头孢哌酮-舒巴坦药敏纸片中舒巴坦量对药敏结果的影响

目的 探讨头孢哌酮-舒巴坦药敏纸片中舒巴坦量对药敏结果 的影响.方法 用琼脂稀释法检测头孢哌酮、头孢哌酮-舒巴坦(2:1)和头孢哌酮-舒巴坦(1:1)3组药对临床分离的534株革兰阴性杆菌的MIC值;用纸片扩散法检测头孢哌酮、头孢哌酮-舒巴坦75/30μg和75/75μg 3种纸片对此534株菌的抑菌环直径;分析MIC结果 之间、纸片扩散法之间,以及2种药敏方法 之间的结果 是否有差异.结果 经琼脂稀释法检测头孢哌酮、头孢哌酮-舒巴坦(2:1)和(1:1)MIC_(50)分别为:32、16、16μg/ml,MIC_(90)分别为≥256,128,64μg/ml,Wilcoxon秩和检验两种药量配比MIC结果 无统计学差异(Z=-0.248,P=0.804);头孢哌酮-舒巴坦75/30μg药敏纸片(75/30纸片)检测的敏感率(S%)、耐药率(R%)和中介率(I%)分别为55.3%、24.5%和20.2%,与琼脂稀释法结果 相似.头孢哌酮-舒巴坦75/75μg(75/75纸片)敏感率、耐药率和中介率分别为72.5%、12.4%和15.1%,比75/30纸片检测的总敏感率高17.2%,对75/30纸片及75/75纸片测所有菌株的2组抑菌环直径进行配对t检验(t=21.613,P＜0.01),但这种差异只来自于CISI规定检测出的产ESBL菌株、鲍曼不动杆菌和未经ESBL检测的其他肠杆菌科菌株;而对铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌和ESBL阴性菌株的敏感率或耐药率差异无统计学意义.结论 头孢哌酮-舒巴坦(2:1)和(1:1)琼脂稀释法药敏结果 及75/30μg纸片法药敏结果 无差异.当使用75/75μg药敏纸片报告产ESBL菌株、鲍曼不动杆菌和其他肠杆菌科菌株的药敏结果 时,应注明舒巴坦的含量.     

嗜麦芽窄食单胞菌体外药敏试验方法研究

目的：比较纸片扩散法和琼脂稀释法作嗜麦芽窄度食单胞菌的药敏试验。方法：采用琼脂稀释法和纸片扩散法，测定嗜麦芽窄食单胞菌对14种抗菌药物的敏感度。结果：琼脂稀释法测得嗜麦芽窄食单胞菌对头孢哌酮和头孢哌酮一舒巴坦复方制剂敏感率最高，分别为92．2％和95％；其次为复方磺胺甲噁唑、替卡西林一克拉维酸、环丙沙星和哌拉西林一三唑巴坦，细菌敏感率分别为84．3％、87．3％、76．5％和75．5％。对大多数抗菌药物的敏感率琼脂稀释法较纸片扩散法高，其差异有显著性。结论：临床微生物实验室应以稀释法进行嗜麦芽窄食单胞菌的药物敏感性试验。     

3种药敏检测方法对洋葱伯克霍尔德菌体外抗菌药物药敏结果分析

目的评估微量肉汤稀释法、纸片扩散法和E-test法检测洋葱伯克霍尔德菌体外抗菌药物药敏试验的结果。方法采用微量肉汤稀释法、纸片扩散法和E-test法检测31株洋葱伯克霍尔德菌对复方磺胺甲噁唑、头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦、米诺环素、左氧氟沙星和美罗培南这6种抗菌药物的药敏性。以微量肉汤稀释法为参考方法,计算50%最低抑菌浓度(MIC_(50))、敏感率和误差率,分析基本一致率和分类一致率。结果复方磺胺甲噁唑的MIC_(50)为1.00μg/mL,敏感率为100.0%,体外活性最好。头孢哌酮/舒巴坦的MIC_(50)为16.00μg/mL,敏感率只有61.3%,体外活性最差。以微量肉汤稀释法为参考方法,E-test法检测头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦和左氧氟沙星的基本一致率和分类一致率均90.0%,且存在一定的误差率,其中左氧氟沙星的非常重大误差为6.5%,头孢哌酮/舒巴的重大误差为12.9%;纸片扩散法检测头孢他啶和头孢哌酮/舒巴坦的分类一致率90.0%,且存在一定的误差率,其中米诺环素的非常重大误差为6.5%,头孢哌酮/舒巴坦的重大误差为12.9%;E-test法和纸片扩散法检测复方磺胺甲噁唑和美罗培南敏感率均90.0%,分类一致率均90.0%。结论微量肉汤稀释法、纸片扩散法和E-test法检测洋葱伯克霍尔德菌可能存在不同的误差,应合理选择药敏检测方法,以确保结果的准确性。     

不同配比头孢哌酮钠/舒巴坦对革兰阴性杆菌体外抗菌效果影响

目的探讨头孢哌酮钠/舒巴坦75/30μg(SCF105)和75/75μg(SCF150)两种配比药敏纸片对革兰阴性杆菌的体外抗菌效果。方法用纸片扩散法检测SCF105和SCF150两种药敏纸片对临床分离的86株革兰阴性杆菌的抑菌环直径,比较药敏结果并分析两种药敏纸片对4种常见革兰阴性杆菌(铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及鲍曼不动杆菌)的抗菌效果。结果本研究检测86株革兰阴性杆菌的敏感率和中介率SCF150纸片均高于SCF105纸片(P0.01);SCF150纸片全部菌株的耐药率低于SCF105纸片(P0.01)。对4种革兰阴性杆菌的敏感率SCF150纸片均高于SCF105纸片,其中差异最明显的是大肠埃希菌(P0.05)。对全部菌株及4种革兰阴性杆菌抑菌环直径SCF105纸片均小于SCF150纸片(P0.05)。4种革兰阴性杆菌抑菌环直径两两比较显示,SCF105纸片中大肠埃希菌与2种菌株(铜绿假单胞菌及鲍曼不动杆菌)以及SCF150纸片中大肠埃希菌与其他3种菌株抑菌环直径比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论成分配比为75/75μg的头孢哌酮钠/舒巴坦药敏低纯对革兰阴性杆菌的体外抗菌效果更优。     

淋病奈瑟菌药敏试验方法及药敏纸片质量的初步评价

目的 评价淋病奈瑟菌（淋球菌）药物敏感性试验方法及了解药敏纸片的质量,为性病实验室选用药敏方法及药敏纸片提供参考依据。 方法 以琼脂稀释法作金标准,用纸片扩散法对5种常用国产及进口药敏纸片进行药敏试验,并将结果与金标准比对,同时比较药敏纸片的质量。 结果 纸片扩散法与琼脂稀释法的符合率：环丙沙星、大观霉素及质粒介导高度耐四环素淋球菌（TRNG）符合率均为100%,而头孢曲松符合率为 96.67%。国产药敏纸片及进口药敏纸片中环丙沙星、大观霉素、头孢曲松及四环素的符合率均为100%;而青霉素符合率为73.33%。 结论 CLSI推荐的淋球菌抗生素敏感试验琼脂稀释法和纸片扩散法检测头孢曲松药物结果存在差异,应引起重视。国产药敏纸片环丙沙星、大观霉素、头孢曲松、四环素可代替进口抗生素,而青霉素药敏纸片质量有待进一步探讨。     

头孢哌酮/舒巴坦对常见革兰阴性杆菌的体外抗菌作用

目的了解头孢哌酮/舒巴坦对常见革兰阴性杆菌的抗菌活性,为临床用药提供依据。方法收集我院分离的908株革兰阴性杆菌,采用K-B纸片扩散法测定头孢哌酮/舒巴坦对其抗菌活性,并与亚胺培南进行比较分析。结果头孢哌酮/舒巴坦对908株革兰阴性杆菌的总敏感率为93.4%,亚胺培南为92.1%;头孢哌酮/舒巴坦对鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌的敏感率为87.5%和89.1%,而亚胺培南为69.1%和77.3%。结论头孢哌酮/舒巴坦对常见革兰阴性杆菌有良好的抗菌活性,且对鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌的抗菌活性优于亚胺培南。     

铜绿假单胞菌和不动杆菌属对β-内酰胺类抗生素的耐药分析

目的:探讨铜绿假单胞菌和不动杆菌对β-内酰胺类抗生素的耐药趋势.方法:分别应用纸片琼脂扩散法(K-B)与浓度梯度法(E-test)对铜绿假单胞菌和不动杆菌进行药敏测试和分析.结果:亚胺培南和美罗培南对铜绿假单胞菌和不动杆菌属的敏感性均达80%以上.尤其是对不动杆菌属的敏感性达90%以上;哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦对铜绿假单胞菌的敏感性分别为69.1%、76.1%和63.1%,头孢哌酮/舒巴坦对不动杆菌属的敏感性为58.7%.结论:亚胺培南、美罗培南、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦对治疗铜绿假单胞菌和不动杆菌属所致感染有一定的疗效.     

2006年我院临床分离非发酵革兰阴性杆菌耐药性分析

目的 了解2006年我院临床分离非发酵革兰阴性杆菌的分布和耐药性.方法 采用法国梅里埃公司ATB细菌鉴定仪鉴定,药敏试验为K-B纸片扩散法.结果 铜绿假单胞菌对亚胺培南、头孢哌酮,舒巴坦、阿米卡星的耐药率均低于19%:鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率最低为4.5%,其次为头孢哌酮/舒巴坦8.3%;嗜麦芽窄食单胞菌对头孢哌酮,舒巴坦、替卡西林,克拉维酸、哌拉西林/三唑巴坦耐药率依次为0%、5.0%和10.0%.结论 非发酵革兰阴性杆菌的分离率、耐药性有升高趋势,应根据药敏试验结果选用抗菌药物.     

2006年我院临床分离非发酵革兰阴性杆菌耐药性分析

目的了解2006年我院临床分离非发酵革兰阴性杆菌的分布和耐药性。方法采用法国梅里埃公司ATB细菌鉴定仪鉴定,药敏试验为K-B纸片扩散法。结果铜绿假单胞菌对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星的耐药率均低于19%;鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率最低为4.5%,其次为头孢哌酮/舒巴坦8.3%;嗜麦芽窄食单胞菌对头孢哌酮/舒巴坦、替卡西林/克拉维酸、哌拉西林/三唑巴坦耐药率依次为0%、5.0%和10.0%。结论非发酵革兰阴性杆菌的分离率、耐药性有升高趋势,应根据药敏试验结果选用抗菌药物。     

CLSI推荐的琼脂稀释法与纸片扩散法对不动杆菌药敏检测的比较

目的比较美国临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐的不动杆菌抗生素敏感性试验琼脂稀释法和纸片扩散法检测结果。方法收集2005年1月至2006年10月临床分离的非重复不动杆菌234株,采用琼脂稀释法和纸片扩散法对临床常用的12种抗生素进行敏感性试验,比较2种检测结果的符合性。结果环丙沙星[极严重错误率(VME)0.43%]、庆大霉素[VME 1.28%,一般错误率(MIE)2.14%]、阿米卡星[VME 0.43%,严重错误率(ME)1.71%,MIE 4.27%]、四环素(VME 0.43%,MIE 8.97%)、复方磺胺甲唑(VME 0.85%,ME0.43%,MIE 1.28%)、亚胺培南(VME 0.85%,ME 0.85%,MIE 2.99%),2种方法差异在可接受范围,符合性较好。青霉素和头孢菌素类药物,除哌拉西林(VME 0.43%,MIE 5.98%)外,头孢他啶(VME 0.43%,MIE10.68%)、头孢曲松(MIE 18.38%)、头孢吡肟(VME 0.85%,ME 2.56%,MIE 25.64%)、氨苄西林-舒巴坦(VME 0.85%,MIE 38.03%)、头孢哌酮-舒巴坦(VME 6.84%,MIE 45.73%)符合性较差。结论CLSI推荐的不动杆菌抗生素敏感性试验琼脂稀释法和纸片扩散法检测青霉素类和头孢菌素类药物结果存在差异,应引起临床实验室关注。     

2010年CLSI三代头孢菌素折点改变对我国大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌及奇异变形杆菌药物敏感性结果解释的评估

目的评估2010年CLSI M100-S20(S20)及2009年CLSI M100-S19(S19)文件中CAZ、CTX、CRO新旧折点变化对我国如何解释产ESBL大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌体外药物敏感性试验结果的影响.方法收集2005-2007年中国15家医院SEANIR监测项目中3种细菌琼脂稀释法药敏结果,用PCR-基因序列分析法和(或)药敏表型分析法去除产AmpC酶的菌株.用CLSI琼脂稀释法确定ESBL表型.3种抗菌药物对2 733株大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌的敏感性用WHONET5.4软件分别按S19和S20折点进行回顾性分析.对北京协和医院同时有琼脂稀释法和纸片扩散法药敏结果的207株3种肠杆菌科细菌用WHONET5.4软件进行散点图和回归性分析,观察S19和S20折点下3种抗菌药物两种方法的相关性.结果产ESBL的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌对CTX的耐药率分别由S19折点(64μg/m1)下的65.2%、55.5%和14.6%上升为S20折点(4 μg/ml)下的99.7%、96.2%和93.8%,敏感率则由S19折点(8 μg/ml)下的6.0%、11.5%和33.3%下降至S20折点(1μg/ml)下的0%、0.2%和0%.CRO的结果与CTX相近.虽然在我国产ESBL的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对CAZ的敏感率比CTX和CRO高,它们的耐药率也由S19折点(32μg/ml)下的30.3%和43.2%升为S20折点(16μg/ml)下的41.9%和55.9%,敏感率则由S19折点(8μg/ml)下的58.1%和44.1%降至S20折点(4 μg/m1)下的44.7%和28.0%.不产ESBL的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌在CTX、CRO和CAZ新旧折点下的敏感率为99.2%～100.0%,耐药率为0%～0.4%.琼脂稀释法CTX和CRO S20折点与ESBL表型分布具有良好的对应关系;琼脂稀释法和纸片扩散法回归性分析得CAZ、CTX和CRO的r值分别为0.67、0.79和0.77,P均＜0.01,S20与S19相比,纸片扩散法药敏正确分类均在可接受范围内.结论应用S20 CTX和CRO的新折点,药敏结果与ESBL检测结果一致性大大提高,临床医生可根据药敏结果结合临床情况合理选择抗菌药物,细菌室可不报告ESBL表型情况.S20 CAZ新折点与我国临床治疗结局相关性还有待进一步评估.     

The in-vitro susceptibility of the Bacteroides fragilis group to amoxycillin-clavulanic acid

The susceptibility to amoxycillin-clavulanic acid of 150 strains belonging to the Bacteroides fragilis group was tested by both disc diffusion and agar dilution methods. On the basis of minimum inhibitory concentrations (MICs), at least 99% of the isolates were sensitive to this agent. However, problems encountered with the disc diffusion method suggest that at present it is unsatisfactory for assessing the in-vitro activity of amoxycillin-clavulanic acid against this group of organisms.     

Validation of a modified Kirby-Bauer disk diffusion method for metronidazole susceptibility testing of Helicobacter pylori

Triple antimicrobial therapy that includes metronidazole has been recommended as a first-line therapy for Helicobacter pylori because it has the highest eradication rates. However, resistance in H. pylori to metronidazole has been reported worldwide and its presence may reduce the efficacy of triple therapy. Various methods for testing H. pylori against metronidazole have been used including agar dilution, disk diffusion and the Etest but there has been little standardization of methods. One hundred isolates of H. pylori from different patients were tested for susceptibility to metronidazole by agar dilution, Etest and disk diffusion (5 μg disk). The agar dilution results confirmed the MIC susceptibility breakpoint to be ⩽8 μg/ml. Using this breakpoint there was close agreement (98%) between Etest and agar dilution results. For susceptible strains, MICs by E-test were generally one twofold dilution lower. Using the error-rate bounded method, agreement between disk diffusion zome diameter and MIC was 98% for agar dilution with breakpoints of ⩾12 mm and ⩽8 μg/ml and 100% for Etest with breakpointsof ⩾12 mm and ⩽8 μg/ml. The Etest discriminated better than agar dilution between susceptible and resistant strains and was simple to perform. The disk diffusion test is a reliable and cheaper alternative to the Etest with susceptibility being a zone diameter ⩾12 mm with a 5 μg disk. The prevalence of metronidazole resistance in this study was 40% by Etest.     

Antimicrobial susceptibility of community-acquired respiratory tract pathogens in the UK during 2002/3 determined locally and centrally by BSAC methods

OBJECTIVES: To determine the antimicrobial susceptibility of Haemophilus influenzae, Moraxella catarrhalis and Streptococcus pneumoniae causing community-acquired lower respiratory tract infection in the UK during 2002/2003 and to compare susceptibilities determined locally by disc diffusion with agar dilution MICs determined at a central laboratory. METHODS: H. influenzae, M. catarrhalis and S. pneumoniae were isolated in 30 laboratories and susceptibility determined locally by the BSAC standardized disc diffusion method. At a central laboratory, isolates were re-identified, tested for beta-lactamase production (H. influenzae and M. catarrhalis only) and MICs determined using the BSAC agar dilution method. RESULTS: Five hundred and eighty-one H. influenzae, 269 M. catarrhalis and 519 S. pneumoniae were collected. Over 93% of M. catarrhalis and nearly 15% of H. influenzae were beta-lactamase positive rendering these sub-populations resistant to aminopenicillins. Overall, the antibacterial susceptibility rates for the isolates were high. However, macrolides showed poor activity against H. influenzae (0.86-1.38% susceptible by disc or MIC methods) and, compared with other antimicrobials, against S. pneumoniae (approximately 88% susceptible). Between 84% and 95% of H. influenzae, M. catarrhalis and S. pneumoniae were susceptible to cefuroxime but all isolates were susceptible to cefotaxime. Eighty-five percent of H. influenzae were susceptible to trimethoprim. The fluoroquinolones were very active against the isolates, with moxifloxacin showing lower MICs than levofloxacin against S. pneumoniae. Susceptibility determined locally by disc diffusion was in general agreement with that determined centrally by agar dilution MIC testing. However, there was one inconsistency with H. influenzae where disc diffusion indicated 22.9% and 46.8% resistance to clarithromycin and erythromycin, respectively but by MIC, only 0.9% and 6.9% were resistant, respectively. CONCLUSIONS: Rates of resistance within community-acquired respiratory tract isolates were relatively low in the UK, in agreement with other studies. Moxifloxacin was the only antibacterial with over 99% isolates susceptible for each of the three pathogens investigated where breakpoints are available. The comparison between disc susceptibility testing and MIC determination using BSAC methods indicated generally good correlation but has highlighted a methodological problem with macrolides against H. influenzae in particular.     

2004-2005年住院患者细菌耐药监测研究

目的 监测和探讨我国不同地区的8所医院感染患者中分离细菌的耐药情况.方法 按照设计方案对7所医院从2004年9月1日至2005年8月31 日内分离的1 111株致病菌采用国际标准琼脂稀释法进行体外敏感试验,按照美国临床和实验室标准协会(CLSI)2007年的标准测定MIC,以MIC50和MIC90表示抗菌药物的抗菌活性,并计算出耐药率(R%)、中介率(I%)和敏感率(S%).结果 检测到的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)分别为39.3%和74.0%.未发现MRSA或MRSE对万古霉素耐药菌株.耐青霉素肺炎链球菌的总耐药率为33.3%(R%5.6%,1%27.7%).肠球菌91株,耐青霉素粪肠球菌40.8%,而耐青霉素屎肠球菌为100%.尚未发现对万古霉素耐药的肠球菌.分离到644株革兰阴性菌.最常见的细菌依次为;大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、不动杆菌、铜绿假单胞菌和阴沟肠杆菌.在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,产超广谱酶菌各占38.6%和26.7%.碳青霉烯类美罗培南、亚胺培南是所测定抗菌药物中对肠杆菌科细菌作用最强的抗牛素.多数革兰阴性杆菌对头孢哌酮/舒巴坦和头孢吡肟有很高敏感率.三代头孢中的头孢他啶对多数革兰阴性杆菌仍有很高敏感率.新喹诺酮类的莫西沙星、左氧沙星对革兰阳性和阴性菌均有很强的广谱抗菌作用.结论 本次监测(2004-2005年)与2002-2003年度监测结果显示,在致病菌的耐药类型和某些菌耐药增长趋势方面基本相似.     

Increase in the activity of third-generation cephalosporins in combination with clavulanic acid and Sulbactam against Bacteroides fragilis

We studied the sensitivity of 160 strains of Bacteroides fragilis (74 beta-lactamase-positive and 86 beta-lactamase-negative) to four third-generation cephalosporins, alone as well as in combination with clavulanic acid and Sulbactam. For susceptibility testing we used a dilution method in agar. Detection of beta-lactamase production by this micro-organism was performed using chromogenic cephalosporin (Nitrocefin). There was a substantial improvement in cephalosporin activity with both positive and negative strains when they were combined with the inhibitors, although this was more significant in beta-lactamase-producing organisms. Generally, the results achieved in combination with clavulanic acid were better than those with Sulbactam, the highest increase in activity being obtained with Ceftizoxime in combination with any one of the inhibitors.     

异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌的分离及检测方法的建立

目的 了解异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌(h-VISA)的分离情况,并筛选简便可行的h-VISA的检测方法.方法 采用琼脂稀释法和E-test法对分离出的113株金黄色葡萄球菌进行检测,筛选出的可疑h-VISA用菌谱分析法进行确认,并对文献推荐的几种方法的筛选效果进行比较.结果 检测到1株万古霉素的MIC为3 μg/mL和2株MIC为4 μg/mL的MRSA,为万古霉素敏感性减低的金黄色葡萄球菌,其中1株MIC为4 μg/mL的MRSA经菌谱分析法证实为h-VISA,本次113株实验菌株h-VISA的检出率为0.88%.结论 通过实验证实K-B法并不是检测h-VISA的理想方法,而菌谱分析法则较为有效,分离率为8.3%,且在本实验中灵敏度可达10-8.本院分离的MRSA中已出现万古霉素敏感性减低菌株,并分离出1株h-VISA,可见,MRSA对万古霉素的异质性中介耐药不容忽视,应引起国内医学界的广泛重视.     

杭州市产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性研究

目的 :了解杭州市产超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药情况。 方法 :收集杭州市区 5所医院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共 198株 ,用酶抑制剂增强纸片扩散试验确证产ESBLs细菌 ,琼脂扩散法测定其对17种抗菌药物的敏感性。结果 :12 7株大肠埃希菌和 71株肺炎克雷伯菌ESBLs检出率分别为 31.5 %和 15 .5 %。产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南和美罗培南耐药率为 0 ,抗菌作用较强的抗生素还有拉氧头孢、头孢哌酮 舒巴坦和哌拉西林 三唑巴坦 ,耐药率分别为 3.9%、3.9%和 2 3.5 %。而氨苄西林、复方磺胺甲唑、氨苄西林 舒巴坦、替卡西林 克拉维酸、阿莫西林 克拉维酸和环丙沙星的耐药率均 >5 0 %。结论 :产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药率较高 ,临床治疗中要选择适当抗菌药并对产ESBLs菌株实行监控。     

耐万古霉素肠球菌的基因检测

目的 调查上海华山医院2007-2009年间VRE的分离率,并对耐药菌株的分子特性进行研究,为本地区VRE的预防和控制提供有价值的信息.方法 通过琼脂平板稀释法(ADSP)从临床鉴定的890株肠球菌中筛选VRE菌株,并通过微量肉汤稀释实验测其对万古霉素及替考拉宁的MIC;采用PCR及测序方法检测万古霉素耐药基因以及可能毒力基因esp,hyl;运用MLST对VRE进行克隆分型并通过PFGE分型技术进行验证.结果 ADSP法及微量肉汤稀释实验共筛选出13株VRE菌株.其中6株VRE(2007-2008年)只对万古霉素耐药,但对于替考拉宁敏感(万古霉素MIC64～256μg/ml);耐药基因PCR产物测序结果提示这6株VRE均携带同一种可能导致万古霉素耐药的新型基因,该基因序列与已报道的耐药基因均不同;MLST及PFGE分型提示其属于不同型别.另外7株VRE(2009年1-7月)对万古霉素和替考拉宁的MIC结果分别为32～64μg/ml和16～32 μg/ml,耐药基因检测均为vanA.MLST分型结果提示13株VRE共分为4个不同的ST型,其中11株均属克隆复合型CC-17.13株VRE毒力基因esp和hyl的阳性率分别为69.2%和30.8%.结论 上海华山医院VRE克隆分型以CC17为主,同时发现上海华山医院存在一种可能导致万古霉素耐药的新型基因介导的VRE,该新基因的功能和定位尚待进一步研究.