MTT比色法测定羟基喜树碱和平阳霉素对Acc—M细胞作用的实验研究

为观察体外应用羟基喜树碱（HCPT）、平阳霉素（PYM）两种药物单用和两两联合应用对人腺样囊性癌Acc—M细胞的生长抑制作用，采用MTT法研究用药前后细胞增殖活性的影响，用流式细胞仪观察细胞凋亡及细胞周期变化。结果表明，两种药单用及两药合用对细胞均有很好的抑制作用，且以HCPT和PYM合用最强。HCPT和PYM单用和合用可使细胞的群体倍增时间显著延长，克隆形成率降低，细胞凋亡率增加，以联合用药为佳。结论：HCPT、PYM单独及联合用药均对Acc—M细胞在体外有很好的抑制作用，且与以联合应用效果更佳。     

硒酸酯多糖与紫杉醇联合应用对肝癌HepG-2细胞生长的抑制作用

目的体外观察硒酸酯多糖(KSC)与紫杉醇(Taxol)对肝癌细胞HepG-2生长的协同抑制效应,并探讨其作用机制。方法 MTT法观察KSC和Taxol单用及合用对HepG-2细胞的抑制作用,并计算两药合用72 h的IC50及合用指数CDI;采用荧光显微镜、流式细胞仪观察上述药物作用后HepG-2细胞形态学、细胞周期及凋亡率的改变。结果MTT结果显示,KSC与Taxol均能显著抑制HepG-2细胞的增殖,且具有时效-量效关系,联合组效果优于单一用药组;KSC、Taxol单用72 h的IC50分别为46.632 mg.L-1和1.684 nmol.L-1,两药联合应用后的IC50分别降至31.684 mg.L-1和0.272 nmol.L-1。30 mg.L-1的KSC与0.5~5 nmol.L-1的Taxol联合效果表现为协同作用(CDI<1.0)。细胞形态学观察可见细胞数减少,细胞核明显变小,并可见致密强荧光及凋亡小体。流式细胞术结果显示两药均作用于S期,联合组既可发生S期周期阻滞,又可诱导凋亡,但凋亡率低于Taxol单独组。结论 KSC与化疗药物Taxol联合可产生协同作用,诱导肿瘤细胞周期阻滞可能为其主要...     

抗癌多肽A38对胃癌细胞SGC-7901凋亡的影响

目的:探讨经计算机辅助药物设计的抗癌多肽A38,或与顺铂联合应用对人胃癌细胞株SGC-7901的体外生长抑制作用及对肿瘤细胞早期凋亡的影响。方法:将人胃癌细胞株SGC-7901与不同浓度的A38、顺铂及A38+顺铂(DDP)分别进行体外培养,采用四甲基偶氮唑蓝法测定不同浓度的A38、顺铂及联合用药组在作用24,48,72 h后对SGC-7901细胞的生长抑制率;流式细胞仪分析细胞的凋亡率。结果:不同浓度A38、顺铂及联合用药后,SGC-7901细胞生长抑制率在不同浓度不同时段较对照组均显著增加(P均<0.01),联合用药组细胞生长抑制率较两单药组也明显增强(P均<0.01),呈现明显时效和量效关系。流式细胞仪检测凋亡结果显示:A38、顺铂及联合用药后,SGC-7901细胞的凋亡率在不同浓度不同时段较对照组均显著增加(P均<0.01),联合用药组细胞的凋亡率较两单药组也明显增加(P均<0.01)。结论:A38能抑制人胃癌细胞株SGC-7901细胞生长,诱导肿瘤细胞早期凋亡,小剂量顺铂与A38联用具有协同抑制作用,且效果比高浓度下的单用A38或单用顺铂的抑制作用明显。     

吉西他滨和依托泊苷联合应用对人卵巢癌3AO细胞系的作用

目的：观察吉西他滨和依托泊苷联合应用对人卵巢癌3AO细胞系的抑制效应,并初步探讨其作用机制。方法：用MTT法检测化疗药物对人卵巢癌3AO细胞系的抑制率（Fa）;FCM（流氏细胞术）检测肿瘤细胞周期分布和细胞凋亡。结果：吉西他滨和依托泊苷单用或合用对人卵巢癌3AO细胞系均有抑制作用,且呈剂量和时间依赖性;通过中效原理计算CI（合用指数）合用48h后,两种药物的CI〈1,呈协同作用。合用72h后,当Fa〈0.78时,合用指数CI〈1,两种药物之间是协同作用,而当Fa〉0.78时,合用指数CI〉1,两种药物之间呈拮抗作用;吉西他滨和依托泊苷二者联合应用对细胞周期没有影响,但凋亡率明显提高。结论：吉西他滨和依托泊苷单用或合用对3AO均有抑制作用,且呈剂量、时间依赖性。合用48h后,两种药物呈协同作用。合用72h后,当Fa〈0.78时,两种药物之间是协同作用,而当Fa〉0.78时,两种药物之间呈拮抗作用;吉西他滨和依托泊苷的作用均与其诱导凋亡和影响细胞周期有关,二者联合应用对细胞周期没有影响,但凋亡率明显提高。     

伊立替康联合氟尿嘧啶对大肠癌LOVO细胞株增值和凋亡的影响

目的探讨伊立替康联合氟尿嘧啶体外抑制人大肠癌细胞株增值和凋亡的效果,以确定联合用药是否具有协同效应。方法使用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法,流式细胞仪,Annexin V-PI双标法等多项方法,体外研究伊立替康联合氟尿嘧啶对人大肠癌LOVO细胞生长抑制和促凋亡作用。结果两药联合应用对大肠癌LOVO细胞株的抑制作用要明显强于单用一种药物,差异均具有显著性意义;24 h时流式细胞仪检测LOVO细胞的凋亡情况发现,单用伊立替康、单用5-FU和联合用药均较对照组显著升高（P〈0.01）。结论伊立替康联合氟尿嘧啶对大肠癌LOVO细胞株生长的抑制作用具有协同或者相加作用,并有促凋亡效应。     

化疗药物诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的研究

目的观察顺铂(CDDP)、长春新碱(VCR)、平阳霉素(BLM)、顺铂+平阳霉素、顺铂+长春新碱在体外对人宫颈肿瘤细胞的作用。方法用四甲基偶氮唑盐(MTT)测定法观察药物对Hela细胞的影响,用流式细胞仪观察细胞凋亡变化。结果CDDP、VCR、BLM单用对Hela细胞抑制率和凋亡率均高于联合用药组。各用药组对细胞抑制率均高于凋亡率,仅CDDP组两作用相近。结论CDDP、VCR、BLM能有效抑制Hela细胞生长,联合应用出现拮抗作用。     

蛇葡萄素钠协同卡铂抑制人肺腺癌SPC-A-1细胞增殖

目的:探讨蛇葡萄素钠(AMP-Na)单用及其与卡铂(CBP)合用对SPC-A-1人肺腺癌细胞增殖的抑制作用及可能的机制。方法:采用MTT比色法测定AMP-Na单用及其与CBP合用对SPC-A-1细胞的体外细胞毒活性;用流式细胞仪分析AMP-Na单用及与卡铂合用后对SPC-A-1细胞凋亡的影响。结果:体外细胞毒实验和流式细胞仪结果表明,AMP-Na对人肺腺癌SPC-A-1细胞增殖的抑制作用具有明显的量效关系,与CBP联用后凋亡率较卡铂单用明显上升,有协同抑制作用。结论:AMP-Na单用能够显著抑制人肺腺癌SPC-A-1细胞的增殖,与卡铂合用可以增强卡铂的活性,协同抑制SPC-A-1细胞的增殖;AMP-Na可能是通过诱导凋亡而发挥其抗肿瘤作用。     

表柔比星、羟喜树碱、顺铂对人膀胱癌细胞株的相互作用

目的观察表柔比星(epirubicin,EPI、羟喜树碱(hydroxy-camptothecin,HCPT)、顺铂(cisplatinum,DDP)在体外对人膀胱癌细胞株(T24)的相互作用.方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法利用中效原理判断药物联合应用的效果及药物对膀胱癌细胞株粘贴力的影响.结果3种药物单独应用随着药物剂量的增加,其效应也增加;EPI与HCPT或DDP联合时,两药大剂量(大于中效剂量)合用时可产生拮抗作用,小剂量(小于中效剂量)合用时可产生协同作用;HCPT与DDP联合时,在适当剂量(中效剂量×10-2～中效剂量)合用时可产生协同作用;两药合用时的浓度比例及给药时间次序不同均会影响效应的大小;3种药物单用或合用均会使肿瘤细胞粘贴力下降,其下降程度与用药配伍情况有关.结论两种药物合用时可以产生协同或拮抗作用,且效应大小与两药浓度比例及给药时间次序有关;3种药物均可降低肿瘤细胞的侵袭能力.     

吉西他滨和丝裂霉素联合应用对人肺癌细胞A549的作用

目的 观察吉西他滨和丝裂霉素联合应用对人肺癌细胞A549的抑制效应,并探讨其作用机制.方法 用MTT法检测化疗药物对人肺癌细胞A549生长的抑制作用;流式细胞术(FCM)检测细胞周期分布和凋亡率.结果 (1)丝裂霉素和吉西他滨单独和联合用药可浓度依赖性抑制A549细胞的生长.(2)丝裂霉素和吉西他滨在合用72 h后,当Fa >0.18时,丝裂霉素和吉西他滨合用指数CI均<1,两种药物之间是协同作用,当Fa<0.18时,合用指数CI大于1,两种药物之间为拮抗作用.(3)丝裂霉素和吉西他滨同时用药时抑制率最高,其次是先用丝裂霉素后用吉西他滨,抑制率最低是先用吉西他滨后用丝裂霉素.(4)丝裂霉素和不同浓度的吉西他滨合用,除与2.5 μg/ml吉西他滨合用时CI>1外,其余均<1.10 μg/ml吉西他滨和不同浓度的丝裂霉素合用,除与0.0625 μg/ml合用时CI >1外,其余均<1.(5)丝裂霉素和吉西他滨单用和合用时对细胞周期和凋亡均有影响.结论 丝裂霉素和吉西他滨单独和联合用药可浓度依赖性抑制A549细胞的生长.不同用药次序和药物浓度比例也影响药物联合作用.     

榄香烯联合5-FU体内外抑制人胃癌MGC80-3细胞增殖与诱导凋亡作用的研究

目的 研究中药莪术提取物榄香烯制剂(Elemene)联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对MGC80-3细胞增殖的抑制及诱导凋亡的作用。方法 采用MTT法考察榄香烯、5-FU单药及联合作用于MGC80-3细胞的体外抗肿瘤效应;应用中效原理进行统计分析单药及联合用药对肿瘤细胞生长的影响,确定联合用药时的效应(Fa)合用指数(CI)的关系;流式细胞仪检测细胞凋亡周期改变。通过建立MGC80-3裸鼠体内异种肿瘤模型,考察榄香烯及5-FU单用及合用对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用。结果体外试验结果表明榄香烯与5-FU联合应用作用于MGC80-3细胞可产生较好协同效应,单染法(PI)检测到榄香烯与5-FU联合之后能够使MGC80-3细胞表现出显著的G0/G1期阻滞作用;体内试验结果表明榄香烯单药及与5-FU联合作用对MGC80-3裸鼠异种肿瘤生长均有明显的抑制作用,且联合用药组抑瘤率可达84.68%。结论 榄香烯联合5-FU作用于MGC80-3肿瘤细胞株可产生较好的协同效应。     

The synergistic antitumor effects of berberine alpha-hydroxy-beta-decanoylethyl sulfonate with hydroxycamptothecine and its effect on topoisomerase

Synergistic antitumor effects of HB (berberine alpha-hydroxy-beta-decanoylethyl sulfonate, houttuyn berberine) with HCPT (hydroxycamptothecine), and its correlative mechanism were studied in vitro. MTT assay was employed to determine the cytotoxicity of HB combined with HCPT in tumor cells culture in vitro, IC50 and combination index (CI value) were used to evaluate the synergistic effects. The supercoiled DNA relaxation mediated by topoisomerase I & II was measured by agarose gel electrophoresis assay, and influence of HB was detected. The results showed that HB could inhibit the proliferation of tumor cells (SGC-7901, SW1116 and SW480) in vitro, and the inhibition ratio was increased, IC50 was reduced when combining with HCPT. CI value of the two drugs was less than 1 in HepG2, SW480, SGC-7901 and SW1116 cells. The lowest value was 0.447, 0.626, 0.161 and 0.178 in these tumor cells, respectively, further indicating HB has synergistic action with HCPT on suppressing tumor proliferation. The agarose gel electrophoresis assay showed HB can inhibit topoisomerase I & II activity of SW480 cells at the concentration of 2.0-8.0 mg x L(-1). HCPT is a typical inhibitor of topoisomerase I , the synergistic action between HCPT and HB on suppressing tumor proliferation is perhaps related to the congenerous inhibition of topoisomerase.     

超声辐照增强载羟基喜树碱聚乳酸微泡对肝癌细胞生物学效应

目的:探讨载羟基喜树碱聚乳酸微泡超声辐照下对肝癌细胞的生物学效应。方法:选择人肝癌细胞株Bel-7402为体外模型,采用MTT比色分析法,观察羟基喜树碱聚乳酸微泡对肝癌细胞的生长和增殖抑制情况,评价载药微泡对肝癌细胞的毒性作用;采用激光共聚焦荧光显微镜技术和流式细胞仪技术观察超声辐照下载药微泡对肝癌细胞摄取药物的影响。结果:羟基喜树碱聚乳酸微泡抑制肝癌细胞的生长增殖,且随羟基喜树碱浓度的升高而增强;激光共聚焦荧光照片显示:与未超声的肝癌细胞相比,超声辐照下,肝癌细胞内羟基喜树碱的绿色荧光增强,说明细胞摄取羟基喜树碱的量增加;流式细胞仪数值:细胞内羟基喜树碱荧光值对照组仅37.5,未超声实验组为71.9;超声实验组为91.3。结论:羟基喜树碱聚乳酸微泡对肝癌细胞Bel-7402有毒性作用,且超声辐照对细胞摄取药物有促进作用。其超声辐照下对肿瘤细胞生物学效应的评价可将为其今后的临床超声治疗提供必要依据。     

Anticancer properties of 10-hydroxycamptothecin in a murine melanoma pulmonary metastasis model in vitro and in vivo

Lung cancer, including lung metastatic cancer, remains one of the most difficult types of cancer to treat. Therefore, the search for new agents for its treatment is very important. 10-Hydroxycamptothecin (HCPT) was proved to have ideal anticancer activity in curing series cancer cells. In this study, the anticancer effect of HCPT on melanoma lung metastasis cancer was investigated by several administration routes, and whether the effect may be attributed to the induction of tumor cells apoptosis was determined. MTT assay results showed that HCPT exhibited selective cytotoxic activity against B16-F10 cells in a concentration- and time-dependent manner. Hoechst 33258 staining and transmission electron microscopy showed typical apoptotic morphology such as condensed chromatin, irregular nuclei, and apoptotic body formation. Flow cytometry analysis indicated a growth on apoptotic cells and a cell-cycle arrest in S phase after treatment with HCPT. In vivo melanoma pulmonary metastases were inhibited by treatment with HCPT. A more significant inhibition was observed if HCPT was administered by aerosol inhalation than that given by i.v. or i.p. administration. Thus, HCPT exhibited potential anticancer activity against B16-F10 cells in vitro and in vivo. However, the possible mechanisms involved still need to be investigated to explain this behavior.     

平阳霉素联合地塞米松硬化治疗婴幼儿颌面部血管瘤

目的评价平阳霉素(Pingyangmycin,PYM)联合地塞米松(Dexamethasone,DXM)治疗婴幼儿颌面部血管瘤的疗效。方法应用PYM联合DXM瘤内注射治疗婴幼儿颌面部血管瘤26例,观察患儿的全身和局部不良反应,一次注射不能治愈者,隔月重复注射1次,追踪随访1年,观察临床疗效。结果26例患儿中,20例全部治愈,局部色泽与周围正常组织无明显异常,无复发,6例瘤体基本消失。注射后局部不良反应包括肿胀、溃疡,全身不良反应包括低热(2例)。未出现过敏反应。结论平阳霉素联合地塞米松瘤内注射治疗婴幼儿颌面部血管瘤治愈率高,疗程短。     

土元乳液对胃癌化疗药物增效作用的体外研究

目的：比较土元乳液对胃癌化疗药物的体外增效作用。方法：采用MTT法体外药敏试验分别测定土元乳液与羟基喜树碱（HCPT）、氟尿嘧啶（5-Fu）、奥沙利铂（Oxa）、多西紫杉醇（泰素帝）体外对人胃癌细胞系BGC-823细胞株的药物敏感性，通过Weeb系数比较细胞生存率（fa），分析土元乳液对其体外增效作用，得出土元乳液最佳体外增效药物。结果：土元乳液对HCPT、Oxa的高中低3个剂量组体外药敏试验增效作用较好，增效作用明显高于5-Fu、泰素帝组（P〈0．05）。结论：土元乳液对HCPT、Oxa有更高的体外增效作用，从而有益于临床上合理配伍用药，更能有效提高临床上联合化疗对肿瘤的抑制率。     

参麦注射液增强羟基喜树碱对肿瘤血管生成的抑制作用研究

目的研究参麦注射液联合羟基喜树碱对肿瘤血管生成的影响.方法:将人结肠癌细胞株(CW-2)细胞分为4组,即空白、参麦、羟基喜树碱、联合用药组.分组后的CW-2细胞培养12 h,制得条件培养液,条件培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),MTT法检测细胞生存率,并用细胞培养小室检测其细胞迁移活性.结果:与空白组比较,其他3个用...     

羟喜树碱联合顺铂热灌注治疗晚期肝癌腹腔积液

目的探讨羟喜树碱（HCPT）联合顺铂热化疗对人肝癌细胞的毒性增效作用,观察其腹腔热灌注治疗肝癌癌腹腔积液的疗效。方法流式细胞术检测温热条件下HCPT联合顺铂处理后肝癌细胞的凋亡。观察48例晚期肝癌腹腔积液患者热灌注化疗的疗效及不良反应。检测治疗前后血清AFP水平变化。结果HCFF联合顺铂化疗显著增加对肝癌细胞的细胞凋亡率。热灌注HCPT联合顺铂治疗肝癌腹腔积液的有效率为60％（18／30）,显著高于顺铂单药灌注组38．9％,不良反应轻微。血清AFP治疗后显著下降,且与疗效相关。结论HCPT联合顺铂热化疗能显著诱导肝癌细胞凋亡,热灌注HCPT联合顺铂是晚期肝癌腹腔积液安全有效的治疗方法。     

羟基喜树碱对C6胶质瘤细胞的抑制作用

目的:研究羟基喜树碱(HCPT)对大鼠脑胶质瘤细胞的抑制作用。方法:采用MTT法检测不同浓度(1～0.03125mg·mL-1)HCPT对大鼠脑胶质瘤细胞的体外细胞毒作用,同时以脑胶质瘤常规治疗药物作对照,并比较开环与闭环HCPT抑瘤活性。结果:HCPT在高浓度时对细胞抑制率高达(69.43±4.5)%,与对照药比较差异无显著性,且其作用呈浓度依赖性。开环与闭环HCPT比较,前者抑瘤效果较低,二者IC50分别为3.626、0.135mg·mL-1。结论:HCPT对C6胶质瘤细胞的增殖具有明显抑制作用,且其闭环形式抑瘤活性更强。     

羟基喜树碱内酯环形式与其抗癌活性的关系

目的：研究10－羟基喜树碱（HCPT）的内酯环形式与抗癌活性之间的关系。方法：采用MTT和台盼蓝排染法测定两种内酯环形式的HCPT在体外对多种肿瘤细胞的作用,并在体内（0．5、1．0和2．0mg/kg,ip）评价它们对S180肉瘤和HepS肝癌的抑瘤效果;应用HPLC方法观察了HCPT内酯环在肿瘤细胞内的转化情况。结果：两种形式的HCPT对同一种肿瘤细胞均显示类似的细胞毒性（P＞0．05）;但在体内实验中,闭环HCPT（C－HCPT）的抑瘤率明显高于（约两倍）开环HCPT（O－HCPT）。采用HPLC方法分析证明,两种类型的HCPT能在一定条件（如pH改变等）下相互转化。因此,O－HCPT体内、外作用的明显差异可归因于其在偏酸性环境（包括肿瘤细胞体外培养时）可较多地转化成C－HCPT,而在偏碱性环境（如正常体液pH约为7．40）中多呈开环形式。结论：闭环和开环HCPT羟基喜树碱均具有抗癌活性,但前者的活性较强;开环HCPT可在一定条件下转化成闭环形式。     

羟基喜树碱联合免疫增强剂治疗癌性腹水

目的　评价羟基喜树碱 (HCPT )联合免疫增强剂治疗癌性腹水的临床疗效。方法　将 78例癌性腹水病人分组行羟基喜树碱或羟基喜树碱联合免疫增强剂的腹腔化疗 ,并行空白对照 ,对其化疗后的腹水量及癌细胞数进行统计分析。结果　羟基喜树碱或羟基喜树碱联合免疫增强剂两组的腹水量与癌细胞数与对照组对比有显著差异。结论　羟基喜树碱联合免疫增强剂对癌性腹水病人有良好的防治作用