食管癌细胞照射后细胞周期及相关蛋白表达的变化

目的：探讨食管癌细胞照射后细胞周期、细胞凋亡及其相关蛋白表达的变化。方法：食管癌细胞株TE-1和TE-13照射2、5、10、15Gy后，应用流武细胞仪分别检测照射后6、24和48h细胞周期和凋亡指数变化、Western blot检测细胞周期相关蛋白的表达。结果：2、5、10、15Gy照射0～48h，TE-1和TE-13细胞均出现明显剂量依赖性的G2／M期阻滞和解除变化；5～15Gy照射后48h，TE-13细胞在G2／M期阻滞逐渐解除时伴随着细胞凋亡的明显增加，而TE-1细胞凋亡不增加。2株细胞胞浆CHK2-p68磷酸化水平均呈随照射后时间延长而出现时相性变化，但与照射剂量无关；而CHK1、CHK2、CHK1-p345和CDK1蛋白表达均无明显变化。15Gy照射后24h，TE-13细胞胞浆中eyelin B1表达下降而TE1细胞中无明显变化。结论：病理不同分化的食管癌细胞照射后细胞周期、细胞凋亡以及细胞周期相关蛋白表达变化不尽相同。     

60Co照射对食管癌细胞周期相关蛋白MDC1和53BP1表达的影响

 目的：观察⁶⁰Co照射后体外培养的食管癌细胞株TE-13和ECA109细胞中MDC1和53BP1蛋白 表达、ECA109细胞核内MDC1和53BP1斑点数量的变化,探讨放射线对食管癌细胞中相关蛋白表 达的影响。方法：Western blot检测照射后细胞中MDC1和53BP1蛋白表达,激光共聚焦显微镜 观察放射线照射后食管癌细胞ECA109中MDC1和53BP1细胞核内斑点数量的变化。结果：0、1、2 、5、10 Gy照射后1、2、24 h,TE-13和ECA109细胞MDC1和53BP1蛋白表达未见明显变化 （P>0.05）;细胞接受不同剂量放射线照射后1 h,MDC1和53BP1核内斑点的数量呈现明显剂量 依赖性,与对照组（0Gy组）相比,差异具有统计学意义（P<0.05）;同时发现4Gy放射线照射 后30 min（MDC1）～1 h（53BP1）细胞核内斑点的数量最多,分别为26.3和36.7个,其后斑点 的数量逐渐下降,与对照组（0Gy组）相比,差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论：单纯 放射线照射未发现食管癌细胞中MDC1和53BP1蛋白表达发生明显变化,但两种蛋白在细胞核内 斑点的数量与剂量和照射后时间存在明显的量效关系。     

shRNA转染对食管癌细胞TE13中CHK1和CHK2表达以及照射后G2/M期阻滞的影响

背景与目的:肿瘤细胞照射后常表现为细胞周期的变化,本研究采用细胞周期监测点激酶CHK1和CHK2基因的短发卡状RNA(shRNA)转染食管癌细胞,观察对其蛋白表达以及60Co γ射线照射后细胞周期的影响.方法:设计合成并构建质粒连接的CHK1和CHK2 shRNA,分别提取质粒DNA并采用脂质体转染TE13细胞并传代;采用Western blot、RT-PCR和流式细胞仪分别检测CHK1和CHK2蛋白和muRNA表达、以及5 Gy 60Co γ射线照射后细胞周期变化,克隆形成实验检测5 Gy γ射线照射后细胞存活率.结果:采用CHK1和CHK2 shRNA转染TE13细胞后,其mRNA和蛋白表达均明显降低.单纯5 Gy γ射线照射后24 h,TE13细胞G2/M期比例由未照射组的32.17%增至6147%;shRNA转染的TE13细胞在5 Gy γ射线照射后24 h,C2/M期比例由单纯照射组的61 47%降至28.13%(CHK1)和42.80%(CHK2),P＜0.05.5 Gy γ射线、CHK1 shRNA力5 Gy γ射线、以及CHK2 shRNA力5 Gy γ射线照射后,细胞存活率分别为27.0%、13.0%和21.0%.shRNA转染的子一代TE13细胞在转染后120 h,对CHK1和CHK2蛋白表达的抑制作用已基本消失:转染120 h后以5 Gy γ射线照射24 h,CHK1或CHK2 shRNA转染组G2/M期比例高于单纯照射组,P＜0.05;至转染后144 h和5 Gy γ射线照射后48 h,转染组与单纯照射组比较G2/M期比例无明显差别,P＞0.05.结论:采用质粒连接的人CHK1和CHK2 shRNA转染TE13细胞后,可以明显抑制其mRNA和蛋白表达并消除照射后G2/M期阻滞,增加放射敏感性;提示TE13细胞γ射线照射后G2/M期检测点可能受CHK1和CHK2激酶双重调节,但以CHK1为主.     

放射线对鼻咽癌细胞周期阻滞、凋亡和抑癌基因p57^kip2表达的影响

目的：研究放射线对鼻咽癌细胞（CNE）周期阻滞、凋亡和抑癌基因p57^kip2蛋白表达的影响。方法：运用流式细胞术检测放射线诱导的细胞周期阻滞、凋亡；运用免疫组织化学法和Westernblot法检测抑癌基因p57^kip2蛋白的表达。结果：照射后，CNE细胞G1期无明显阻滞，S期出现短暂堆积，G2／M期阻滞强度具剂量和时间依赖性，随照射剂量增加，其阻滞程度增强，阻滞时间延长，G2／M期阻滞在12、24h与照射剂量呈正相关（P〈0．01），随照射后时间延长而增强，峰值出现于12Gy24h；凋亡发生率与照射剂量和照射后时间均呈正相关（P〈0．01）。p57^kip2蛋白表达在照射后随照射剂量的增加和照射后时间的延长均呈现上调（P〈0．01）。结论：放射线对鼻咽癌细胞G2／M期阻滞、凋亡率和抑癌基因p57^kip2蛋白表达均有明显的增强作用。     

全反式维甲酸联合射线对食管癌细胞TE13增殖及凋亡的影响

目的:研究全反式维甲酸( all-trans-retinoicacid,ATRA)联合放射线照射对食管癌TE13细胞增殖、凋亡的影响及可能的作用机制.方法:采用MTT法检测ATRA对人食管癌细胞TE13增殖的影响;以其对TE 13细胞生长抑制率(inhibitory rate,IR)达25％、50％和75％时的ATRA的浓度分别联合γ-射线进行分组处理细胞;FCM法分析ATRA单药及联合放射治疗对TE13细胞周期及凋亡的影响;采用克隆形成实验分析对克隆形成率和细胞存活率的影响;采用FCM法检测cyclinD1蛋白的表达.结果:ATRA对TE13细胞有增殖抑制作用,且呈剂量和时间依赖性;ATRA浓度为0.78、6.25和12.5 μmol/L作用48 h后,其对TE13细胞的IR分别达到22.0％、55.1％和71.1％.ATRA联合γ-射线(4 Gy)与ATRA单药组比较,可明显降低TE13细胞的存活率和克隆形成率;ATRA联合γ-射线(4 Gy)处理TE13细胞24和48 h后,细胞增殖能力明显下降,更多的细胞被阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率明显增加,与ATRA单药组比较,联合放射治疗可明显增强对TE13细胞周期和凋亡的影响;ATRA浓度为0.78 μmol/L时和γ -射线联合作用对细胞周期cyclinD1蛋白表达量影响不大,但ATRA浓度为6.25和12.5 μmol/L时则能明显下调cyclinD1的表达.结论:ATRA对TE 13细胞具有明显的增殖抑制作用,其可能通过下调cyclinD1蛋白的表达,将TE13细胞阻断于G0/G1期并诱导细胞凋亡.在ATRA浓度较高时联合放疗,能显著下调cyclinD1蛋白表达,加强细胞G0/G1期阻滞及促进凋亡,抑制细胞克隆的形成能力;在ATRA浓度较低时联合放疗对原代细胞cyclinD1蛋白表达量的影响较小,但对促进细胞凋亡、抑制细胞克隆仍有一定的效果,其损伤效应可能需要一定时间.     

抑制ATM表达致鼻咽癌细胞CNE1辐射增敏的细胞周期阻滞研究

背景与目的:细胞周期调控是决定细胞辐射敏感性的决定性因素之一。共济失调毛细血管扩张症突变基因(ataxia-telangiectasia mutant,ATM)功能与细胞DNA损伤修复、细胞周期检查点调控密切相关。我们前期研究通过反义RNA抑制ATM基因表达可增加鼻咽癌细胞系CNE1辐射敏感性,本研究拟探讨其辐射增敏的细胞周期阻滞调控机制。方法:ATM反义组细胞CNE1/pDOR-atm及对照组细胞CNE1/pDOR经2Gy、5GyX线照射后不同时间点(1h、4h、8h、24h、48h)收获,应用流式细胞仪(flowcytometer,FCM)检测各细胞周期百分比及凋亡率。结果:两组细胞X线照射后均未出现明显G1期阻滞和细胞凋亡,但分别在照射后1h、4h、8h出现明显S期阻滞,24h、48h出现明显G2期阻滞,其中反义组S期细胞百分率总均数水平低于对照组(P<0.05),而G2/M期细胞百分率总均数水平高于对照组(P<0.05)。结论:反义RNA抑制ATM表达致CNE1辐射增敏的细胞周期调控机制可能与减少S期细胞比例,增加G2/M期细胞比例有关,与G1期阻滞和细胞凋亡的调控无关。     

RNA干扰MDC1基因对食管癌细胞X线照后细胞周期及相关蛋白表达影响

目的 利用RNA干扰技术降低食管癌细胞ECA109中MDC1基因表达, 观察照射后细胞周期和放射敏感性变化并探讨相关机制。方法 针对MDC1mRNA序列设计合成3对有效干扰序列和阴性对照序列, 与载体pSIH1-H1-copGFP形成重组质粒, RT-PCR和蛋白印迹法测定MDC1mRNA和蛋白水平表达。克隆形成实验检测细胞放射敏感性, 流式细胞术检测细胞周期, 蛋白印迹法检测CHK1、CHK2蛋白表达, 激光共聚焦显微镜观察细胞核内MDC1斑点数量。单因素方差分析组间差别。结果 成功构建pMDC1-shRNA质粒并感染ECA109细胞, 获得稳定转染细胞ECA109M。ECA109M细胞MDC1mRNA、蛋白表达水平低于ECA109N、ECA109细胞(P=0.032、P=0.041)。5 Gy照射后ECA109M细胞G₂+M期比例低于ECA109N、ECA109(P=0.026)。5 Gy照射后ECA109、ECA109N、ECA109M细胞中CHK1和CHK2蛋白表达相近(P=0.345和P=0.451), ECA109M细胞CHK2T68蛋白表达低于ECA109、ECA109N细胞(P=0.012)。ECA109细胞D₀值为3.06 Gy, SF₂值为0.91;ECA109N、ECA109M细胞的D₀值分别为2.90、1.88 Gy;SF₂值分别为0.89、0.84(P=0.021;P=0.037)。结论 RNA干扰降低MDC1蛋白表达后可以降低细胞周期相关蛋白的表达, 解除细胞周期阻滞, 增强食管癌细胞ECA109的放射敏感性。     

6MV-X射线对肝癌细胞凋亡及周期分布的影响

目的:研究人肝癌细胞接受不同剂量或时间的6MV-X线照射后,对细胞凋亡和周期进程的影响。方法:用流式细胞术检测6MV-X线照射4Gy后不同时间以及不同剂量6MV-X线照射后24h HepG2和PLC/PRF/5两种细胞的细胞凋亡和周期分布状况。结果:4Gy 6MV-X线照射后24h,HepG2细胞凋亡率高于PLC/PRF/5细胞,分别为(7.61±0.77)%和(5.63±0.87)%(P<0.05),且随时间和剂量增加,差异越显著;HepG2细胞受4Gy照射后12h,G0/G1期比例下降,为(40.56±1.59)%,后逐渐上升,G2/M期比例增高,为(13.28±1.02)%,随后逐渐下降;2-6Gy照射24h后,G0/G1期比例逐渐上升,G2/M期比例逐渐下降;PLC/PRF/5细胞G2/M期比例在照射后24h阻滞最明显(22.11±1.48)%,后逐渐降低,随照射剂量增加而增大。结论:2-6Gy 6MV-X线照射可诱导HepG2与PLC/PRF/5细胞凋亡,并改变周期进程,HepG2细胞发生G1和G2期阻滞,PLC/PRF/5发生G2期阻滞。     

电离辐射对血管内皮细胞和PC-3细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨不同剂量X射线照射对原代人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和PC-3细胞周期和凋亡的影响,为临床放疗提供理论依据。方法 采用形态学观察和Annexin V-FITC联合PI双染法和ApO2.7单抗法流式细胞仪(FCM)定量检测原代HUVEC和PC-3细胞在0-10 Gy的6MV-X射线照射后细胞周期和凋亡的变化。结果 照射后24 h和48 h两种细胞均出现明显G0/G1期减少和G2/M期增加,但2 Gy照射时仅对PC-3细胞周期有影响;两种细胞照射后均未出现辐射相关的凋亡。结论 电离辐射可诱导两种细胞出现G2/M期阻滞但不引起凋亡发生,两种细胞均有一定的辐射抗拒性。     

The bioreductive agent RH1 and gamma-irradiation both cause G2/M cell cycle phase arrest and polyploidy in a p53-mutated human breast cancer cell line

PURPOSE: RH1 is a newly developed bioreductive agent, and its bioactivation is mediated by the enzyme DT-diaphorase (DTD). We have shown previously that RH1 is highly cytotoxic against cells expressing high DTD, using the p53-mutated MDA231 human breast cancer cell line transfected with the DTD gene (D7 cells). We now report that both RH1 and gamma-irradiation cause D7 cells to arrest in the G2/M cell cycle phase and undergo polyploidy. The latter is a way of p53-mutated cells responding to DNA-damaging agents. Only a small proportion of the polyploid cells are clonogenic, hence polyploidy may contribute to the reproductive failure of the cells after RH1 and irradiation. Thus, we investigated the effect of RH1 and gamma-irradiation on the formation of polyploid cells and a sub-G1 population (as a measure of apoptosis) in relation to the G2/M cell cycle block. METHODS AND MATERIALS: MDA231 D7 cells were treated using a range of RH1 doses. The cells were irradiated using 2 Gy or 5 Gy gamma-rays either as a single dose or in combination with RH1. An IC(90) dose (dose to kill 90% of the cells) of RH1 was administered for 3 h followed by irradiation after a further 24 h. Subsequent changes in cell cycle and polyploidy (DNA content in excess of that of G2/M cells) were examined. RESULTS: Treatment of D7 cells with the RH1 resulted in 60-70% of cells arrested in the G2/M phase of the cell cycle by 24 h, which decreased to control levels by 48 h. Irradiation with 2 Gy and 5 Gy caused a similar G2/M block at 12-24 h, which was followed by a sharp decline at 24-48 h. In contrast, the same dose of radiation combined with RH1 held the cells in the G2/M phase up to 48 h, and this pattern reached pretreatment levels at 72-96 h. Most control cells were found to contain a small number of spontaneously arising polyploid cells. The development of polyploid cells was evident from 12 h after all treatments and showed a significant increase at 48 h and subsequently. As opposed to this, apoptosis measured by the sub-G1 cell population in DNA analyses showed a tendency to increase according to the elapsed time for each group of treatments. Single treatments with RH1 caused a significant increase in the apoptotic population between 48 and 120 h. The first significant increase in apoptosis was observed at 48 h for 5 Gy, 2 Gy + RH1, and 5 Gy + RH1 treatments, and showed a tendency to increase further at later times, but the 2 Gy dose gave an earlier apoptotic peak at 24 h, which decreased to 96 h. The addition of RH1 to the irradiation did not increase the formation of polyploid cells or apoptosis compared with radiation alone (2 Gy vs. RH1 + 2 Gy or 5 Gy vs. RH1 + 5 Gy). The higher dose of irradiation (5 Gy vs. 2 Gy) resulted in a significantly higher proportion of polyploid cells (but not of apoptotic cells) when used alone or in combination (5 Gy + RH1 vs. 2 Gy + RH1). CONCLUSIONS: Both RH1 and gamma-irradiation, individually and in combination, showed a significant G2/M block in MDA231 D7 breast cancer cells. The formation of polyploid cells was dependent more on the radiation dose rather than on the pretreatment with RH1. The polyploid cell population was observed after the G2/M cell cycle phase arrest, and it preceded the late increase of the apoptotic cell population. The role of polyploidy in cell reproductive failure in the total cell population is not known, but it appears to contribute to cytotoxicity in cells released from the G2/M cell cycle phase block.     

RNA干扰53BP1基因表达对食管癌放射敏感性的影响

背景与目的:细胞周期检测点激酶53BP1在细胞周期调控方面发挥着重要的作用,对体细胞的正常生长没有明显的调节作用,但在DNA损伤发生后被激活,引起细胞周期阻滞。本研究利用RNA干扰技术降低食管癌细胞ECA109细胞53BP1基因表达,观察其对放射线照射后细胞周期和放射敏感性的影响。方法:针对53BP1 mRNA序列,设计合成3对有效的干扰序列(siRNAl、siRNA2和siRNA3)和阴性对照序列,与载体pSIH1-H1-copGFP连接形成重组质粒,瞬时转染细胞,实时PCR(real-time PCR)和Western blot检测53BP1的表达,筛选有效干扰序列,与慢病毒包装质粒混合物共同转染293T细胞,收集病毒液,感染ECA109细胞,获得稳定转染细胞系,命名为ECA109/B,转染空载体组命名为ECA109/N。采用real-time PCR和Western blot测定53BP1在mRNA水平和蛋白水平的表达。采用MTT、流式细胞术和克隆形成实验检测RNA干扰53BP1基因对ECA109细胞放射敏感性的影响。结果:成功构建p53BP1-shRNA质粒,3对干扰序列对人53BP1基因的表达在mRNA和蛋白水平显著低于阴性对照组和空白对照组,尤以siRNA1组效果最明显,取干扰效果最好的siRNA1,利用慢病毒包装系统,共同转染293T细胞,收集病毒液,感染ECA109细胞,荧光显微镜下挑取阳性克隆,扩大培养,获得稳定转染细胞株ECA109/B,53BP1基因在mRNA和蛋白表达水平亦低于对照组;MTT结果表明53BP1低表达对细胞的增殖无明显影响,用流式细胞术分析显示5 Gy射线照射后,ECA109/B的G2/M期比例明显低于阴性对照组和空白对照组;克隆形成实验的结果显示ECA109、ECA109/N、ECA109/B细胞的D0值分别为3.06、2.90和2.07 Gy;SF2值分别为0.91、0.89和0.79;Dq值分别为1.59、1.47和1.21,可见ECA109/N、ECA109放射敏感性未见明显差异,而ECA109/B细胞的放射敏感性高于ECA109/N、ECA109。结论:RNA干扰技术可以有效地抑制食管癌细胞ECA109中53BP1基因的表达,从而增强ECA109细胞的放射敏感性。     

CoCl2诱导缺氧对Eca109细胞细胞周期及放射敏感性的影响

Objective:To investigate the change of the cell cycle,apoptosis and radiosensitivity effect by CoCl2 induced hypoxia in esophageal cancer line Eca109 cells in vitro.Methods:The hypoxia culture model induced by 150 microM CoCl2 was established.The cell cycle and apoptosis were measured with flow cytometry (FCM).The radiosensitivity was analysized with clonogenic assay after irradiation alone or combined with hypoxia in Eca109 cells in vitro.Results:Eca109 cells were treated with 150 microM CoCl2 for 24 h,cell cycle arrest in G0/G1 phase increase and decreasing arrest in S phase with longer of hypoxiac time (0-24 h),the other rate of cell cycle and apoptosis did not change obviously.The G2/M phase block was arrested obviously in radiation alone comparing with the hypoxia plus irradiated group,apoptosis did not occur in Eca109 cell line following irradiation.The DO value and cell surviving fraction of Eca109 cell was 2.48 Gy,2.44 Gy and 97.33%,96.33% in hypoxia and control group,respectively;the Dq value of Eca109 cell was 2.89 Gy,0.52 Gy,the cell surviving fraction after radiation with 4 Gy was 48.3%,21.7% in hypoxia and control group,respectively.The hypoxia decreased the radiosensitivity in esophageal cancer Eca109 cells with clonogenic assay.Conclusion:Hypoxia induced by CoCl2 influences radiosensitivity of Eca109 cell through regulating cellular proliferation rates.     

汉防己甲素对体外培养食管癌细胞放射增敏作用的初步研究

目的 探讨汉防己甲素对人食管癌TE1细胞放射增敏作用及其机制.方法 利用MTT法检测食管癌TE1细胞增殖活性影响,细胞克隆形成法测定汉防己甲素联合X射线对TE1细胞放射敏感性影响,Western blotting分析汉防己甲素联合X射线对TE1细胞周期蛋白表达的影响.结果 汉防己甲素对TE1细胞增殖抑制作用具有时间、浓度依赖性,1.00、5.00、10.00μg/ml浓度作用24 h时对TE1细胞增殖有抑制作用(F=3.09、10.43、24.00,P值均＜0.05),0.10、1.00、5.00、10.00μg/ml浓度作用48 h时对TE1细胞增殖有更显著地抑制作用(F=4.12、12.77、44.28、48.53,P值均＜0.01).随汉防己甲素浓度增加,TE1细胞的D0、Dq、SF2值均逐渐减小,0.5 μg/ml汉防己甲素的放射增敏比最大为1.60.汉方已甲素增加TE1细胞周期蛋白cyclin B1的表达,解除G2+M期阻滞.结论 汉防己甲素对TE1细胞有放射增敏作用,其机制可能是通过增加周期蛋白cyclin B1表达解除细胞G2+M期阻滞.     

慢病毒介导沉默食管癌细胞53BP1基因表达对裸鼠移植瘤放射敏感性的研究

背景与目的：p53结合蛋白1(p53 binding protein,53BP1)在多种正常组织和肿瘤细胞中有表达,与放射线照射后细胞周期阻滞有关。体外实验证实抑制53BP1的蛋白表达可有效地消除肿瘤细胞照射后引起的周期阻滞,增加放射敏感性。但体内实验国内尚未见相关报道。该研究旨在探讨沉默食管癌细胞53BP1基因对裸鼠移植瘤放射敏感性的影响。方法：将48只BALB/c/nu裸鼠按随机数字表法分为对照组、单纯照射组、空载体组、空载体加照射组、沉默53BP1组以及沉默53BP1加照射组,每组8只,于裸鼠皮下接种相应食管癌细胞ECA109,制备裸鼠模型,给予15 Gy放射线单次照射,受照后1 h每组处死3只裸鼠,将肿瘤标本按蛋白[质]印迹法(Western blot)及流式细胞分析要求处理,Western blot检测移植瘤组织中CHK1、CHK2和磷酸化CHK2-T68的表达,流式细胞术分析裸鼠肿瘤组织中细胞周期分布和细胞凋亡。观察各组剩余裸鼠移植瘤照射后的生长情况,移植瘤体积变化情况。结果：所有接种裸鼠均成活并有肿瘤形成,各组之间肿瘤体积大小差异无统计学意义(F=0.67,P=0.69);单纯照射组和空载体照射组裸鼠的肿瘤生长速度慢于未照射组(P=0.02),沉默53BP1加照射组裸鼠的肿瘤生长速度最慢(P=0.03),沉默53BP1加照射组的相对生长速率较空载体加照射组和单纯照射组降低,生长抑制率增加(P=0.01)。沉默53BP1加照射组的q值为1.45;沉默53BP1加照射组裸鼠体内CHK1和CHK2的蛋白表达产物未见明显变化(P=0.71),CHK2-T68的磷酸化水平较单纯照射组和空载体照射组明显下降(P=0.03),各组裸鼠的瘤组织中细胞周期分布和凋亡率差异无统计学意义(P=0.45)。结论：体内研究显示沉默53BP1基因可以提高食管癌放射敏感性。     

r-H2AX在不同食管癌株系中的剂量时间效应特点

目的   通过检测不同食管癌株系的r-H2AX时间剂量效应关系,了解r-H2AX的动力学特点。 方法   将食管癌ECA109和TE13两种细胞株分别给予1、2、4和8Gy 的6MV-X线照射,并分别于0.5、1、2、4、8、12、24 h收集细胞提取蛋白,检测r-H2AX时间及剂量效应特点。 结果   (1) ECA109细胞和TE13细胞随着放疗剂量的增加,r-H2AX表达量第一次最高点出现的时间逐渐提前。(2) ECA109细胞接受低剂量照射后,r-H2AX在24 h内能够恢复到放疗前的水平,且剂量越低恢复越快;TE13细胞接受1、2、4和8Gy照射后24 h内r-H2AX均不能恢复到放疗前水平。(3)在0.5、1、2 h这3个时间点,随着放疗剂量的增加,r-H2AX的表达量并不都是逐渐增加。 结论   TE13细胞较ECA109细胞敏感,照射后r-H2AX更难恢复到正常水平。