高效液相色谱-荧光检测法测定沉香中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2

目的建立高效液相色谱–光化学衍生–荧光检测法测定沉香药材中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2。方法采用高效液相色谱法,通过免疫亲和柱提取和净化,荧光检测器检测。Agilent Zorbax Ecilpse Plus C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇–水(45∶55);体积流量:0.8 m L/min;柱温:30℃;进样盘温度:4℃;荧光激发波长为360 nm,发射波长为450 nm。结果黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2分别在9.3~74.4、3.0~24.0、9.3~74.4、3.5~28.0 pg线性关系良好,r均大于0.998 0;检测限分别为1.86、0.60、1.86、0.70 pg,定量限分别为7.44、2.40、7.44、2.80 pg。平均回收率分别为78%、92%、82%、99%,RSD值分别为4.4%、3.0%、4.3%、2.8%。结论所建立的方法结果准确、重复性、稳定性均良好,可用于沉香药材中黄曲霉毒素的质量控制。     

11种中药材中黄曲霉毒素G_2、G_1、B_2、B_1的HPLC法测定

建立了HPLC法测定11种中药材中的黄曲霉毒素G_2、G_1、B_2、B_1.样品经70%甲醇提取、免疫亲和色谱柱净化后,用HPLC-柱后衍生-荧光检测器测定.黄曲霉毒素G_2、B_2在1.5～60 Pg范围内,黄曲霉毒素G1、B1在5～200 Pg范围内线性关系良好.回收率为60%～120%.     

黄曲霉毒素提取与净化技术用于延胡索药材中黄曲霉毒素检测

摘 要 目的：通过优化黄曲霉毒素提取与净化方法来建立延胡索中黄曲霉毒素的测定方法。 方法: 采用免疫亲和柱净化 HPLC法测定,样品经超声提取后通过免疫亲合柱,用1%吐温 20的PBS溶液去除杂质,采用柱后光化学衍生荧光检测器检测,并对超出现行药典规定限度的样品用高效液相色谱 串联质谱（HPLC-MS/MS）法验证。 结果: 23批样品中有10批检出黄曲霉毒素,其中4批超出药典规定限度,超限样品与HPLC-MS/MS验证结果一致。 结论: 该方法能有效去除样品中的杂质,排除测定干扰,可作为延胡索中黄曲霉毒素定量分析的检测方法。10批样品均检出黄曲霉毒素,显现出黄曲霉毒素污染方面的安全问题,建议增加延胡索中黄曲霉毒素检查项,以确保药材质量的安全性、有效性。     

免疫亲和柱净化光化学衍生高效液相色谱-荧光检测法测定动物类药材中黄曲霉毒素

目的建立动物类药材中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2的免疫亲和柱净化光化学衍生高效液相色谱-荧光检测(HPLC-FLD)法。方法样品经甲醇-水(80∶20)提取后,通过免疫亲和柱净化、柱后光化学衍生、高效液相色谱-荧光检测器测定。结果在优化条件下,黄曲霉毒素G2,G1,B2,B1的检出限分别为0.15,0.25,0.1,0.2μg/kg,回收率为78.8%～106.7%,RSD均低于7.1%。结论所用方法简便快速、灵敏度高、重现性好,可满足动物类药材中黄曲霉毒素检测的需要。     

HPLC法测定150种中药材中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的含量

目的:建立了HPLC法测定150种中药材中的黄曲霉毒素G₂、G₁、B₂、B₁含量。方法:样品经70%甲醇提取、免疫亲和色谱柱净化后,用HPLC-柱后衍生-荧光检测器测定结果:黄曲霉毒素G₁、B₂在0.15～6.00 ng·ml^-1范围内,黄曲霉毒素C₁、B₁在0.5～20.00 ng·ml^-1范围内线性关系良好回收率为85.6%～92.0%结论:本法操作简便,结果准确、重复性好,可用于中药材中黄曲霉毒素G₂、G₁、B₂、B₁的测定     

HPLC-柱后光化学衍生法测定大七厘制剂中黄曲霉毒素含量及安全性评价

目的 建立免疫亲和柱净化-柱后光化学衍生-高效液相色谱测定大七厘制剂中黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2的方法.方法 样品经过70％甲醇溶液匀浆提取,用水稀释后经免疫亲和柱富集净化,经C18色谱柱分离,以甲醇和水为流动相,柱后光化学衍生,荧光检测器进行检测.结果 黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2分别在进样量为10.15～50.75 pg、2.515～12.575 pg、10.1～50.5 pg、2.51～12.55 pg与峰面积有良好的线性关系,平均回收率为87.4％～ 105.5％,RSD≤1.6％.结论 该方法可作为大七厘制剂中黄曲霉毒素的检测方法.     

高效液相色谱-柱后光化学衍生法测定参苓白术散中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1

目的 建立中成药参苓白术散中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的测定方法.方法 样品经70％甲醇提取,免疫亲和柱净化后,采用高效液相色谱-柱后光化学衍生-荧光检测法定量,以串联质谱法验证.结果 高效液相色谱法线性关系良好(r＞0.999),回收率范围76.8％～115.2％(RSD范围1.8％～12.9％),检测了57批样品,并使用串联质谱仪的多反应监测模式确证了阳性结果.结论 本法快速、简便、灵敏、准确,专属性强,可用于参苓白术散中黄曲霉毒素的检测.     

HPLC法测定中药材覆盆子中黄曲霉毒素的含量及安全性评价

目的 测定覆盆子中黄曲霉毒素含量并对其进行安全性评价。方法 覆盆子经取样、粉碎、过筛、70%甲醇匀浆提取、稀释、离心、免疫亲和柱富集、除杂、甲醇洗脱制样,使用C18色谱柱分离,光化学衍生器柱后衍生,并由荧光检测器测定结果。结果 方法线性良好（r>0.999）,平均回收率为93.8%～97.7%,RSD≤1.6%。结论 中药材覆盆子被黄曲霉毒素污染的风险低,安全性较好。     

制貂肾中黄曲霉毒素的测定方法研究及暴露风险评估

目的:本研究基于免疫亲和柱净化样品,采用高效液相色谱法光化学衍生荧光检测器测定制貂肾中黄曲霉毒素B₁、B₂、G₁、G₂的含量并对其进行暴露风险评估。方法:样品采用70%甲醇作为提取溶剂,经免疫亲和柱净化、高效液相色谱分离、光化学柱后衍生后,通过荧光检测器测定其中黄曲霉毒素的含量。采用暴露边界比对制貂肾黄曲霉毒素的有害残留物进行风险评估。结果:结果表明黄曲霉毒素B₁的线性范围为0.010 4～0.052 0 ng(r=0.999 9)、黄曲霉毒素B₂的线性范围为0.003 8～0.019 0 ng(r=0.999 8)、黄曲霉毒素G₁的线性范围为0.010 8～0.054 0 ng(r=0.999 8)、黄曲霉毒素G₂的线性范围为0.003 8～0.019 0 ng(r=0.999 8),线性关系良好,回收率在89.31%～99.54%间,RSD≤3.1%。结论:建立的制貂肾中黄曲霉毒素检测方法具有操作简单,灵敏度...     

食品中的黄曲霉毒素(B1B2G1G2)HPLC法测定探讨

目的 探讨高效液相色谱法测定食品中的黄曲霉毒素(B1、B2、G1、G2)的测定方法.方法 样品经处理、净化、衍生后,采用不同比例的乙腈、水梯度洗脱,用带有荧光检测器的高效液相色谱仪测定.结果 方法的检测限为AFT(B1、G1)1.5μg/kg;AFT(B2、G2)0.5μg//Kg.四种黄曲霉毒素的回收率均在87.2%-101.3%,四种黄曲霉毒测定结果的RSD在1.17%-2.76%.结论 方法简单、快速、准确,检出限低,回收率高.     

免疫亲和净化-液相色谱-串联质谱测定中成药中14个真菌毒素

目的:建立同时测定中成药中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2,HT-2毒素,T-2毒素,赭曲霉毒素A,伏马毒素B1、B2,玉米赤霉烯酮,α-玉米赤霉烯醇,β-玉米赤霉烯醇,α-玉米赤霉醇以及β-玉米赤霉醇共14个真菌毒素的测定方法。方法:采用PBS溶液和70%甲醇-PBS溶液依次提取样品中真菌毒素,提取液经多功能免疫亲和柱净化,0.1%吐温-PBS溶液和水依次淋洗,甲醇洗脱,氮气流下浓缩定容,测定时采用Waters Xterra C18MS(100 mm×2.1 mm,3.5μm)分析柱,0.3 mL·min-1的流速,梯度洗脱,质谱测定采用多反应监测(MRM)模式。结果:14个真菌毒素的最小检出浓度(LOQ)为1.0～5.0μg·kg-1;4个中成药基质的3个不同水平的添加回收率(n=6)为75.7%～97.9%,RSD为5.3%～13.8%。结论:本方法采用了多功能免疫亲和柱净化,质谱定性定量,加快了检测速度,降低了中成药复杂基体的干扰,方法检测限满足了国内外中成药多个真菌毒素限量控制要求。     

高效液相色谱法与荧光光度法检测中药材中黄曲霉毒素的比较

目的比较研究了免疫亲合柱（IAC）净化-HPLC柱后溴化衍生荧光法检测黄曲霉毒素B₁，B₂，G₁和G₂的含量与溴化荧光光度法（SFB法）检测黄曲霉毒素总量的方法。方法在IAC-HPLC柱后溴衍生荧光法中，药材经甲醇-水（70∶30）溶剂系统提取后，采用免疫亲合柱净化、富集黄曲霉毒素，净化后的样品溶液通过高效液相色谱柱分离后，进入柱后衍生管中与过溴化溴化吡啶溶液发生反应，最后进入荧光检测器分别检测黄曲霉毒素B₁，B₂，G₁和G₂含量。在SFB法中，样品经甲醇-水（70∶30）提取后，再经免疫亲合柱净化、富集，在处理后的样品溶液中添加一定量一定浓度的溴水溶液后，迅速置于荧光光度计中读数。结果IAC-HPLC柱后溴衍生荧光法中，考察了3种不同药材中添加2个浓度水平的混合对照品的回收率实验，回收率平均值在93%-97%之间。黄曲霉毒素B₂和G₂的最低检出限为0.06 μg·kg^-1，黄曲霉毒素B₁和G₁的最低检出限为0.20 μg·kg^-1。精密度实验的RSD值在0.8%-1.4%之间。运用此高效液相色谱法检测了39种中药中黄曲霉毒素的含量。同时运用SFB法检测了上述39种中药中黄曲霉毒素的总量。结论SFB法不适合用来检测中药中黄曲霉毒素的总量。     

Contamination by Aflatoxins B/G in Food and Commodities Imported in Southern Italy from 2017 to 2020: A Risk-Based Evaluation

This study reports the results of aflatoxins B/G monitoring in food of vegetal origin, imported in Southern Italy from extra-European Union countries. From 2017 to 2020, we analyzed 1675 samples using an accredited HPLC method with fluorescence detection. We found out 295 samples (17.6%) were contaminated by aflatoxin B1, 204 by aflatoxins B/G (12.2%), while 75 (4.5%) resulted non-compliant to maximum limits set by the European Union law. Most of the batches tested were unprocessed food; the distribution of contamination levels, incidence of non-compliant samples, inference for different kinds of food are reported. The study focuses on the food more susceptible to contamination by aflatoxins; nuts are the food more controlled, showing the higher number of non-compliant samples. Our study confirms that pistachio nuts, hazelnuts and almonds are the major sources of exposure for consumers. Still, other products, such as chili pepper and Brazil nuts, need to get more information about their contamination levels. The study’s findings are discussed in the perspective of the last opinion by EFSA about chronic exposure to aflatoxins. A case study to evaluate not compliance of a composed food to the European Union law is reported.     

黄曲霉毒素免疫亲和柱重复利用的探讨

目的考察中药材类别和亲和柱处理方法对黄曲霉毒素免疫亲和柱重复利用的影响,探讨亲和柱重复利用的可能性。方法通过在不同中药材中加入黄曲霉毒素对照品,经免疫亲和柱净化一HPLC-柱后光衍生分析,考察亲和柱重复利用后的回收率;考察不同的亲和柱处理方法对回收率的影响。结果中药材类别对免疫亲和柱重复利用的影响差异很大,部分种子类中药材使用后亲和柱重复利用3次回收率无明显变化,部分根茎类使用后,亲和柱回收率降低明显,特别是G：更易受影响。亲和柱处理时有机溶剂,空气暴露和复性时间均可影响柱子重复利用。结论中药材类别和处理方法对黄曲霉毒素免疫亲和柱的重复利用均有显著影响。     

决明子黄曲霉毒素检测中假阳性的解决方法的探索

目的 探索决明子黄曲霉毒素检测中假阳性的解决方法。方法 采用1%吐温-20的磷酸盐缓冲溶液洗脱除杂,免疫亲和柱净化-高效液相色谱柱后光化学衍生测定,以延胡索药材作为阳性样品进行比较考察,并用HPLC-MS/MS进行验证。结果 该溶液能有效去除决明子中假阳性成分干扰,并能去除延胡索样品中的有色成分,且不影响黄曲霉毒素在免疫亲和柱中的保留。结论 该方法操作简便、结果稳定可靠,能有效排除假阳性干扰,可用于复杂基质中药的前处理,作为黄曲霉毒素测定中假阳性的解决方法。     

Safety and efficacy evaluation of aqueous citric acid to degrade B-aflatoxins in maize.

Chemical inactivation of aflatoxin B1 (AFB1) and aflatoxin B2 (AFB2) in maize grain by means of 1N aqueous citric acid was confirmed by the AFLATEST immunoaffinity column method, high performance liquid chromatography (HPLC), and the Ames test (Salmonella-microsomal screening system). The AFLATEST assay showed that aflatoxins in the maize grain with an initial concentration of 29 ng/g were completely degraded and 96.7% degradation occurred in maize contaminated with 93 ng/g when treated with the aqueous citric acid. Aflatoxin fluorescence strength of acidified samples was much weaker than untreated samples as observed in HPLC chromatograms. On the other hand, the Ames test results indicated that the mutagenic activity of acidified samples was greatly reduced compared with that of untreated samples based on his- --> his+ reversions in the Salmonella TA100 strain. Chemical inactivation appears to be a promising method of removing aflatoxin from food commodities.