内皮细胞固有型一氧化氮合成酶基因G894T变异与糖尿病肾病的关系

目的：观察内皮细胞固有型一氧化氮合成酶（ecNOS）基因外显子7的Glu298Asp基因多态性与2型糖尿病肾病（DN）的关系。方法：利用聚合酶链反应限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测了天津地区299例2型糖尿病患者和100例正常对照者的ecNOS基因外显子7的基因型，比较各组间的等位基因频率与基因型频率。结果：（1）2型糖尿病合并持续性微量白蛋白尿组（DN1组）的GT基因型和T等位基因频率高于糖尿病非肾病组（DM组）和正常对照组（C组），差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）在2型糖尿病患者中GT基因型者较GG基因型者的DN患病率高（X^2=5．252，P=0.022）。（3）高血压、血纤维蛋白原（FIB）、ecNOS外显子7的GT基因型是2型糖尿病合并DN的独立危险因素。（4）2型糖尿病合并高血压组（DMEH组）、糖尿病非高血压组（DM1组）和C组间ecNOS基因外显子7的基因型分布和等位基因频率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：ecNOS基因外显子7的基因G894T（Glu298Asp）的变异可能是天津地区2型糖尿病患者DN易感性的基因标志之一，可能参与DN的启动；该基因多态性不是通过促进高血压的发生而增加DN的易感性。     

醛糖还原酶基因5''''端两种基因多态性与2型糖尿病肾病的相关性

目的：研究AR基因5＇-端（AC）n多态标记及启动子区C（-106）T多态标记与2型糖尿病肾病易感性之间的关系。方法：研究对象为421例中国北方汉族人，包括320例2型糖尿病（DM）患者，其中162例合并糖尿病肾病（DN），另101例为非糖尿病对照组（CON）。用PCR-变性聚丙烯酰胺凝胶-银染的方法检测AR基因5＇-端（AC）n串联重复序列多态标记，同时设计引物，PCR扩增含AR基因调控区多态标记的C（-106）T的目的片断，以限制性内切酶XspI行酶切RFLP分析。比较各组间等位基因频率和基因型频率。结果：在2型糖尿病和对照组中共发现AR基因（AC）n序列的10种等位基因，28种基因型（Z-10～Z＋8），C（-106）T多态标记的CC、CT和TT3种基因型及C、T两种等位基因；上述各种等位基因和基因型频率在DM组和CON组之间无显著性差异；2型糖尿病合并肾病者Z-2等位基因、含Z-2等位基因的基因型、T等位基因及CT＋TT基因型频率明显高于无肾病患者。结论：AR基因5’端（AC）n多态标记Z-2等位基因及C（-106）T多态标记T等位基因与2型糖尿病肾病易感性密切相关。     

贵州地区汉族人群2型糖尿病肾病RANTES基因启动子多态性分析

目的探讨RANTES基因启动子-28C/G多态性与贵州地区汉族人群2型糖尿病并发肾病之间的关系。方法应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP),检测143例2型糖尿病患者(53例单纯2型糖尿病患者,90例2型糖尿病合并肾病患者)和55例正常对照组RANTES基因启动子-28C/G基因型,并对各组间的等位基因频率与基因型频率进行检测分析。结果(1)正常对照组与2型糖尿病组相比,-28G阳性基因型频率和G等位基因型频率差异无显著意义(P>0.05)。(2)糖尿病肾病组与单纯糖尿病组相比,-28G阳性基因型频率和G等位基因型频率显著升高(P<0.05)。结论RANTES基因启动子-28G等位基因与贵州地区汉族人群2型糖尿病的发生无关,但可能是糖尿病肾病的易感基因。     

CCR5基因启动子多态性与2型糖尿病肾病相关性研究

目的 探讨趋化因子受体5(CCR5)基因启动子多态性与中国人2型糖尿病肾病之间的关系.方法 应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP),检测2型糖尿病患者、2型糖尿病合并肾病患者及正常对照组CCR5基因启动子59029G/A基因型,并对各组间的等位基因频率与基因型频率进行比较. 结果 A( )基因型:单纯糖尿病组(DNO)与糖尿病肾病微量白蛋白尿组(DN1)比较差异有显著性(P=0.310),与大量白蛋白尿组(DN2)比较差异有显著性(P＜0.01),DN1组与DN2组比较差异有显著性(P=0.002),DNO组与糖尿病肾病组(DN1 DN2)比较差异有显著性(P=0.007).结论 CCR5 59029G/A基因多态性与糖尿病肾病的发展密切相关.     

RANTES基因多态与2型糖尿病肾病的临床研究

目的探讨RANTES基因启动子G-403A多态与2型糖尿病肾病之间的关系。方法用聚合酶链反应限制性片段长度多态性技术（PCR-RFLP）检测252例RANTES基因启动子G-403A多态的基因型,其中2型糖尿病患者170例（糖尿病非肾病组76例,糖尿病肾病组94例）;正常对照组82例,并对各组间的等位基因频率与基因型频率进行比较。结果糖尿病肾病组的AA基因型频率（24．5％）明显高于正常对照组（14．6％）。糖尿病肾病组的A等位基因频率（52．1％）明显高于正常对照组（40．3％）,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论RANTESG-403A多态与糖尿病肾病的发生有相关性。     

Graves病白细胞减少与CTLA-4基因多态性的相关性

目的：探讨天津地区汉族人Graves病（GD）合并白细胞减少，与细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-H4（CTLA-4）基因外显子1第49位点A／G和启动子-318位点C／T二态性的相关性。方法：运用PCR—RFLP技术分析40例GD白细胞减少患者、56例GD白细胞正常患者及60例正常人CTLA-4基因、外显子1第49位点和启动子-318位点基因型．计算并比较各组基因型和等位基因频率。结果：GD组第1外显子第49位点基因型GG和等位基因G的频率明显高于正常对照组，3组人群的CTLA-4基因启动子-318位点的基因型与等位基因的分布差别无统计学意义。GD白细胞减少组与GD白细胞正常组之间基因型、等位基因的分布差别无统计学意义。结论：CTLA-4基因外显子1G49可能是天津地区汉族人Graves病的易感基因，而其与启动子-318位点可能不是天津地区汉族人GD合并白细胞减少的易感基因。     

醛糖还原酶基因5′端两种基因多态性与2型糖尿病肾病的相关性

目的:研究AR基因5′-端(AC)n多态标记及启动子区C(-106)T多态标记与2型糖尿病肾病易感性之间的关系。方法:研究对象为421例中国北方汉族人,包括320例2型糖尿病(DM)患者,其中162例合并糖尿病肾病(DN),另101例为非糖尿病对照组(CON)。用PCR-变性聚丙烯酰胺凝胶-银染的方法检测AR基因5′-端(AC)n串联重复序列多态标记,同时设计引物,PCR扩增含AR基因调控区多态标记的C(-106)T的目的片断,以限制性内切酶XspI行酶切RFLP分析。比较各组间等位基因频率和基因型频率。结果:在2型糖尿病和对照组中共发现AR基因(AC)n序列的10种等位基因,28种基因型(Z-10￣Z 8),C(-106)T多态标记的CC、CT和TT3种基因型及C、T两种等位基因;上述各种等位基因和基因型频率在DM组和CON组之间无显著性差异;2型糖尿病合并肾病者Z-2等位基因、含Z-2等位基因的基因型、T等位基因及CT TT基因型频率明显高于无肾病患者。结论:AR基因5′端(AC)n多态标记Z-2等位基因及C(-106)T多态标记T等位基因与2型糖尿病肾病易感性密切相关。     

转化生长因子β1基因多态性与广东汉族糖尿病肾病的相关性研究

目的研究转化生长因子β1（TGF-β1）＋869T／C、＋915G／C基因多态性与广东汉族糖尿病肾病（DN）的相关性。方法采用病例-对照方法进行研究,即以DN患者为病例组,糖尿病不伴肾病患者与健康对照者两组人群分别构成两个对照组进行比较研究。采用序列特异性引物聚合酶链反应（PCR—SSP）技术检测糖尿病肾病患者45例,糖尿病不伴肾病患者53例,健康对照组50例的TGF-β1第1号外显子＋869T／C及＋915G／C位点等位基因及基因型分布,并对该基因多态性与广东汉族糖尿病肾病的相关性进行分析。结果TGF-β1＋869T／C、＋915G／C基因多态性可区分为3种类型,分别为TT、TC、CC3种和GG、GC、CC3种;＋869T／C中T、C等位基因的分布,DN组分别为0．414、0．586,糖尿病非肾病组分别为0．455、0．545,对照组分别为0．596、0．404;＋915G／C中G、C等位基因的分布,DN组分别为0．714、0．286,糖尿病非肾病组分别为0．700、0．300,对照组分别为0．768、0．232;三组数据总体比较,＋869T／C基因类型TT、TC、CC这一组数据总体上差异有显著性（P〈0．05）,说明DN组、非肾病组和对照组这三组的TT、TC、CC3种基因类型总体分布存在差异,＋915G／C基因类型差异无显著性（P〉0．05）;三组数据两两比较,差异均无显著性（P〉0．05）。结论TGF—β1＋869T／C及＋915G／C位点基因多态性与广东汉族糖尿病肾病可能无关。     

MCP-1A-2518G基因多态性与2型糖尿病的相关研究

目的探讨MCP-1A-2518G基因多态性在2型糖尿病的发生以及其血管并发症的发展中的作用。方法选择健康对照组55例,2型糖尿病患者135例,所有入选对象留取空腹静脉血,提取DNA,PCR扩增、酶切分析其基因型,应用病例-对照研究方法探讨MCP-1基因多态性与2型糖尿病及其并发症的关系。结果 (1)2型糖尿病患者MCP-1GG(-2518)基因型频率及G(-2518)等位基因频率显著高于正常对照组(P<0.01),差异有统计学意义。(2)2型糖尿病无血管并发症组与合并血管并发症组之间GG基因型及G等位基因频率差异无统计学意义(P>0.05)。结论在中国昆明汉族2型糖尿病人群中,MCP-1G(-2518)等位基因频率明显增高,MCP-1G(-2518)等位基因可能是2型糖尿病发生的危险因素,MCP-1A-2518-G基因多态性可能与2型糖尿病的发生有一定的相关性。     

STAT6基因多态性与哮喘的相关性对血浆IgE水平的影响

目的 探讨STAT6基因＋2964G／A多态性与哮喘的相关性及对血浆IgE水平的影响。方法 用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性（PCR／RFLP）方法检测哮喘组与对照组＋2964位点多态性，用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血浆IgE水平。结果 ＋2964位点等位基因G、A频率在两组间分布的差异有统计学意义（Х^2=17．26，P〈0．01），等位基因G与哮喘关联，OR（G／A）=2．62，95％Cl=1．66～4．13，P〈0．01。两组基因型（GG、GA、AA）频率的分布差异亦有统计学意义（Х^2=19．52，P〈0．01），其优势比：OR（GG／AA）=3．30、95％Cl=1．26～8．66，P〈0．05；OR（GG／GA）=3．79，95％Cl=2．03～7．09，P〈0．01；OR（GA／AA）=0．869，95％Cl=0．303～2．496、P〉0．05；同组内，T等位基因携带者血浆IgE水平高于非携带者；同一基因型，哮喘组IgE水平高于对照组。结论 STAT6基因＋2964位点多态性是影响哮喘的重要候选基因，G等位基因与哮喘关联，并影响血浆IgE水平。     

血管紧张素Ⅰ转换酶、血浆纤溶酶原激活物抑制剂基因多态性与2型糖尿病肾病相关性分析

目的探讨血管紧张素Ⅰ转换酶（ACE）、血浆纤溶酶原激活物抑制剂（PAI-1）基因多态性与2型糖尿病肾病的相关性。方法58例健康者为对照组、92例糖尿病非肾病患者为糖尿病非肾病组、125例糖尿病肾病患者为糖尿病肾病组，聚合酶链反应确定ACE、PAI-1基因型。酶联免疫吸附法检测血浆PAI-1。结果糖尿病肾病组ACE基因中D等位基因频率、PAI-1基因中4G等位基因频率明显高于糖尿病非肾病组、对照组。Logistic回归分析表明ACE、PAI-1基因是2型糖尿病肾病的危险因素。结论ACE基因中D等位基因、PAI-1基因中4G等位基因可能涉及2型糖尿病肾病发病。     

醛糖还原酶5’端两种基因多态性与2型糖尿病肾病的相关性研究

目的探讨醛糖还原酶(AR)基因启动子区C(-106)T单核苷酸多态性和2.1Kb处(AC)n二核苷酸微卫星多态性与2型糖尿病肾病(DN)的关系。方法用聚合酶链反应(PCR)、测序及琼脂糖凝胶电泳技术检测AR基因两多态位点的基因型及等位基因,比较各组分布频率。结果在DM组和CON组均发现AR基因C(-106)T多态位点存在C、T两种等位基因和CC、CT、TT三种基因型,(AC)n序列的7种等位基因(Z-6~Z+6);T、Z-2等位基因及CT+TT及含有Z-2的基因型在DN组明显高于NDN和CON组,但在DM组和CON组之间无显著性差异。结论 AR基因C(-106)T多态位点的T等位基因及(AC)n多态位点的Z-2等位基因可能是DN的易感基因。     

脂联素45 T/G基因多态性对利拉鲁肽治疗2型糖尿病患者的临床疗效

目的:研究脂联素45(APM1-45)T/G基因遗传变异对利拉鲁肽治疗2型糖尿病(T2DM)患者的临床疗效以及对T2DM易感性的影响。方法:选取2017年7月至2019年11月期间海口市第三人民医院收治的T2DM患者共95例作为研究对象,均给予利拉鲁肽进行为期14周的治疗,记录不同基因型患者治疗前后的血糖水平、BMI指数和mRNA相对表达等指标变化,统计不良反应的发生情况。结果:APM1-45(rs2241766)位点在研究人群中的基因分布频率为:TT型46例(48.42%),TG型43例(45.26%),GG型6例(6.32%),三种基因型分布频率符合哈迪温伯格平衡(P=0.328)。治疗后,各组患者的餐后2小时血糖(2h PG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖(FPG)和BMI相关指标相比治疗前均下降明显,且存在统计学差异(P<0.05);TT基因型患者的各项指标与TG/GG基因型患者相比,下降更多,但二者相比不存在统计学差异(P>0.05)。mRNA相对表达方面,相对于TG/GG基因型患者,TT基因型患者的mRNA的相对表达明显偏低,二者差异具有统计学意义(P<0.05)。患者整体不良反应发生情况较少,各组之间无统计学差异。结论:对2型糖尿病患者,利拉鲁肽进行治疗具有明显效果,在显著降低血糖水平、控制体质量的同时,不良反应发生率较低,G等位基因与T2DM易感性存在一定的相关性,而T等位基因携带者对利拉鲁肽的治疗表现出更优的效果。     

中国人群难治性癫痫患者CYP2C19*2基因型对癫痫耐药的影响

目的:研究中国人群难治性癫痫患者CYP2C19*2基因型对癫痫耐药的影响,促进阐明难治性癫痫的耐药机制。方法:采用聚合酶链反应(PCR)-限制性片段长度多态性(RFLP)方法对难治性癫痫患者(接受癫痫治痫灶切除的患者)和非难治性癫痫患者(单药有效的癫痫患者)的CYP2C19*2(681G→A)位点进行基因型分析,对患者杂合型和纯突变型的样本进行抽样测序验证,以确保基因分型结果准确。对两组基因和基因型频率采用卡方检验的统计学分析,选用SPSS12.0版软件进行处理。结果:收集了96例难治性癫痫患者和305例非难治性癫痫患者。CYP2C19*2等位基因频率:难治组G64.6%,A35.4%;非难治组:G67.9%,A32.1%;难治组突变基因频率高于非难治组但没有统计学差异(P>0.05)。CYP2C19*2基因型频率:难治组GG33.3%,GA62.5%,AA4.2%;非难治组GG44.6%,GA46.6%,AA8.9%。难治组和非难治组基因型频率具有统计学差异(P<0.05),难治组中GG型频率显著低于非难治组,GA型频率高于非难治组(P<0.05);而AA型频率在两组内虽然不同却没有统计学差异。另外,进行基因型组合后,只有无突变(GG)与突变(GA和AA)基因型频率在两组间有统计学差异(P<0.05),难治组突变基因型频率高于非难治性组(66.7%:55.4%)。结论:中国人群难治性癫痫患者与非难治性癫痫患者的CYP2C19*2基因型分布频率有统计学差异,难治性癫痫组CYP2C19*2突变基因型频率高于非难治组;癫痫耐药与CYP2C19*2基因型之间没有关联性,阐明癫痫耐药机制应更加关注多基因之间的联合作用尤其是影响脑组织局部药物浓度的基因。     

Impact of the endothelial nitric oxide synthase gene G894T polymorphism on renal endothelial function in patients with type 2 diabetes

OBJECTIVE: Endothelial dysfunction and increased oxidative stress contribute to the progression of diabetic nephropathy. To analyze the functional significance of the G894T polymorphism of NOS3, the gene encoding endothelial nitric oxide synthase (NOS), we assessed basal nitric oxide activity and the amount of oxidative stress in the renal circulation of patients with type 2 diabetes. METHODS: Renal plasma flow (RPF) was assessed by steady-state input clearance technique with sodium para-aminohippurate in 84 patients with type 2 diabetes and 84 patients without diabetes. RPF was measured at baseline and after the infusion of the NOS inhibitor N-monomethyl-L-arginine (4.25 mg/kg); the substrate of NOS L-arginine (100 mg/kg); and coinfusion of vitamin C (3 g) with L-arginine (100 mg/kg). RESULTS: The decrease of RPF to N-monomethyl-L-arginine was similar between carriers of the T allele and homozygous carriers of the G allele in patients with diabetes (-56+/-40 vs. -68.1+/-74 ml/min/1.73 m, P=0.342) and patients without diabetes (-66.7+/-81 vs. -58.3+/-63 ml/min/1.73 m, P=0.606). In patients with diabetes, however, carriers of the T allele revealed a more pronounced increase of RPF to coinfusion of vitamin C with L-arginine than homozygous carriers of the G allele (61.8+/-75 vs. 22.3+/-73 ml/min/1.73 m, P=0.021), whereas in patients without diabetes the response of RPF to coinfusion of vitamin C with L-arginine was similar between both groups (46.2+/-80 vs. 70.7+/-86 ml/min/1.73 m, P=0.217). Gene-environment interaction between disease (diabetes) and genotype (genotype GG vs. genotype GT/TT) was observed for increase of RPF to coinfusion of vitamin C with L-arginine (P=0.020). CONCLUSION: G894T polymorphism of NOS3 has no impact on the basal nitric oxide activity of renal circulation. In contrast, the T allele is associated with increased oxidative stress in the renal circulation in patients with diabetes suggesting a specific role of the G894T polymorphism in the pathogenesis of diabetic nephropathy.     

IL-10 基因多态性及血清水平与颅内动脉瘤发病的关系

目的 分析白细胞介素（IL）-10 基因启动子区－ 1082G/A、－ 819C/T 单核苷酸多态性（SNP）及血清 IL-10 水平与颅内动脉瘤（IAs）发病的关系。 方法 运用 PCR 及 DNA 直接测序的方法, 检测 206 例 IAs 患者（IAs 组）和 187 例非 IAs 患者（对照组）的 IL-10 基因启动子区 SNP 位点, － 1082G/A、－ 819C/T 的基因型频率和等位基因频率, χ2检验分析 IAs 组和对照组之间的差异; 采用 ELISA 法检测血清中 IL-10 水平, t 检验分析 2 组之间的差异。 结果 IL-10 基因启动子区－ 1082G/A 位点的 GG 基因型和 GA＋ AA 基因型, 以及 G 等位基因和 A 等位基因频率比较, IAs 组较对照组 GA＋ AA 基因型以及 A 等位基因频率更高, 差异均有统计学意义（P < 0.01）, GA＋ AA 基因型（OR 值为 4.137, 95%CI 2.476~6.914）和 A 等位基因（OR 值为 3.368, 95%CI 2.476~4.583）携带者有更高的 IAs 发病风险; IL-10 基因启动子区－ 819C/T 位点的 CC 基因型和 CT＋ TT 基因型以及 C 等位基因和 T 等位基因频率比较, IAs 组较对照组 CT＋ TT 基因型以及 T 等位基因频率更高, 差异均有统计学意义（P < 0.01）, CT＋ TT 基因型（OR 值为 3.393, 95% CI 1.952~5.900）和 T 等位基因（OR 值为 3.764, 95%CI 2.730~5.192）携带者有更高的 IAs 发病风险。 IAs 组血清 IL- 10 水平低于对照组（P < 0.01）。 结论 IL-10 基因启动子区 SNP 影响 IL-10 表达,IL-10 基因启动子区－ 1082G/A、－ 819C/T 多态性与 IAs 的发病有关。     

ACE基因多态性与2型糖尿病肾病的相关性研究

目的 探讨血管紧张素Ⅰ转换酶(ACE)基因的插入／缺失多态性与2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)患合并肾病的关系。方法采用聚合酶链反应技术检测109例T2DM患(其中合并肾病患37例，未发生肾病患72例)和260例健康对照组ACE基因插入／缺失多态性。结果糖尿病肾病患的DD基因型频率和D等位基因频率有高于无肾病糖尿病患组的趋势，其频率差异接近显性水准(75．7％vs55．6％，P=0．070；87．8％vs77．1％，P=0．057)。DD基因型糖尿病患合并肾病的频率高于其他基因型，差异有统计学意义(41．2％vs22．0％，P=0．040)。对糖尿病病程与ACE基因多态性的交互作用分析发现，DD基因型与5年以上病程存在交互作用(OR=3．75，95％CI；1．019～13．795)。结论ACE基因的DD基因型可增高T2DM患并发肾病的危险性，并且与糖尿病病程有交互作用。     

HLA-A等位基因与2型糖尿病糖尿病肾病的相关性

目的：探讨2型糖尿病糖尿病肾病的发生与HLA-A等位基因间的关系。方法：利用基因芯片技术。根据HLA不同基因亚型的独特序列设计特异性的寡核苷酸分型探针。制成DNA分型芯片。用带荧光标记的PCR产物与芯片上的探针杂交，再应用特定计算机软件对杂交信号进行分析对比。以此确定样品的基因亚型。结果：天津地区2型糖尿病患者HLA-A2，A11，A24等位基因频率明显高于正常对照组，A33等位基因频率明显低于对照组；2型糖尿病并发肾病患者HLA-A11等位基因频率明显高于无肾病患者，HLA-A34等位基因频率明显低于无肾病患者。结论：HLA-A2，A11，A24可能是2型糖尿病的易感基因，HLA-A33等位基因则可能是2型糖尿病的保护基因：HLA-A11有可能是糖尿病肾病的易感基因，HLA-A34则可能是其保护基因。     

氯吡格雷在老年缺血性脑卒中患者的应用及CYP2C19 基因多态性对预后的影响

目的 探讨氯吡格雷在老年缺血性脑卒中患者中的应用及细胞色素P4502C19(CYP2C19)基因多态性对预后的影响.方法 选取收治的老年缺血性脑卒中患者144例,依据氯吡格雷抵抗情况将这些患者分为抵抗组(n=45)和非抵抗组(n=99)两组,测定两组患者的血小板聚集功能并检测其基因型,然后对2个单核苷酸多态性(SNPs)的等位基因频率及基因型频率、两组患者的2个SNPs分布情况进行统计分析.结果 CYP2C19(636G>A,rs4986893)(681G>A,rs4244285)等位基因及基因频率均和Hardy-Weinberg相符(P>0.05);抵抗组患者的CYP2C19?2(rs4244285)GG型分布率显著低于非抵抗组(P<0.05),GA+AA型分布率显著高于非抵抗组(P<0.05),且GA+AA型分布率显著高于GG型(P<0.05),但两组患者的CYP2C19?3(rs4986893)GG型、AG+AA型分布率之间均差异无统计学意义(P>0.05).结论 老年缺血性脑卒中患者的氯吡格雷抵抗和CYP2C19?2(rs4244285)GA+AA型关系密切,检测该基因型能够为氯吡格雷的临床科学应用提供有效指导,值得临床充分重视.