薄切片的放射自显影术

薄切片是指厚度为0．5～1μm的树脂类切片。文献中称它为厚切片（thicksection）或半薄切片（semithinsectio）,籍以与电镜观察用的薄切片（thinsection）区别。我国已习惯称电镜用的切片为超薄切片,因此,把这类切片称薄切片就能说明其比超薄切片厚,比普通石蜡切片薄的特性。用薄切片作放射自显影具有下列优点：（1）改善分辨力：放射自显影象的分辨力与样品的厚度成反比,薄切片的厚度低于普通石蜡切片,所以其分辨力高于用石蜡切片制作的放射自显影象的。（2）减少人工假象：用薄切片作放射自显影,不需去除包埋剂,因此,提供了平正…     

一种重包埋方法的应用

目前普遍使用的简单定向方法,是先在包埋对使样品定向,以后再将聚合好的包埋块切一张大面积的1—2微米的厚切片,经光学显微镜检查找出所需要的部位,做好标记,然后对照厚切片修整样品再作超薄切片。Grimley 曾报道一种简单的重包埋方法,将包埋的组织块简单地切成一张1—8微米的厚片,贴在盖玻片上染色后,在光学显微镜下找出需要进行电镜观察的部位,标上记     

介绍一种超薄切片中细胞定位的薄层包埋方法

电子显微技术中,对研究材料中的特定组织或细胞的定位在超薄切片时是最困难的一步。曾提出的用还氧树脂厚切片重新包埋的方法以及类似的厚切片重新粘贴法在克服这一困难上有很好的效果。对于单细胞或分离的原生质体,以及花粉和萌发的花粉管等材料,电镜样品的制作常用离心进行材料的收集、固定、脱水和渗透等步骤,并按寻常的方法     

菜粉蝶幼虫感染颗粒体病毒后线粒体形态异常变化的初步观察

病毒侵入昆虫后引起细胞器形态变化的报道很少。我们进行菜粉蝶颗粒体病毒组织病理观察时,在脂肪细胞中,观察到线粒体有异常形态变化现象,现简要报道如下。 用病毒悬液浸湿甘蓝叶,晾干后饲喂3龄幼虫,感染后第3天,截取虫体中段,戍二醛和锇酸固定,618环氧树脂包埋,醋酸铀染色,透射电镜观察。 在脂肪细胞的超薄切片中,可以看到有些线粒体近似环状或液泡状,在有的切片中,此种线粒体的比例很大(图版Ⅰ:2),但在正常幼虫脂肪组织的超薄切片中,极少观察到此种形状的线粒体(图版Ⅰ:1)。     

一种简单实用的连续半薄切片技术

一种简单实用的连续半薄切片技术常规的半薄切片法有两种：一是干刀法，玻璃刀不装水槽，切一片，用尖头镊子夹取切片边缘，放到滴有蒸馏水的载玻片上。二是湿刀法，玻璃刀上安装水槽，切一片，待其在水中展开，用睫毛针从边缘捞起，放于载玻片的水滴中。在没有专用超薄切...     

花粉壁的透射电镜标本制备

在透射电镜下观察花粉壁的超薄切片,是当前研究花粉外壁构造的重要方法,也是鉴定花粉的重要依据。但花粉外壁主要由孢粉素组成,因此很坚硬,所以在制备花粉壁的超薄切片时,溶剂较难渗入,给包埋和切片造成一定的困难。本文介绍的方法,是作者多次实验的总结。依照此方法可以得到较为满意的结果。     

一种调节超薄切片机标本块与刀距的简易装置

在使用超薄切片机时,调节标本块与刀之间的距离时往往会遇到一些困难。开始切片时,如舉两者之间距离过大,会造成切片机之标本臂往返运动而切不到切片;反之,如果把标本块的顶端调节到超过刀口的位置,则又会因一刀切得太厚而损坏了刀口和标本。为了解决这个问题,我们参考了LKB修块机等有关资料,制作了一个简易的照明装置(图1a)。该     

保持培养细胞原位、原形的超薄切片制备法

本文介绍先用环氧树脂Epon812包埋剂制成丘状膜,再在膜上培养细胞,直接将膜与细胞一起包埋,制备超薄切片。此种方法不仅能克服以往培养细胞需要离心成团,容易造成细胞破碎、变形的缺点;还能避免琼脂预包埋法悬浮细胞造成的抗原封闭;并能得到为数较多的连续超薄切片。它操作简便,较好地保持了培养细胞生长的原来位置及原有形状,为培养细胞进行免疫电镜的操作和提高制备培养细胞超薄切片的数量和质量提供了一种有效的途径。     

超薄切片染色后一种简易快速的洗涤法

超薄切片在电镜观察之前染色这一关是比较麻烦,也是比较重要的一关。现在LKB公司虽然已经生产出一种超薄切片自动染色器,每次同时能染色25个铜网,给超薄切片染色带来了很大的方便。但是该仪器价格昂贵(近一万美元),很不经济。因此目前大多数工作者仍以传统的方法进行染色,即液滴染色法。但用这种传统的方法染色是很麻烦的,尤其是在染色后     

改装FOK型超微切片机

FOK型超微切片机(图1),适合于切动植物组织的切片,所切之厚薄介于0.05-5微米之间,原机器是使用刮脸刀片作为薄切的刀。有一个固定刀片的台于,刀片按装好;由带有齿轮之轴向前推动,轴之前面有上下跳动之杠杆,调节切片之厚薄,在杠杆前端有按装包埋组织聚合物的固定装置,用手摇动机柄时,螺旋轴问前转动,杠杆上下跳动便可进行薄切,薄切的同时还可以调节厚度。这种机器因为按装的刀片太厚,刀锋又不锐利,一般很难切出0.05微米厚的薄切片,并     

对虾病毒病和细菌合并感染的病理特点和诊断价值

应用电镜超薄切片及光学石蜡切和环氧树脂薄片技术,观察健康对照组,疾病始发组和濒临死亡组的草虾,中国对虾、日本对虾和肝胰腺和中肠。结果在３组４种对虾中均检测到病毒,只在濒临死亡组的４种对虾中发现病毒与细菌的合并感染。合并染的病毒有ＭＢＶ,球形病毒和淋细胞核型杆状病毒。细菌以弧菌为主。其病理变化表现为器官和组织的保护层受损、溶解样坏死和凝固样坏死,仅以病毒和细菌合并感染徐为养殖对虾病毒病早期诊断的指标     

用水溶性环氧树脂包埋生物组织和制片方法

有各种包埋介质可用于生物组织的电子显微镜超薄切片和光学显微镜切片,其中以环氧树脂(如Epon 812、国产环氧树脂~#618等)使用最广泛。但大多数包埋介质是不溶于水的。常规的组织脱水剂如乙醇、丙酮和环氧丙烷(propykne oxide),它们都是良好的脂溶剂,因此组织中脂肪和蛋白质可能在脱水过程中往往被流失,而引起细胞亚显微结构的人工损伤。近年来新出现的水溶性包埋剂也能作脱水剂使     

单殖目双睾吸虫(Diplorchis sp.)钩毛蚴眼点的超微结构

双睾吸虫自由生活的幼虫(钩毛蚴)是由寄生在沼蛙(Rana guentheri Boulcnger)膀胱内的成熟虫体所产的虫卵孵化而获得。按常规的方法清洗虫体后,于2％戊二醛和1％锇酸中双重固定,然后在各等级浓度的乙醇和丙酮中脱水,用618~#环氧树脂和Epon 812包埋剂浸透和包埋。经超薄切片后用醋酸铀和柠檬酸铅染色,最后在JEOL,JEM-100CXI,型透射电子显微镜下观察并进行显微摄影。     

花粉亚显微结构研究技术

做过花粉超薄切片的人们都知道,要想得到充整满意的连续切片和清晰的花粉电镜照片是比较困难的。造成闲难的原因主要有:(1)花药壁(尤其是禾本科植物的花药壁)外表皮上有一层较厚的蜡质,在固定、脱水及包埋过程中溶剂较难渗入。(2)花粉囊中往往有空气,花药漂浮在固定液上不下沉。(3)较成熟的小孢予的外壁厚而坚硬,其内壁也较厚。花粉外壁的主要成份是能耐酸、碱和射线的孢粉素。外壁不仅是溶剂渗透的重要障碍,而且在切片时     

用于光学显微镜研究的塑料半薄切片

本文介绍了以环氧树脂为包埋介质的用于光学显微镜的塑料半薄切片的制备技术和部分实验结果。叙述了固定、脱水、渗透、包埋、聚合、切片、染色及封片各程序。作为对石蜡切片技术的补充和发展。塑料半薄切片能充分发挥光学显微镜的分辨能力,能观察到许多在石蜡切片上看不清或看不到的细胞内部结构,如:花粉的外粉壁,萌发孔;细胞的微核,液泡和液泡问的原生质丝等。可用同一包埋材料在半薄切片基础上进行超薄切片,所以半薄切片技术是一种把光学显微镜水平的研究和电子显微镜水平的研究联系在一起的一种过渡性技术。因此,它无论对植物学工作者或其它生物学工作者都是很有用的一项技术。     

不同厚度细胞薄切片对 AFM 图像反差的影响

利用原子力显微镜（ AFM ）观察超薄切片的表面,探索表面形貌与切片厚度、朝向等因素的关系以及对图像反差的影响 . 选择三种不同类型的细胞,培养后按电镜超薄切片法固定、包埋并切片后,将不同厚度的切片区分上下表面转移到云母上, AFM 在空气中以接触模式进行观察 . 结果发现,切片表面细胞相对包埋介质的凸起与凹陷与切片本身的厚度密切相关,并随切片厚度的不同呈现有规律的变化 . 实验统计结果显示这种现象可能具有普遍性 .     

一种简便快速的超薄切片裸面载网法

电镜生物样品制作的质量,直接影响到对标本的观察及结果分析与判断。要获得既整洁,平坦又结构清晰的优质超薄切片,除标本的固定、包埋等一系列步骤必须严格操作外,超薄切片制作完成后的捞片载网也是一个十分重要的问题。为此,我们从实际工作中摸索出了一种超薄切片裸面铜网捞片法,将超薄切片直接载至经过特定处理的裸面铜网上。其处理的步骤是:首先将市售未经过处理的300目铜网(北京创业电镜铜网工艺社产品)入小称量瓶中,以双蒸馏水清洗2次,每次1～2分钟;继入用重铬酸钾配制的硫酸清洗液(取洗液1伤;水1份,释稀为1∶1)浸洗5—10秒钟,充分震荡直至铜网沉降在清洗液底部,迅速倾去清洗液。再用双蒸水洗3～5次,每次1分钟,彻底洗净清洗液用沪纸吸于水份,再浸入无水乙醇     

生物样品冷冻超薄切片技术简介

电子显微镜超薄切片技术的发展开拓了组织学和细胞学的显微和亚显微结构的研究。但由于常规超薄切片术采用强烈化学囿定,有机溶剂脱水和塑料包埋等步骤所带来的结构损伤和分子活性散失等缺点,人们在光学显微冷冻切片和常规超薄切片基础上,近年来发展了冷冻超薄切片制样技术。七十年代初期,商品冷冻超薄切片装置先后问世,进一步促进了这一技术的发展。     

介绍一种自制的超薄切片机液槽水面调节装置

在作电子显微镜超薄切片时,液槽内水位调节常常会遇到麻烦。槽液过多时,往往会从刀口部位溢出,沾湿了标本块面,致使切片无法进行。这样只能用滤纸吸干溢出的槽液,调节液槽水位。如果污染了刀口,就不得不更换新刀,重新调整块面与刀口距离,才能续继切片;若液槽内水位过低,又不能沾湿刀口时,     

塑料薄切片技术

光学显微镜术观察用的薄切片,可用各种塑料包埋剂,如乙二醇甲基丙烯酸酯(glycolmethacrylate)和环氧树脂类(epoxy resins)包埋。这些塑料包埋剂经凝固后,很容易被切成1—2微米的薄切片,比传统的石蜡切片要薄得多;而且染色时无需经过脱蜡手续,便可