gp120mAb对gp120抑制大鼠海马脑片CA1区LTP作用的研究

目的探讨人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)的包膜糖蛋白gp120特异抗体gp120mAb对gp120引起大鼠海马脑片CA1区的突触传递及可塑性变化的影响.方法应用离体脑片记录技术,记录大鼠海马CA1区的兴奋性突触后电位(EPSP),研究gp120mAb对gp120抑制高频电刺激Schaffer侧支引起的鼠海马长时程增强效应(LTP)作用的影响.结果gp120对高频电刺激(HFS,100 Hz,1 000 ms×2,串间隔20秒,共2次)Schaffer侧支引起的大鼠海马CA1区LTP产生抑制作用,而对其基础EPSP没有影响.用浓度为200 pmol/L的gp120灌流脑片,可引起LTP的维持发生抑制.这种抑制作用可被gp120特异抗体gp120mAb(50 ng/ml)所拮抗.结论gp120mAb可能是通过拮抗gp120抑制海马CA1区的LTP诱发和维持而参与艾滋病痴呆(HIV-1 associated dementia,HAD)的形成.     

Lavendustin A对gp120抑制大鼠海马CA1区LTP的翻转作用

目的：为了探讨酪氨酸蛋白激酶抑制剂Lavendustin A（Lav A）对人类免疫缺陷病毒Ⅰ型（HIV-1）的包膜糖蛋白gp120引起大鼠海马脑片CA1区的长时程增强效应（Iong-term potentiation，LTP）的影响。方法：应用离体脑片记录技术，记录大鼠海马CA1区的兴奋性突触后电位EPSP，研究了Lav A对gp120引起的大鼠海马脑片CA1区突触传递和可塑性变化的影响。     

Genistein对HIV-1gp120抑制鼠LTP的实验研究

目的为了探讨酪氨酸蛋白激酶抑制剂Genistein对人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV1)的包膜糖蛋白gp120引起大鼠海马脑片CA1区的长时程增强效应(Longtermpotentiation,LTP)作用的影响。方法应用离体脑片记录技术,记录大鼠海马CA1区的兴奋性突触后电位EPSP,研究了Genistein对gp120引起的大鼠海马脑片CA1区的突触传递和可塑性变化的影响。结果gp120对高频电刺激(HFS,100Hz,1000ms×2,串间隔20s,共2次)Schaffer侧支引起的大鼠海马CA1区LTP产生抑制作用,而对PTP没有影响。酪氨酸蛋白激酶抑制剂Genistein可以反转这种抑制效应。结论gp120可能通过抑制海马CA1区LTP而参与艾滋病痴呆(HIV1associateddementia,HAD)的形成,且这种抑制作用可能与酪氨酸蛋白激酶抑制剂Genistein有关。     

姜黄素在HIV-1 gp120致海马突触可塑性损伤中的作用机制研究

<正>目的:观察姜黄素对gp120 V3环所致大鼠海马神经元突触可塑性损伤的作用及机制。方法:制备离体大鼠海马脑片,1mol/L姜黄素或10 mol/L尼莫地平单独或分别与1 nmol/L gp120 V3环共同作用于大鼠海马脑片1h后,采用细胞外微电极记录技术,分别记录Schaffer侧支-CA1区神经元的输入/输出曲线(input-output curve,I/O curve)、场兴奋性突触后电位(field-ex-     

姜黄素对TNF-α损伤大鼠海马神经元的功能性保护作用及机制

目的:观察姜黄素对TNF-α损伤大鼠海马神经元的功能性保护作用并探讨其机制。方法:应用离体脑片记录技术,记录大鼠海马CA1区的兴奋性突触后电位(EPSP),给予Schaffer侧支高频刺激(HFS)诱发长时程增强(LTP),观察不同药物处理组EPSP起始斜率的变化情况。结果:与对照组相比,TNF-α和NMDA(N-甲基D-天冬氨酸)对大鼠海马脑片LTP产生明显的抑制作用(P0.05);而姜黄素可以部分拮抗TNF-α和NMDA对海马脑片LTP的抑制作用,与对照组相比无显著差异(P0.05);TNF-α、姜黄素和NMDA对大鼠海马神经元的基础突触传递没有显著影响。结论:姜黄素对TNF-α损伤的大鼠海马神经元有功能性保护作用,其机制可能是姜黄素部分拮抗TNF-α诱导的神经元细胞膜上的NMDA受体过度激活,维持神经元的长时程增强。     

HIV-1包膜糖蛋白V3环对大鼠海马长时程增强效应的影响

目的　探讨人免疫缺陷病毒Ⅰ型 (HIV 1)的包膜糖蛋白V3 环对大鼠海马脑片CA1区的突触传递及可塑性的影响。方法　应用离体脑片记录技术 ,记录大鼠海马CA1区的场兴奋性突触后电位 (fieldexcitatorypostsynapticpotentials,f EPSP) ,研究了V3 环对高频电刺激Schaffer侧支引起的鼠长时程增强效应 (long termpotentiation ,LTP)的影响。结果　V3 环对高频电刺激 (HFS ,10 0Hz,10 0 0ms× 2 ,串间隔 2 0s,共 2次 )Schaffer侧支引起的大鼠海马CA1区LTP产生抑制作用 ,而对其基础f EPSP没有影响。用浓度为 2 0 0pmol/L的V3 环灌流脑片 ,可引起LTP的维持发生抑制。这种抑制作用可被V3 环特异抗体V3 McAb(4 0ng/ml)所拮抗。结论　V3 环可能是通过抑制海马CA1区的LTP诱发和维持而参与艾滋病痴呆 (HIV 1associateddementia ,HAD)的形成     

在脑片水平上突触可塑性长时程增强的研究进展

长时程增强(LTP)是突触效能的重要表现形式,是研究学习与记忆突触机制的客观指标.近年来随着脑片技术的发展,很多关于LTP的实验研究都在脑片水平上进行.介绍了海马脑片CA1区LTP的调节表达机制的研究,海马脑片上诱导产生的LTP的特征和脑片条件的关系,多巴胺转运蛋白阻断剂通过活化D3多巴胺受体增强海马脑片CA1区LTP,以及激活大鼠海马脑片CA1区突触β-肾上腺素能受体增强联合LTP的研究,综述了在脑片水平上研究LTP的诱导表达维持及调节等方面的研究动态和进展.     

COX-2抑制剂对幼鼠痫性发作海马神经元突触活动的影响

目的：观察环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）抑制剂硝基苯-甲磺酸（NS-398）对幼鼠痫样放电的作用及其对海马CA1锥体神经元突触电活动的影响,研究NS-398在幼鼠痫性发作中的作用。方法：用生后第14天龄SD大鼠制作海马组织脑切片,记录其CA1区锥体神经元场电位,以群峰电位（PS）个数和波幅作为指标来评价脑片放电的变化。给脑片用不同浓度青霉素,建立离体海马脑片痂样放电模型,在脑片灌流液中用不同浓度NS-398,观察对PS个数和波幅的影响。全细胞记录模式下,观察NS-398对海马CA1锥体神经元递质释放和突触活动的影响。分别记录自发性兴奋性突触后电流（sEPSC）和自发性抑制性突触后电流（sIPSC）,观察NS-398对其波幅和频率的影响。结果：NS-398浓度为10μmol／L时,对青霉素诱发的痼样放电没有多大的抑制效应;当浓度为20gmol／L时,有明显的抑制作用;为30μmol／L时抑制作用很强,明显降低PS的波幅和减少其频率。NS-398能明显抑制致痴大鼠海马锥体神经元sEPSC的频率,但是对其波幅及衰减时间没有明显的影响;同时NS-398能明显增强致痫大鼠海马脑片锥体神经元sIPSC的频率,明显延长sIPSC的衰减时间,对波幅影响不大。结论：COX-2抑制剂NS-398能减少sEPSC的放电和增强sIPSC的抑制功能,导致兴奋性神经递质的释放减少,降低神经元的兴奋性,从而抑制神经元异常放电。     

不同浓度海洛因灌流对大鼠海马CA1区神经元电生理的影响

目的： 观察海马CA1区神经元在不同浓度海洛因灌流时电生理特性的变化。 方法： 运用神经元胞内记录技术，对大鼠离体海马脑片给予3种浓度海洛因（heroin）急性灌流，分别记录CA1区神经元灌流前、后电生理参数，进行对比。 结果： 随着海洛因灌流浓度的增加，神经元静息电位和阈电位绝对值小于灌流前(P<0.05)。0.3 mmol·L-1灌流时，动作电位振幅低于灌流前(P<0.05)，锋电位半幅时程，10%-90%上升时间和10%-90%衰减时间延长（P<0.05，P<0.01）。0.1-0.3 mmol·L^-1灌流时，电流-电压（I-V）关系曲线显示膜斜率电阻显著高于灌流前（P<0.05，P<0.01）。电流-频率（I-F）关系曲线表明，0.03 mmol·L^-1海洛因灌流15 min时，0.1-1.8 nA胞内电流刺激，神经元放电频率与对照相似，但1.9-2.0 nA刺激时可保持较高放电频率（P<0.05）。3种浓度海洛因对神经元兴奋性突触后电位（excitatory postsynaptic potential,EPSP）均有抑制作用，以0.1-0.3 mmol·L^-1明显。 结论： 不同浓度海洛因对海马CA1区神经元膜电特性具有显著影响。     

依达拉奉对血管性痴呆大鼠海马突触可塑性的影响

目的：探讨依达拉奉(edaravone,Eda)对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠海马CA1区神经元突触可塑性的调节作用及分子机制。方法：成年雄性SD大鼠30只,随机分成3组：假手术组、VD组、VD+Eda组,每组10只。应用Morris水迷宫(Morris water maze,MWM)测试各组大鼠的空间认知功能。MWM后,分别记录每只大鼠海马CA1区神经元长时程增强(long-term potentiation, LTP)并进行分析比较;电生理记录后,大鼠断头取脑,制备脑冰冻切片,免疫组织化学测定海马CA1区神经生长相关蛋白-43(GAP-43)的表达情况。结果：VD组大鼠有明显的空间认知障碍;Eda治疗后,VD+Eda组大鼠的空间认知障碍得到显著改善。VD+Eda组兴奋性突触后电位(excitatory postsynaptic potential,EPSP)斜率增加百分比显著高于VD组(P<0.05)。VD组GAP-43的表达量显著低于假手术组(P<0.01),VD+Eda组GAP-43的表达量显著高于VD组(P<0.05)。结论：依达拉奉可通过提高VD大鼠海马CA1区的突触可塑性改善空间认知障碍,其机制与依达拉奉上调VD大鼠海马CA1区GAP-43的表达有关。     

谷氨酸对大鼠海马CA1区锥体细胞电压依赖性Na^＋电流的影响

本实验采用全细胞膜片钳技术、观察了谷氨酸对急性分离的海马ＣＡ１区神经元的电压依赖性Ｎａ＾＋通道的影响,结果发现谷氨酸对电压依赖性Ｎａ＾＋电流有明显抑制作用,其抑制方式呈电压依赖性,浓度依赖性和时间依赖性,表明谷氨酸对电压依赖性钠通道有抑制作用。     

慢性脑缺血大鼠海马CA_1区中的BDNF表达

为了观察慢性脑缺血时海马CA1区中BDNF的表达变化,探讨缺血性脑损伤及修复机制。我们将Wistar大鼠双侧颈总动脉结扎制成慢性脑缺血动物模型。分为三组:正常对照组、慢性脑缺血30d和120d组。分别于术后30d和120d处死动物,行BDNF免疫组化染色,计数各组大鼠海马CA1区中的阳性神经元数。结果显示:(1)在对照组的海马CA1区可见BDNF较强的表达;(2)在慢性脑缺血30d时,海马CA1区BDNF的表达高于缺血120d组及对照组(P<0.05)。而120d时,海马CA1区BDNF的表达与对照组无显著性差异(P>0.05)。结果提示:(1)在正常大鼠海马CA1区有BDNF表达,能维持神经元的存活;(2)慢性脑缺血时,BDNF在海马CA1区的表达先升后降。     

Potentiating effects of 4-[2-(phenylsulfonylamino)ethylthio]-2,6-difluoro-phenoxyaceta mide (PEPA) on excitatory synaptic transmission in dentate granule cells

A novel sulfonylamino compound, 4-[2-(phenylsulfonylamino)-ethylthio]-2,6-difluoro-phenoxyaceta mide (PEPA) has been shown to selectively potentiate glutamate-induced currents in Xenopus oocytes expressing recombinant AMPA receptor subunits, GluR1-GluR4, by attenuation of desensitization. Here, we examined the effects of PEPA on responses to excitatory amino acids as well as on excitatory synaptic transmission in dentate granule cells of rat hippocampal slices using the whole-cell patch clamp technique. PEPA at 100 microM produced a 3-4-fold increases in the peak amplitude of current responses to AMPA and glutamate applied iontophoretically in the dentate granule cells, whereas it showed no effect on NMDA-induced currents. Excitatory postsynaptic currents (EPSCs) evoked in these neurons by stimulation of the perforant path had fast and slow components mediated by AMPA and NMDA receptors, respectively. PEPA at concentrations between 10 and 100 microM potentiated only the AMPA component of the EPSC (AMPA EPSC) in a dose-dependent manner without affecting the NMDA component. Although the potentiating effect of PEPA on the amplitude of the AMPA EPSC was weaker than that on the AMPA-induced current, it clearly prolonged the duration of the EPSC. PEPA at 100 microM increased the peak amplitude of the AMPA EPSC by 17%, and increased the area enclosed by the AMPA EPSC by 72%.     

自噬对HIV-1 gp120V3环介导的海马神经元L型钙离子通道电流的影响

 目的:观察哺乳动物雷帕雷素靶蛋白（mTOR）依赖性自噬信号转导通路对HIV-1 gp120V3环介导的海马神经元L-型钙离子通道电流的影响。方法：取出生1 d内的乳鼠海马神经元原代培养7 d后用于实验。实验分为2个平行实验组,即空白对照组、gp120V3组、自噬阻断剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）组和gp120V3+3-MA组;空白对照组、gp120V3组、自噬激动剂雷帕雷素（rapamycin)组和gp120V3+rapamycin组。以膜片钳技术记录海马神经元的L型钙离子通道电流。结果：gp120V3组及3-MA组与空白对照组比较,L型钙离子通道电流密度增大（P<0.05）;gp120V3+3-MA组与gp120V3组比较,L-型钙离子通道电流密度增大（P<0.05）;rapamycin组与空白对照组比较,L型钙离子通道电流密度减小（P<0.05）;gp120V3+rapamycin组与gp120V3组比较,L型钙离子通道电流密度减小（P<0.05）。结论：从电生理角度证明,自噬可能参与了HIV-1gp120V3环介导的海马神经元L型钙离子通道电流的改变。     

大剂量苯巴比妥对惊厥幼鼠浦肯野细胞电生理功能的影响

 目的：研究单次大剂量苯巴比妥对惊厥幼鼠小脑浦肯野细胞(Purkinje cells, PCs)电生理功能的影响。方法：将健康新生7 d (P7) SD幼鼠随机分为正常对照组、惊厥模型组和苯巴比妥组。给予幼鼠腹腔注射戊四氮60 mg/kg制作惊厥模型。苯巴比妥按120 mg/kg一次性腹腔注射。采用全细胞膜片钳记录法在小脑脑片上记录小脑PCs动作电位及PCs兴奋性突触后电流（excitatory postsynaptic current, EPSC）的长时程抑制（long-term depression, LTD）。结果：（1）苯巴比妥组幼鼠小脑PCs诱发动作电位的阈值降低,频率增高。（2）苯巴比妥组幼鼠小脑PCs EPSC幅值在低频刺激后15 min内降低的幅度显著大于其它2组。结论:单次大剂量苯巴比妥增加了惊厥幼鼠小脑PCs的兴奋性,并改变了小脑PCs的突触功能。     

Inhibitory effects of calcitonin gene-related peptide on long-term potentiation induced in hippocampal slices of rats

It is well known that hippocampus plays important roles in learning and memory. Both calcitonin gene-related peptide (CGRP) and CGRP receptors are found in hippocampus. In the present study we explored the influence of CGRP on long term potentiation (LTP) in hippocampal Schaffer collateral-CA1. Our results demonstrated that CGRP inhibited the LTP induced by high frequency stimulation (HFS) in hippocampal CA1 neurons in rat brain slices. The inhibitory effect was blocked by CGRP receptor-1 antagonist CGRP 8-37. The results indicate that both CGRP and CGRP receptor 1 are involved in the modulation process of LTP in hippocampus of rats.     

电鱼小脑浦肯野细胞对急性缺氧的功能反应

目的:通过研究急性缺氧对电鱼(mormyrid electric fish)小脑浦肯野细胞(Purkinje cell,PC)的功能影响,阐明缺氧耐受动物神经元在缺氧条件下的电生理特征。方法:采用全细胞膜片钳记录法,观察急性缺氧对电鱼小脑主神经元PC膜电位、兴奋性和平行纤维(parallel fiber,PF)-PC突触传递的影响。结果:(1)短暂缺氧使电鱼小脑PC膜电位发生迅速而持久的超极化,可持续30 min以上,同时伴随自发放电频率的显著下降。谷氨酸AMPA受体阻断剂CNQX不影响PC缺氧性超极化的产生,但可阻断缺氧性超极化的持续存在;而GABAA受体阻断剂Bicuculline则完全阻断缺氧性超极化的产生,并使膜电位在缺氧开始后发生短暂的去极化。(2)缺氧使PC诱发动作电位的阈值增高,频率减低,幅值减小。(3)急性缺氧使刺激PF诱发的PC兴奋性突触后电流(excitatorypostsynaptic current,EPSC)呈现长时程增强(long term potentiation,LTP),同时使EPSC双脉冲增强现象(pair-pulsefacilitation,PPF)显著衰减。CNQX逆转了PF EPSC的缺氧性LTP,表现为长时程抑制(Long Term Depression,LTD);而Bicuculline则使PF EPSC的缺氧性LTP增强。结论:耐缺氧动物电鱼小脑神经元的缺氧反应特征与哺乳类动物显著不同,AMPA受体和GABAA受体均参与电鱼小脑PC的缺氧性超极化和PF LTP的产生,表明维持GABA能突触和谷氨酸能突触活动的适度平衡,可能是电鱼以及其他耐缺氧动物脑保护机制的关键。