食管鳞癌患者Th1/Th2漂移与临床病理因素之间关系的研究

目的:探讨食管鳞癌患者Th1/Th2转录因子和细胞因子的表达与临床病理因素之间的关系,为肿瘤免疫治疗提供实验依据.方法: 实时荧光定量PCR(RQ-PCR)检测食管癌患者及正常组外周血单个核细胞(PBMC)中转录因子T-bet mRNA、GATA-3 mRNA表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中细胞因子IFN-γ、IL-2和IL-4、IL-10的表达.结果: 与正常对照比较,食管鳞癌患者PBMC中Th1型转录因子T-bet和血浆中Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2的表达水平显著降低(P<0.01);Th2型转录因子GATA-3和细胞因子IL-4、IL-10的表达水平显著升高(P<0.01),并且Th1/Th2漂移程度与肿瘤的CT分期和病灶长度相关(P<0.05),而与病变的部位、病理分型及分化程度无明显相关性(P>0.05).结论: 食管鳞癌患者体内存在Th1/Th2漂移,这可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸的机制之一.     

食管鳞癌患者Th1/Th2漂移与临床病理因素之间关系的研究

目的：探讨食管鳞癌患者Th1/Th2转录因子和细胞因子的表达与临床病理因素之间的关系,为肿瘤免疫治疗提供实验依据。方法：实时荧光定量PCR（RQ-PCR）检测食管癌患者及正常组外周血单个核细胞（PBMC）中转录因子T-bet mRNA、GATA-3 mRNA表达,酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆中细胞因子IFN-γ、IL-2和IL-4、IL-10的表达。结果：与正常对照比较,食管鳞癌患者PBMC中Th1型转录因子T-bet和血浆中Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2的表达水平显著降低（P〈0.01）;Th2型转录因子GATA-3和细胞因子IL-4、IL-10的表达水平显著升高（P〈0.01）,并且Th1/Th2漂移程度与肿瘤的CT分期和病灶长度相关（P〈0.05）,而与病变的部位、病理分型及分化程度无明显相关性（P〉0.05）。结论：食管鳞癌患者体内存在Th1/Th2漂移,这可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸的机制之一。     

肝癌患者PBMC中TH1/TH2类细胞因子mRNA表达

目的探讨TH1类细胞因子IL-2、IFN-γ及TH2类细胞因子IL-4mRNA在Ⅰ期和Ⅱ期肝癌患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达模式,并观察IL-2、IFN-γmRNA在手术前后的表达变化。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定8例Ⅰ期和10例Ⅱ期原发性肝癌患者手术前后及15例健康人外周血中IL-2、IFN-γ的表达,并用凝胶图像分析系统进行图像分析。结果在18例肝癌患者中,IL-2、IFN-γmRNA的表达率分别为16.7%、5.6%,低于IL-4的表达率88.9%(P<0.05),呈现明显的TH2偏移状态,且IL-2、IFN-γ的表达强度在0.10~0.11之间,也远低于IL-4的0.21~0.22;在8例Ⅰ期肝癌患者中,术前有25.0%(2/8)表达IL-2mRNA,12.5%(1/8)表达IFN-γ,高于对照组的13.3%(2/15)、5.6%(1/15);手术治疗后两者的表达率分别是50.0%、37.5%,高于术前组;术前组及正常对照组两种细胞因子mRNA表达强度(0.10~0.12)明显低于术后组的0.20~0.22(P<0.05)。另外,10例Ⅱ期患者手术前后术均无IFN-γm...     

食管鳞癌患者外周血中Th17细胞的检测及其临床意义

目的:检测食管鳞癌患者外周血Th17细胞占淋巴细胞的比例及外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中RORγt和IL-17的表达水平,探讨Th17、RORγt及IL-17在食管鳞癌中的临床意义。方法:收集山东大学齐鲁医院2009年8月至2010年6月40例食管鳞癌患者PBMC标本,其中男24例、女16例,年龄34～78(61±8.76)岁。采集40例健康志愿者PBMC为对照。流式细胞术检测Th17细胞在外周血淋巴细胞中的比例;PT-PCR检测PBMC中RORγt和IL-17mRNA的表达水平。结果:食管鳞癌患者外周血Th17细胞占淋巴细胞的比例较健康对照者明显升高[(2.40±0.55)%vs(0.84±0.41)%,P<0.01];PBMC中RORγt、IL-17mRNA表达水平均明显高于健康对照组[(0.669±0.184)vs(0.451±0.151),(0.625±0.179)vs(0.438±0.150),P<0.01],且两者呈明显正相关(r=0.551,P<0.01)。食管鳞癌患者转移组与未转移组相比,Th17细胞比例、RORγt和IL-17mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。结论:食管鳞癌患者外周血Th17细胞占淋巴细胞的比例及PBMC中RORγt和IL-17mRNA表达水平明显升高,Th17细胞可能通过RORγt和IL-17参与食管癌的发生。     

宫颈癌患者血清Th1、Th2细胞因子表达水平及意义

目的 探讨宫颈癌患者血清Th1、Th2细胞因子表达水平及意义.方法 选取宫颈癌患者94例(观察组),同时选取健康女性90例作为对照组,检测两组患者干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、IL-4和IL-6.结果 观察组IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-6水平分别为(52.13±9.55)pg/ml、(38.70±8.96)pg/ml、(27.61±6.22)pg/ml和(32.16±7.81)pg/ml,均高于对照组(P﹤0.05);Ⅲ~Ⅳ期患者IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-6水平高于Ⅰ期和Ⅱ期患者(P﹤0.05),Ⅱ期患者IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-6水平高于Ⅰ期患者(P﹤0.05);不同分化程度患者IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-6水平比较差异无统计学意义(P﹥0.05),有无淋巴结转移患者IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-6水平比较差异无统计学意义(P﹥0.05).结论 宫颈癌患者Th1/Th2细胞因子动态平衡紊乱,可能在肿瘤的发生发展中有一定作用.     

肝细胞癌患者外周血Th17细胞水平的变化及其与肿瘤进展的关系

目的 研究Th17细胞在肝细胞癌(HCC)外周血中的表达,探讨Th17与HCC进展的关系.方法 采用流式细胞术检测61例HCC患者和38例正常对照者外周血中Th17细胞的水平,应用实时荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR),从mRNA水平检测白细胞介素(IL-17)、IL-23p19和维甲酸相关孤儿受体(RORc)的表达情况,分析HCC患者外周血Th17水平变化与其各项临床指标间的关系.结果 61例HCC患者的Th17细胞水平为4.67%±0.79%,正常对照组为3.25%±0.68%,两组间差异有统计学意义(P＜0.0001).HCC患者外周血单个核细胞(PBMC)中IL-17、IL-23p19和RORc的mRNA表达水平分别为正常对照组的23.9、8.5和23.2倍,差异有统计学意义(P＜0.05).HCC患者外周血中Th17水平增高与患者的性别、年龄、术前甲胎蛋白浓度等无关(P＞0.05),而与肿瘤大小、门脉癌栓、远处转移、TNM分期等有相关性(P＜0.05).Th17细胞水平随TNM分期的增加而升高,Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期患者外周血中Th17细胞水平分别为4.05%±0.82%、4.32%±0.67%、4.94%±0.70%和5.22%±0.87%,Ⅰ～Ⅱ期患者的Th17细胞水平明显低于Ⅲ～Ⅳ期(P=0.0008).结论 HCC患者外周血中Th17细胞水平升高,Th17细胞水平增高与肿瘤大小、门脉癌栓、远处转移、TNM分期有明显关系;PBMC中IL-17、IL-23p19和RORc的mRNA表达水平也明显升高.Th17细胞可能通过分泌效应细胞因子,直接或间接参与了HCC细胞的增殖、侵袭和远处转移.     

肺癌患者外周血Th1／Th2水平的观察

 目的 研究肺癌患者IFN-γ、IL-4、Th1／Th2水平的变化及其临床意义。方法 采用流式细胞仪对82例肺癌患者及25名健康对照进行特异性细胞因子表达水平分析。结果 肺癌患者Th1型细胞因子IFN-γ较正常显著降低，肺癌患者Ⅰ期与Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者差异有统计学意义；Th2型细胞因子IL-4与正常对照差异无统计学意义，各分期之间差异亦无统计学意义。肺癌患者Th1／Th2较正常组显著降低，Ⅰ期与Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者差异有统计学意义。结论 肺癌患者体内存在Th1／Th2的漂移，同其他肿瘤一样，同样存在着肿瘤细胞发生的免疫逃逸。     

胃癌患者外周血单核细胞Th1和Th2类细胞因子基因表达变化及其临床意义的分析

目的:探讨胃癌患者外周血单个核细胞(PBMC)中Th1和Th2类细胞因子mRNA表达变化及其临床意义.方法:采用RT-PCR技术,检测102例胃癌组织化疗前后、60例胃良性疾病组织和50例正常对照组织PBMC中Th1和Th2类细胞因子mRNA表达.结果:正常时照及胃良性疾病组PBMC中Th1和Th2类细胞因子基因阳性率差异无统计学意义,P>0.05.胃癌组PBMC中IL-4、IL-6和IL-10 mRNA阳性率显著高于正常对照和胃良性疾病组(P<0.05),且与胃癌的分化程度及临床分期相关,P<0.05;IFN-γ仅3例阳性表达(3/102),IL-2有7例阳性表达,显著低于正常对照和胃良性疾病组;胃癌组化疗有效者PBMC中Th1类细胞因子阳性率增加,Th2类细胞因子的阳性率则减低,P<0.05;化疗无效者PBMC中Th1和Th2类细胞因子mRNA阳性率较化疗前差异无统计学意义,P>0.05.结论:检测Th1和Th2类细胞因子mRNA的表达对评价胃癌患者的免疫状况和疾病进展及指导临床对患者进行免疫调节治疗有一定的应用价值.     

大肠癌患者外周血Th1/Th2的检测及其临床意义

目的 检测大肠癌患者外周血CD+4细胞Th1、Th2细胞因子的表达水平,观察大肠癌患者Th1/Th2漂移的幅度,探讨Th1、Th2细胞因子与大肠癌发生、发展的关系.方法 采取实验对象的清晨空腹静脉血标本,用Th1、Th2细胞因子标记流式细胞技术检测Th1类细胞因子IFN-γ,Th2类细胞因子IL-4,计算Th1/Th2(IFNγ/IL-4),进行统计学分析.结果 大肠癌患者IFN-γ的表达率为(11.7±1.86)%,健康对照组IFN-γ的表达率为(16.4±6.07)%,大肠癌组比健康对照组明显减低,差异有统计学意义(P＜0.05).大肠癌患者IL-4的表达率为(2.8±0.32)%,健康对照组IL-4的表达率为(1.8±0.19)%,大肠癌组比健康对照组升高,差异有统计学意义(P＜0.05).大肠癌患者外周血IFN-γ/IL-4为4.2±0.94,健康对照组外周血IFN-γ/IL-4为9.7±1.11,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 大肠癌患者外周血CD+4细胞表达Th2型细胞因子占优势,Th1/Th2平衡失调,向Th2方向漂移,导致机体免疫功能低下,是大肠癌复发或转移的原因之一.     

肺癌患者Th1和Th2类细胞因子的基因检测及其与化疗的关系

目的观察肺癌患者Th1和Th2类细胞因子的基因表达与化疗的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测102例肺癌患者在化疗前、化疗后外周血单个核细胞(PBMC)Th1和Th2类细胞因子mRNA表达水平。结果肺癌组IL-4、IL-6和IL-10mRNA阳性表达较正常对照及良性疾病组显著增高(P≤0.001。肺癌组IFN-γ和IL-2mRNA阳性表达较正常对照及良性疾病组显著降低(P<0.05)。化疗有效组化疗后IFN-γ和IL-2mRNA阳性表达分别为42/67和43/67,较化疗前显著增高(P≤0.001;IL-4、IL-6和IL-10mRNA阳性表达分别为30/67、26/67和24/67较化疗前显著降低(P≤0.01。化疗无效组化疗前后Th1和Th2类细胞因子mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论肺癌患者Th1类细胞因子表达受抑,Th2类因子呈强势表达;化疗可使肺癌患者Th2类细胞因子的强势表达向Th1类逆转。     

宫颈癌患者血清CYFRA21-1、TPS、CA125和CEA表达的临床分析

目的:探讨宫颈癌患者血清CYFRA21-1、TPS、CA125、CEA表达和临床的相关性。方法:随机选取28例宫颈癌患者和同时期的宫颈上皮内瘤样病变患者31例,健康对照人群35例。化学发光分析法检测血清CYFRA21-1、TPS、CA125和CEA水平,观察其和宫颈癌临床分型、分期的关系。结果:宫颈癌组CYFRA21-1、TPS、CA125、CEA检出水平最高,分别为:（5.15±36.35）ng/ml、（129.45±74.73）U/L、（58.35±17.47）U/ml、（15.86±9.35）ng/ml;宫颈上皮内瘤样病变检出水平其次,分别为:（0.96±0.45）ng/ml、（53.12±21.56）U/L、（36.24±14.23）U/ml、（3.28±1.74）ng/ml;健康人群最低,分别为:（0.61±0.32）ng/ml、（36.71±17.35）U/L、（12.69±4.51）U/ml、（1.26±0.86）ng/ml,以上两两比较差异均有显著性差异(P<0.05)。宫颈癌Ⅰ-Ⅱ期和宫颈癌Ⅲ-Ⅳ期在CYFRA21-1、TPS、CA125、CEA水平上比较差异也有统计学意义（P<0.05）。结论:血清CYFRA21-1、TPS、CA125、CEA在宫颈癌患者中的表达明显高于宫颈上皮内瘤样病变和健康受试者,为临床诊治研究提供了新的思路和方向。其在宫颈癌诊断中是否具有较好的特异性,需做进一步的临床研究。     

食管癌患者血清结合珠蛋白水平的检测及临床意义

目的:通过对食管癌患者血清结合珠蛋白水平的检测,探讨其在食管癌诊断及疗效评估中的意义。方法:用酶联免疫吸附法（ELISA）测定40名健康志愿者、60例食管癌患者血清结合珠蛋白的浓度。结果:治疗前食管癌组血清结合珠蛋白浓度明显高于正常组（P<0.01）,Ⅲ-Ⅳ期食管癌患者血清结合珠蛋白浓度明显高于Ⅰ-Ⅱ期组（均P<0.01）。经全身化疗的患者血清结合珠蛋白在部分缓解组浓度明显低于治疗前（P<0.01）,而稳定组及进展组治疗前后浓度差异无统计学意义。结论:血清结合珠蛋白浓度在食管癌患者中明显升高,且与临床分期相关,是一个较好的食管癌诊断和临床分期的辅助指标,并且有助于临床对食管癌疗效的评估。     

降钙素原和C 反应蛋白预测伊立替康化疗后腹泻患者肠原性细菌感染的研究

目的:探讨伊立替康化疗后腹泻患者血清降钙素原（procalcitonin,PCT ）和C 反应蛋白（C-reactiveprotein,CRP ）的水平。方法:对伊立替康化疗后85例腹泻患者和63例无腹泻患者行血清PCT 和CRP 水平测定。结果:根据WHO腹泻分级,使用伊立替康治疗后,无腹泻者0 级（对照组）,腹泻者Ⅰ～Ⅳ级（试验组）,对照组PCT 、CRP 第2 天分别为（0.29± 0.17）ng/mL、（6.06± 1.85）mg/L ,第4 天分别为（0.28± 0.15）ng/mL、（5.80± 1.82）mg/L ,试验组根据分级从低到高第2 天为Ⅰ级（0.30± 0.18）ng/mL、（6.12± 1.16）mg/L ,Ⅱ级（0.36± 0.20）ng/mL、（6.20± 1.68）mg/L ,Ⅲ级（1.24± 0.22）ng/mL、（22.62± 4.55）mg/L ,Ⅳ级（2.15± 0.26）ng/mL、（31.26± 5.23）mg/L ,第4 天为Ⅰ级（0.30± 0.14）ng/mL、（5.94± 1.14）mg/L ,Ⅱ级（0.34± 0.18）ng/mL、（6.15± 1.55）mg/L ,Ⅲ级（2.00± 0.22）ng/mL、（30.52±4.74）mg/L ,Ⅳ级（2.40± 0.28）ng/mL、（38.67± 5.68）mg/L ,对照组和试验组腹泻Ⅰ级、Ⅱ级PCT 、CRP 水平差异无统计学意义（P >0.05）,对照组、试验组腹泻Ⅰ级、Ⅱ级均与Ⅲ级、Ⅳ级PCT 、CRP 差异有统计学意义（P < 0.05）。 结论:通过检测伊立替康化疗后腹泻患者血清PCT 和CRP ,早期评估腹泻分级,可判断是否存在肠源性细菌感染,对指导早期抗感染治疗有一定临床价值。      

肺癌患者血清中癌胚抗原和细胞角蛋白片段19的检测与临床价值

目的 探讨血清癌胚抗原(CEA)和细胞角蛋白片段19( CYFRA21-1)检测对肺癌的诊断价值.方法 采用电化学发光法对102例肺癌患者、78例肺部良性病患者和104例健康人血清进行分析,检测CEA和CYFRA21-1水平.结果 肺癌组患者血清中CEA水平及阳性率[(25.77±15.34) ng/ml,47.1％]均明显高于肺良性病组[(4.67±2.21)ml,7.7％]和健康组[(3.98±3.00)ng/ml,3.8％],差异有统计学意义(P＜0.05).肺癌组患者血清中CYFRA21-1水平及阳性率[(14.08±8.34)ng/ml,62.7％]也同样高于肺良性病组[(3.27±2.87)ml,7.7％]和健康组[(2.69±2.02)ng/ml,3.8％],差异有统计学意义(P＜0.05),而良性病组和健康组间差异无统计学意义(P＞0.05).肺癌组患者经TNM分期后,随着肿瘤分期级别的升高,CEA水平[Ⅱ～Ⅳ期分别为(17.78±8.71)ng/ml、(25.84±7.34)ng/ml和(34.85±6.99) ng/ml]和CYFRA21-1水平[Ⅱ～Ⅳ期分别为(10.05±6.76)ng/ml、(15.93±6.66) ng/ml和(22.78±4.12)ng/ml]也升高.CEA和CYFRA21-1联合检测后,灵敏度增高,特异度降低,准确率基本不变.结论 CEA和CYFRA21-1对肺癌有一定的辅助诊断价值,并且对肺癌的分期有一定诊断价值,联合检测可提高对肺癌的阳性诊断.     

卵巢癌组织中EVEC的表达及其生物学意义

目的 研究EVEC在卵巢癌中的表达情况,并探讨其生物学意义.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测EVEC在正常卵巢组织、卵巢癌组织及相应大网膜转移灶中的表达水平,分析EVEC的表达与卵巢癌临床病理特征的关系.结果 RT-PCR检测结果显示,EVEC mRNA在Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌组织中的表达水平(0.155±0.015)低于Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌组织(0.199±0.014,P＜0.05),在Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌组织中的表达水平低于正常卵巢组织(0.415±0.055,P＜0.05).EVEC mRNA在Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌大网膜转移灶组织中的表达水平(0.142±0.024)低于Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌大网膜转移灶组织(0.195 ±0.021,P＜0.05),在Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌大网膜转移灶组织中的表达水平低于正常大网膜组织(0.409±0.035,P＜0.05).Western blot检测结果显示,EVEC蛋白在Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌组织中的表达水平(0.115±0.023)低于Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌组织(0.179±0.026,P＜0.05),在Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌组织中的表达水平低于正常卵巢组织(0.543±0.032,P＜0.05).EVEC蛋白在Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌大网膜转移灶组织中的表达水平(0.101±0.037)低于Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌大网膜转移灶组织(0.201±0.028,P＜0.05),在Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌大网膜转移灶组织中的表达水平低于正常大网膜组织(0.579±0.048,P＜0.05).EVEC的表达水平与卵巢癌病理类型、组织学分级及患者年龄无关(P＞0.05),与临床分期呈负相关(P＜0.05),原发灶与转移灶的表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 EVEC在卵巢癌及其大网膜转移灶中低表达,EVEC的表达水平与卵巢癌的侵袭转移密切相关.     

肺癌患者血浆中基质金属蛋白酶抑制剂2蛋白水平及其临床意义

目的： 检测基质金属蛋白酶抑制剂2 (tissue inhibitor of metalloproteinases 2,TIMP2)在肺癌患者血浆中的蛋白水平及其临床意义。方法：通过对214例血浆样本,包括114例肺癌患者、100例健康人,采用酶联免疫吸附试验 (enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)进行检测,测定TIMP2蛋白的血浆浓度,检验其诊断肺癌的敏感性和特异性。结果：ELISA检测结果显示,肺癌患者血浆中TIMP2蛋白浓度为 (74.56±16.70) ng/mL,显著低于正常对照人群 (170.98±48.61) ng/mL (P<0.01)。且TIMP2蛋白在晚期 (Ⅲ+Ⅳ期)肺癌患者血浆中的水平 (81.57±15.62) ng/mL显著高于早期 (Ⅰ+Ⅱ期)肺癌患者 (69.16±15.63) ng/mL (P<0.01);在肿瘤直径小于或等于3 cm肺癌患者血浆中TIMP2蛋白水平显著低于肿瘤直径大于3 cm的肺癌患者 (P<0.01),并且与肺癌的远处转移相关 (P<0.01)。当cutoff值定为103.29 ng/mL时,TIMP2检测肺癌的敏感性为97.4%,特异性为82.8%。结论：检测血浆中TIMP2的蛋白水平有助于肺癌的诊断。