肝病患者的肝组织单细胞悬液与外周血中淋巴细胞亚群的分析比较

目的探讨肝脏组织单细胞悬液的制备方法,了解慢性肝病患者的肝组织和外周血的淋巴细胞亚群差异。方法分别选择慢性乙型肝炎(CHB)14例、自身免疫性肝炎(AIH)4例和原发性肝细胞癌(HCC)3例,在超声引导下经皮作肝脏穿刺活检,用单细胞制备仪或物理研磨方法将肝组织制备成单细胞悬液,肝组织中淋巴细胞经4种特异性荧光抗体标记,在流式细胞仪(FCM)上作四色荧光分析,并与外周血测定结果比较。结果单细胞制备仪和物理研磨方法制备的肝组织单细胞悬液,细胞成活率分别为92.4%和91.5%;检测肝组织单细胞悬液中淋巴细胞亚群,正常对照组和慢性肝病各组间差异均有显著性(P<0.05),AIH组和CHB组间差异有显著性(P<0.05)。而外周血中淋巴细胞亚群检测,HCC组和CHB组间差异有显著性(P<0.05)。肝组织和外周血相应项目比较差异均有显著性(P<0.05)。结论用2种方法制备单细胞悬液能满足FCM检测的特殊需要;肝脏组织中淋巴细胞与外周血的淋巴细胞亚群比例差异有显著性。     

妊娠合并ITP患者适应性免疫变化的观察

目的研究妊娠合并特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者外周血淋巴细胞数及其亚群的变化,探讨这一特殊微环境下适应性免疫的变化及其对临床的指导意义.方法仪器分析法测定血常规,淋巴细胞计数反应适应性免疫强弱, FCM法检测外周血淋巴细胞亚群,T、B细胞分别反应细胞、体液免疫活性,采用t检验对比两组间淋巴细胞数及其亚群变化.结果观察（妊娠合并ITP）组总淋巴细胞数与对照（ITP）组比较变化不明显;观察组CD3＋细胞、CD4＋细胞比对照组显著增加（P〈0.001）,观察组CD19＋细胞（P〈0.05）、NK细胞（P〈0.001）比对照组显著减少,观察组CD8＋T细胞与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）.结论与单纯ITP患者相比,妊娠合并ITP患者适应性免疫功能变化,表现为细胞免疫更加活跃,体液免疫受到抑制;同时佐证和支持小剂量糖皮质激素对妊娠合并ITP的治疗.     

多发性硬化患者造血干细胞移植后Th、Tc细胞亚型的变化

目的 观察多发性硬化（MS）患者自体造血干细胞移植（AHSCT）前后外周血中辅助性T细胞（Th）、细胞毒性T细胞（Tc）亚型的变化,及其在AHSCT后诱导MS缓解中的作用.方法 用流式细胞仪（FCM）检测患者移植前1周及移植后1月外周血中Th、Tc细胞亚型,及其分别占CD3＋T淋巴细胞的百分比.结果 MS患者外周血Th1和Tc1细胞百分比高于健康对照组（P〈0.01及P〈0.05）,移植后Th1和Tc1显著低于移植前及对照组（P〈0.01）.移植前MS患者Th2细胞与健康对照组差异无显著性（P〉0.05）,Tc2细胞低于对照组（P〈0.05）.移植前后相比,移植前组Th2细胞下降（P〈0.05）,而Tc2差异无显著性（P〉0.05）.结论 MS患者体内存在高水平的Th1和Tc1.AHSCT可使其逆转,从而有利于MS病情的缓解.     

兰州地区慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群与HBV DNA水平的相关性研究

目的通过分析不同病毒载量慢性乙型肝炎(CHB)患者和乙型肝炎病毒携带者(ASC)外周血T淋巴细胞各亚群变化的规律,探讨乙肝病毒复制水平对T淋巴细胞免疫功能的影响及其可能机制。方法选择兰州市第二人民医院2012年7~12月收治的CHB患者63例(CHB组),选取同期ASC患者112例(ASC组),健康体检者84例(对照组)。采用流式细胞仪检测三项分组血清中T淋巴细胞亚群水平,实时荧光定量法检测HBV DNA水平。结果 CHB组患者和ASC组患者外周血CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);而CD8+水平则显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论兰州地区慢性HBV感染者T淋巴细胞亚群存在不同程度免疫调节异常和功能障碍。     

乙型肝炎“大三阳”患者外周血T淋巴细胞亚群的测定及意义

目的采用流式细胞术对乙型肝炎＂大三阳＂患者外周血T淋巴细胞亚群进行初步研究,探讨在乙型肝炎病毒复制状态下免疫功能情况及可能的意义。方法应用流式细胞仪检测患者外周血T细胞亚群并与健康者比较。结果乙型肝炎＂大三阳＂患者外周血T细胞亚群测定值中,CD3＋、CD3＋CD4＋的T细胞和CD3＋CD4＋/CD3＋CD8＋比值明显低于对照组（P〈0.05）,CD3＋CD8＋T细胞升高,但差异无统计学意义（P〉0.05）。结论乙型肝炎＂大三阳＂患者外周血T淋巴细胞亚群紊乱,且活性下降,免疫功能受损。     

类风湿性关节炎患者淋巴细胞CD45RO、CD45RA的表达及临床意义

目的检测类风湿性关节炎（RA）患者CD4^＋、CD8^＋细胞表达CD45RO和CD45RA亚群的变化并探讨其临床意义。方法采用双色流式细胞术（FCM）检测28名正常人外周血、43例RA患者外周血和15例关节液的CD4^＋、CD8^＋细胞CD45RO、CD45RA的表达。结果RA患者关节液CD4^＋、CD8^＋细胞表达CD45RO的百分比显著高于RA患者外周血和正常人外周血（P〈0.01）;RA患者外周血CD4^＋、CD8^＋细胞表达CD45RO的百分比显著高于正常人外周血（P〈0.01）。活动期RA患者血液CD4^＋、CD8^＋细胞表达CD45RO的百分比显著高于非活动期RA患者（P〈0.05,P〈0.01）。结论CD45RO^＋淋巴细胞是参与RA病理过程的主要淋巴细胞。     

血浆置换对慢性重型乙型肝炎T淋巴细胞亚群的影响及其意义

目的探讨血浆置换对慢性重型乙型肝炎（CSHB）患者T淋巴细胞亚群的影响及其意义。方法用FACSCalibur流式细胞仪检测26例CSHB患者血浆置换前后和47例慢性乙型肝炎（CHB）的外周血T淋巴细胞总数及其亚群比例，并比较CSHB患者存活组和死亡组T淋巴细胞总数及其亚群比例的变化。结果治疗前的CSHB组T淋巴细胞总数及CD4^＋比例显著低于CHB组，而CD8^＋比例显著高于CHB组，均P〈0．01。CSHB组经血浆置换治疗后存活率为53．85％（14／26），存活组治疗后T细胞总数和CD4^＋比例较治疗前及死亡组治疗后水平升高，而CD8^＋T细胞比例则较治疗前和死亡组治疗后水平显著下降（P〈0．05）。结论血浆置换治疗可改善慢性重型乙型肝炎患者的免疫功能紊乱，并且免疫功能的检测可能有助于疗效和预后的判断。     

二期梅毒患者外周血细胞免疫水平的相关性研究

目的探讨二期梅毒患者外周血细胞免疫水平。方法应用流式细胞仪检测40例二期梅毒患者的外周血T淋巴细胞亚群及自然杀伤（NK）细胞,并以42名健康人的检测结果作对照,比较2组之间的差异。结果二期梅毒患者外周血CD3细胞与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,CD4、CD4/CD8及NK细胞数显著低于对照组（P〈0.05）,CD8细胞数高于对照组（P〈0.05）。结论二期梅毒患者存在细胞免疫功能异常,这可能是造成患者体内病原体不能完全清除的原因之一。     

自身免疫病患者造血干细胞移植后Ts及Tc细胞的变化

目的检测严重自身免疫病（SAID）患者自体造血干细胞移植（AHSCT）前后外周血中抑制性T（Ts）细胞、杀伤性T（Tc）细胞亚群的变化,探讨Ts、Tc细胞在AHSCT诱导自身免疫病缓解中的作用。方法使用流式细胞术（FCM）检测对照组及SAID患者AHSCT前1周及AHSCT后1-3月外周血中Ts、Tc细胞亚群。Ts细胞表型为CD3^＋CD8^＋CD28^-,Tc表型为CD3^＋CD8^＋CD28^＋。分析各细胞亚群占T淋巴细胞的百分率,并比较AHSCT前后Ts、Tc的变化。结果SAID患者AHSCT前Ts与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,Tc高于对照组（P〈0.05）。AHSCT前后比较,患者外周血中Ts细胞显著增高（P〈0.05）;Tc虽有下降,但差异无统计学意义（P〉0.05）。AHSCT后与对照组比较,Ts显著增高（P〈0.05）,Tc差异无统计学意义。结论AHSCT治疗SAID患者,能显著提高患者Ts细胞,降低Tc细胞的比例,是AHSCT诱导SAID缓解的机制之一。     

化脓性结核病患者T淋巴细胞亚群分类变化特征

目的：检测化脓性结核病患者外周血和病灶处脓液T淋巴细胞亚群分类,探讨化脓性结核病患者免疫状态。方法：对30例结核病组患者外周血标本和病灶处脓液标本各30份应用流式细胞仪在单个核细胞水平检测T淋巴细胞亚群分类;选取20例健康体检者外周血标本20份作对照。结果：结核病组外周血中CD4^＋淋巴细胞百分含量低于对照组,CD8^＋淋巴细胞百分含量高于对照组,2组比较差异有统计学意义（P〈0．01）;结核病组病灶处CD4^＋淋巴细胞数高于对照组（P〈0．01）,CD8^＋淋巴细胞数与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：化脓性结核病的发生与T淋巴细胞亚群失衡有关,表现为外周血中CD4^＋细胞数量减少,而局部病灶中CD4^＋细胞增加。     

Lipid peroxidation of the liver in liver disease

Material of puncture biopsy of the human liver left after morphological study was used to explore enzymatic and non-enzymatic lipid peroxidation, NADH-ferricyanide reductase activity, the content of triglycerides, cholesterol and protein. It was shown that the degree of lipid peroxidation varies considerably in different liver diseases. The highest degree of lipid peroxidation was discovered in patients with fibrosis accompanied by the symptoms of fatty dystrophy. It was established that the rate of peroxidation does not directly correlate with the level of liver lipid infiltration. It is concluded that NADH-ferricyanide reductase activity mirrors adequately the nature of a liver disease and can be used as a highly sensitive and very specific enzymatic test.     

Schistosomiasis of the liver

Schistosomiasis is an infection of trematodes, Schistosoma, causing periportal fibrosis and liver cirrhosis due to deposition of eggs in the small portal venules. In schistosomiasis caused by S. mansoni, sonography shows echogenic thickening or fibrotic band along the portal veins. CT shows low-attenuation bands or rings around the large portal vein branches in the central part of the liver with marked enhancement. Hepatoplenomegaly, liver cirrhosis, portal hypertension and gastroesophageal varies are commonly associated. In schistosomiasis caused by S. japonicum, sonography shows echogenic septae in the liver, utlining the polygonal liver lobules, mimicking “fish-scale” network appearance, reflecting fibrosis. CT shows periportal septae in the peripheral part of the liver parenchyma, producing “turtle-back” appearance, representing calcified eggs along the portal tracts. The portal tracts and hepatic capsule are enhanced on contrast-enhanced CT images. The size and shape of the liver are relatively preserved. MR images show fibrous septae as low signal intensity on T1-weighted images, high signal intensity on T2-weighted images, and these fibrous septae are enhanced. CT images of the lungs show multiple scattered nodules with halo of ground-glass opacities. Exudative granulomatous inflammation of the colonic wall may produce inflammatory polyps, fibrous thickening or stenosis of the colonic wall.     

Echinococcosis of the liver

Echinococcosis, also known as hydatid disease, is an infection of larval stage animal tapeworm, Echinococcus. The larvae reside in the liver and lungs, producing multiloculated fluid-filled cysts. Imaging findings of Echinococcosis caused by E. granulosus are single, unilocular cyst or multiseptated cysts, showing “wheel-like”, “rosette-like” or “honeycomb-like” appearances. There may be “snow-flakes” sign, reflecting free floating protoscoleces (hydatid-sand) within the cyst cavity. Degenerating cysts show wavy or serpentine bands or floating membranes representing detached or ruptured membranes. Degenerated cysts show heterogeneous, solid-looking pseudotumor that may show “ball of wool sign”. Dead cysts show calcified cyst wall. Echinococcosis caused by E. multilocularis produces multilocular alveolar cysts with exogeneous proliferation, progressively invading the liver parenchyma and other tissues of the body. Imaging findings are ill-defined infiltrating lesions of the liver parenchyma, consisting of multiple small clustered cystic and solid components. On sonography, lesions are heterogeneous with indistinct margins, showing “hailstorm appearance” or “vesicular or alveolar appearance”. CT and MR imaging displays multiple, irregular, ill-defined lesions. Multiple small round cysts with solid components are frequent. Large lesions show “geographical map” appearance. Calcifications are very frequent, appearing as peripheral calcification or punctuate scattered calcific foci. Invasion into the bile ducts, portal vein or hepatic vein may occur. Direct spread of infected tissue may result in cysts in the peritoneal cavity, kidneys, adrenal gland or bones.     

在CCl4诱导的大鼠肝脏纤维化模型中肝功、肝脏纤维化程度的监测

目的对肝纤维化实验动物模型的肝功能和肝纤维化程度等指标进行评估。方法肝纤维化大鼠模型的制备,肝纤维化指标。血清透明质酸(HA),层粘连蛋白(LN),Ⅲ型前胶原(PCⅢ),Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)。肝功能指标:①反映肝细胞蛋白合成代谢功能的指标:总蛋白TPROT(g/L),白蛋白ALB(g/L),球蛋白GLB(g/L);②肝细胞受损的指标:谷草转氨酶AST(U/L),谷丙转氨酶ALT(U/L),胆碱脂酶CHE(U/L);③反映肝脏胆排泄、分泌及解毒功能的指标:总胆红素TBILI(μmol/L),直接胆红素DBILI(μmol/L),间接胆红素IBILI(μmol/L),总胆汁酸TBA(μmol/L);④胆汁淤积指示酶:谷氨酰转肽酶GGT(U/L),碱性磷酸酶ALP(U/L)。结果纤维化肝脏的形态学和病理学结果显示的大鼠的肝纤维化处于终末期状态;对于肝纤4项,除层粘连蛋白(LN)外,正常组和肝纤维化组的大鼠有显著性差异;对于肝功15项,除了总蛋白(TPROT)和胆碱酯酶(CHE)外,正常组和肝纤维化组的大鼠有显著性差异。结论肝纤维化大鼠的肝纤维化和肝功指标对对照组相比有显著性差异,与肝纤维化的病理和形态学检测相一致。