反相高效液相色谱法测定盐酸帕洛诺司琼注射液的含量

 目的建立盐酸帕洛诺司琼注射液含量测定的高效液相色谱方法。方法采用Alltima C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.02 mol·L^-1磷酸二氢钠溶液(含0.25%的三乙胺与0.01 mol·L^-1己烷磺酸钠,用磷酸调节pH值至3.0)-乙腈(40∶60)为流动相;检测波长为254 nm,流速为1.5 mL·min^-1。结果线性范围为10.3～103.1 mg·L^-1,r=0.999 9;平均回收率为100.4%,RSD为0.95%(n=9)。结论本方法简便、可靠,可用于盐酸帕洛诺司琼注射液的含量测定。     

高效毛细管电泳法测定注射用水溶性维生素的含量

 目的采用高效毛细管电泳法(HPCE)的胶束毛细管色谱(MECC)模式分离和测定注射用水溶性维生素的含量。方法未涂层熔融石英毛细管67 cm(有效长度55 cm)×50μm;运行缓冲液为50 mmol·L^-1 SDS-50 mmol·L^-1的硼酸钠溶液(pH8.33);6.89 KPa×10 s压力进样;运行电压15.0 kV;检测波长214 nm;毛细管柱温25℃。结果注射用水溶性维生素中的九种成分分离完全,烟酰氨、维生素B6、D-生物素、核黄素磷酸钠、维生素B12、维生素C、泛酸钠、叶酸、维生素B1的线性范围分别为4.16～520.0 mg·L^-1(r=0.999 1),0.40～50.0 mg·L^-1(r=0.999 7),0.42-52.0 mg·L^-1(r=0.999 3),0.40～50.0 mg·L^-1(r=0.998 2),0.39-49.0 mg·L^-1(r=0.999 6),8.00～1 000.0 mg·L^-1(r=0.992 0),0.83-104.0 mg·L^-1(r=0.999 5),0.42～53.0 mg·L^-1(r=0.999 0),0.41～51.0 mg·L^-1(r=0.999 8),n=5;精密度(RSD)分别为1.75%,1.04%,1.6%,2.84%,1.85%,3.26%,1.58%,2.5%,1.92%(n=5);最低检测质量浓度分别为0.60,0.16,0.24,0.23,0.21,0.45,0.41,0.20,0.18 mg·L^-1。结论采用HPCE测定注射用水溶性维生素的方法简便、结果可靠。     

HPLC-EC检测法测定血浆中的罗红霉素

 目的:建立测定血浆中罗红霉素浓度的HPLC-EC检测法,并与微生物法的测定结果相比较,评价两种方法的相关性?方法:以克拉霉素为内标,C₁₈反相色谱柱,流动相为甲醇-乙腈-0.06mol·L^-1磷酸二氢钠-0.003mol·L^-1EDTA(0.11∶0.39∶0.49∶0.01,pH7.0),安培型电化学检测器的工作电压+1.2V;0.5ml血浆样品经液 液萃取纯化后溶于流动相中,进样20μl?结果:本法的线性范围0.1～10mg·L^-1,日内RSD<3.2%,日间RSD<5.5%,方法回收率99.5%～103.3%,最低检测限0.1mg·L^-1?比较HPLC和微生物法的测定结果,相关性显著(P<0.01)?结论:方法灵敏度高,重现性好,操作简便,适用于罗红霉素的药代动力学研究?     

高效液相色谱法测定人肝微粒体中帕洛诺司琼的浓度

 目的研究帕洛诺司琼的体外代谢,建立人肝微粒体中帕洛诺司琼的反相高效液相色谱测定法。方法帕洛诺司琼与人肝微粒体共孵育之后用乙醚提取,采用地非三唑为内标,以Diamonsil C₁₈柱(4.6mm×200mm,5μm)为分析柱,0.01μmol·L^-1KH₂PO₄(pH3.0)-甲醇(30∶70)为流动相,流速1.0mL·min^-1,紫外检测波长为241nm。结果帕洛诺司琼在1～100μmol·L^-1内线性关系良好(r=0.9999,n=5),检测限为0.05μmol·L^-1(S/N≥3),定量限为(0.21±0.04)μmol·L^-1(n=5)。方法提取回收率和方法回收率平均分别为89.7%和100.0%,日内,日间RSD均<10%(n=5)。结论此法简便,准确,可用于研究帕洛诺司琼在人肝微粒体中的代谢。     

高效液相色谱法测定血浆中泮托拉唑浓度

 目的:建立用高效液相色谱法测定血浆中泮托拉唑浓度的方法,为进行泮托拉唑的体内药物代谢、生物利用度研究提供基础?方法:血浆用0.01mol·L^-1磷酸氢二钠做pH调节剂,二氯甲烷做提取溶剂,硝西泮作内标?采用Platinum C₁₈(5u,250mm×4.6mm)柱,流动相:甲醇-水-醋酸盐缓冲液(40∶60∶5),流速1.0ml·min^-1,检测波长286nm?结果:该法回收率平均在98.36%～104.27%,重现性高,RSD在4.693%～9.12%范围内(n=5),线性范围:20～4000μg·L^-1,最低检测浓度15μg·L^-1?结论:HPLC测定血浆中泮托拉唑的方法简便、准确、灵敏、专一,能满足血药浓度测定及药代动力学研究的需要?     

高效液相色谱法测定人乳汁中枸橼酸芬太尼浓度

 目的建立剖宫产产妇乳汁中枸橼酸芬太尼浓度测定的HPLC方法,并考察剖宫产产妇应用枸橼酸芬太尼镇痛泵镇痛后,芬太尼在乳汁中的分布情况,探讨剖宫产术后新生儿的合理哺乳时间。方法1mL乳汁中加入0.5mol·L^-1NaOH200μL碱化,涡旋30s,再加入环己烷5mL,涡旋2min,于2000r·min^-1离心20min,静置10min,取上述有机相4mL于另一干净试管中,在N₂流下吹干,残渣用流动相350μL溶解,进样量100μL。采用AgillentZorbaxSB-C₁₈柱(4.6mm×250mm,5μm),以0.015mol·L^-1磷酸二氢钠-乙腈(60∶40)为流动相,流速为0.7mL·min^-1,于200nm波长下检测。结果枸橼酸芬太尼在40～2000μg·L^-1内线性关系良好(r=0.9997),方法回收率为85.3%～101.6%,乳汁低、中、高3种浓度的萃取回收率(n=5)分别为62.7%,66.3%,65.6%;RSD(n=5)分别为8.11%,6.72%,4.83%;方法回收率(n=5)分别为86.1%,96.4%,103.7%,日内和日间精密度RSD小于12%。结论本法操作简单,灵敏,准确,重现性好,能满足临床对芬太尼乳药浓度的测定,可用于芬太尼在乳汁中的浓度分布研究。     

高效液相色谱法测定硫鸟嘌呤的含量及有关物质

 目的建立高效液相色谱法测定硫鸟嘌呤原料及片剂的含量及有关物质。方法采用Altima C₁₈色谱柱,以0.05mol·L^-1磷酸二氢钠溶液(pH3.0)为流动相,柱温为35℃;检测波长248nm;流速1.0mL·min^-1。结果硫鸟嘌呤在8～120mg·L^-1内线性关系良好(r=0.9999),最低检测限为0.12mg·L^-1,回收率为99.27%。结论本方法准确、灵敏,精密度高、专属性强,可用于硫鸟嘌呤含量及有关物质的测定。     

罗红霉素胶囊在人体内的药动学及生物等效性研究

 目的建立人血浆中罗红霉素浓度的HPLC-MS分析方法,用以测定健康受试者口服罗红霉素制剂后的血药浓度,估算受试制剂和参比制剂的药动学参数,评价两种制剂的生物等效性和相对生物利用度。方法血浆中加入内标克拉霉素后,乙醚提取,HPLC-MS分离、分析。色谱系统:汉邦ODS柱(4.6 mm×150 mm),甲醇-醋酸铵溶液(0.01 mol·L^-1)(75∶25)为流动相,流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃。质谱检测方式:SIM。结果罗红霉素的线性范围为0.1～15 mg·L^-1(r=0.999 9),最低检测浓度达0.01 mg·L^{-1,提取回收率≥80%。受试制剂及参比制剂的生物半衰期分别为(11.40±2.07)和(11.16±2.05)h,达峰时间分别为(2.7±0.8)和(2.9±0.9)h,峰浓度分别为(6.45±2.58)和(5.94±1.61)mg·L-1。受试制剂的相对生物利用度为(102.6±17.4)%。结论本法简便,准确,灵敏度高。统计学结果表明,两种制剂具有生物等效性。}     

HPLC测定洛伐他汀烟酸缓释片中两组分含量

 目的建立洛伐他汀烟酸缓释片中2个组分(洛伐他汀、烟酸)含量的高效液相色谱法。方法采用Hypersil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.005 mol·L^-1己烷磺酸钠溶液-乙腈(35:65)为流动相,检测波长为239 nm。结果烟酸和洛伐他汀的浓度分别在49.8～249和2～10 mg·L^-1有良好的线性关系(r=0.999 6),样品的回收率分别为99.93%(n=6,RSD=0.73%)和101.3%(n=6,RSD=1.61%)。结论本法简便、快速,重现性好,灵敏度高,适用于洛伐他汀烟酸缓释片的质量控制。     

高效液相色谱法测定L-肌肽原料药的含量及其有关物质

 目的建立HPLC测定L-肌肽原料药的含量并进行有关物质检查。方法采用Kromasil NH₂色谱柱(4.6mm×200mm,5μm),流动相为乙腈-40mmol·L^-1磷酸氢二钾溶液(44∶56,磷酸调pH6.3),流速1.0mL·min^-1,检测波长为210nm,柱温35℃。结果L-肌肽在9.93～99.3mg·L^-1内线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为100.5%(RSD=1.0%),检测限为1ng(S/N=3)。L-肌肽与有关物质分离良好。结论该方法操作简便、重复性好、专属性强,可用作L-肌肽原料药的含量测定和有关物质检查。     

黄芩素对大鼠离体胸主动脉的舒张作用及其机制

目的:研究黄芩素(BAI)对去甲肾上腺素(NE,1×10-6mol· L-1)和氯化钾(KCl,6×10-2 mol·L-1)预收缩健康成年雄性大鼠胸主动脉环的舒张作用,并探讨其作用机制.方法:应用离体血管环技术观察BAI对大鼠胸主动脉环张力的作用,记录NE预收缩的离体大鼠胸主动脉环张力变化.采用一氧化氮合酶(eNOS)抑制剂L-硝基精氨酸甲酯(L-NAME,1×10-4mol·L-1)、环氧合酶抑制剂吲哚美辛(INDO,1×10-5mol· L-1)和鸟苷酸环化酶抑制剂亚甲蓝(MB,1×10-5mol· L-1)和不同的钾通道阻滞剂预孵后观察BAI对血管环张力改变的影响,并观察对NE诱发的内钙释放和CaCl2引起的外钙内流的影响.结果:BAI对NE或KCl预收缩的内皮完整和去内皮大鼠离体胸主动脉环均产生明显的舒张作用,与溶剂组相比差异有统计学意义.预先用L-NAME,MB,KV通道阻断剂四氨基吡啶(4-AP,1×10-4mol· L-1),KC.通道阻断剂四乙胺(TEA,1×10-3mol· L-1),Kir通道阻断剂氯化钡(BaCl2,1×10-4mol·L-1)孵育后,BAI对预收缩的血管张力的改变与无阻断药时比较,差异均无统计学意义;预先用KATP通道阻断剂格列苯脲(Gli,1×10-5mol·L-1)和INDO孵育后,BAI的舒张血管作用减弱,与无阻断药比较差异有统计学意义(P＜0.05);且BAI对NE外钙内流引起的收缩有明显的抑制作用.结论:黄芩素可明显降低由NE诱发的血管环张力的升高,且其作用具有浓度依赖性,此作用有内皮依赖性和非内皮依赖性的特点.内皮依赖性收缩可能与前列环素(PGI2)途径有关,非内皮依赖机制与KATP通道和钙离子通道有关.     

人血浆中盐酸二甲双胍HPLC测定法

 目的建立人血浆中盐酸二甲双胍高效液相色谱测定方法。方法取200μL血浆,加入雷尼替丁(ranitidine)为内标,以400μL乙腈沉淀蛋白,上清液与二氯甲烷混合离心后,取上层水相进样分析。流动相:乙腈-0.05 mol·L^-1NaH₂PO₄-0.05 mol·L^-1Na₂HPO₄(75∶25∶5);流速1.0 mL·min^-1,紫外检测波长236 nm,室温操作。结果二甲双胍与内标分离良好,保留时间分别为12.5和11.6 min。标准曲线范围0.025～4.0 mg·L^-1,线性良好(r=0.999 5,n=5),批间RSD为2.46%～4.96%(n=5),批内RSD为1.85%～3.97%(n=10),最低检测限为0.01 mg·L^-1`。二甲双胍在检测过程中保持稳定。结论本方法取样量小,操作快速简便,专一性强,灵敏度高,可满足药动学研究需要。     

高效液相色谱法同时测定人血浆中左卡尼汀、乙酰左卡尼汀和丙酰左卡尼汀的浓度

 目的建立同时测定人血浆中左卡尼汀(LC)、乙酰左卡尼汀(ALC)和丙酰左卡尼汀(PLC)的浓度的方法。方法血浆样品经蛋白沉淀法处理,以氨基蒽衍生化后进样测定。色谱条柱采用Hypersil C₁₈柱(4.6mm×200mm,5μm),流动相为乙腈-0.1mol·L^-1乙酸铵(28∶72),流速为1.2mL·min^{-1,检测波长:Ex248nm,Em418nm。结果LC,ALC和PLC的线性范围分别是5～160,1～32,0.25～8μmol·L-1。平均方法回收率分别为99.48%,99.94%,98.20%。日内、日间RSD均小于5.83%。结论本实验方法灵敏、稳定、结果准确,操作方便,适用于左卡尼汀、乙酰左卡尼汀和丙酰左卡尼汀血药浓度研究性监测。}     

一种提高高半胱氨酸液相色谱检测灵敏度的方法

 目的:建立一种用高效液相色谱测定微量高半胱氨酸的新方法?方法:反应条件研究采用分子荧光光谱法,高半胱氨酸测定采用反相高效液相色谱法?结果:使用邻苯二甲醛作荧光衍生试剂,在温度为50℃,pH8.4,反应4min时,衍生物相对荧光强度最大?在5×10^-9～2.7×10^-7mol·L^-1浓度范围内,荧光强度与浓度之间呈线性关系,检测限为4.2×10^-10mol·L^-1?结论:经过氧化氢处理后,HCY与OPA的衍生物荧光强度可提高5倍?     

长穗桑中的α-葡萄糖苷酶抑制剂成分研究

 目的 研究长穗桑中具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的化学成分。方法 采用各种离子交换树脂对长穗桑水提取物进行分离纯化,通过NMR、MS等波谱分析手段鉴定化合物结构。结果 从长穗桑水提取物中分离到11个化合物,其中7个多羟基生物碱类化合物,2个酰胺类化合物,1个氨基酸以及甜菜碱。分别鉴定为1-deoxynojirimycin (1),fagomine (2),3-epi-fagomine (3),1,4-dideoxy-1,4-imino-D-arabinitol (4),2-O-α-D-galactopyranosyl-1-deoxynojirimycin (5),4-O-β-D-glucopyranosyl-fagomine (6),1,4-dideoxy-1,4-imino-(2-O-β-D-glucopyranosyl)-D-arabinitol (7),(2S)-citrullinamide (8),grateloupinamide (9),天冬氨酸(10),甜菜碱(11)。化合物1~10分别进行了α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选。结论 化合物1~11均为首次从该植物中分离得到。4个多羟基生物碱(1,5~7)以及1个酰胺类化合物(9)有较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性,其中化合物1的IC₅₀为0.07 μmol·L^-1;化合物5的IC₅₀为0.39 μmol·L^-1,与阳性对照阿卡波糖(acarbose,IC₅₀=0.52 μmol·L^-1)相当;化合物6,7,9的IC₅₀值在1~5 μmol·L^-1。     

毛细管电泳法同时检测刺五加叶中的芦丁和金丝桃苷含量

 目的建立简单、快速且能同时分离测定刺五加叶中芦丁、金丝桃苷含量的毛细管电泳法。方法采用毛细管电泳法,缓冲体系为0.2mol·L^-1NaH₂PO₄,0.1mol·L^-1Borax及双蒸水(10:7:3,pH8.8),熔融石英毛细管柱(25μm×45cm),分离电压为20kV,检测波长为254nm,进样时间为30s,进样高度10cm。结果芦丁、金丝桃苷在125～750,200～1200mg·L-1与峰面积线性关系良好,线性方程分别为:Y=144145ρ+423.8(r=0.9999)及Y=216836ρ-191.57(r=0.9999),样品平均回收率为99.38%及100.39%。结论该方法简单、快速、准确、重现性好,不同生长时期、不同产地的刺五加叶中两成分均存在一定的差异。     

阿夫唑嗪的示波极谱法测定及其电化学行为

 目的 研究阿夫唑嗪(alfuzosin,简称AFZ)的电化学行为和电极反应机制,拟定测定AFZ的单扫示波极谱法。方法 采用单扫示波极谱3法、循环伏安法进行研究。结果 在0.01 mol·L^-1 KH₂PO₄K₂HPO₄(pH7.05)底液中,AFZ在汞电极上有一灵敏的导数还原峰,峰电位Ep=-1.60V(vs.SCE),峰高与AFZ的浓度在1.0×10^-7～9.0×10^-6范围内呈线性关系(r＝0.997 9),检出限为3.0×10^-8 mol·L^-1。该法应用于片剂中AFZ含量的测定,得到满意结果。结论 实验表明,该体系属两电子还原的不可逆吸附过程。