人精子甘露糖受体对精卵融合的影响

目的：进一步探讨人精子甘露糖受体（MR）在精卵融合中的作用。方法：采用改良后的甘露糖-琼脂糖凝胶亲和层析法分离纯化人精子MR，并将提纯的人精子甘露糖受体（pMR）作用于去透明带的金黄地鼠卵母细胞，应用透射电子显微镜技术和罗丹明偶联的兵豆凝集素（TAITC-LCA）免疫荧光标记技术观察pMR对卵子的影响。同时以pMR免疫小鼠获得抗MR抗血清，将其同人精子共同孵育一段时间，采用异种体外受精实验模型，即精子穿透试验（SPA），观察其对人精子与卵母细胞体外受精的影响。结果：（1）人精子MR能够诱发去透明带金黄地鼠卵母细胞中皮质颗粒的胞吐，并引起卵母细胞表面微绒毛形态和数量发生改变；（2）皮质颗粒胞吐后，其内容物可结合到卵3膜表面；（3）抗MR抗血清预处理精子可抑制精子与卵子的结合与融合，使受精率、穿透指数和结合指数下降，并均有剂量依赖性。结论：人精子MR在受精过程中起重要作用，其主要作用可能是介导精-卵膜融合并促进卵母细胞的活化。     

受精前后地鼠卵母细胞皮质颗粒的变化

为观察人精子与地鼠卵异体受精前后,卵母细胞内皮质颗粒的变化,采用罗丹明偶联的兵豆凝集素标记受精前、受精30 min和3 h后金黄地鼠的去透明带卵母细胞,用激光共聚焦显微镜观察皮质颗粒的分布情况,结果显示,受精前卵母细胞内的皮质颗粒散在于卵质膜下和皮质区,受精后皮质颗粒数量减少,并发生边集.说明人精子与金黄地鼠卵异体受精时,可引起皮质颗粒向卵质膜靠拢并胞吐.     

人精子甘露糖受体纯化及其对受精能力的影响

目的　探讨人精子甘露糖受体 (MR)对受精能力的影响。　方法　采用改良的亲和层析法分离纯化 MR,L owry法测定其蛋白质浓度 ,在精子穿透试验 (SPA)模型中定量研究其对精卵融合能力的影响并检测其细胞生物学活性 ;以已知浓度的纯化甘露糖受体 (p MR)干预精子半透明带试验 ,观察用 p MR预处理半透明带对精子与透明带结合的影响。　结果　 (1) MR分子量为 6 7.8± 1.6 k D,1× 10 6 个精子中可分离纯化到 p MR 19.6± 7.1ng;(2 )人精子 p MR作用浓度为 0 .95μg/ m L能抑制人精子穿透金黄地鼠卵母细胞 (P <0 .0 5 ) ,浓度 >2 .86μg/ m L时完全抑制 (P<0 .0 5 ) ;(3)用浓度为 2 .84μg/ m L的人精子 p MR预处理透明带半膜 ,不能抑制精子与透明带的结合 (t=1.2 5 ,P<0 .0 5 )。　结论　人精子 MR在精子与透明带识别结合中可能不起介导作用 ,其对精卵融合能力可能具有影响。     

FVB小鼠精子冷冻及体外受精的研究

目的：探索FVB小鼠及FVB遗传工程小鼠种系保存的新途径.方法：用孕马血清和人绒毛膜促性腺激素（HCG）超排FVB小鼠,并分别用复苏精子和新鲜精子进行体外受精并将受精卵移植到假孕雌鼠输卵管中,比较两种精子的受精率;对注射HCG后13,15,17h不同时间采集FVB小鼠的卵母细胞进行体外受精,比较其受精率及体外培养至2细胞情况.结果：新鲜精子的受精率（62.4%）略高于冷冻复苏精子的受精率（58.1%）;在注射HCG 13～15 h后取FVB小鼠卵母细胞其受精率效果较好,受精率（60.2%、61.6%）显著高于17h取卵的受精率（51%）,但13,15,17 h采集卵母细胞体外受精后胚胎发育至2细胞及异常卵数无显著性差异.结论：本研究将为FVB小鼠及FVB遗传工程小鼠的种系保存、繁殖提供了基础.     

哺乳动物受精过程中配子膜相互作用的分子学基础

哺乳动物受精过程中精子与卯细胞作用发生在3个不同水平:①卵丘颗粒细胞和透明质酸细胞外基质(放射冠);②卵透明带(zona pellucida,ZP);③卵子质膜.由精子与卵ZP结合诱发的顶体的胞吐作用,即顶体反应是精-卯融合的先决条件.它不仅使精子能够进入发生膜相互作用的卯周隙,还暴露和修饰精子表面首先与卵细胞膜发生作用的顶体内膜区域.配子膜的作用涉及一系列复杂的分子问相互作用,首先是精子附着到卯细胞膜表面,进而细胞问发生紧密的结合,最后导致细胞膜融合[1].本文主要对配子膜相互作用过程进行了讨论.     

低温冷冻对人精子受精能力的影响

目的评价低温冷冻对人精子受精能力的影响.方法用人精子与去透明带金黄地鼠卵异种体外授精技术(穿卵实验),比较冷冻前后及不同冷冻方法间精子的穿卵率,评估低温冷冻对人精子受精能力的影响.结果精子穿卵率在冷冻前为(36.41±8.75)%,经速冻法冷冻后为(24.63±7.75)%,经缓冻法冷冻后为(31.20±7.23)%,任意两者间比较结果均有显著差异(P＜0.01).结论低温冷冻使人精子的受精能力显著下降;降温速度越快,受精能力下降越显著.在冷冻前后进行精子穿卵实验,具有重要的临床意义.     

卵胞浆内单精子注射后人精子激活鼠卵母细胞能力的研究

目的 :研究各种质量精子的鼠卵母细胞激活能力。方法 :选用 2 0～ 2 5 g昆明种雌性白鼠 ,超排卵取卵细胞 ,用 Percoll密度梯度离心法处理正常精液、少精、弱精、畸精以及冷冻后的正常精液 ,选择优质的精子进行显微注射 ,计算卵母细胞激活率、卵细胞形态正常率。结果 :各种质量精液中优选的精子激活鼠卵母细胞能力差异无显著性 ( P>0 .0 5 )。结论 :人精子激活鼠卵母细胞能力与最初精液状态没有直接的相关性 ,它不受精子数量、活力、运动性及形态的影响     

磷酸二酯酶抑制剂己酮可可碱对人精子受精力的影响

为进一步证明己酮可可碱(pentoxifylline,PF)对精子受精力的影响,对29例临床送检标本进行精液常规分析及体外受精实验.结果:6例精液常规及受精率均低于正常;14例精液常规正常, 但受精率低;9例精液常规及受精率均正常.所有标本均提取上游精子, 其中部分经体外获能后用作对照,部分用1mg/ml PF,37℃, 孵育0.5小时后再行体外获能.获能精子与去透明带金黄地鼠卵行异种体外受精,然后观察受精率,受精指数,及每个卵表面附着的精子平均数,结果提示PF对精液常规正常但受精力低下的精液标本有明显增强精子受精力的作用,这类患者精子经PF体外处理可能提高人工助孕技术的成功率.     

蛋白水解酶抑制剂对人精子穿透去透明带蛙卵的影响

目的研究蛋白水解酶抑制剂对人精子穿透去透明带蛙卵的影响。方法用人精子穿透经不同浓度的蛋白水解酶抑制剂处理过的去透明带蛙卵,观察对穿卵率的影响。结果(1)在人精子获能期,1.0×10-3mol.L-1天花粉抑制剂可使人精子的穿卵率明显下降(P<0.01),而同样浓度的慈姑抑制剂,作用不明显。(2)去透明带蛙卵用抑制剂预处理0.5 h,被获能精子的穿卵率和未用抑制剂处理的卵子相似。(3)在获能后的人精子和去透明带蛙卵孵育期,两种抑制剂的浓度为0.5×10-3mol.L-1或1.0×10-3mol.L-1时精子的穿卵率明显下降。(4)在人精子获能期及人精子/去透明带蛙卵孵育期,两种抑制剂的浓度为1.0×10-3mol.L-1时,均使精子的穿卵率下降(P<0.01),而抑制剂浓度为1.0×10-4mol.L-1时,作用不明显。结论蛋白水解酶抑制剂对人精子穿透去透明带蛙卵的穿透能力有显著影响,但不影响精子的活力,提示精子穿透卵子的酶体系受蛋白酶抑制剂的影响。     

卵胞浆内单精子显微注射完全受精失败的原因和处理对策

卵胞浆内单精子注射(ICSI)中发生完全受精失败(TFF)的发生率是1％～4％.发生ICSI-TFF的原因可能是卵母细胞激活失败、卵子质量差、精子异常、ICSI的实验室技术和环境等,临床对策有卵母细胞人工激活、形态学选择性单精子卵胞浆内显微注射、优化促排卵方案、供精或供卵等.本文对ICSI-TFF发生可能的原因及临床对...     

贵州省201例正常男子精液质量综合评价

目的:了解我省男性精液质量并对其进行综合评价,探讨影响精液质量的环境行为因素。方法:对贵阳市和遵义市201例正常男性志愿者进行流行病学调查和两次精液检查。应用SAS软件对资料统计分析和单因素成组比较。结果:精液量为(2.49±1.24)m l,精子前向运动百分率为(43.82±3.89)%;精子密度为(52.87±33.36)×106/m l,精子存活率为(78.40±8.13)%;精子正常形态率为(37.70±8.1)%。精液质量各项常规指标都符合WHO标准的对象仅占12.4%。经常清洗外生殖器有助于提高精子密度,清洗外生殖器时清洗包皮者其精子密度和精子总数与清洗时不翻包皮者比较有显著性差异(P<0.05)。长时间坐姿工作使精子前向运动百分率、密度、总精子数都有所下降,对精子存活率有极显著不良影响(P<0.01)。结论:研究结果初步揭示我省正常男性精液质量各项指标与WHO标准相比较偏低。清洁卫生习惯、穿着裤子方式和坐姿工作对男性的精液质量可能有很大影响。养成良好的个人卫生清洁习惯、避免和减少可致阴囊温度升高的生活及工作方式是提高精液质量、促进男性生殖健康的重要途径。     

纳米细菌对人精子质量的影响

目的　探讨纳米细菌对人精子浓度和运动能力的影响。方法　选择 2021年10~12月新乡医学院第三附属医院泌尿外科收治的12例Ⅲ型前列腺炎患者为研究对象,收集患者前列腺液标本,分离培养和鉴定前列腺液标本中纳米细菌,依据培养结果将患者分为纳米细菌阴性组和纳米细菌阳性组。应用计算机辅助精子分析系统（CASA）分析纳米细菌阴性组和纳米细菌阳性组患者的精液量、精子总活力、精子前向运动力。另取10例健康男性精液,优化处理后分为对照组和实验组;实验组精子与纳米细菌悬液共孵育,对照组精子与输卵管液共孵育;分别于孵育0、2、4、8 h时,应用CASA检测2组精子浓度、总活力、前向运动力、直线速度（VSL）、曲线速度（VCL）、平均路径速度（VAP）、精子头部侧摆幅度（ALH）和精子形态及凝集情况。结果　培养的纳米细菌为沉积在管底的白色沉淀,且培养基颜色变黄;阴性标本颜色与培养基对照组相比,颜色略有变黄。茜素红钙染色结果显示,不同视野下的纳米细菌常聚集成簇,单个细菌由于形体微小不可见,成簇的纳米细菌可被染成红色。12例Ⅲ型前列腺炎患者的前列腺液标本中,5例纳米细菌培养阳性,7例纳米细菌培养阴性。纳米细菌阴性组与纳米细菌阳性组患者的年龄、精液量、总活力比较差异无统计学意义（P>0.05）,纳米细菌阳性组患者的精子浓度、前向运动力显著低于纳米细菌阴性组（P<0.001）。实验组和对照组精子形态各时间点无明显变化,均未出现明显凝集。实验组和对照组精子浓度随孵育时间的延长呈下降趋势（F=135.420、132.925,P<0.001）;孵育0 h时,对照组和实验组精子浓度比较差异无统计学意义（P>0.05）;孵育2、4、8 h时,实验组精子浓度显著低于对照组（P<0.001）。对照组精子总活力、前向运动力、VCL、VSL、VAP及ALH随着孵育时间的延长呈下降趋势（F=304.494、48.012、95.780、53.538、383.257、287.428,P<0.001）,且实验组精子总活力、前向运动力、VCL、VSL、VAP及ALH随着孵育时间的延长亦呈下降趋势（F=1 758.057、924.174、297.114、244.244、1 173.730、290.031,P<0.001）。孵育0 h时,对照组和实验组精子总活力、前向运动力、VCL、VSL、VAP及ALH比较差异无统计学意义（P>0.05）;孵育2、4、8 h时,实验组精子总活力、前向运动力、VCL、VSL、VAP及ALH显著低于对照组（P<0.05）。结论　纳米细菌可显著降低精子浓度和运动参数,进而影响患者的生育能力。     

晶体和胶体溶液对冷冻复温后精子功能的影响

①目的观察不同溶液对冷冻复温后精子功能的影响。②方法用４种胶体和４种晶体溶液分别孵育冷冻复温后的精子，检测孵育后精子对人宫颈粘液穿透力和不同时间的精子活动率。③结果胶体溶液孵育后１ｈ精子活动率好于晶体溶液（Ｆ＝８．７６３４，ｑ＝２．９５～５．１０，Ｐ＜０．０５），而晶体溶液中精子穿透力好于胶体溶液（Ｆ＝１１．６９０２，ｑ＝３．２３～４．６２，Ｐ＜０．０１），孵育１２ｈ后果糖和葡萄糖溶液组的精子活动率均明显高于对照组（ｑ＝７．１０，３．３４，Ｐ＜０．０１）。④结论选择使用胶、晶体溶液和果糖复合液对复温后精子进行适宜的处理，可以保持或改善精子功能状态，提高人工授精成功率。     

精子形态与精子活力和活率的关系

目的：探讨精子形态与精子活力和活率的关系。 方法：应用精子质量自动检测系统（CASA）进行精子活力分析,伊红染色进行活率分析,采用精子形态检测系统下人工修正方法分析精子形态。 结果：活力异常组形态正常精子百分率低于活力正常组,两组比较差异有显著性（P<0.01）;活率异常组形态正常精子百分率亦明显低于活率正常组(P<0.001)。 结论：精子形态与精子活力和活率有密切关系,精子形态可反映精液质量,可作为评价男性生育力指标。 1671-587Ⅹ(2006)04-0681-02 吉林省科技厅资助课题（20030544-1）     

干扰素-γ对精子顶体酶活力的影响及其作用机制初探

目的 探讨干扰素-γ(IFN-γ)对正常人精子顶体酶(aerosin)活力的影响及其作用机制.方法 采用BAEE/ADH联合法测定精子顶体酶活力,用高效液相色谱(HPLC)测定一氧化氮(NO),用生化法测定超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮合酶(NOS).用定磷法测定Na -K -ATPase和Ca2 -ATPase活性.结果 IFN-γ可降低精子顶体酶活力(P＜0.05),明显降低精子中Na -K -ATPase、Ca2 -ATPase和SOD活性(P＜0.001);但显著提高精子NOS活性和NO浓度(P＜0.001).结论 IFN-γ可降低精子顶体酶活力,其机制可能与精子中Na -K -ATPase、Ca2 -AT-Pase、SOD和NOS活性以及NO浓度等因素有一定关系.     

男性不育症患者精子形态结果分析

目的:对男性不育症患者异常精子形态结果进行统计分析,为临床提供诊断和治疗依据.方法:以2014年5月~2015年5月来我院生殖中心就诊的2180例患者为研究对象,采用改良巴氏染色法用西班牙SCA全自动精子质量分析系统进行精液常规分析和精子形态分析.根据精液分析的相关指标将对象按精子数量和精子活力两两分组即:少精子症组、精子正常数量组;弱精子症组、精子正常活力组;对各组结果进行统计学分析.结果:少精子症组和弱精症组中畸形精子的阳性率明显高于精子正常数量组和精子正常活力组.精子形态的畸形结构分类中,以头部异常为主,其次是颈部和尾部.颈部异常率,尾部异常率两组比较无统计学差异.少精子症组、弱精子症组与精子正常数量组、精子正常活力组的精子正常形态的百分率与其它组比较,有统计学意义.在精子头部尺寸分类中,以小头精子异常为主.头部形态分类中,以无定形头异常为主,其次是圆头异常.顶体区分类中,以空泡异常为主.少精子症组、弱精子症组与其它组比较;头部尺寸、顶体区有统计学意义,头部形态无统计学意义.结论:在不育症患者异常精子形态畸形结构分类中,精子形态异常以头部为主.精子头部尺寸异常分类中,以小头精子异常为主.头部形态异常分类中,以无定形头异常为主,其次是圆头异常.顶体区异常分类中,以空泡异常为主.少精子症、弱精子症患者子精子形态畸形率会明显升高.     

附睾及睾丸精子结合ICSI治疗无精子症的研究

目的回顾性分析比较附睾精子和睾丸精子结合卵胞浆内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection,IC-SI）治疗无精子症的助孕结局。方法 167例无精子症患者经皮附睾精子抽吸术（PESA）取得附睾精子,69例无精子症患者经皮睾丸精子抽吸术（TESA）获得睾丸精子。女方进行常规超排卵。采用卵胞浆内单精子注射技术获得妊娠,比较两者的受精率、种植率和临床妊娠率。结果全部患者共41个治疗周期,附睾精子组和睾丸精子组的受精率分别为75.5%和73.9%,两组间比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。两组的种植率为40.7%、24.6%,临床妊娠率为53.9%、39.1%,两组间比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 PESA和TESA结合ICSI是男性无精子症患者的有效治疗方法 ,附睾是精子获能、成熟的重要部位,附睾精子优于睾丸精子,应首先选取附睾精子。     

睾丸取精卵浆内显微注射受精治疗无精症的疗效分析

目的：评价采用睾丸取精卵浆内显微注射法治疗无精症的疗效。方法：对2000年7月--2002年7月来我所就诊的35例患者，女方取卵当日，男方取精。手术时，患者取平卧位，术野常规消毒，用1％利多卡因局麻，新鲜人体睾丸组织通过切口活检取材，立即放入装有培养液的培养皿中。取部分睾丸组织在体视显微镜下，用无菌针头划开曲精小管，在显微镜下检查是否存在精子。如果找到精子，将存有睾丸组织的培养皿放入培养箱，直到注射前取出。B超引导下经阴道取卵，常规去卵丘结构处理。在倒置显微镜下进行胞浆内单精子注射(ICSI)。注射后15--18小时检查有无原核，48小时观察卵裂，经阴道宫腔内移植质优胚胎1--3个。移植后11天进行妊娠试验检查，7周进行B超检查，了解有无胎心搏动。结果：35例无精症患者全部在睾丸曲精小管中找到精子。女方取卵466个(5--32个)，其中MⅡ期卵367个，显微注射337个，有270个受精卵见到两个原核，受精率为80．11％，35对全部获得受精卵。临床妊娠率为40％。结论：睾丸取精卵浆内显微注射技术是目前治疗无精症最有效的方法。     

3种取精方式获得的精子进行ICSI治疗效果的比较

目的探讨3种取精方式获得的精子进行卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗的临床效果。方法比较精液精子、附睾精子、睾丸精子进行ICSI治疗后的受精率、优质胚胎率、种植率及妊娠率等。结果3种取精方式获得的精子进行ICSI治疗的受精率、优质胚胎率、种植率及妊娠率差异无统计学意义(P>0.05)。结论3种取精方式获得的精子进行ICSI治疗的临床效果相似,精子的成熟度可能不会影响ICSI的临床效果。