HIV感染者≠AIDS患者

成年HIV携带者在疾病进展到“全面暴发的”AIDS之前常有一个较长的潜伏期，HIV-1侵入机体后潜伏期为2～10年左右，HIV-2侵入机体后潜伏期可能更长，这期间HIV携带者称HIV感染者。几乎所有的HIV携带者最后都会发生HIV相关疾病和AIDS。诊断AIDS必须至少具有下列2个主要体征和1个次要体征。     

人类免疫缺陷病毒/艾滋病患者中和抗体保守表位氨基酸变异研究

目的 探讨人类免疫缺陷病毒／艾滋病（HIV／AIDS）患者中和抗体保守表位氨基酸变异特征，为开展中和抗体免疫治疗和疫苗设计奠定理论基础。方法 RT-PCR及nest-PCR扩增HIV／AIDS患者HIV-1外膜env C2～C3区基因，双脱氧终止法进行核酸序列测定，翻译为氨基酸序列，并与HIV-1SequenceDatabase参考毒株中和抗体表位数据比对辨别其保守表位氨基酸突变情况。结果 HIV-1外膜蛋白gp120 C2～C3区，HIV感染者和AIDS患者CD4结合位点（CIMBS）、CD4诱导（CD4i）、2G12三种类型中和抗体保守表位氨基酸均存在突变，两组病例表位突变率差异无统计学意义（均P〉0．05）；CD4BS保守表位突变有370E／Q（12．1％），370E／K（4．5％），266A／S（1．5％），368D／E（1．5％）；CD4i保守表位突变有370E／Q（12．1％），370E／K（4．5％），381E／D（7．6％），381E／V（1．5％）；2G12保守表位突变有295N／V（19．7％），295N／T（6．1％），295N／D、295N／K、295N／E（各1．5％），297T／I（9．1％），297T／S、297T／N（各1．5％）。结论 我国HIV／AIDS患者HIV-1外膜蛋白gp120 C2～C3区中和抗体CIMBS、CD4i、2G12保守表位氨基酸均存在突变，但尚处于低突变水平；不同类型中和抗体保守表位各氨基酸位点的变异程度有差异。     

夫妻感染HIV-1病毒的分子流行病学研究

目的研究宁波市HIV-1感染夫妻的免疫状况和HIV毒株的亚型分布特点和流行规律。方法收集宁波市7对已经被确认为HIV-1型阳性夫妻的全血样品,对CD4+T淋巴细胞进行绝对计数,运用巢式PCR方法扩增病毒膜蛋白env基因和gag基因区并进行序列测定。应用DNASTAR软件对序列和参考序列进行比对分析,确定基因亚型。结果成功获得11条env基因序列和13条gag基因序列,确定6株为B’亚型,2株为01_AE流行重组型,2株为07_BC流行重组型,4株为08_BC流行重组型。该11例HIV-1阳性全血的CD4+T淋巴细胞绝对数最低7个/μl,最高654个/μl,平均288个/μl。结论宁波市夫妻感染HIV-1毒株存在多种亚型,大多数的感染者免疫状况低下需要抗病毒治疗,流行形势严峻,应加强对该人群免疫状况和HIV-1毒株亚型变异的监测,及时调整防治策略。     

HIV感染者≠AIDS患者

成年HIV携带者在疾病进展到"全面暴发的"AIDS之前常有一个较长的潜伏期,HIV-1侵入机体后潜伏期为2～10年左右,HIV-2侵入机体后潜伏期可能更长,这期间HIV携带者称HIV感染者。几乎所有的HIV携带者最后都会发生HIV相关疾病和     

325例艾滋病患者和人类免疫缺陷病毒感染者血象变化特点

获得性免疫缺陷综合征(AIDS，艾滋病)患者和人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者(HIV／AIDS)常常出现血液细胞学改变．例如贫血、粒细胞减少和血小板减少等，但是，其特点如何、与疾病进展有什么关系?在这方面国内文献还鲜有报道。我们就我院诊治的HIV／AIDS325例患者的血液细胞学改变特点进行分析，就以上问题作了初步总结。     

HIV基因分型以及耐药性的研究进展

人类免疫缺陷症病毒( HIV)是艾滋病的主要致病因子,无论是无症状HIV感染者还是有症状的艾滋病患者,都有持续的HIV复制[1]。体内的HIV病毒每天进行着107~108次病毒复制,约产生1010新的病毒颗粒。 HIV基因组由将近1万个核苷组成,由于HIV酶缺乏纠错能力,每天至少有104~105子代HIV出现单位点突变。检测结果证实,在尚未开始抗病毒治疗的感染者体内已存在耐药变异。美国和西欧最新研究报道,10.7%~27.6%的新感染者为HIV-1耐药株感染,耐药变异是导致临床抗病毒治疗失败的主要原因[2]。全国流行病学调查结果显示,中国是HIV-1基因亚型最多的国家之一[3]。 HIV-1基因亚型分析在HIV-1的分子流行病学调查、诊断、临床和药物治疗及其疫苗研制等方向均有重要作用[4]。     

人类免疫缺陷病毒感染者及艾滋病患者免疫功能与病毒载量之间的关系

目的探讨人类免疫缺陷病毒（HIV）感染者和艾滋病（AIDS）患者机体的免疫功能与病毒载量的关系、以此判断疾病的进展，评价抗病毒治疗效果和评估预后情况。方法对226例已确诊的HIV感染血样进行CD4^＋T淋巴细胞绝对计数、CD4／CD8比值和血浆病毒载量的检测。结果226例HIV感染者或AIDS患者体内CD4^＋T淋巴细胞绝对数与病毒载量的对数值呈负相关，变化趋势相反，但与CD4／CD8比值呈正相关。结论CD4^＋T淋巴细胞绝对数是HIV感染者或AIDS患者免疫系统中的“金指标”，流式细胞术单平台法是检测CD4^＋T淋巴细胞绝对数的标准方法，病毒载量则主要是衡量AIDS患者药物疗效必不可少的方法之一。     

程序化健康教育对门诊HIV感染者／AIDS患者的影响

目的探讨程序化健康教育对门诊艾滋病病毒（HIV）感染者／艾滋病（AIDS）患者的影响。方法以120例门诊HIV感染者／AIDS患者为研究对象,随机分为实验组和对照组。对照组只接受医院门诊常规健康教育;实验组在常规健康教育的基础上,接受本研究专门设计的系统健康教育,干预3个月,用问卷调查分别对两组患者进行测试。结果接受程序化健康教育的患者艾滋病相关知识水平和对健康指导依从性显著高于对照组（P〈0．05）,心理健康水平优于对照组。结论本研究设计的程序化健康教育能有效促进门诊HIV感染者／AIDS患者的身心健康,对降低艾滋病流行和蔓延,控制疾病的发展,延长患者生命和提高患者的生存质量具有重要意义。     

艾滋病的实验室检测及进展

获得性免疫缺陷综合征（Acquired Immunodeficiency Syndrom）又称艾滋病（AIDS）,已成为危害全球的一种严重传染性疾病.2003年12月底,联合国艾滋病规划署估计全世界艾滋病病毒（HIV）感染者约4000万,HIV感染者和艾滋病患者死亡人数约300万 .我国AIDS的流行也呈加速发展趋势,截止2003年底,估计现存活的HIV感染者约84万人 .如不采取积极有效的控制措施,到2010年我国HIV感染者将达1000万,形势十分严峻.AIDS的实验室检测是艾滋病预防控制工作的重要组成部分,现就AIDS的实验室检测及进展作一综述.     

沈阳市新诊断HIV感染者整合酶抑制剂原发耐药研究

目的 明确沈阳市新诊断的HIV-1感染者整合酶抑制剂（Integrase inhibitors, InIs）耐药株的传播情况。方法 回顾性收集2018年6月至2019年3月沈阳市新诊断的HIV感染者80例，扩增血浆病毒RNA的整合酶编码基因，系统进化分析病毒基因型，以Stanford HIV耐药数据库解读耐药基因突变，计算原发耐药率并分析不同亚型毒株耐药相关自然多态性。结果 80例HIV-1感染者中共检出CRF01_AE感染者51例，占63.8%；CRF07_BC感染者14例，占17.5%，B亚型感染者6例，占7.5%；其他不典型重组9例，占11.3%。2例CRF01_AE感染者检出R263K突变，1例B亚型感染者检出E138A突变，耐药率3.8%。CRF01_AE感染者在整合酶耐药相关位点 50、74、119、153位氨基酸具有多态性，频率分别为5.9%、2.0%、13.7%和4.0%；而CRF07_BC感染者在在整合酶耐药相关位点50、74、157位上氨基酸具有多态性，频率均为7.1%。结论 沈阳市新诊断HIV感染者InIs原发耐药率较低，但少数感染者在整合酶耐药相关位点具有氨基酸多态性。需要加强整合酶耐药监测，并加强对我国常见HIV流行株的耐药基因型及表型研究，更好地解读耐药突变的意义。     

Gene combination raises broad human immunodeficiency virus-specific cytotoxicity

DNA plasmid immunization has the important advantage over traditional vaccines of making it possible to combine selected genes into one vaccine. The efficacy of a combination of DNA plasmids encoding the nef, rev, and tat HIV-1 regulatory genes in inducing cellular immune responses was analyzed in asymptomatic HIV-1-infected patients. Patients initially selected for having low or no detectable immune responses to Nef, Rev, or Tat antigens developed MHC class I-restricted cytolytic activities as well as enhanced bystander effects. The induction of memory cells against target cells infected with the whole HIV-1 genome was analyzed by using a pseudovirus HIV-1/murine leukemia virus (MuLV), and target cells infected with vaccinia virus carrying the respective gene. The most remarkable change observed after immunization with the gene combination was an increase in cytotoxic T lymphocyte (CTL) precursors to target cells infected with the whole HIV-1 genome. Infection by the pseudotype HIV-1/MuLV virus should result in a multitude of HIV-1 peptides presented on the target cell surface, representative of the in vivo situation. An in vitro assessment of the expression of the single and combined gene products showed that this was consistent with the induction of CTL responses in vivo. No clinical advantage or adverse effects were noted. Therapeutic effects of such immunization may become measurable by structured therapy interruption.     

Inhibition of human immunodeficiency virus type 1 replication in vitro in acutely and persistently infected human CD4+ mononuclear cells expressing murine and humanized anti-human immunodeficiency virus type 1 Tat single-chain variable fragment intrabodies.

We have previously reported that a murine anti-Tat sFv intrabody, termed sFvtat1Ck, directed against the proline-rich N-terminal activation domain of HIV-1, is a potent inhibitor of HIV-1 replication [Mhashilkar, A. M., et al. (1995). EMBO J. 14, 1542-1551]. In this study, the protective effect of sFvtat1Ck expression on HIV-1 replication in both acutely infected and persistently infected CD4+ cells was examined. Stably transfected CD4+ SupT1 cells were resistant to HIV-1 infection at high MOI with both the laboratory isolate HxB2 and six syncytium-inducing (SI) primary isolates. Persistently infected U1 cells, which can be induced to increase HIV-1 mRNA synthesis on addition of PMA or TNF-alpha, showed decreased production of HIV-1 in the presence of sFvtat1Ck. In transduced CD4+-selected, CD8+-depleted, and total PMBCs, the sFvtat1Ck-expressing cells showed marked inhibition of HIV-1 replication. The anti-Tat sFv was subsequently humanized by substituting compatible human framework regions that were chosen from a large database of human V(H) and V(L) sequences on the basis of high overall framework matching, similar CDR length, and minimal mismatching of canonical and V(H)/V(L) contact residues. One humanized anti-Tat sFv intrabody, termed sFvhutat2, demonstrated a level of anti-HIV-1 activity that was comparable to the parental murine sFv when transduced PBMCs expressing the murine or humanized sFv intrabodies were challenged with HxB2 and two SI primary isolates. Because Tat is likely to have both direct and indirect effects in the pathogenesis of AIDS through its multiple roles in the HIV-1 life cycle and through its effects on the immune system, the strategy of genetically blocking Tat protein function with a humanized anti-Tat sFv intrabody may prove useful for the treatment of HIV-1 infection and AIDS, particularly when used as an adjuvant gene therapy together with highly active antiretroviral therapies that are currently available.     

重组分泌型人类免疫缺陷病毒Tat蛋白在真核细胞中的表达及活性检测

目的 构建人类免疫缺陷病毒病毒 tat基因的重组分泌型真核表达载体并在真核细胞中表达,检测表达的重组蛋白活性。方法 聚合酶链反应（PCR）从重组质粒pcDNA3．1（＋）/Tat中扩增tat基因,利用 HindⅢ和Bam HⅠ酶切位点分别将tat基因正向、反向插入分泌型载体pSecT ag ,获得正向插入克隆（pSecT at ）和反向插入克隆（pSecTat-AS）,经双酶切鉴定连接成功后,利用测序鉴定其序列和插入方向。将构建的重组质粒转染293细胞,利用Western blot法检测Tat蛋白的表达。进而将重组质粒与LTR-CAT报告质粒共转染293细胞和BCBL-1细胞,CAT-酶联免疫吸附试验（ELISA）检测其细胞内CAT表达,从而检测Tat蛋白的活性。最后将转染重组质粒的293细胞与转染LTR-CAT报告质粒的BCBL-1细胞用Transwell培养系统共培养,CAT-ELISA检测分泌型Tat蛋白的旁分泌调控活性。结果 PCR扩增产物在10 g/L琼脂糖凝胶上约300 bp位置出现条带,与预期的324 bp大小相符;经HindⅢ和BamHⅠ分别酶切鉴定,获得2个正向克隆;正向克隆经测序,克隆的 tat基因序列与Gen-Bank中登记的HIV-1 tat基因100％同源。正向克隆质粒转染293细胞后,Western blot法检测观察到约19×10^3蛋白条带。正向克隆质粒与LTR-CAT报告质粒共转染293细胞和BCBL-1细胞CAT 表达量高于反向克隆质粒转染细胞（P＜0．05）。与反向克隆对照相比,与正向克隆转染的293细胞共培养的BCBL-1细胞CAT表达量更高（P＜0．05）。结论 成功构建 HIV-1 tat基因基因分泌型真核表达载体,该载体不但可在真核细胞内表达具有调控活性的T at蛋白,表达的Tat蛋白还可分泌至细胞外并具有调控活性。     

上海地区HIV-1感染者耐药基因型检测及亚型分析

目的研究上海地区人类免疫缺陷病毒（H IV）感染者/获得性免疫缺陷综合征（AIDS）患者耐药性基因型以及亚型的分布情况。方法采用美国拜耳公司H IV耐药检测试剂盒（TRUGENE（H IV-1 Genotyp ingK it）,扩增H IV-1靶序列（pol基因）中长度分别为297bp的蛋白酶基因片段和621bp的逆转录酶基因片段,OpenGene（DNA测序系统和数据分析软件进行测序和序列分析,利用H IV Database网站提供的H IV基因亚型分析软件（BLAST）对所得到的靶序列进行亚型分析。结果对87例H IV/AIDS患者的病毒载量和CD4＋T淋巴细胞计数4年随访中,其中61例接受高效抗逆转录病毒联合治疗（HARRT）的患者中,有4例性传播患者检测结果显示出现逆转录酶类耐药相关位点,49例合并血友病的患者,服药的依从性好,病毒载量检测均低于检测限（？50拷贝/mL）。10例未接受过HARRT治疗的患者标本中未检出耐药相关突变。对16份标本进行亚型分析,发现1例国内尚未见报道的ADHK重组型。结论利用TRUGENE（H IV-1系统,进行H IV-1耐药性基因型的检测,可以有效地监测接受HARRT治疗前后患者血浆H IV-1的耐药情况,并对不同的亚型进行分析。     

A prophylactic and therapeutic AIDS vaccine containing as a component the innocuous Tat Toxoid

Extracellular Tat can act as a viral toxin on uninfected cells of different tissues, including the CNS and the immune system, thus in order to immunize humans against Tat we have prepared a biologically inactivated but immunogenic Tat (Tat Toxoid). Tat Toxoid is not toxic in mice even at high doses. It triggers high levels of specific Tat Abs in the mouse and rabbit. Furthermore, in humans Tat Toxoid immunization was safe and induced in seronegatives persistent high levels of Tat Abs and in immunodeficient patients a significant rise of these specific Abs. Facing acute HIV-1 infection, the presence of high level of circulating Tat Abs promoted by Tat Toxoid vaccine should prevent Tatinduced immunosuppression and allow anti-HIV-1 cellular response to develop. As a consequence, early release of β-chemokines could enhance host resistance towards HIV-1, and, in infected people, inhibit viral replication and evolution towards AIDS.     

我国237例未接受抗病毒治疗的HIV/AIDS患者中原发性基因型耐药监测和病毒亚型分析

目的 分析237例HIV/AIDS患者中原发性耐药的发生率和病毒亚型分布情况.方法 从河南、云南、上海等20个地区采集237例未经抗病毒治疗的HIV/AIDS患者血浆HIV-1进行基因测序,通过病毒亚型分析软件REGA HIV-1 Subtyping Tool确定测序样本的HIV-1亚型,并与斯坦福大学HIV耐药数据库比对确定测序样本HIV-1耐药相关突变位点.采用b-DNA方法检测患者血浆病毒载量,采用流式细胞仪检测CD4+ T淋巴细胞计数.结果 237例未接受抗病毒治疗的HIV/AIDS患者感染的HIV-1毒株分布为A1、B、C、CRF01-AE、CRF02-AG、CRY7-BC、CRF08-BC、CRF12-BF、G等9个不同亚型,可能的感染时间分布在1990-2006年.237例患者中仅有3例分别对核苷类逆转录酶抑制剂高度耐药、蛋白酶类抑制剂低度耐药和非核苷类逆转录酶抑制剂高度耐药,原发性耐药的发生率为1.3%(3/237).结论我国部分地区未经抗病毒治疗的HIV/AIDS患者中HIV-1原发性基因型耐药的发生比例处于较低水平,病毒亚型分布在9个亚型.