系统性红斑狼疮患者白介素-10mRNA、白介素-18mRNA、FasmRNA表达水平的研究

目的 探讨未经刺激外周血单一核细胞(PBMC)白介素(IL)-10mRNA、IL-18mRNA和Fas mRNA的表达水平在系统型红斑狼疮(SLE)发病中的作用.方法 分离82例SLE患者和31例正常对照组外周血单一核细胞,提取总RNA,应用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR技术,检测并比较SLE患者及正常对照组PBMC中IL-10mRNA、IL-18mRNA、Fas mRNA表达水平的差异.结果 SLE患者组PBMC IL-10 mRNA、IL-18 mRNA、Fas mRNA的表达水平明显高于正常对照组(P＜0.01,P＜0.05 ). SLE患者组三个因子的变化趋势一致,成正相关(r=0.713,r=-0.565,r=-0.593,P＜0.01).结论 SLE患者外周血单一核细胞存在IL-10mRNA、IL-18mRNA、FasmRNA表达异常,IL-10mRNA,IL-18mRNA和FasmRNA的高表达在SIE发病中起着非常重要的作用.     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中γ干扰素mRNA的表达

目的 探讨系统性红斑狼疮（SLE）患中γ-干扰素（IFNγ）表达的自然情况。方法 用逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）法检测了15例SLE患和10例正常人外周血单个核细胞（PBMC）中IFNγmRNA表达的水平。结果 与正常人相比，活动期SLE患PBMC中IFNγmRNA表达水平降低（P<0.01)。结果 SLE患中IFNγ的表达下调。     

卡介菌多糖核酸对SLE患者外周血单个核细胞产生Th细胞因子mRNA及其表达的影响

目的：探讨卡介菌多糖核酸对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中Th细胞因子mRNA产生及其表达的影响，初步了解其作用机制，方法：将SLE患者随机分为处理组和对照组，于治疗前后采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和ELISA技术分别检测Th1型细胞因子γ于扰素(IFN-γ)和Th2型细胞因子IL-4、IL-10的mRNA表达及PBMC培养上清水平，并评估疾病活动性。结果：治疗后，两组SLE患者PBMC中IFN-γ mRNA表达低于正常，IL-4、IL-10mRNA表达仍高于正常；但处理组上述细胞因子产生水平均降至正常；而对照组IFN-γ产生水平低于正常，IL-4、IL-10产生水平仍高于正常。处理组疾病活动降低的程度明显优于对照组：结论：卡介菌多糖核酸可能在转录后翻译或翻译后调控机制中某一环节对细胞因子蛋白质进行干预．从而对SLE发挥辅助治疗作用．     

系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞中IL—2及其受体mRNA的表达

目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者中白介素（IL－2）及其受体（IL－2R）表达的自然情况。方法：用逆转录－多聚酶链反应（RT－PCR）法检测17例SLE患者和10例正常人外周血单个核细胞（PBMC）中IL－2、IL－2RmRNA表达的水平。结果：与正常人相比，活动期SLE患者IL－2mRNA表达水平降低而IL－2mRNA表达水平增高（P＜0．01）。结论：SLE患者中IL－2R的表达未受IL－2的诱导。     

SLE患者HSP90基因表达及其与IL-6相关性的研究

目的:通过检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中热休克蛋白90(HSP90)基因mRNA及IL-6的水平,探讨SLE患者HSP90基因的表达及其与IL-6间存在的相关性。方法:分别使用原位杂交法、双抗体夹心ELISA法检测45例SLE患者外周血中HSP90mRNA和IL-6的表达,并进行直线相关性分析。取15份健康人血样进行正常对照。结果:SLE活动期、非活动期PBMC中HSP90mRNA表达的平均光度值分别为0.350±0.225,0.221±0.040,均显著高于正常对照组0.114±0.009(P<0.01,P<0.05)。SLE活动期HSP90mRNA表达显著高于SLE非活动期(P<0.05)。SLE活动期、非活动期血清IL-6水平分别为(16.82±1.79)pg/mL,(12.58±1.12)pg/mL,均显著高于正常对照组(10.13±2.95)pg/mL(P<0.01,P<0.05)。SLE活动期IL-6水平显著高于SLE非活动期(P<0.01)。IL-6的表达与HSP90mRNA的含量之间呈直线正相关关系(r=0.413,P<0.01)。结论:SLE患者体内存在IL-6的过度表达,可导致HSP90mRNA表达的增多,进而导致HSP90蛋白增高,高表达的HSP90可参与SLE的自身免疫反应,这可能在SLE的发病机制中起着一定的作用。     

系统性红斑狼疮外周血单一核细胞Fas和FasL mRNA的表达

目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血淋巴细胞Fas及其相应配体FasL的表达水平及在SLE发病中的作用。方法：应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测34例活动期SLE患者和30例正常人外周血单一核细胞（PBMC）中Fas和FasL mRNA的表达水平。结果：活动期SLE患者PBMC中FasL的阳性检出率为91.18%,明显高于正常对照组（63.30%),差异非常显著（P＜0.01);Fas的阳性检出率与对照组相比无明显差异（P＞0.05)。活动期SLE患者PBMC中Fas和FasL mRNA的平均表达水平均高于正常对照组,差异显著（P＜0.05)。结论：Fas和FasL的高水平表达可能与SLE患者外周血T淋巴细胞活化、凋亡增加有关,Fas介导的淋巴细胞凋亡可能参与了SLE的发病过程。平表达可能与SLE患者外周血T淋巴细胞活化、凋亡增加有关,Fas介导的淋巴细胞凋亡可能参与了SLE的发病过程。     

结缔组织疾病

992897 SLE患者外周血单个核细胞中IL-10与r干扰素的表达/陈志强（中国医科院、中国协和医大皮研所）…//临床皮肤科杂志.-1999,28（2）.-74～76 采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法,对15例活动期SLE患者外周血单个核细胞（PBMC）中T_（H2）型细胞因子-白介素10（IL-10）和T_（H1）型细胞因子-r干扰素（IFNr）的mRNA自然表达水平进行了半量分析,并以10例正常人做对照。结果,与正常对照组相比,患者PBMC中IL-10mRNA表达平均水平与正常对照组相比有显著增高,相反,患者的PBMC中IFNrRNA的平均水平与正常对照组相比有显著降低,差别均有统计学意义。结果提示患者中有T_（H2）型细胞因子表达的上调与T_（H1）型细胞因子表达的下调,即可能有T_（H2）/T_（H1）细胞因子网络的改变;提示在发病机制中起作用。表1参10 （孙泑秦）     

HAX-1在SLE患者外周血单一核细胞中的表达及其亚细胞定位

目的 检测活动期SLE患者PBMC中抗凋亡基因HAX-1的表达水平，并进行亚细胞定位分析。方法 分别采用半定量PCR以及Western印迹试验从mRNA和蛋白水平上检测活动期SLE患者及正常人对照组PBMC中HAX-1的表达，并通过激光共聚焦显微镜观察HAX-1在SLE患者PBMC中的亚细胞定位。结果 活动期SLE患者PBMC中HAX-1在mRNA水平以及蛋白水平的表达均明显高于健康正常人（P值分别 = 0.000、0.007），且其相对表达水平与SLEDAI之间呈线性正相关；HAX-1在SLE患者PBMC中主要分布于线粒体内及内质网。结论 HAX-1可能通过抗凋亡机制抑制SLE患者体内淋巴细胞凋亡而导致其过度活化，从而参与SLE疾病发生发展过程。     

SLE患者雌激素受体-α与相关细胞因子的表达及临床相关性研究北大核心CSCD

目的探讨SLE患者雌激素受体（ER）对T、B淋巴细胞的作用机制以及T、B淋巴细胞在SLE发病中的协同作用。方法采用实时荧光定量PCR检测40例SLE患者与40例正常人外周血单核细胞（PBMC）ER-α、IL-10、B淋巴细胞刺激因子（BLyS）mRNA表达水平;分析ER-α、IL-10和BLySmRNA表达与临床及实验室指标的相关性。结果SLE组ER-α、IL-10、BLyrSmRNA相对表达量显著高于正常人对照组（P〈0．05或P〈0．01）,SLE活动期较静止期明显增高（P〈0．05或P〈0．01）,且其表达水平与肾损害、蛋白尿、关节炎等临床及实验室指标有相关性。男女SLE组以及男女正常对照组的表达比较差异无统计学意义。结论IL-10和BLys与SLE的病情活动性和严重程度相关,ER-α可能在SLET、B淋巴细胞的作用机制中有重要作用。     

SLE患者外周血单个核细胞IL—13mRNA的表达

探讨IL-13在系统性红斑狼疮(SLE)发病机制中的作用及其意义,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PGR)检测了34例活动期SLE患者和30名正常人外周血单个核细胞(PBMC)中IL-13mRNA的表达水平.结果表明,活动期SLE患者IL-13的阳性表达率与正常人对照组相比无明显差异(P＞0.05);活动期SLE患者PBMC中IL-13mRNA的平均表达水平(0.8983±0.1153)明显高于正常人对照组(0.6085±0.0903),差异非常显著(P＜0.001).提示高水平的IL-13表达可能与SLE患者外周血T细胞高度活化、功能异常有关,其通过刺激B细胞活化、分化与增殖或激活B细胞旁路,参与SLE的发病过程.     

活动性系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞白介素6信使RNA（IL－6mRNA）表达水平的研究

应用反转录／聚合酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）方法检测了２１例ＳＬＥ患者及１４例正常人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）中白介素６信使ＲＮＡ（ＩＬ－６ｍＲＮＡ）表达水平，结果表明活动性ＳＬＥＰＢＭＣｓ中ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达明显高于非活动性患者及正常对照，而非活动期ＳＬＥ与正常组比较无显著统计学差异，提示ＩＬ－６可能参与活动性ＳＬＥ的发病机制。     

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞白介素6受体水平的研究

目的 探讨白介素6(IL-6)及其受体(IL-6R)在系统性红斑狼疮(SLE)发病中的作用。方法 应用逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)检测89例SLE患者和30例正常人外周血单一核细胞(PBMC)中IL-6RmRNA的表达水平,用ELISA法检测血清中IL-6水平。结果 ①活动期SLE患者和非活动期SLE患者及正常人IL-6R阳性表达率为100%。②PBMC中,IL-6RmRNA表达水平:活动期SLE患者为0.902±0.273,非活动期SLE患者为0.519±0.11,正常人为0.573±0.24。活动期组和非活动期组和对照组比较,差异均有统计学意义(P=0.00),非活动期组和对照组比较差异无统计学意义(P=0.289)。③血清中IL-6水平:活动期组为71.89±20.02pg/mL,非活动期组为17.96±6.93pg/mL,对照组为0.035±0.035pg/mL。活动组显著高于非活动组和对照组(P=0.00),非活动组显著高于对照组(P=0.00)。活动期SLE患者和非活动期SLE患者血清中的IL-6水平与PBMC上的IL-6R的表达水平呈正相关(r=0.887和r=0.615,P<0.05)。结论 IL-6及其受体的异常表达可能在SLE疾病活动和发展过程中起重要作用。检测SLE患者PBMC中IL-6受体的表达水平可作为评估疾病活动性的参考指标之一。     

SLE患者T淋巴细胞IL-13受体α1基因表达及其调节序列甲基化状态的研究

目的 研究SLE患者外周血T淋巴细胞IL-13受体α1（IL-13Rα1）基因mRNA的表达及IL-13Rα1基因调节序列甲基化状态。方法 免疫磁珠法（MACS）分离10例SLE患者和6例正常人外周血CD4+和CD8+ T细胞，采用实时荧光定量PCR检测T细胞中IL-13Rα1 mRNA的表达，并用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测IL-13Rα1基因调节序列的甲基化水平。结果 活动期SLE患者CD4+ T细胞中IL-13Rα1 mRNA表达水平为2.224 ± 0.251，非活动期SLE患者为1.712 ± 0.132，正常人组为1.104 ± 0.044，三组间比较，差异均有统计学意义（P < 0.05）；CD8+ T细胞中IL-13Rα1 mRNA表达水平活动期、非活动期及正常人组分别为1.672 ± 0.142，1.410 ± 0.154，1.238 ± 0.106，活动期组与正常人组比较差异有统计学意义（P < 0.05），而非活动期组与正常人组、活动期组与非活动期组比较，差异均无统计学意义（P > 0.05）。CD4+ T细胞中IL-13Rα1基因甲基化指数活动期SLE患者为0.454 ± 0.023，非活动期为0.635 ± 0.065，正常人为0.844 ± 0.097，三组间比较，差异均有统计学意义（P < 0.05）；CD8+ T细胞中IL-13Rα1基因甲基化指数三组间比较，差异均无统计学意义（P > 0.05）。SLE患者外周血CD4+，CD8+ T细胞IL-13Rα1 mRNA的表达与疾病活动度（SLEDAI评分）呈正相关（r = 0.79，P < 0.01；r = 0.76，P < 0.05）；CD4+ T细胞的IL-13Rα1基因的甲基化水平与疾病活动度（SLEDAI评分）呈负相关（r = -0.89，P < 0.01）；CD4+ T细胞IL-13Rα1 mRNA表达与其调节序列的甲基化水平呈负相关（r = -0.84，P < 0.01）。结论 SLE的发生发展可能与DNA低甲基化导致SLE患者T细胞过度表达IL-13Rα1有关。     

系统性红斑狼疮患者外周血IL-18的表达

目的　探讨白细胞介素 18(IL 18)在系统性红斑狼疮 (SLE)发病中的作用。方法　采用逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)及酶联免疫吸附法 (ELISA)测定 40例SLE患者及 2 0例正常对照者血浆中IL 18分泌水平及外周血单一核细胞 (PBMC)IL 18mRNA表达量。结果　SLE患者血浆IL 18水平及PBMCIL 18mRNA的相对表达水平与SLEDAI呈正相关。活动期SLE患者血浆IL 18水平及PBMCIL 18mRNA表达水平显著高于非活动期SLE患者及正常对照 (P均 <0 .0 1)。结论　外周血IL 18可能并未参与SLE的早期发病过程 ,但当疾病发展到一定程度 ,IL 18分泌水平升高 ,可能在疾病的进一步发展中起一定的作用。     

系统性红斑狼疮患者Th1/Th2细胞及白介素12、18及其受体mRNA的表达

目的 探讨未经药物治疗的初发系统性红斑狼疮患者Th1/Th2细胞亚群分布,白介素12、白介素18及其受体的基因表达.方法 运用三色荧光标记流式细胞术检测35例初发SLE患者、10例正常人Th1/Th2细胞亚群分布;ABI7700Real-TimePCR法同时检测38例患者和28例正常人IL-12、IL-18及其受体mRNA表达水平.结果 ①初发狼疮患者Th1较正常人明显减低(P<0.05),但Th1/Th2无显着性改变.②与正常人组相比,SLE组患者IL-12、IL-18mRNA及其受体表达较正常人明显降低(P值均<0.05);③面部红斑组患者Th1/Th2、IL-12P35较正常人组降低(P均<0.05);④RNP阳性组患者IL-12P40较正常人组升高,IL-12P35、IL-18较正常人组降低(P均<0.05).结论 SLE是一种以Th1细胞下降,Th2细胞相对占优势的自身免疫性疾病,源于诱导向Th1细胞分化的一系列细胞因子及其受体减少和细胞因子间失衡所致.     

SLE患者雌激素受体-α与相关细胞因子的表达及临床相关性研究

目的 探讨SLE患者雌激素受体(ER)对T、B淋巴细胞的作用机制以及T、B淋巴细胞在SLE发病中的协同作用.方法 采用实时荧光定量PCR检测40例SLE患者与40例正常人外周血单核细胞(PBMC)ER-α、IL-10、B淋巴细胞刺激因子(BLyS)mRNA表达水平;分析ER-α、IL-10和BLyS mRNA表达与临床及实验室指标的相关性.结果 SLE组ER-α、IL-10、BLyS mRNA相对表达量显著高于正常人对照组(P＜0.05或P＜0.01),SLE活动期较静止期明显增高(P＜0.05或P＜0.01),且其表达水平与肾损害、蛋白尿、关节炎等临床及实验室指标有相关性.男女SLE组以及男女正常对照组的表达比较差异无统计学意义.结论 IL-10和BLyS与SLE的病情活动性和严重程度相关,ER-α可能在SLE T、B淋巴细胞的作用机制中有重要作用.

Abstract：

Objective To study the mechanism of effects of estrogen receptor (ER) on T and B lymphocytes in patients with SLE and synergistic effect of T and B lymphocytes in the pathogenesis of SLE.Methods Real-time fluorescence quantitative PCR was performed to detect the mRNA expressions of ER-α,interleukin 10 (IL-10) and B lymphocyte stimulator (BLyS) in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs)from 40 SLE patients and 40 normal human controls. The clinical and laboratory correlation with the levels of these parameters was analyzed. Results A significant increase was observed in the relative expression levels of ER-α, IL-10 and BLyS mRNA in SLE patients compared with the normal human controls (P ＜ 0.05 or 0.01 ), in active SLE patients compared with inactive SLE patients (P ＜ 0.05 or 0.01 ). Additionally, the mRNA expression levels of the 3 parameters were significantly correlated with the presence of renal damage, proteinuria, arthritis, etc. No statistical difference was observed in the mRNA expression levels of these parameters between female and male patients or between female and male normal controls. Conclusions IL-10 and BLyS appear to be correlated with the disease activity and severity of SLE, and ER-α may play an important role in the action mechanism of T and B lymphocytes in SLE.     

慢性特发性荨麻疹患者单一核细胞IL-2、4、10受体mRNA的表达

目的 探讨白介素2受体(IL-2R)、白介素4受体(IL-4R)、白介素10受体(IL-10R)在慢性特发性荨麻疹(CIU)患者外周血单一核细胞(PBMC)中的表达及与疾病的相关性.方法 收集30例确诊的CIU患者和30例正常人对照,收集PBMC,提取RNA.应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测研究对象IL-2R、IL-4R、IL-10RmRNA表达水平.结果 CIU患者IL-10RmRNA表达水平比健康人对照组增高,两组分别为0.806±0.072、0.373±0.027,差异有统计学意义(t=5.62,P<0.01).而IL-2R、IL-4RmRNA表达水平患者组与健康人对照组无统计学意义,分别为,IL-2R:0.688±0.357、0.670±0.527,t=1.16,P>0.05;IL-4R:0.679±0.055和0.549±0.049,t=1.77,P>0.05.结论 CIU患者IL-10RmRNA表达水平比健康人对照组增高,而IL-2R、IL-4RmRNA表达水平与健康人对照组无统计学意义.CIU患者存在T淋巴细胞细胞因子受体表达的异常.     

曲古抑菌素A对SLE患者外周血IL-10和IL-12分泌的影响

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血全血培养细胞中IL-10和IL-12分泌水平的影响。方法:选取21例SLE患者和10名正常人,采集空腹静脉血标本分为空白组、HDAC抑制剂(曲古抑菌素A,TSA)组、植物血球凝集素/脂多糖(PHA/LPS)刺激组和PHA/LPS TSA组作体外全血细胞培养,分离培养液上清并应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测IL-10和IL-12分泌水平。结果:SLE患者的外周血全血培养细胞IL-12分泌水平明显低于正常人(P<0.01),但IL-10却明显高于正常人(P<0.01);TSA对SLE患者IL-10的分泌有显著抑制作用(P<0.01),而对IL-12则有明显上调作用(P<0.01),但对正常人IL-10和IL-12分泌水平无明显影响;而且SLE患者IL-10和IL-12的分泌水平分别与SLE疾病活动指数(SLEDAI)呈不同程度的正相关和负相关。结论:IL-10分泌水平上调和IL-12下降在SLE的发病中可能起重要作用,TSA对体外培养的外周血多途径激活后的IL-10分泌具有抑制作用,对IL-12具有上调作用,HDAC抑制剂可能是治疗SLE的一种新方法。