杜仲叶黄酮苷元水解及富集纯化工艺研究

以杜仲叶提取物为原料,采用酸水解的方法制备杜仲叶黄酮苷元,通过单因素及正交试验优化杜仲叶黄酮苷元的水解条件;并研究了聚酰胺两步法富集黄酮苷元的工艺条件。结果表明:当料液比为2∶1(mg/m L)时,杜仲叶黄酮苷元水解的最佳工艺参数为:水解温度80℃,水解时间3 h,盐酸浓度6 mol/L,黄酮苷元的含量可达到2.512%。水解样品经过一次聚酰胺静态吸附,黄酮苷元的纯度可达12.87%,再经聚酰胺二次富集,杜仲黄酮苷元纯度可达63.19%。     

固定化黑曲霉β-葡萄糖苷酶制备染料木素活性苷元的研究

比较了以海藻酸钠为载体,用胶囊法、包埋-交联法、交联-包埋法三种不同方法固定化黑曲霉β-葡萄糖苷酶的效果,并研究了最佳固定化方法的固定化条件和固定化酶的部分性质。结果表明,交联-包埋法即β-葡萄糖苷酶与0.20%戊二醛交联后再用2.0%海藻酸钠包埋的固定化方法中酶结合效率和酶活力回收率最高。海藻酸钠浓度和戊二醛浓度对酶结合效率影响较大,戊二醛浓度和包埋颗粒直径大小对酶活力回收率影响显著。与游离酶相比,制备的固定化酶最适温度、最适pH值和K_m值分别由50℃、4.5和2.57 μg/mL下降到40℃、4.0和2.02 μg/mL。固定化酶具有更强的耐酸性和稳定性。该固定化酶用于大豆异黄酮活性苷元染料木素的合成,重复使用6次后,固定化酶的活力仍保持84.94%,染料木苷转化率为56.04%。     

固定化黑曲霉β-葡萄糖苷酶制备染料木素活性苷元的研究

比较了以海藻酸钠为载体,用胶囊法、包埋-交联法、交联-包埋法三种不同方法固定化黑曲霉β-葡萄糖苷酶的效果,并研究了最佳固定化方法的固定化条件和固定化酶的部分性质。结果表明,交联-包埋法即β-葡萄糖苷酶与0.20%戊二醛交联后再用2.0%海藻酸钠包埋的固定化方法中酶结合效率和酶活力回收率最高。海藻酸钠浓度和戊二醛浓度对酶结合效率影响较大,戊二醛浓度和包埋颗粒直径大小对酶活力回收率影响显著。与游离酶相比,制备的固定化酶最适温度、最适pH值和Km值分别由50℃、4.5和2.57μg/mL下降到40℃、4.0和2.02μg/mL。固定化酶具有更强的耐酸性和稳定性。该固定化酶用于大豆异黄酮活性苷元染料木素的合成,重复使用6次后,固定化酶的活力仍保持84.94%,染料木苷转化率为56.04%。     

蕨菜黄酮苷元的组成及含量测定研究

以80%乙醇浸提经乙醚脱脂预处理的干蕨菜粉,减压回收乙醇得浓缩液.浓缩液以8%硫酸沸水浴水解3 h后,加入20%NaOH中和至弱酸性,过滤,滤渣以三氯甲烷索氏提取获总蕨菜黄酮苷元.TLC法检测总黄酮苷元的组成,HPLC法测定其主要苷元的含量.结果表明,通过酸水解获得总蕨菜黄酮苷元,其主要成分为山奈酚,含量约占蕨菜干重的1.9%.     

响应面法优化酶法水解大豆异黄酮糖苷

采用 Design-Expert 软件中 Central Composite Design（CCD）响应面分析方法对β-葡萄糖苷酶水解大豆异黄酮糖苷的4个主要因素（水解温度、水解时间、pH 以及加酶量）进行优化。方差分析发现,影响大豆异黄酮糖苷水解最主要的因素有温度、水解时间和 pH。对各因素进行回归拟合,得到最佳实验条件分别为：温度46．2℃,反应时间94 min,pH 5．1,酶量61单位,此时大豆异黄酮苷元含量达到0．096 g·L－1,比优化前提高了22％。     

莲子心碳苷黄酮与黄酮异构体的色谱质谱研究

采用电喷雾质谱法(ESI-MS),对从莲子心分离得到的碳苷类黄酮化合物进行质谱碎裂规律研究。结果表明,负离子模式下,六碳糖碳苷黄酮主要发生糖环裂解,通过丢失特征性的碎片(90 u、120 u、150 u)与氧苷黄酮区分;单糖取代的六碳醛糖氧苷黄酮直接丢失单糖部分(162 u),六碳醛糖种类无法通过质谱区分,但由于它们在液相上的保留时间不同,可通过液相色谱-质谱(LC-MS)联用方法分离鉴定;二糖取代的氧苷黄酮主要碎片离子通过丢失糖部分(146 u、162 u、308 u)所得,二糖的种类及连接方式可通过质谱图上的碎片离子峰及其相对丰度辨别。莲子心中多种碳苷黄酮和氧苷黄酮质谱的不同裂解规律,不仅有助于莲子心黄酮化合物的快速鉴定,而且可以通过与液相色谱联用实现莲子心中同分异构体的快速区分。     

元宝槭树叶中的黄酮苷

从槭树科植物元宝槭(Acer truncatum Bunge)树叶中分离得到6个黄酮苷化合物。通过波谱分析鉴定其结构分别为：kaempferol 3 O α L rhamnopyranoside(1);quercetin 3 O β D galactopyranoside(2);quercetin 3 O α L rhamnopyranoside(3);quercetin 3 O α L arabinopyranoside(4);isorhamnetin 3 O α L arabinopyranoside(5);myricetin 3 O α L rhamnopyranoside(6)。     

元宝槭树叶中的黄酮苷

从槭树科植物元宝槭(AcertruncatumBunge)树叶中分离得到6个黄酮苷化合物。通过波谱分析鉴定其结构分别为:kaempferol-3-O-α-L-rhamnopyranoside(1);quercetin-3-O-β-D-galactopyranoside(2);quercetin-3-O-α-L-rhamnopyranoside(3);quercetin-3-O-α-L-arabinopyranoside(4);isorhamnetin-3-O-α-L-arabinopyranoside(5);myricetin-3-O-α-L-rhamnopyranoside(6)。     

贵州传统发酵豆制品中水解银杏黄酮苷的微生物β-葡萄糖苷酶筛选

[目的]微生物β-葡萄糖苷酶法水解银杏黄酮苷具有重要意义,不过目前这方面的研究极少。因此,本文目的是筛选到水解银杏黄酮苷的酶活高的微生物β-葡萄糖苷酶,并分析其底物选择性机制。[方法]以银杏叶提取物作为唯一碳源富集培养,从贵州传统发酵豆豉中筛选产对银杏黄酮苷水解酶活高的β-葡萄糖苷酶的菌株,并对该菌株进行鉴定。然后比较此β-葡萄糖苷酶对不同底物的选择性,同时测定此酶水解银杏黄酮苷反应的米氏常数Km及最大反应速率Vmax。最后,对不同的底物进行分子对接,分析其底物特异性机制。[结果]结果表明,筛选到的菌株GUXN01所产β-葡萄糖苷酶水解银杏黄酮苷的酶活最高,被鉴定为枯草芽孢杆菌。此β-葡糖糖苷酶对β构型的糖类以及苷类等具有广泛的底物特异性和不同的选择性,尤其对银杏黄酮苷具有很好的亲和性。分子对接研究表明枯草芽孢杆菌β-葡萄糖苷酶对银杏黄酮苷和其他糖苷类具有不同亲和性和选择性的原因主要是酶结构和底物分子结构的相互作用力的差异导致的。[结论]这些发现为GUXN01所产的β-葡萄糖苷酶应用于水解银杏黄酮苷类生产相应苷元奠定了良好的基础。     

王不留行黄酮苷软膏剂的制备工艺研究北大核心CSCD

为了研究"王不留行黄酮苷软膏剂"的制备工艺及制剂稳定性,本研究采用多因素配比实验筛选软膏剂处方,采用乳化法制备软膏剂,通过HPLC测定制剂含量。优化后的软膏剂处方为:15%硬脂酸甘油酯(质量分数)、20%液状石蜡、2%硬脂酸、6%十八醇、25%纯甘油、30%蒸馏水、2%十二烷基硫酸钠、0.1%羟苯乙酯和0.1%王不留行黄酮苷。实验结果表明该工艺简单可行,王不留行黄酮苷软膏剂质量稳定可控。     

高效液相色谱法同时测定荷叶中6种黄酮类成分

为了探索同时测定荷叶茶及饮片中6种黄酮类成分(芦丁、金丝桃苷、紫云英苷、槲皮素、山奈素和异鼠李素)含量的方法,本研究以8种不同的荷叶样本为材料,采用高效液相色谱分析法对6种黄酮类成分进行了同时测定。样品经过前处理,以0.5%甲酸-水(A)和0.1%甲酸-乙腈(B)作为流动相进行梯度洗脱,流速为1mL/min,柱温为25℃,进样量为20μL,经Agilent TC-C18(2)(150mm×4.6mm,5μm)色谱柱分离,于360nm波长处检测,结果显示,芦丁、金丝桃苷、紫云英苷、槲皮素、山奈酚、异鼠李素6种黄酮类成分分别在1.6~160、1.8~180、2.16~216、1.4~140、2.12~212、1.6~160μg/mL浓度范围内有良好的线性关系(R20.9992),其检测稳定性、重复性、日内精密度、日间精密度以及加样回收率的RSD均小于2%。进一步用该方法对不同来源的8个荷叶样本进行检测,结果显示荷叶样本中6种黄酮类成分含量以槲皮素最高,并且以样本G荷叶茶(购自G公司,批号为130802)的槲皮素含量最高。本研究建立的同时测定6种荷叶黄酮类成分含量的方法快速、准确,可为荷叶有效成分的检测和质量控制提供技术支撑。     

微波辅助提取荷叶总生物碱的工艺研究

本文通过采用单因素试验和正交试验考察不同因素对荷叶总生物碱提取量的影响,从而探讨微波辅助提取荷叶中总生物碱的最佳工艺.结果表明:微波辅助提取荷叶总生物碱的最佳条件为:pH 2.5 HCI、微波765W辐照2.5 min、固液比1:40、浸提3 h,荷叶总生物碱提取量为175.95μg/g,与热回流提取6 h、索氏提取10.5h的结果接近.因此微波辅助提取技术应用于荷叶总生物碱的提取,具有省时、高效、节能等优点.     

Flavonoid glycosides of Lotus corniculatus (leguminosae)

Two-dimensional TLC of stems and leaves of Lotus corniculatus revealed the presence of ca 25 flavonoid glycosides. Among these, 14 were identified; 10 are new for this species. This pattern is qualitatively the same among different populations of this plant but the relative amounts of mono- and diglycosides varies considerably from one population to another.     

元宝枫叶黄酮类化合物分离与鉴定

用聚酰胺和SephadexLH20柱层析方法对元宝枫叶化学成分进行研究。分离纯化得到一种黄酮类化合物,根据理化性质及光谱数据鉴定化学结构为3,5,7,3′,4′五羟基黄酮,即槲皮素。这种化合物是首次从元宝枫叶中获得。     

微波辅助提取荷叶生物碱条件的优化

对荷叶中主要生理活性物质生物碱的提取条件进行了初步研究,以稀盐酸水为溶剂结合微波照射浸渍提取,获得了较优化的提取工艺,即用pH2.5 HCl、微波辅助处理2.5 min、固液比1:40、提取温度90℃、提取时间3 h,可得荷叶生物碱量172.63μg.g-1。     

不同品种荷叶HPLC指纹图谱研究

研究用高效液相色谱法建立荷叶指纹图谱的分析方法。采用依利特Sino Chrom色谱柱(4.6 mm×200mm,5μm),以乙腈-缓冲溶液(H3PO4-NaH2PO4,0.1 mol/L,pH 2.5)为流动相,梯度洗脱,流速1.5 mL/min,柱温30℃,检测波长254 nm。用上述方法确定了10批不同品种荷叶的12个共有峰,各色谱峰分离效果良好,精密度、稳定性、重复性试验中各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD均小于3%,符合指纹图谱要求。该方法精密度、稳定性和重复性均较好,为荷叶的质量控制标准提供了参考。     

Enzymatic Preparation of Crystalline Laminaribiose from Curdlan

The enzymatic preparation of laminaribiose was investigated in this research. When curdlan was hydrolyzed with the β-1,3-glucanase system of Streptomyces sp. K27-4, the hydrolyzate mainly consisted of glucose and laminaribiose in an approximate ratio of 1:1 by weight. Yeast strains selected in this study, effectively and selectively metabolized all of the glucose in the hydrolyzate, without any degradation of laminaribiose.

By successive treatment of curdlan with the glucanase system and glucose-metabolizable yeast, 31 g of crystalline laminaribiose was obtained from l00g of curdlan.     

Flavonoid Pigments in Rice Leaves and the Isolation of Glucotricin

The distribution of flavonoid pigments in the leaves of indica and japonica type rice plants was studied by paper chromatographic and electrophoretic techniques. A fluorescent flavoniod compound prominent in the leaves of indica was isolated in a crystalline form and identified as glucotricin (tricin-7-β-glucoside), the structure of which was characterized by Kuwatsuka in 1962.