶ－ＩｇＭ阳性率为２３．５３％。脐血ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性的新生儿平均出生体重明显低于脐血ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阴性的新生儿，而脐血ＨＤＷ－ＤＮＡ阳性的新生儿肝功能异常、血小板减少以及低Ａｐｇａｒ评分的发生率明显高于脐血ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阴性的新生儿。结果表明：采用ＥＲ技术检测羊水、脐血或产后两周内新生儿尿液ＨＣＭＶＤＮＡ有助于ＨＣＭＶ官内感染的早期诊断，便于临床早期干预，ＨＣＭＶ官内感染严重影响胎儿的生长发育，可造成胎儿肝功能异常、血小板减少和新生儿窒息的发生。     

成都地区孕妇和新生儿TORCH感染的检测与分析

采用ＥＬＩＳＡ检测孕妇血清及新生儿脐血ＴＯＲＣＨ特异性ＩｇＧ、ＩｇＭ抗体，同时采用ＰＣＲ检测ＣＭＶ－ＩｇＭ阳性孕妇的羊水及产后乳汁ＣＭＶ－ＤＮＡ，以了解孕妇及新生儿ＴＯＲＣＨ感染情况。结果显示ＴＯ、ＲＶ、ＣＭＶ、ＨＳＶ－１和ＨＳＶ－２检出率分别为４１．４８％、８９．３６％、９５．７４％、３９．３６％和２２．３４％，其活动性感染分别为４．２５％、３．１９％、２４．４６％、１１．７０％和５．３１％。新生儿脐血检出率为３８．２０％、８３．１４％、９３．２５％、３３．７０％和２１．３４％，宫内感染率分别为１．１２％、１．１２％、６．７４％、２．２４％和０。ＣＭＶ感染较为普遍，血清ＣＭＶ－ＩｇＭ阳性孕妇羊水ＣＭＶ－ＤＮＡ检出率为４５．４６％，远高于脐血ＩｇＭ，ＣＭＶ－ＤＮＡ阳性者胎儿、新生儿异常率较高。两种或两种以上因素感染胎儿更易受损     

用Dot－ELISA检测孕妇巨细胞病毒感染

建立了快速检测孕妇血清内的巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＩｇＭ、ＩｇＡ的ＤＯｔ－ＥＬＩＳＡ技术，用该法检测１２０例孕妇血清，ＨＣＭＶ－ＩｇＭ、ＩｇＡ的阳性率分别为１２．５０％和１４．１７％；总检出率为２１．６７％，显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）。与ＥＬＩＳＡ相比，灵敏性为９６．３０％，特异性１００％。两者对ＨＣＭＶ－ＩｇＭ、ＩｇＡ的检出率无显著性差别（Ｐ＞０．０５），但较ＥＬＩＳＡ更为快速，简便，经济，适于推广普及。     

用HCMVDNA探针检测IgA肾病患者尿及肾组织中巨细胞病毒

用ＨＣＭＶＤＮＡ探针检测ＩｇＡ肾病患者尿及肾组织中巨细胞病毒北京解放军总医院北京１００８５３刘述文，陈香美，柏立群，谷志远本文利用α－３２￣Ｐ－ｄＣＴＰ标记的人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＤＮＡ探针，以斑点杂交法检测了１７例ＩｇＡ肾病（ＩｇＡＮ）患者尿及肾...     

石家庄地区新生儿尿巨细胞病毒感染的临床分析

采用聚合的酶链反应（ＰＣＲ）检测１０５例出生后３日内新生儿尿中巨细胞病毒,同时应用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测脐血特异性ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体。结果,新生儿尿液ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性者３３例,阳性率３１．４％,脐血ＩｇＧ抗体阳性率１００％,ＩｇＭ挤体阳性率１．９％。结果表明ＰＣＲ技术检测新生儿尿液ＨＣＭＶ－ＤＮＡ有利于ＨＣＭＶ先天性感染的早期诊断,早预防、早阻断。有利于更好地实行计划生育,有利于优生     

用聚合酶链反应和放射免疫法检测肾移植术后人巨细胞病毒感染

将５０例肾移植术后发热病人的尿标本接种细胞，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测第１代细胞培养上清中的人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＤＮＡ。结果１９例为ＨＣＭＶＤＮＡ阳性，阳性率为３８．００％，用固相放射免疫法（ＲＩＡ）检测ＨＣＭＶ抗原，阳性的有１５例，阳性率为２７．７７％。将５４倒尿标本接种人胎肺二倍体单层细胞，分离到６株ＨＣＭＶ。用ＥＬＩＳＡ检测６５例病人单份血清的ＨＣＭＶ－ＩｇＭ抗体，阳性的有１７例，检测４５例病人双份血清ＩｇＧ抗体，１１例的第２份血清的ＨＣＭＶ－ＩｇＧ抗体滴度比第１份有４倍以上升高。上述结果表明，ＰＣＲ检测结果与ＲＩＡ的检测结果基本符合；病人血清抗体的阳性率与ＰＣＲ检测的阳性率基本符合。     

丙型肝炎病毒感染者中抗病毒IgM检测的意义

建立了抗ＨＣＶＩｇＭ间接ＥＬＩＳＡ方法，并用之检测ＨＣＶ不同感染人群。抗ＨＣＶＩｇＭ在不同感染人群中的检出率变化很大。急性输血后丙型肝炎患者检出率可高达９３．８％，而正常献血员中可低至０．６８％。比较抗ＨＣＶＩｇＭ和抗ＬｇＧ阳性中ＨＣＶＲＮＡ的检测结果发现，抗ＩｇＭ阳性者中，不同ＨＣＶ感染人群的ＨＣＶＲＮＡ检出率很高（９３．０％～１００％）；而ＩｇＧ阳性者中ＨＣＶＲＮＡ的检出率变化很大（３７．５％～９３．８％）。在４３例血液透析者中抗ＩｇＭ与ＨＣＶＲＮＡ检测的一致性为８３．７％；抗ＩｇＭ与抗ＩｇＧ检测的一致性为８８．４％，结果提示：（１）抗ＨＣＶＩｇＭ与ＨＣＶ活跃复制有关，（２）抗ＨＣＶＩｇＭ与抗ＨＣＶＩｇＧ检出不完全一致。因此，临床检测抗ＨＣＶＩｇＭ有其特殊意义。     

1984-1995年12年间西安地区孕妇TORCH特异性抗体检测结果分析

本文报告自１９８４年１月至１９９５年５月间西安地区孕妇ＴＯＲＣＨ特异性抗体检测结果分析。本室用微量间接血凝法及ＥＬＩＳＡ法对孕妇血清分别检测弓形体抗体（ＴＰ－Ａｂ）３１４４例、抗风疹病毒ＩｇＭ（ＲＶ－ＩｇＭ）９２０例、抗巨细胞病毒ＩｇＭ（ＣＭＶ－ＩｇＭ）１４５４例、抗单纯疱疹病毒Ⅱ型ＩｇＭ（ＨＳＶⅡ－ＩｇＭ）９５９例，其结果阳性率分别为３．６６％０．１１％、１１．２８％、３．０２％。其中，早孕和中晚孕孕妇间的各项特异性抗体阳性率均无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；有无上感病史孕妇间的ＴＰ－Ａｂ、ＣＭＶ－ＩｇＭ、ＨＳＶⅡ－ＩｇＭ阳性率均无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；不同职业孕妇的ＴＰ－Ａｂ阳性率亦无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。从而得知，对所有的孕妇在孕期进行ＴＯＲＣＨ感染检测，对于作好优生工作有重要的意义。     

应用PCR法检测新生儿肝炎综合征患者HCMV－DNA

应用ＰＣＲ法检测新生儿肝炎综合征患者ＨＣＭＶ－ＤＮＡ长春市儿童医院应用ＰＣＲ检测３０例临床诊断为新生儿肝炎综合征（ＮＨＳ）患者和１４例正常新生儿尿中人巨细胞病毒ＤＮＡ（ＨＣＭＶ－ＤＮＡ）。结果阳性率分别为６６．７％和１４．２９％，两者差异显著。ＨＣＭ...     

应用聚合酶链反应对有异常妊娠史妇女人巨细胞病毒感染的探讨

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对于有异常妊娠史妇女６０例，检测了血液、尿液和宫颈分泌物中的人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＤＮＡ；用ＥＬＩＳＡ检测血清中的ＨＣＭＶ－ＩｇＭ抗体。结果表明：有死胎、畸胎妊娠史的妇女，血、尿和宫颈分泌物中的ＨＣＭＶ－ＤＮＡ以及ＨＣＭＶ－ＩｇＭ阳性率分别为４２．８５％（１２／２８）、２８．５７％（８／２８）、５３．５７％（１５／２８）和２５．００％（７／２８）；习惯性流产史的妇女分别为２１．８７％（７／３２）、１２．５％（４／３２）、３１．２５％（１０／３２）和１５．６２（５／３２）；正常对照为１４．２８％（５／３５）、１１．４２％（４／３５）、１７．１４％（６／３５）和６．７１％（２／３５）。统计表明：畸胎、死胎组的血、尿和宫颈分泌物中的ＨＣＭＶ－ＤＮＡ明显高于对照Ｐ＜０．０５，有显著差异。习惯性流产组的四项指标与对照比较均无差异Ｐ＞０．０５。结果提示，血清中的ＨＣＭＶ－ＩｇＭ的阳性率低于血液和宫颈分泌物中的阳性率，而接近于尿中的结果。不同部位的标本，以宫颈分泌物的阳性率最高，其次是血液，再其次是尿液。     

用核酸分子杂交技术产前诊断人巨细胞病毒感染

用ELISA法筛选早孕妇女和中孕引产妇女积压人巨细胞病毒IgM(HCMV-IgM)，早孕妇女阳性者在旱12．20周(中孕引产妇女阳性者在引产时)留羊水，用生物素标记的HCMV-DNA探针斑点杂吏检测其羊水中的HCMV-DNA。对胎儿巨细胞病毒惑染作出产前诊断。结果：早孕妇女384例．血HCMV-IgM阳性26例，此26例羊水HCMV-DNA阳性9例，其中7例出生时留脐血进一步检测HCMV-IgM和HCMV-DNA。证实有HCMV感染。中孕引产妇女125例。血HCMV-IgM阳性10例。此10例羊水HCMV-DNA阳性4例。     

人巨细胞病毒宫内感染与孕龄的关系

目的研究孕龄与人巨细胞病毒宫内感染的垂直传播率之间的关系。方法分别应用ELISA方法和PCR方法检测273例不同孕龄的孕妇外周血标本中的HCMV-IgM和HCMV-DNA,新生儿血样或胚胎组织用PCR方法检测HCMV-DNA以诊断先天性HCMV感染。结果孕早期妇女外周血中的HCMV-IgM和HCMV-DNA的阳性率均低于孕中期和孕晚期妇女,差异有显著性(P<0.005)。孕中期和孕晚期妇女宫内感染的垂直传播率显著高于孕早期妇女,差异有统计学意义(P<0.001)。结论孕中期和孕晚期妇女发生宫内感染的几率和垂直传播率均显著大于孕早期妇女,应加强对孕中期和孕晚期HCMV感染孕妇的监测和治疗。     

应用PCR技术对孕妇HCMV感染的前瞻性研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对１５６ 例孕妇尿中ＨＣＭＶ 进行检测,并追踪观察１１４ 例新生儿脐血中ＨＣＭＶ 垂直传播情况。结果表明：１１ 例孕妇尿ＨＣＭＶＤＮＡ 检测阳性,孕期感染率为７－０５％ ,有异常妊娠史孕妇感染率（１４－７１ ％ ）较正常孕妇（４－９２ ％） 明显升高。９ 例ＨＣＭＶ 阳性孕妇有４ 例观察新生儿脐血ＨＣＭＶＤＮＡ 阳性,占４４％ ,而ＨＣＭＶＤＮＡ阴性孕妇无１ 例新生儿脐血出现阳性结果。我们认为ＰＣＲ方法是检测ＨＣＭＶ宫内感染的可靠而灵敏的指标,对ＨＣＭＶＤＮＡ阳性的孕妇应进一步检查羊水,如羊水ＨＣＭＶＤＮＡ也阳性,应终止妊娠。     

巨细胞病毒宫内感染状态与母婴垂直传播之间的关系

目的研究巨细胞病毒（HCMV）宫内感染状态即活动性与非活动性感染与母婴垂直传播之间的关系。方法对85例HCMV-IgM或HCMV-DNA阳性的母血标本用RT-PCR方法检测即刻早期（IE）mRNA和晚期（L）mRNA,并用PEP-PCR方法检测母血标本中分离出的胎儿细胞的HCMV-DNA。结果 85例母血标本中检测到IE-mRNA或L-mRNA的有57例,其中胎儿细胞HCMV-DNA呈阳性的有37例,宫内垂直传播率为64.91%。未检测到IE-mRNA和L-mRNA的28例样本中胎儿细胞HCMV-DNA呈阳性的有4例,宫内垂直传播率为14.29%。两组的垂直传播率经χ2检验有统计学差异（P〈0.001）。结论巨细胞病毒宫内感染处于活动期状态时,其发生母婴垂直传播的危险性显著高于非活动期感染状态,这对于采取正确的治疗措施和评估预后有重要的指导意义。     

HCMV-DNA is detected more frequently than infectious virus in blood leucocytes of immunocompromised patients: a direct comparison of culture-immunofluorescence and PCR for detection of HCMV in clinical specimens.

In two studies comparing detection of human cytomegalovirus (HCMV) in 118 patients (93 of whom were immunocompromised) by the polymerase chain reaction (PCR) and virus isolation using either early antigen detection by culture-immunofluorescence or conventional cytopathic effect, DNA-PCR was found to be the most sensitive, followed by culture-immunofluorescence, then by cytopathic effect. Urine was inhibitory to the action of Taq polymerase; this was overcome by concentration of HCMV with PEG 6000 prior to gene amplification. Without PEG treatment, HCMV-DNA in 6 of the 11 specimens positive by culture-immunofluorescence was not detectable by PCR. In healthy seropositive individuals, HCMV-DNA was not detected in leucocytes. However, in immunocompromised patients with AIDS or transplants, and therefore at high risk of HCMV infection or reactivation, blood leucocytes were usually positive for HCMV-DNA (19/20), some for as long as 20 weeks after initial detection and persisting for long after culture-immunofluorescence became negative. Neither HCMV-RNA nor infectious HCMV were detected in the follow-up blood leucocyte specimens from immunocompromised patients who had detectable HCMV-DNA in these cells. These data suggest that persistence of HCMV-DNA in blood leucocytes of immunocompromised patients after reactivation or primary infection may be due to persistence of non-viable virus, residual HCMV genomic DNA, or latent HCMV-DNA.     

育龄妇女TORCH感染的诊断指标及其临床意义

目的　探讨TORCH血清学检测各指标在诊断TORCH感染中的应用。方法　收集 10 80例育龄妇女外周血血清标本分别应用ELISA捕获法检测TORCH -IgM、ELISA双抗体夹心法定量检测TORCH -IgG以及PCR技术检测 2 0 6例HCMV -IgM阴性且HCMV -IgG阳性标本的HCMV -DNA。结果　TOXO -IgM阳性率为 1.76 % (16 /90 9) ,RV -IgM阳性率为 0 .33% (3/90 2 ) ,HCMV -IgM阳性率为 1.6 4 % (16 /930 )。TOXO -IgG为 3.74 % (34/90 8) ;RV -IgG为 6 7.0 7%(6 0 5 /90 2 ) ;HCMV -IgG为 91.0 6 % (84 5 /92 8)其阳性率接近国内有关文献报道。HCMV -IgG(+)组和HCMV -IgG(++)组的DNA阳性率分别为 1.39%和 1.5 0 % ,HCMV -IgG(+++)组的DNA阳性率为 7.35 % ,HCMV -IgG阳性 (+)组和HCMV -IgG阳性 (++)组HCMV -DNA的阳性率无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;HCMV -IgG阳性 (+)组和HCMV -IgG阳性(++)组与HCMV -IgG阳性 (+++)组HCMV -DNA的阳性率均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　捕获法检测血清TORCH -IgM特异性高 ,假阳性率低 ,是可靠的辅助的诊断指标之一。在HCMV -IgG滴度较高时 ,提示有HCMV近期感染的可能。     

孕妇HCMV感染及妊娠结局分析

目的了解孕妇感染HCMV后对胚胎、胎儿及妊娠结局的影响.方法采用ELISA方法对4148例长沙地区孕妇进行TORCH-IgM检测.结果在对4148例长沙地区孕妇进行TORCH-IgM检测中,发现有62例孕妇为HCMV-IgM阳性,阳性率为1.5%.在随访的58例孕妇中,妊娠结局为自然流产者达31%(18/58);为死胎及胎儿畸形者达19%(11/58),显著高于其他异常妊娠结局者(P＜0.001).结论HCMV宫内感染是导致胚胎和胎儿自然流产的主要原因之一,同时也是导致胎儿宫内死亡、畸形发生的主要原因.因此,提高孕妇免疫能力,加强孕期健康教育,避免和减少易感因素的接触,是降低胎儿宫内感染的主要措施;另外,大力推广孕前优生检测也是防止胎儿宫内感染发生的重要手段.     

孕妇外周血胎儿有核红细胞的分离与检测

目的从孕妇血循环中分选出有核红细胞（ＮＲＢＣｓ），并证实其是胎儿来源的。方法选用红细胞特异单克隆抗体ＧｌｙｃｏｐｈｏｒｉｎＡ（ＧＰＡ）结合流式细胞术成功地从３例妊娠１６～２４周的孕妇血中分离出ＮＲＢＣｓ，并用Ｙ－染色体特异重复序列ＤＮＡ探针（ＰＹ３．４）荧光原位杂交及聚合酶链反应技术检测Ｙ－染色体特异序列（ＳＲＹ）结果ＦＩＳＨ结果，３例分选出的ＧＰＡ阳性细胞中ＰＹ３．４杂交阳性率分别是３１．４％、０、３８％；其ＰＣＲ结果，分别为阳性、阴性、阳性，并在引产后得到性别证实。结论孕妇外周血中确实存在胎儿有核红细胞，采用非创伤性方法可以分离并检测它们     

Human cytomegalovirus infection in foci of Langerhans cell histiocytosis

 Langerhans cell histiocytosis (LCH) has been thought to be a disorder of immune regulation, and increasingly, evidence showing that the tissue damage in LCH involves lymphokines and pro-inflammatory cytokines is reported. We detected human cytomegalovirus (HCMV)-DNA in LCH cells in the foci of LCH lesions by immunohistochemistry, in situ hybridization and PCR. HCMV was detected in the nuclei and/or cytoplasm of LCH cells in 9 of 27 LCH cases by immunostaining. HCMV was probably an early antigen. In situ hybridization revealed signals for HCMV-DNA only in the nuclei of LCH cells in 10 of the 27 LCH cases. PCR analysis was performed in 20 of the LCH cases, and HCMV-DNA was detected in 7 of these. All 7 positive cases were also positive for HCMV by ISH and IHC. These findings suggested that early phase infection or reactivation of HCMV occurred in the LCH lesions. HCMV infection may be accompanied by impaired cytokine production. Our study also suggested a relationship between HCMV infection and expression of TNFα. In tissues affected by LCH, dermatopathic lymphadenopathy or malignant fibrous histiocytoma and in normal tissues no signals for Epstein-Barr virus-RNA were detected. These findings suggest that in some cases LCH is associated with HCMV infection. Received: 24 November 1998 / Accepted: 24 April 1998