鲍曼不动杆菌高活性β-内酰胺酶检测与耐药性变迁

目的 了解中山大学附属第三医院鲍曼不动杆菌临床分离株AmpC酶、超广谱β-内酰酶（ESBLs）和金属β-内酰胺酶（MBLs）的产生情况及其耐药性。方法 采用Microscan WalkAway-40全自动微生物鉴定仪及配套阴性菌药敏复合板进行菌种鉴定与药敏试验,改良酶提取物头孢西丁和头孢曲松三维试验检测AmpC酶和ESBLs,E试验MBL试条检测MBLs。结果 AmpC酶和ESBLs产酶株总检出率为26．8％（57／213）,未检出产MBLs株。药敏结果提示对亚胺培南敏感率最高,其次是氨苄西林-舒巴坦、头孢吡肟、哌拉西林-他唑巴坦。结论鲍曼不动杆菌耐药性高,产生高活性β-内酰胺酶是介导其耐药的机制之一,亚胺培南仍是治疗该菌感染最为有效的药物。     

皖北地区耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌产金属β-内酰胺酶检测

目的了解皖北地区ICU病房内耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌产金属β-内酰胺酶（metallo-β-lactamase,MBL）情况。方法收集皖北地区3家教学医院ICU病房中不动杆菌,K-B纸片扩散法检测其对碳青霉烯类抗生素耐药情况;PCR法检测blaIMP、blaVIM等MBL基因。结果共收集35株耐亚胺培南、美罗培南非重复分离鲍曼不动杆菌菌株,其中9株（25.7%）金属酶初筛阳性;PCR检测5株（5/35,14.3%）产IMP型MBL,1株（1/35,2.9%）VIM型MBL。结论在本地区耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌中首次发现IMP和VIM型金属酶,提示产金属酶机制参与本地区鲍曼不动杆菌对碳青霉烯耐药,值得进一步关注。     

鲍曼不动杆菌超广谱β-内酰胺酶检测及耐药性分析

为了解厦门中山医院鲍曼不动杆菌产超广谱β 内酰胺酶(ESBLs)情况及耐药现状,指导临床用药,采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的纸片扩散法,测定 2002 ~2003年临床分离的 211株鲍曼不动杆菌产ESBLs的比例及其对头孢噻肟、阿米卡星等 13种抗菌药物耐药性特征。结果表明 211株鲍曼不动杆菌中ESBLs阳性 27株(占 12. 8% ),产ESBLs菌株对 13种抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs株。鲍曼不动杆菌的产ESBLs株有较高的交叉耐药性,采用纸片确证实验检出ESBLs对于临床用药有一定的指导意义。     

多重耐药鲍曼不动杆菌耐药性及β-内酰胺酶耐药基因的研究

研究多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药性及β-内酰胺酶耐药基因的携带情况。采用VIKET Compact 2 全自动细菌鉴定系统进行细菌鉴定,采用纸片扩散法（K-B法）测定鲍曼不动杆菌对抗菌药物的耐药性,应用聚合酶链反应（PCR）法检测β-内酰胺酶耐药基因。32株多重耐药鲍曼不动杆菌对13种常用抗菌药物的耐药率均>80%,对亚胺培南和美罗培南耐药率分别高达78.1%和71.9%,头孢哌酮/舒巴坦耐药率31.3%,多粘菌素B抗菌活性最好,耐药率0%。检出超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和头孢菌素酶（AmpC）耐药基因,未检出金属β-内酰胺酶（MBLs）耐药基因。32株多重耐药鲍曼不动杆菌TEM基因均阳性,17株检出PER基因,29株检出ADC基因。有16株菌同时携带TEM、PER、ADC基因。结果表明,同时携带TEM、PER、ADC基因是安徽医科大学解放军174临床学院鲍曼不动杆菌产生多重耐药性的原因之一。     

鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物敏感性的分析

目的:研究鲍曼不动杆菌感染情况及对常见抗生素的敏感性.方法:采用FORTUNE 2000细菌生化药敏鉴定分析仪测定其体外药物敏感性.结果:年龄分布为5～80岁,男性为280例,女性为136例.416株不动杆菌中有331例是鲍慢不动杆菌,占79.6%,鲍曼不动杆菌对美罗培南高敏,其他敏感次序为舒普深、阿米卡星、头孢吡肟等.结论:鲍曼不动杆菌耐药现象严重,诊断与治疗有赖于细菌培养和药物敏感结果,应引起临床的高度重视,一旦发现感染株,必须迅速采取控制措施,避免引起医院感染的暴发流行.     

鲍曼不动杆菌耐药性监测与碳青霉烯酶基因型研究

目的:对鲍曼不动杆菌耐药性及碳青霉烯酶基因型进行研究,以指导临床合理应用抗生素。方法:收集青岛市海慈医疗集团2009年6月至2010年6月从临床分离的鲍曼不动杆菌60株,用琼脂稀释法测定最低抑菌浓度(M IC),改良Hodge试验检测碳青霉烯酶,用PCR法检测OXA-23,OXA-24,OXA-58基因,并对PCR产物进行测序。结果:①鲍曼不动杆菌检出率前两位是ICU病房和呼吸科病房,分别占32.3%和27.4%,多重耐药鲍曼不杆菌阳性率最高的是ICU,为70.6%(12/17),其次为呼吸科病房,为35.0%(7/20),哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢曲松、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、美罗培南、庆大霉索、阿米卡星、环丙沙星、左氧氟沙星、加替沙星、头孢哌酮/舒巴坦、氨曲南耐药率分别为92.3%、55.4%、88.6%、86.3%、80.3%、30.0%、35.0%、76.6%、79.6%、75.1%、87.1%、48.3%、42.0%和79.6%.②在21株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌,有14株碳青霉烯酶表型阳性,检出率为66.7%,有18株PCR扩增出OXA-23基因,检出率85.7%,全部菌株blaOXA-24及blaOXA-58PCR扩增均为阴性,PCR产物测序表明与鲍曼不动杆菌(AY795964.1)blaOXA-23基因序列100%同源。结论:鲍曼不动杆菌多重耐药性严重;表型和基因型检测证实本院临床分离鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类耐药机制主要是产OXA-23型酶。     

鲍曼不动杆菌耐药性监测与碳青霉烯酶基因型研究

目的：对鲍曼不动杆菌耐药性及碳青霉烯酶基因型进行研究,以指导临床合理应用抗生素。方法：收集青岛市海慈医疗集团2009年6月至2010年6月从临床分离的鲍曼不动杆菌60株,用琼脂稀释法测定最低抑菌浓度（M IC）,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶,用PCR法检测OXA-23,OXA-24,OXA-58基因,并对PCR产物进行测序。结果：①鲍曼不动杆菌检出率前两位是ICU病房和呼吸科病房,分别占32.3%和27.4%,多重耐药鲍曼不杆菌阳性率最高的是ICU,为70.6%（12/17）,其次为呼吸科病房,为35.0%（7/20）,哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢曲松、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、美罗培南、庆大霉索、阿米卡星、环丙沙星、左氧氟沙星、加替沙星、头孢哌酮/舒巴坦、氨曲南耐药率分别为92.3%、55.4%、88.6%、86.3%、80.3%、30.0%、35.0%、76.6%、79.6%、75.1%、87.1%、48.3%、42.0%和79.6%.②在21株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌,有14株碳青霉烯酶表型阳性,检出率为66.7%,有18株PCR扩增出OXA-23基因,检出率85.7%,全部菌株blaOXA-24及blaOXA-58PCR扩增均为阴性,PCR产物测序表明与鲍曼不动杆菌（AY795964.1）blaOXA-23基因序列100%同源。结论：鲍曼不动杆菌多重耐药性严重;表型和基因型检测证实本院临床分离鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类耐药机制主要是产OXA-23型酶。     

鲍曼不动杆菌院内感染调查与耐药性分析

目的 研究鲍曼不动杆菌院内感染情况及对常用抗生素的敏感性。方法 采用Microscan Walk Away-40全自动微生物仪及配套药敏复合板进行细菌鉴定与药敏试验。结果 46株不动杆菌中有35株为鲍曼不动杆菌,占76．09％。主要分布在ICU、康复科、呼吸内科。标本主要以脓、痰及呼吸道分泌物为主。药敏结果显示：亚胺培南、头孢吡肟、阿米卡星对鲍曼不动杆菌高度敏感,但3代头孢菌素大多数耐药。结论 鲍曼不动杆菌易引起伤口、呼吸道继发感染,且耐药现象严重,诊断与治疗有赖于细菌培养和药物敏感结果,应引起临床的高度重视。一旦发现感染株,必须迅速采取控制措施,避免引起医院感染的暴发流行。     

多药耐药鲍曼不动杆菌老年患者分离株发现ADC型β-内酰胺酶基因新的变异型

目的调查多药耐药鲍曼不动杆菌老年患者分离株(MDR-ABA-5077)β-内酰胺酶基因分布情况。方法 MDR-ABA-5077株分离自宁波市医疗中心李惠利医院2009年7月住院老年患者,采用聚合酶联反应(PCR)及序列分析的方法分析21种β-内酰胺酶基因。结果本株MDR-ABA共检出3种β-内酰胺酶基因:TEM、SHV、ADC,其余18种β-内酰胺酶基因未检出。ADC阳性基因测得序列经BLAST比对与已在GenBank登录的ADC型AmpC均不相同,经与GenBank登录的ADC型序列分子进化分析,确认为ADC型β-内酰胺酶新的变异型。结论本株MDR-ABA多种β-内酰胺类药物耐药与产TEM、SHV、ADC等3种β-内酰胺酶相关。     

不动杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶调查

目的了解不动杆菌属产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及耐药分析。方法用K-B琼脂扩散法进行药敏试验,三维试验检测不动杆菌属产生的AmpC酶和ESBLs。结果169株不动杆菌,产ESBLs 43株(25.6%),产AmpC酶41株(24.4%),同时产超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶10株(5.8%);产AmpC酶的菌株耐药情况比产ESBLs的菌株严重。结论不动杆菌属产AmpC酶和ESBLs的比例较高,应合理使用抗生素,才能有效控制感染。     

从耐药鲍曼不动杆菌中发现β-内酰胺酶ADC基因和膜孔蛋白carO基因新的变异型

目的 调查一组耐药鲍曼不动杆菌中β-内酰胺酶基因和膜孔蛋白基因的存在和变异情况.方法 收集2010年1月至2010年12月浙江某医院ICU患者痰液标本中分离的多耐药和泛耐药鲍曼不动杆菌各10株,用分子鉴定法鉴定菌种,再用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析34种β-内酰胺酶基因与膜孔蛋白carO基因.结果 本组20株耐药鲍曼不动杆菌共检出TEM-1型20株(100％)、OXA-23型10株(50.0％)、ADC-30型12株(60.0％)、ADC基因新的变异型ADC-60型8株(40.0％)(GenBank登录号:JQ692087).10株PDR菌均检出OXA-23型β-内酰胺酶基因,而10株MDR菌则均未检出OXA-23型β-内酰胺酶基因.20株耐药鲍曼不动杆菌膜孔蛋白carO基因均存在有义突变,19株测得序列相同,翻译成氨基酸序列后与鲍曼不动杆菌敏感株(SDF)比较,一致率为76.0％.8号株carO基因序列与其他19株测得DNA序列不同,第351位缺失了12个碱基并导致过早出现终止密码子.结论 本组鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类药物耐药主要与产TEM、ADC、OXA-23和carO基因存在有义突变相关.OXA-23型β-内酰胺酶基因阳性是PDR菌耐碳青霉烯类药物的原因.ADC基因存在新变异型:ADC-60是国内外首次报道.     

29株耐亚胺培南和/或美罗培南鲍曼不动杆菌产碳青霉烯酶基因型检测

目的 了解临床分离耐亚胺培南和/或耐美罗培南鲍曼不动杆菌中产碳青霉烯酶的基因型别.方法 采用聚合酶链反应扩增IMP、VIM、OXA型碳青霉烯酶基因并测序.结果 29株对碳青霉烯类耐药的鲍曼不动杆菌中,以产OXA-24型和IMP型酶菌株最多,二者均占51.7％ (15/29).产OXA-24+ IMP型5株、OXA-24+ OXA-51+IMP型4株、VIM型4株、OXA-24+ OXA-58+ IMP型、OXA-23+ OXA-24+ IMP型各2株,OXA-23+IMP型、OXA-51+OXA-24型、OXA-24型、IMP型各1株,8株细菌PCR检测结果为阴性.结论 耐亚胺培南和/或美罗培南鲍曼不动杆菌主要产OXA-24型和IMP型碳青霉烯酶,部分菌株可同时产2种或以上碳青霉烯酶.     

鲍曼不动杆菌耐药表型与基因型分析

目的了解杭州市第一人民医院临床分离的鲍曼不动杆菌菌株分布及其对常用抗菌药物的耐药性和耐药基因分布。方法分析2015年1月至12月杭州市第一人民医院常规细菌分离培养的鲍曼不动杆菌的分布情况以及耐药性,从中筛选出40株多重耐药菌株(MDR-AB),并采用聚合酶链式反应(PCR)检测相关耐药基因。结果共检出1 112株鲍曼不动杆菌,其中以痰液标本的分离率最高82.37%(916/1 112),其次为洁尿8.99%(100/1 112)。临床分布以ICU为主61.60%(685/1 112),其次为老年干部病房11.60%(129/1 112)以及呼吸内科9.98%(111/1 112)。鲍曼不动杆菌对21种常用抗菌药物的耐药率中以替加环素耐药率最低9.8%(109/1 112),其次为阿米卡星25.2%(280/1 112);对头孢西丁、头孢美唑、阿莫西林/克拉维酸耐药率最高分别为99.7%(1 109/1 112)、100.0%(1 112/1 112)、98.8%(1 099/1 112)。40株MDR-AB菌株耐药基因Tem、SHV、CTX-M-9、OXA-23、aac(3)-II、aac(6′)-Ⅰ、aac(6′)-II、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ、ParC、GyrA、tetA、tetR检出率分别为65.0%、72.5%、70.0%、72.5%、2.5%、55.0%、87.5%、55.0%、40.0%、92.5%、87.5%、15.0%、12.5%。结论本院鲍曼不动杆菌耐药情况严重,耐药机制复杂。     

鲍曼不动杆菌的耐药性及金属酶基因型的分析

目的 探讨本地区鲍曼不动杆菌的耐药性及耐亚胺培南鲍曼不动杆菌(IRAB)金属酶基因型的分布情况,为临床使用抗生素提供帮助.方法 回顾性分析1 614株鲍曼不动杆菌的耐药情况,PCR检测金属酶基因型.结果 (1)1 614株IRAB的检出率为63.82％ (1030/1614),以重症监护室检出率最高占46.22％(746/1614).(2)抗菌药物的耐药率:其中米诺环素(28.51％)和多粘菌素B(6.10％)的耐药率最低,其他药物的耐药率均＞40.0％.(3) IRAB产金属酶基因型的以OXA-23为主.结论 监测鲍曼不动杆菌的耐药率,有助于有效控制鲍曼不动杆菌引起的医院内感染.     

鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类药物的耐药性及相关耐药基因的研究

采用琼脂二倍稀释法及聚合酶链式反应(PCR)对36株鲍曼不动杆菌的耐药性及相关耐药基因(blaTEM、blaSHV、blaIMP、blaVIM、blaOXA-23)进行检测。结果表明,36株鲍曼不动杆菌对哌拉西林和替卡西林的耐药率最高,为94.4%;对亚胺培南的耐药率最低,为52.8%;在β-内酰胺酶耐药基因检测过程中,发现有3株菌株携带有blaTEM、blaVIM、blaOXA-233种基因,且对12种实验药物均耐药,表明菌株的耐药性与其携带的耐药基因数目有关,数目越多,耐药性越强。     

鲍曼不动杆菌噬菌体的研究进展

鲍曼不动杆菌能引起严重的院内感染,近年来鲍曼不动杆菌的耐药性越来越强,给治疗和控制感染带来极大困难。噬菌体可在宿主菌内复制并可破坏宿主菌,而对动植物没有毒性。因此,噬菌体以其特有的自然特征有望成为较好的抗菌制剂,作为一种新兴的治疗方法,已经越来越受到人们的关注,对噬菌体展开广泛和深入的研究具有重要的基础意义和潜在的临床应用价值。     

不动杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药分析及其检测

不动杆菌是重要的条件致病菌,对β-内酰胺类抗生素的耐药性在逐年增加,给治疗带来了很大的困难,因此对其耐药机制和检测方法的了解很有必要。     

耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌插入序列及其水平传播

目的 了解我院耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的临床分布并探讨插入序列与其耐药的关系,分析水平传播能力,为指导医院感染及临床合理应用抗菌药物提供科学依据。方法 收集2013年9月‒2015年6月我院临床分离鲍曼不动杆菌,经VITEK-II全自动细菌分析系统鉴定细菌并检测16S rRNA,Walkway-40/药敏测试系统进行药敏检测;多重PCR检测鲍曼不动杆菌携带β-内酰胺酶（A、B、C、D类）相关耐药基因。检测上游插入序列ISAba1与OXA-23、OXA-51、ADC连锁表达,并分析ISAbal与耐药基因OXA-23、ADC的相关性。质粒接合试验验证OXA碳青霉烯酶基因的水平转移。结果 耐碳青霉烯类的鲍曼不动杆菌（CRAB）与碳青霉烯类敏感的鲍曼不动杆菌（CSAB）抗生素耐药率差异有统计学意义（Ps<0.01）。CRAB与CSAB产酶基因（OXA-23、ADC、TEM）检出率差异明显。50株CRAB中40株检测出ISAbal-OXA-23连锁基因,1株检测出ISAbal-OXA-51连锁基因。接合试验阳性株检测出OXA-23、OXA-24、OXA-51及插入序列。结论 我院CRAB主要是产OXA-23、OXA-24、OXA-51、ADC、TEM型碳青霉烯酶,ISAbal常出现在OXA-23基因上游,ISAbal-OXA-23可能是CRAB重要的耐药机制。     

鲍曼不动杆菌临床菌株生物膜形成能力的研究

目的对鲍曼不动杆菌临床菌株的生物膜形成能力进行对比研究,并分析生物膜形成的一些可能的影响因素。方法利用在聚苯乙烯板上构建生物膜的技术对51株全耐药的鲍曼不动杆菌的生物膜形成能力进行检测,同时对分离自下呼吸道和无菌体液的各20株鲍曼不动杆菌的生物膜形成能力进行研究,然后对新近报道的鲍曼不动杆菌生物膜形成相关基因abaI在所有菌株中的分布情况进行检测。结果 51株全耐药的鲍曼不动杆菌中35株(68.6%)可以形成生物膜,并且形成生物膜的能力较强。50%(10/20)分离自下呼吸道的鲍曼不动杆菌能够形成生物膜,20株无菌体液中分离的菌株仅有1株可以形成生物膜。78.0%(71/91)鲍曼不动杆菌中abaI基因扩增阳性。结论分离自下呼吸道的鲍曼不动杆菌临床菌株有较强的生物膜形成能力,abaI基因广泛存在于鲍曼不动杆菌临床菌株中。临床在治疗鲍曼不动杆菌感染的同时需要考虑其在感染部位形成生物膜的因素,可能在治疗的同时有必要加入一些对生物膜有穿透性的药物。     

产超广谱β-内酰胺酶细菌耐药性基因型分析

检测我院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性和基因型。表型确定临床分离产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌56株,应用PCR基因扩增技术及双脱氧DNA测序方法,分别对TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-2和CTX-M-9编码基因进行分析。产酶菌株对亚胺培南、美洛培南、阿米卡星、头孢吡肟耐药性较低,对其他16种抗生素耐药性较高。在56株菌株中有50株为CTX-M型,占89%,34株为TEM型(60.7%),20株SHV型(35.7%);其中CTX-M-9型共计39株占78%,CTX-M-1型19株占38%,CTX-M-2型16株占32%。产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性值得关注,主要临床流行基因型是CTX-M型。