离心沉淀集菌涂片法检查痰内结核分枝杆菌

目的建立一种操作简单、阳性检出率高的痰涂片结核分枝杆菌检查方法.方法采用离心沉淀集菌涂片技术,检测53例肺结核患者痰内结核分枝杆菌,与漂浮集菌涂片、直接涂片法进行比较.结果 53例肺结核患者痰内结核分枝杆菌检出率改良离心沉淀集菌涂片法为62.3%,漂浮集菌涂片法为39.6%,直接涂片法为45.3%.结论离心沉淀集菌涂片法痰内结核分枝杆菌检出率显著高于漂浮集菌涂片法和直接涂片法,值得推广应用.     

离心沉淀集菌涂片法检查痰内结核分枝杆菌

目的 建立一种操作简单、阳性检出率高的痰涂片结核分枝杆菌检查方法。方法 采用离心沉淀集菌涂片技术，检测53例肺结核患者痰内结核 分枝杆菌，与漂浮集菌涂片、直接涂片法进行比较。结果 53例肺结核患者痰内结核分枝杆菌检出率改良离心沉淀集菌涂片法为62．3％，漂浮集菌涂片法为39.6%，直接涂片法为45.3%。结论 离心沉淀集菌涂片法痰内结核分枝杆菌检出率显著高于漂浮集菌涂片法和直接涂片法，值得推广应用。     

3种检测方法在HIV合并结核分枝杆菌感染诊断中的对比研究

目的对比3种检测方法在HIV合并结核分枝杆菌感染中的诊断价值,以期找到最优的检测方法或检测方法组合。方法收集2013年1月至2015年12月确诊为HIV合并结核分枝杆菌感染患者的各类标本115份。每例患者均用相同类型的标本进行直接涂片抗酸染色镜检、罗氏培养和实时荧光定性PCR法检测。结果以任意1种标本检出阳性计算阳性率,115例HIV合并结核分枝杆菌感染患者的标本直接涂片抗酸染色法与罗氏培养法检测的阳性率比较,差异有统计学意义(χ~2=19.865,P=0.001);直接涂片抗酸染色法与实时荧光定性PCR法检测的阳性率比较,差异有统计学意义(χ~2=0.028,P=0.001);罗氏培养法与实时荧光定性PCR法检测的阳性率比较,差异无统计学意义(χ~2=21.261,P=0.868)。应用罗氏培养法来检测脓液、粪便和尿液,其检出率都达到了100.0%。实时荧光定性PCR法检测脑脊液、胸腔积液及腹水等含菌量较少的标本,检出率达到100.0%。罗氏培养法与实时荧光定性PCR法在检测痰液标本时检出率也较高(80.0%)。而从标本类型上来看,脓液标本3种方法均全部检出结核分枝杆菌,粪便和尿液标本用培养的方法检测结核分枝杆菌阳性率均为100.0%。支气管肺泡灌洗液的检出率也较高,均大于70.0%。结论实时荧光定性PCR在检测低排菌量标本如脑脊液、胸腔积液及腹水时具有明显优势;脓液标本3种方法均全部检出结核分枝杆菌,粪便和尿液标本用培养的方法均能100.0%检测出结核分枝杆菌。     

肺结核病人痰标本中结核分枝杆菌检查结果分析

[目的]评价肺结核病人痰标本中结核分枝杆菌的直接涂片显微镜检和培养检查的临床效果。[方法]采用直接厚涂片萋-尼氏法抗酸染色显微镜检和BACTEC-TB960快速培养系统对1340例肺结核病人痰标本进行检测。[结果]快速培养法检测的阳性率为36.6％，直接涂片镜检的阳性率为24.6％，两种检测法的阳性率有显著性差异（P〈0.01）；两种方法联合检测的阳性率为4l％，高于培养法阳性率（P〈0.05）。痰标本的留取时间对培养法检出率有很大影响，晨痰检出率高于即时痰（P〈0.05）。[结论]提高肺结核病人痰标本中结核分枝杆菌检出率的有效方法是采用直接涂片镜检与培养法联合进行检测，同时应重视痰标本留取时间对检出率的影响。     

基因芯片法和涂片法在肺部感染分枝杆菌诊断中的应用评价

目的探讨基因芯片法和涂片法检测分枝杆菌的一致性。方法采集肺部感染患者痰标本先进行直接涂片查找抗酸杆菌,然后用基因芯片法平行检测分枝杆菌。对两种方法的结果进行统计,分析两种方法的差异性。结果 136例患者痰标本用基因芯片法共检测出抗酸杆菌69例,阳性率为50.7%,其中结核分枝杆菌56例(81.2%),非结核分枝杆菌13例(18.8%);涂片法共找到抗酸杆菌50例,阳性率为36.8%。结论基因芯片法检测抗酸杆菌的阳性率明显高于涂片法,而且可以检测出抗酸杆菌的种类,其结果明显优于涂片法,为临床鉴别肺部疾病提供了重要依据。     

夹层杯离心集菌涂片法检测痰液抗酸杆菌的临床应用研究

目的探讨夹层杯离心集菌涂片法检测痰液抗酸杆菌的临床应用价值。方法同时用液基夹层杯离心集菌涂片法、直接涂片法和罗氏培养法对收集的864例晨痰标本进行检测,并比较检测结果。结果夹层杯法、直接法和培养法检测864例晨痰标本的阳性率分别为17.59%、5.67%和18.63%,夹层杯法阳性率明显高于直接涂片法(P<0.05);以培养法为标准,夹层杯法的敏感性、特异性、阳性预期值、阴性预期值及准确性分别为93.16%、99.71%、98.68%、98.46%和98.50%。结论夹层杯离心集菌涂片法是一种阳性率高、更利于标准化和简便化的抗酸杆菌检验方法,其阳性率高于直接涂片法,并与培养法相比有较好的符合率,可能是一种值得推广的检测方法。     

结核分枝杆菌快速培养基临床应用研究

目的 评价分枝杆菌变色液体培养基快速检测痰标本结核分枝杆菌的可靠性.方法 将230例疑似肺结核患者痰标本接种于分枝杆菌变色液体培养基和酸性罗氏培养基培养,进行对照平行测定.结果 230例痰涂片标本检出阳性率为27.8%;变色液体培养基和酸性罗氏培养基培养阳性率分别为47.4%,47.0%,两种方法阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 分枝杆菌变色液体培养基检测结核分枝杆菌具有特异、快速、可靠等优点,对结核病患者的早发现、早治疗具有积极意义.     

直接杂交法检测痰液中结核分枝杆菌

目的 建立了一种高度灵敏、特异、快速和简便的探针杂交检测技术，以解决临床上结核病快速诊断的难题。方法 采用简易的方法处理标本，以对结核分枝杆菌特异的生物素标记188bpDNA探针进行点杂交，与链霉亲合素标记的辣根过氧化酶偶联后，以化学发光自显影方式记录检测信号。结果 此法的第三性可检出200个菌，较PCRI地为高，对20种分枝杆菌和9种非分枝杆菌检测时发现只有结核分枝杆菌呈阳性，以本法检测104例临床标本。结果发现，对其中45例结核病人痰涂片阳性标本。41例结核病人痰涂片阴性标本和18例非结核标本。检测阳性率分别为100%、65.9%和0.0%。结论 本法简便，特异。     

河南省尉氏县结核病的病原学调查及结核分枝杆菌耐药性分析

目的 调查河南省结核病的分枝杆菌菌种类型、分布特征及耐药状况。 方法 对研究现场所有疑似结核病患者进行痰涂片和痰菌培养;用鉴别培养基和双重聚合酶链反应(PCR)方法对分离的菌株进行菌种鉴定,用比例法进行药物敏感性检测。 结果 共收集患者2661份痰标本,应用痰涂片、痰培养和双重PCR三种方法联合应用进行病原学分析,发现涂片阳性者179份(占6.5%);培养阳性菌株245份,阳性率为9.2%,其中225株为结核分枝杆菌,占91.8%,结核分枝杆菌复合群6株,占2.4%,13株为非结核分枝杆菌(NTM),占5.3%,1株为结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌混合感染,占0.4%。药敏检测显示结核分枝杆菌总体耐药率为24.0%(54/225),4种药物的耐药率链霉素16.9%(38/225),异烟肼 16.0%(36/225),利福平 9.8%(22/225),乙胺丁醇8.4%(19/225)。耐单药菌株20株,占8.9% ,耐2种药以上的多药耐药为15.1%(34/225),其中,同时耐异烟肼和利福平及2种以上抗生素菌株即耐多药株(MDR-TB)菌株19株,占8.4%(19/225)%。男、女性结核病患者耐药率差异无统计学意义(2=2.8214,P0.05),耐药与年龄的相关性差异有统计学意义(2=8.3868,P0.05),复治病例耐药率与初治病例耐药率差异有统计学意义(2=13.7193,P0.05);复治病例MDR-TB耐药率与初治病例MDR-TB耐药率差异有统计学意义(211.1361,P0.05)。 结论 河南省尉氏县的结核病病原菌包括结核分枝杆菌、结核分枝杆菌复合群及非结核分枝杆菌,耐药情况较为严重,尤其对复治病例、较年轻病例应引起重视。     

支气管肺泡灌洗液中分支杆菌检查方法的研究

目的 :研究痰涂片阴性的肺结核病人支气管肺泡灌洗液 (BAL F)标本的最佳检查方法。方法 :采用直接涂片法、沉淀集菌法、改良罗氏培养法和 BACTEC快速培养法进行分支杆菌检测。结果 :直接涂片法检出 4例 ,阳性率 2 .6 % ;沉淀集菌法检出 18例 ,阳性率 11.6 % ;改良罗氏培养法检出 2 8例 ,阳性率 18.1% ;BACTEC快速培养法检出 46例 ,阳性率 2 9.7%。结论 :支气管肺泡灌洗液检查分支杆菌 ,最好是沉淀集菌法和改良罗氏培养法同时进行 ,才能达到高的检出率。     

液基夹层集菌技术检测痰标本中抗酸杆菌对诊断肺结核的应用价值

目的 评价液基夹层集菌技术检测抗酸杆菌对肺结核诊断的应用价值.方法 对134例肺结核病人晨痰标本同时进行液基夹层集菌技术与直接痰涂片进行镜检检测抗酸杆菌,比较两种方法的阳性检出率.选取10份抗酸杆菌阳性痰标本,将处理后的消化痰液接种到罗氏培养基,37℃培养,来评价液基夹层集菌技术的安全性.结果 液基夹层集菌技术和直接痰涂片检测抗酸杆菌的阳性率分别为28.4％（38/134）和16.4％（22/134）,检测结果差异有统计学意义.安全性试验发现经消化液处理的痰标本,培养8周后未见分枝杆菌生长.结论 液基夹层集菌技术提高了肺结核病人痰标本的阳性检出率,且操作简单、安全性高,是一种很有推广价值的检测方法.     

结核菌特异性IFN-γ检测在骨关节结核诊断中的初步应用

目的探讨酶联免疫斑点试验（ELISPOT）检测结核特异性IFN-γ在骨关节结核病患者中的诊断价值。方法收集2009年5月至2011年5月期间,深圳市第三人民医院收治并确诊为骨关节结核病患者及其临床资料,共90例,比较分析ELISPOT检测、涂片染色镜检、结核菌培养、聚合酶链反应（PCR）检测结核菌DNA以及病理检查诊断在骨关节结核病中的阳性率。结果 90例临床确诊骨关节结核患者中,ELISPOT检测阳性率为75.6%,涂片染色法（27.9%）,结核菌培养法（51.7%）,聚合酶链反应PCR（53.0%）,病理诊断（39.1%）,ELISPOT阳性率显著高于其它临床常用检测方法,差异有统计学意义（P〈0.05）;ELISPOT联合涂片染色法、结核菌培养法及PCR检测法,阳性率分别达到80.9%、88.3%、87.9%,当ELISPOT、结核菌培养法和PCR检测法三者联合应用时,阳性率高达90.7%。结论 ELISPOT检测方法在骨关节结核患者中有一定辅助诊断价值,与临床常规检测方法相结合有助于提高诊断率。     

基因芯片在分枝杆菌菌种鉴定及结核耐药基因检测的诊断价值

目的探讨基因芯片检测系统在分枝杆菌菌种鉴定及耐药基因检测中的临床应用价值。方法应用基因芯片技术对疑似结核病和非结核分枝杆菌病患者的痰液、尿液、胸腹腔积液、脑脊液和穿刺液等标本进行核酸检测;并对分枝杆菌阳性样本进行利福平及异烟肼的耐药基因检测。结果 91例标本中共检出结核分枝杆菌复合群16例,非结核分枝杆菌2例（戈登分枝杆菌1例、偶然分枝杆菌1例）,分枝杆菌检出总阳性率为19.8%（18/91）,其中结核分枝杆菌占17.6%（16/91）,非结核分枝杆菌占2.2%（2/91）;不同标本类型检出阳性率有差别,由高到低依次为穿刺脓液（33.3%）、痰液（24.0%）、胸腹腔积液（18.8%）、脑脊液（16.7%）和尿液（15.8%）。有57例患者同时进行了基因芯片法和涂片抗酸染色法检测,其中芯片法有16例阳性,阳性率为28.1%（16/57）,涂片法有3例阳性,阳性率为5.3%（3/57）,两种方法比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。18例分枝杆菌阳性标本进一步进行耐药基因检测,有4例发生耐药基因突变,其中2例（1例戈登分枝杆菌）为利福平耐药相关基因,ropB基因526位点发生C→G突变,1例为ropB基因531位点发生C→T突变,还有1例为异烟肼耐药相关基因,inhA基因启动子-15位点发生C→T突变;没有检测到多重耐药株。结论基因芯片技术适用于不同标本类型的分枝杆菌菌种鉴定及耐药基因检测,操作简便快速,灵敏度高,特异性好。     

实时荧光定量聚合酶链反应技术在结核性脑膜炎中的诊断价值

目的 用涂片、实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测结核分枝杆菌,探讨其临床应用价值.方法 对临床确诊的结核性脑膜炎(n =110)、可疑结核性脑膜炎(n=205)和非结核性脑膜炎(n=100)患者的脑脊液标本分别采用涂片、RT-PCR两种方法进行检测,对结果进行对比分析.结果 415例脑脊液标本中,脑脊液涂片检查阳性率为2.4％(10/415),PCR检测阳性率为12.5％(52/415);脑脊液涂片、PCR法检测110例临床确诊的结核性脑膜炎患者脑脊液标本阳性率分别为6.4％(7/110)、26.4％(29/110);检测205例临床可疑结核性脑膜炎患者脑脊液标本阳性率分别为1.5％(3/205)、11.2％(23/205).比较两种方法的阳性检测率,差异有统计学意义(P＜0.05),检测100例非结核患者脑脊液标本,涂片及PCR检测均为阴性.结论 RT-PCR法检测脑脊液中TB-DNA对结核性脑膜炎的诊断有决定意义,具有较高临床应用价值.     

HIV/AIDS合并结核感染患者中分枝杆菌检测技术比较和耐药表型研究

目的 对HIV/AIDS合并结核分枝杆菌(MTB)感染实验室诊断技术进行比较研究,分析患者MTB的药物敏感性和耐药表型.方法 应用T-SPOT.TB试剂盒和rRNA扩增直接检测(MTD)试剂盒对HIV/AIDS合并MTB感染患者进行检测,同时做抗酸杆菌涂片、TB-DNA和结核菌培养,比较以上几种实验方法 阳性检出率.对MTB培养阳性的患者做五种药物(异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、吡嗪酰胺)敏感性试验.结果 T-SPOT.TB对HIV/AIDS合并MTB感染阳性检出率为68.1%(64/94),明显高于其他四种实验方法,MTD的阳性检出率为40.0%(30/75),涂片查抗酸杆菌阳性率18.1%(17/94),TB-DNA阳性率35.5%(27/76),结核菌培养阳性检出率为26.6%(25/94);T-SPOT.TB与其他四种实验方法 比较有明显统计学差异(P<0.01);MTD阳性检出率高于其他三种方法,但与TB-DNA、结核菌培养比较无差异,与涂片查抗酸杆菌比较有统计学差异(P<0.05).T-SPOT.TB、PPD检测结核的敏感度随CD4 T淋巴细胞水平的升高而增强.25例确诊HIV/AIDS合并结核患者中,五种药全敏感76.0%(19/25),耐多药耐药率为16.0%(4/25),单耐异烟肼耐药率8.0%(2/25).结论 T-SPOT.TB和MTD在HIV/AIDS合并MTB感染中是一种快速敏感的检测方法,可作为HIV/AIDS合并结核感染的辅助诊断.大部分HIV/AIDS合并结核患者对目前一线抗结核药仍敏感,但耐药患者多为耐多药.     

结核分枝杆菌检测方法临床应用的对比研究

目的用涂片、聚合酶链反应(PCR)法检测结核分枝杆菌,探讨其临床应用价值。方法对169例临床确诊的肺结核患者、可疑肺结核患者和非结核患者痰标本用涂片、PCR两种方法进行检测,对结果进行对比分析。结果 169例痰标本中,痰涂片检查阳性率为7.1%(12/169),PCR检测阳性率为32.54%(55/169);痰涂片、PCR法检测42例临床确诊的肺结核患者痰标本阳性率分别为11.9%(5/42)、57.1%(24/42);检测82例临床可疑肺结核患者痰标本阳性率分别为8.54%(7/82)、37.8%(31/82)。比较两种方法的阳性检测率,差异有统计学意义(χ2=19.729,P<0.01),检测45例非结核患者痰标本,涂片及PCR检测均为阴性。结论 PCR法检测结核分枝杆菌具有较高的敏感性和特异性,可作为临床结核病检测诊断的有效方法之一。     

应用痰模型涂片法检测抗酸杆菌结果分析

目的评价痰模型涂片法检测抗酸杆菌的应用价值。方法应用组、研究组分别收集初诊活动性肺结核患者的痰标本780例、1 089例,应用模型涂片法检测抗酸杆菌,两组检测结果采用χ2检验进行比较。结果应用组与研究组应用痰模型涂片法检测抗酸杆菌的阳性检出率分别为29.74%(232/780)、31.68%(345/1 089)(χ2=0.799;P>0.05),差异无统计学意义,5项质量指标合格率均较高,分别为痰细胞(94.10%～94.21%)、痰膜大小(98.72%～98.99%)、厚薄(95.64%～96.14%)、染色(93.72%～94.49%)、痰膜脱落(97.18%～97.43%),两组痰涂片5项质量指标差异均无统计学意义(P值均大于0.05),说明应用组与研究组检测结果差异无统计学意义。结论痰模型涂片法检测抗酸杆菌,实现了涂片标准化,提高了制片质量和阳性检出率,灵敏度高,重复性好,实用性强,简单易行,特别适合于基层实验室应用。     

1262例拟似肺结核初发患者的痰液性状、排菌量的分析

[目的]探讨拟似肺结核初次发病（初发）和初发肺结核病人,不同性质的痰标本的结核分枝杆菌涂片阳性分布（涂阳）对结果的影响。提高诊断的准确性。[方法]1262例拟似肺结核初发患者,其中927例最终排除了肺结核,335例确诊为初发肺结核的患者。对痰液标本3751份,性状,结核分枝杆菌的数量分级的比较。确诊患者的涂片和培养阳性率的比较。[结果]初发结核病人中,涂片阳性占75．2％,培养阳性占83．9％。分别为涂片培养双阳性60．30％,单涂片阳性15．52％,单培养阳性24．18％。培养的阳性率明显高于涂片（P〈0．05）。不同痰标本的涂片阳性率分别是：血样痰42．7％、1二乳样痰40．10％较黏液痰32．60％、气管镜27．50％、水样痰17．40％差异非常显著（P〈0．01）。结核分枝杆菌阳性数量分级分布为：干乳样痰、血样菌痰、黏液样痰4级多见;水样痰、气管镜1级多见。[结论]初发病人痰培养与痰涂片二者都应重视,呵增加涂片次数。不同性状的痰分级可以观察到排菌量的不同,重视干乳样、黏液样痰检查,水样痰检查不能忽视,不能过分依赖皿样痰作诊断。     

结核抗体蛋白芯片法对老年肺结核的诊断价值研究

目的探讨结核抗体蛋白芯片法对老年肺结核的诊断价值。方法选择93例肺结核及77例肺部非特异性感染老年患者,均行痰涂片抗酸染色试验,均采用结核分枝杆菌IgG抗体检测试剂盒(蛋白芯片)检测抗结核分枝杆菌脂阿拉伯甘露醇(LAM)、基因工程重组的16 kD和38 kD的IgG抗体,计算两种方法诊断结核分枝杆菌感染的敏感性及特异性;并分别构建受试者工作特征曲线,通过比较曲线下面积(area under the curve,AUC)评价其诊断效能。结果蛋白芯片法和痰涂片抗酸染色试验诊断结核分枝杆菌感染的敏感性分别为68.82%和33.33%,特异性分别为100.00%和97.40%;AUC分别为0.84和0.65,提示蛋白芯片法的诊断效能显著高于痰涂片抗酸染色法,差异有统计学意义(P0.01)。结论蛋白芯片法检测抗结核分枝杆菌LAM、16 kD和38 kD抗体快捷简便,对诊断老年肺结核有较高的实用价值。