胆管癌组织及胆汁中端粒酶活性的检测及意义

目的：检测胆管癌组织和胆汁中的端粒酶活性，以研究与端粒酶与胆管癌的关系及对胆管癌的诊断意义。方法：用PCR—ELISA方法检测20例胆管癌的癌组织和胆汁中端粒酶活性，同时用相同的方法检测20例正常胆管组织和胆汁中的端粒酶活性以作对照。结果：20例胆管癌组织中，端粒酶活性阳性为80％（16／20），胆汁中端粒酶活性阳性率75％（15／20）。正常胆管组织端粒酶活性阳性表达率为0（0／20），胆汁中端粒酶活性阳性率为0（0／20）。结论：端粒酶可能参与了胆管癌的发生发展过程，检测胆汁中端粒酶活性可有助于胆管癌的诊断。     

端粒酶活性与宫颈癌及子宫颈上皮内瘤样变的关系

目的探讨端粒酶活性与宫颈癌及子宫颈上皮内瘤样变（CIN）的相关性。方法对50例浸润型宫颈癌,152例CIN（CINⅢ级58例、CINⅡ级44例、CIN级Ⅰ50例）和66例正常者的宫颈新鲜组织,用端粒酶重复扩增法-聚合酶链反应（TRAP-PCR）检测端粒酶活性。结果宫颈癌组中,端粒酶阳性42例（84.0%）;CINⅢ级中端粒酶阳性33例（56.9%）;CINⅡ级中,端粒酶阳性15例（34.1%）;CINⅠ级中,端粒酶阳性12例（24.0%）。而66例正常宫颈组织仅有3例（4.55%）端粒酶活性表达,宫颈癌和CINⅢ组织端粒酶活性表达差异有统计学意义（P〈0.01）,CINⅢ级与正常对照组织端粒酶活性表达差异有统计学意义（P〈0.01）。结论端粒酶活性在宫颈癌发生中可能起到重要作用,在子宫颈病变中检测端粒酶活性,对探讨宫颈病变的进展和宫颈癌的发生具有重要意义。     

P16INK4A、Brn-3a、C-myc及端粒酶在宫颈癌中的诊断价值研究

目的 探讨P16INK4A、Brn-3a及C-myc基因表达及端粒酶活性在宫颈癌诊断中的价值。方法 选取2012年3月至2014年5月接受手术治疗的宫颈癌患者40例,检测宫颈癌组织中P16INK4A、Brn-3a、C-myc的表达情况及端粒酶活性水平。同时选取40例宫颈上皮内瘤样病变（CIN）组织和28例正常宫颈组织作对比。采用受试者工作特征曲线（ROC）评价组织中P16INK4A、Brn-3a、原癌基因C-myc及端粒酶活性水平在宫颈癌诊断中的价值。结果 宫颈癌组织中P16INK4A、Brn-3a和C-myc的阳性表达率分别为100.0％、95.0％和100.0％,均高于正常宫颈和CIN组织,差异有统计学意义（P＜0.05）;CIN Ⅱ和CIN Ⅲ组织的P16INK4A阳性表达率高于正常宫颈和CINⅠ组织（P＜0.05）;正常宫颈组织中Brn-3a和C-myc阳性表达率均为7.14％,明显低于其他组织（P＜0.05）;宫颈癌组织中端粒酶活性水平为（44.38±3.82）U／g,高于其余各组,差异有统计学意义（P＜0.05）。Brn-3a、C-myc诊断宫颈癌的曲线下面积Az＞0.8,且灵敏度和特异度均在80.0％以上,而P16INK4A及端粒酶活性水平的诊断效能相对较低,但4个指标联合检测的诊断效能获提高,灵敏度和特异度分别为89.5％和83.4%,曲线下面积Az为0.879。结论 宫颈癌组织中P16INK4A、Brn-3a、C-myc表达水平和端粒酶活性异常,可能与宫颈癌的发生发展有密切关系,可作为宫颈癌诊断的参考指标。     

前列腺衰老逃逸现象的实验研究

目的：了解良性前列腺增生腺体中不同组织的端粒酶阳性细胞分布情况，从端粒酶角度研究前列腺增生的机制。方法：采用TRAPHyb Kit测定端粒酶活性。实验分两步。第一步，测定正常前列腺与良性增生腺体的端粒酶阳性率。第二步，测定前列腺增生腺体中增生结节和包膜的端粒酶活性。结果：13例正常前列腺端粒酶阳性率为15．38％（2／13），35例前列腺增生组织端粒酶阳性率为25．71％（9／35）。增生结节、包膜各33管中端粒酶阳性率分别为42．42％（14／33）和3．03％（1／33）；前列腺增生组织中端粒酶阳性表达率显著高于正常前列腺组织，P〈0．01，增生结节阳性率高于包膜组织，P〈0．05。结论：前列腺增生组织中端粒酶活性升高，前列腺增生组织中端粒酶分布不均匀，增生结节含端粒酶阳性细胞高于包膜组织。提示前列腺的衰老逃逸可能与端粒酶活性有关。     

端粒酶活性检测在膀胱肿瘤早期诊断中的应用

目的：探讨检测端粒酶活性在膀胱癌早期诊断中的临床意义。方法：采用TRAP-PCR-ELISA法检测32例膀胱癌患者尿液和膀胱冲洗液中脱落细胞、膀胱癌组织、20例正常膀胱组织及14例非膀胱肿瘤患者尿液脱落细胞中端粒酶活性，并行尿脱落细胞学检查。结果：32例膀胱癌患者尿液脱落细胞、膀胱冲洗液脱落细胞、膀胱癌组织中端粒酶活性阳性率分别为65．6％（21／32）、71．9％（23／32）和84．0％（27／32），20例正常膀胱组织端粒酶活性均为阴性，14例非膀胱肿瘤患者尿液中1例端粒酶活性阳性。端粒酶活性阳性表达与肿瘤的分级、分期之间差异无明显相关性（P〉0．05），敏感性明显高于脱落细胞病理学检查。结论：尿液、膀胱冲洗液脱落细胞端粒酶活性测定敏感性较高．可用于膀胱癌的早期诊断。     

端粒酶hTRT在原发性肺癌中的表达

目的：探讨原发性肺癌组织中端粒酶反转录酶（hTRT)的表达和端粒酶活性的关系以及在肺癌分子生物学诊断的临床意义。方法：用免疫组化和TRAP法分别观察54例原发性肺癌和10例正常肺组织，比较分析它们的相关性；结果：hTRT阳性率83％（45／54）端粒酶活性阳性率85％（46／54），在肺癌组中3例术前化疗患者hTRT表达2例呈弱阳性1例阴性，肺癌淋巴结转移的hTRT阳性率达92％，5例小细胞肺癌hTRT均为阳性，10例正常肺组织均为阴性。结论：抗hTRT抗体在肺癌中具有癌细胞的特征性，并与端粒酶活性呈正相关，可作为肺癌诊断的灵敏性和特异性的指标，用免疫组化法比TRAP法检测肺癌中端粒酶的活性将更为简便易行。     

端粒酶逆转录酶在食管癌中表达

目的：探讨食管癌组织中端粒酶逆转录酶（hTRT)的表达和端粒酶活性的关系。评价端粒酶hTRT表达检测在食管癌诊断中的价值。方法：用免疫组化和TRAP法分别观察58例食管癌和28例正常食管组织,比较分析它们的相关性。结果：58例食管癌hTRT阳性率83％（48／58）,端粒酶活性阳性率86％（50／58）,28例正常食管组织均为阴性。中低分化的食管癌端粒酶hTRT及端粒酶活性阳性高于高分化食管癌。结论：抗hTRT抗体在食管癌中具有癌细胞的特征性,并与端粒酶活性呈正相关。随组织学分级的增高,端粒酶hTRT及端粒酶活性阳性率增高。提示其检测有望成为预测舯瘤发生、肿瘤诊断的良好指标。用免疫组化法比TRAP法检测食管癌中端粒酶的活性将更为简便易行。     

食管拉网细胞端粒酶活性检测及临床应用研究

目的：检测食管拉网细胞中端粒酶活性，探讨其在食管癌诊断及预测预后的临床应用价值。方法：应用端粒重复序列扩增法，对３０例食管拉网细胞标本及相应的癌组织和癌旁正常食管组织进行检测。结果：３０例食管拉网标本中端粒酶活性阳性率为８３．３％（２５／３０），相应癌组织中阳性率为９６．７％（２９／３０），１４例正常食管组织中阳性率为１４．３％（２／１４）。拉网细胞和癌组织中端粒酶阳性率与正常组织相比较差异有显著     

新疆子宫颈癌的端粒酶活性研究

目的：探讨端粒酶活性与宫颈癌发生发展的关系及其在宫颈癌中的临床诊断价值。方法：用TRAP－ELISA法检测34例宫颈癌和21例正常宫颈的新鲜组织及脱落细胞标本的端粒酶活性,并进行比较。结果：宫颈癌细胞中端粒酶阳性检出率为88．2％,显著高于正常宫颈细胞的阳性检出率（9．5％）,端粒酶活性水平与宫颈癌临床分期,组织学分化无关。脱落细胞检测宫颈细胞的端粒酶活性与新鲜组织检测的结果一致。结论：端粒酶活性可作为宫颈癌的肿瘤标记物。用TRAP－ELISA法对宫颈脱落细胞行端粒酶检测有助于宫颈癌的筛查。     

消化道恶性肿瘤组织中端粒酶的检测及其意义

目的 探讨端粒酶活性在恶性肿瘤诊断中的意义。方法 采用TRAP－ELISA方法,对41例消化系统恶性肿瘤及10例良性疾病组织中的端粒酶活性进行检测并相互比较。结果 恶性肿瘤细胞中端粒酶活性的检测阳性率为75．6％（31／41）,端粒酶活性与组织类型、分化程度无明显相关性;良性疾病组织中端粒酶活性的检测阳性率为20．0％（2／10）。结论 大多数消化系统恶性肿瘤组织中有端粒酶活性,端粒酶活性的检测可能成为恶性肿瘤1个诊断指标。     

Semiquantitative analysis of telomerase activity in cervical cancer and precancerous lesions

We investigated telomerase expression in cervical lesions and its diagnostic value for cervical cancer and the precancerous lesions. The subjects were 100 women who underwent cervical biopsy, comprising 16 normal cervix, 61 cervical intraepithelial neoplasia (CIN) and 23 invasive cervical cancer. Telomerase activity was detected by the telomerase repeat amplification protocol using a non-radioisotope system, and quantitated using a DNA image analyzing system. Telomerase was detected at 18.8% (3/16) in normal cervix, 32. 0% (8/25) in CIN I, 50.0% (3/6) in CIN II, 60.0% (18/30) in CIN III, and 91.3% (21/23) in invasive cervical cancer. Semiquantitation of telomerase activity was significantly higher in the subjects with invasive cancer than in those with CIN or a normal cervix (p<0.05). However, telomerase activity was not significantly different between the grades of CIN. Telomerase was detected in subjects with CIN, suggesting that telomerase expression is an early event in cervical carcinogenesis. Quantitation of telomerase activity may be helpful for the diagnosis of cervical cancer.     

Telomerase activity and human papillomavirus (HPV) infection in human uterine cervical cancers and cervical smears

Telomerase activity and human papillomavirus (HPV) infection were investigated in uterine cervical samples using molecular biology techniques. Thirteen cervical carcinomas and corresponding normal tissue from the same patient, and 102 cervical swabs were examined. Telomerase activity was detected in 12 of 13 cervical cancer tissues (92%). Of the 12 cases that showed telomerase activity, all were HPV positive, and the one case that did not show telomerase activity was HPV negative. A telomeric repeat amplification protocol assay detected telomerase activity in one out of seven normal cervical tissues (14%), and this one case was HPV positive. In cervical smear samples, telomerase activity was detected in two out of 36 normal smears (6%; both HPV positive), in 10 of 32 (31%) CIN1 (cervical intra-epithelial neoplasia) cases (three HPV positive), in four of five (80%) CIN2 cases (two HPV positive), in 15 of 21 (71%) CIN3 cases, (seven HPV positive) and in seven of eight (88%) squamous cell carcinoma cases (six HPV positive). These results suggest that telomerase activity may play some role in cervical carcinogenesis, and telomerase activity is associated with HPV infection in uterine cervical lesions.     

宫颈癌组织中LRP16和CIAP2的表达及其意义

目的:探讨宫颈癌组织中LRP16和CIAP2蛋白的表达及其与临床病理特征的关系。方法:采用免疫组化的方法检测正常宫颈组织24例,宫颈上皮内瘤变（CIN）30例（CINⅠ+CINⅡ18例,CINⅢ12例）,宫颈癌组织66例中LRP16和CIAP2的表达,分析其与患者年龄、宫颈癌临床分期、组织学分级、病理类型及有无淋巴结转移的关系。结果:LRP16在正常宫颈组织,CINⅠ+CINⅡ、CINⅢ,宫颈癌组织中的阳性表达率分别为16.67%,33.33%,66.67%,69.70%;CIAP2为8.33%,22.22%,50.00%,53.03%。宫颈癌组和正常宫颈组、CINⅠ-Ⅱ组相比较差异均有统计学意义（P<0.05）,宫颈癌组和CINⅢ组比较差异无明显的统计学意义（P>0.05）。LRP16蛋白的表达水平与CIN及宫颈癌呈正相关,检测LRP16对了解CIN及宫颈癌生物学行为和评估预后具有一定的价值。LRP16和CIAP2的阳性表达率与临床分期、组织学分级和有无淋巴结转移均有相关性（P<0.05）;LRP16和CIAP2的表达存在正相关性（P<0.05）。结论:LRP16和CIAP2在宫颈癌组织中表达水平的上调可能在宫颈癌的发生发展和转移浸润中起着重要的作用。     

KAI1蛋白与人乳头状瘤病毒E6、E7蛋白在子宫颈癌组织中的表达及其意义

目的 探讨高危型人乳头状瘤病毒（HPV）感染和肿瘤转移抑制蛋白KAIl在子宫颈癌形成及进展中的意义.方法 对117例石蜡包埋子宫颈组织[正常对照20例、子宫颈上皮内瘤样病变（CIN）58例、子宫颈癌39例]采用免疫组织化学SP法检测KAI1蛋白、HPV16/18E6、HPV16E7蛋白的表达情况.结果 在正常子宫颈组织、CIN和子宫颈癌组织中,KAII阳性表达率分别为90.0％（18/20）、72.4％（42/58）、25.6％（10/39）,呈下降趋势,差异有统计学意义（P＜0.01）. HPVI6/18E6阳性表达率分别为0（0/20）、31.0％（18/58）、41.0％（16/39）,差异有统计学意义（P＜ 0.01）;HPV16E7阳性表达率分别为0（0/20）、34.5％（20/58）、64.1％（25/39）,差异有统计学意义（P＜0.01）.但KAI1与HPV16/18E6、HPV16E7阳性表达间无相关性（P=0.429）.KAI1蛋白在子宫颈癌中的阳性表达率与细胞分化程度、临床分期、淋巴结转移有关（均P＜ 0.05）,与发病年龄无关（P＞0.05）;HPV感染与子宫颈癌发病年龄、临床分期、细胞分化程度、淋巴结转移均无关（均P＞ 0.05）.结论 KAI1蛋白在子宫颈癌中的表达下调,HPV16/18E6、HPV16E7感染与KAI1蛋白表达无关.     

DEK蛋白在宫颈癌病因学中的意义研究

目的:检测DEK蛋白在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌组织中的表达情况,探讨其在宫颈癌发病机制中的作用。方法:采用免疫组织化学方法检测DEK蛋白在35例宫颈癌组织,30例宫颈上皮内瘤变(CIN)及20例正常宫颈组织的表达情况,分析DEK蛋白的表达与宫颈癌发生的关系。结果:宫颈癌组织中DEK蛋白表达率(74.3%)高于宫颈上皮内瘤变组织(23.3%)和正常组织(15.0%),差异具有显著性意义(P<0.05),宫颈上皮内瘤变组织和正常组织,二者无统计学意义(P>0.05)。结论:DEK蛋白在宫颈癌中表达升高,可能与宫颈癌的发生有关,DEK蛋白可作为宫颈癌病因学的一个新指标。     

DEK蛋白在宫颈癌病因学中的意义研究

目的：检测DEK蛋白在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变（CIN）及宫颈癌组织中的表达情况,探讨其在宫颈癌发病机制中的作用。方法：采用免疫组织化学方法检测DEK蛋白在35例宫颈癌组织,30例宫颈上皮内瘤变（CIN）及20例正常宫颈组织的表达情况,分析DEK蛋白的表达与宫颈癌发生的关系。结果：宫颈癌组织中DEK蛋白表达率（74．3％）高于宫颈上皮内瘤变组织（23．3％）和正常组织（15．0％）,差异具有显著性意义（P〈0．05）,宫颈上皮内瘤变组织和正常组织,二者无统计学意义（P〉0．05）。结论：DEK蛋白在宫颈癌中表达升高,可能与宫颈癌的发生有关,DEK蛋白可作为宫颈癌病因学的一个新指标。     

细胞周期抑制蛋白p16^INK4a在宫颈病变中的异常表达

[目的]探讨宫颈癌（UCC）、宫颈上皮内瘤变（CIN）及宫颈炎中p16^INK4a蛋白表达水平的变化及意义。[方法]应用免疫组化方法检测126例宫颈病变（UCC50例、CIN57例和宫颈炎19例）组织中p16^INK4a蛋白的表达，进行半定量分析及统计学检验。[结果]50例UCC中，p16^INK4a全部阳性表达；57例CIN中，p16^INK4a阳性表达41例，阳性表达率为71．93％，其中CIN Ⅰ，CINⅡ，CINⅢ p16^INK4a阳性表达率分别为36．84％（7／19）、81．82％（18／22）、100．00％（16／16），且三者间差异有显著性（P〈0．05）。19例宫颈炎组织中，p16^INK4a阳性表达8例，阳性表达率为42．11％。p16^INK4a蛋白在宫颈炎、CIN和UCC组织中表达水平依次升高，且差异有显著性（P〈0．05）。[结论]UCC及癌前病变中p16^INK4a阳性表达明显高于良性病变。p16^INK4a在UCC及癌前病变中过表达，提示其在UCC发生、发展中起重要作用。     

子宫颈癌SOX9基因甲基化早期诊断价值探讨

目的检测宫颈癌和宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）脱落细胞中SOX9基因甲基化水平,为子宫颈癌的早期诊断提供新的分子标志。方法收集2010-03-01-2011-06-30就诊于首都医科大学附属北京妇产医院肿瘤科患者的宫颈脱落细胞156例,采用双探针实时定量聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）技术,定量检测正常宫颈组（48例）、CINⅠ组（30例）、CINⅡ-Ⅲ组（30例）和宫颈癌组（48例）的宫颈脱落细胞中SOX9基因甲基化水平,分析SOX9基因甲基化与各级别宫颈病变的关系。结果正常宫颈组SOX9基因甲基化水平（甲基化评分）17.93±4.33,CINⅠ组为10.35±4.06,CINⅡ-Ⅲ组为33.17±15.19,宫颈癌组为48.04±24.03。SOX9基因甲基化水平随宫颈病变级别的增加而升高,且在CINⅡ-Ⅲ组和宫颈癌组中显著升高。CINⅠ组和正常宫颈组脱落细胞甲基化水平差异无统计学意义,P=0.062;SOX9基因甲基化水平在其余任意两组间差异均有统计学意义,P〈0.001。SOX9基因甲基化评分可有效区分宫颈癌/CINⅡ-Ⅲ和CINⅠ/正常宫颈,受试者工作特征曲线下面积（area under the receiver operating characteristic curve,AUC）为0.961（95%CI：0.933-0.990）,P〈0.001。在最佳临界值,SOX9基因甲基化评分检测宫颈癌/CINⅡ-Ⅲ的敏感度为92.3%,特异度为89.7%。结论甲基化SOX9基因能够有效诊断宫颈癌/CINⅡ-Ⅲ,可以作为子宫颈癌早期诊断的分子标志。     

人类端粒酶RNA和C-myc基因在子宫颈癌及癌前病变组织中的表达及其临床意义

目的探讨人类端粒酶RNA（hTERC）及原癌基因C—myc在子宫颈病变中的表达。方法荧光原位杂交（FISH）法检测35例子宫颈上皮内瘤样病变（CIN）、8例浸润性子宫颈癌、19例炎性反应（对照）患者子宫颈组织中hTERC和C-myc基因的表达情况。结果3号染色体上的hTERC基因在慢性子宫颈炎组织、CINⅠ、CINⅡ～Ⅲ及子宫颈癌中的阳性率分别为5．3％（1／19）、16．7％（2／12）、87．0％（20／23）及87．5％（7／8）,CINⅡ～Ⅲ及子宫颈癌中阳性率明显升高（χ^2=36．299,P〈0．01;χ^2=40．237,P〈0．01）,原癌基因C-myc阳性率分别为5．3％（1／19）、8．3％（1／12）、78．3％（18／23）及62．5％（5／8）,CINⅡ-Ⅲ及子宫颈癌中阳性率明显升高（χ^2=30．200,P〈0．01;χ^2=34．224,P〈0．01）。CINⅡ～Ⅲ及子宫颈癌中hTERC和C—myc基因表达之间呈正相关（r=0．514,P〈0．01）。结论3号染色体上hTERC基因及原癌基因C-myc的阳性表达与子宫颈癌的发生、发展可能有密切关系。