维拉帕米对人单核巨噬细胞蛋白质DNA,RNA合成的影响

目的；观察维拉帕米对人单核巨噬细胞ＤＮＡ，ＲＮＡ及蛋白质合成过程的影响，方法：维拉帕人单核细胞孵育２４ｈ或４ｄ，测定细胞＾３Ｈ－ＴｄＲ，＾３Ｈ－ＵＲ，＾３Ｈ－Ｌｅｕ掺入人单核巨噬细胞状态及细胞内蛋白质含量，结果：维拉帕米在低浓度对ＤＮＡ，ＲＮＡ合成有抑制作用，呈浓度依赖性，高浓度时作用明显，对ＲＮＡ作用较ＤＮＡ显著（Ｐ〈０．０５），对蛋白质合成在高浓度时有抑制作用，维拉帕米与成熟过程中人单核巨噬细     

维生素E对小鼠核酸蛋白质合成的影响

目的 观察ＶＥ对小鼠脑、心脏、肝脏ＲＮＡ、ＤＮＡ及蛋白质合成的影响。方法 采用放射性同位素＾３Ｈ－ＴｄＲ、＾３Ｈ－ＵＲ、＾３Ｈ－Ｌｅｕ体内掺入的方法。结果 维生素Ｅ能促进脑组织ＰＮＡ的合成，促进心脏ＤＮＡ、ＲＮＡ的合成，促进肝脏ＤＮＡ、ＲＮＡ及蛋白质的合成（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１）。     

辐射增敏剂AK2123和辐射防护剂WR2721对受照人肝癌细胞DNA双链断裂与修复的影响

目的：探讨辐射增敏剂ＡＫ２１２３和辐射防护剂ＷＲ２７２１对肝癌细胞ＤＮＡ损伤与修复的影响．方法：用脉冲交变电泳法（ＰＦＧＥ）和￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入法，测定上述两药物对受照人肝癌细胞ＤＮＡ双链断裂（ｄｓｂ）与修复及ＤＮＡ合成的影响．结果：在０～８０Ｇｙ剂量范围内，随着照射剂量增加，肝癌细胞ＤＮＡ残留率逐渐降低（１００％～５７．０％），ＤＮＡｄｓｂ量亦逐渐增多，照前给ＡＫ２１２３或ＷＲ２７２１，均能显著地降低ＤＮＡ残留率，使ＤＮＡｄｓｂ量增多，加重ＤＮＡ损伤（Ｐ＜０．０５）；２０Ｇｙ受照细胞保温０～１２０ｍｉｎ，在６０ｍｉｎ时ＤＮＡｄｓｂ开始被修复（Ｐ＜０．０５），而ＡＫ２１２３组为１２０ｍｉｎ（Ｐ＜０．０５），ＷＲ２７２１在３０ｍｉｎ后有修复的趋势；ＡＫ２１２３在６２．５～５００μｇ／ｍｌ内其参入率显著升高（Ｐ＜０．０５），呈促进ＤＮＡ合成作用，ＷＲ２７２１则随药物浓度增加其参入率降低（Ｐ＜０．０５），抑制ＤＮＡ合成．结论：ＡＫ２１２３和ＷＲ２７２１显著加重受照肝癌细胞的辐射损伤，促进ＤＮＡｄｓｂ量增加，抑制其修复过程．     

慢性丙型肝炎患者外周血T细胞亚型及NK活性的研究

目的：检测慢性丙型肝炎患者外周血Ｔ细胞亚型和ＮＫ活性，并与正常人比较，以观察ＨＣＶ感染对患者细胞免疫功能的影响。方法：采用间接免疫荧光－流式细胞分析法检测外周血Ｔ细胞ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８表达，采用ＬＤＨ释放法测定ＮＫ活性。结果：慢性丙型肝炎患者外周血ＣＤ４、ＣＤ４／ＣＤ８比值、ＮＫ活性明显降低，与正常人比较差异有显著性（Ｐ值分别＜０．０１，＜０．０１和＜０．０５），而ＣＤ８升高（Ｐ值＜０．０５）；ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性组与ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性组比较，ＣＤ４／ＣＤ８比值、ＮＫ活性进一步下降，差异有显著性（Ｐ值分别＜０．０５）。结论：慢性丙型肝炎患者存在细胞免疫功能紊乱，提高其细胞免疫功能可能有利于患者的愈后。     

慢性乙型肝炎自体LAK细胞回输前后IL—2变化的意义

目的探讨ＬＡＫ细胞治疗慢性乙型肝炎的机制。方法应用生物学方法检测ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ均阳性慢乙肝患者治疗前后ＩＬ－２水平。结果４０例患者治疗后ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ阴转率分别为４０．４％和６８．６％。治疗前ＩＬ－２水平低于对照组（Ｐ＜０．００１），治疗后有显著提高（Ｐ＜０．００５）。依ＨＢＶ标记阴转情况分组：１组ＨＢｅＡｇ（－）、ＨＢＶＤＮＡ（－）１６例；２组ＨＢｅＡｇ（＋）、ＨＢＶＤＮＡ（－）９例；３组ＨＢｅＡｇ（＋）、ＨＢＶＤＮＡ（＋）１５例。１、２组治疗前ＩＬ－２均低于对照组（Ｐ＜０．００１），治疗后均明显提高（Ｐ＜０．００５，Ｐ＜０．０１）。３组治疗前ＩＬ－２与对照组比较无明显降低（Ｐ＞０．０５），治疗前后无显著差异（Ｐ＞０．０５），治疗后ＩＬ－２比对照组低（Ｐ＜０．０２）。结论ＩＬ－２水平明显降低的慢性乙型肝炎采用ＬＡＫ细胞回输治疗ＨＢＶ标记阴转率高。     

铁蛋白对卵巢癌细胞生长和细胞周期动力学的影响

检测Ｈ铁蛋白及Ｌ铁蛋白对人上皮性卵巢癌细胞株ＡＯ及３ＡＯ的生长情况及细胞周期分布的影响。采用３Ｈ标记胸腺嘧啶校苷摄入细胞ＤＮＡ的放射测定法及流式细胞仪进行测定。结果：Ｈ及Ｌ铁蛋白均能抑制 ＡＯ及 ３ＡＯ细胞的生长，此作用在加入铁蛋白后的 ７２ ｈ较 ３６ ｈ显著，且随铁蛋白浓度的增加而增强０．０１＜Ｐ＜０．０５）。在７２时Ｈ铁蛋白的抑制作用较强，有显著差异（Ｐ＜０．０１）。同时发现，加入铁蛋白可使Ｇ１期细胞百分比增加，而Ｓ期细胞明显减少，也有显著差异（Ｐ＜０．０５）。结论：初步认为铁蛋白，特别是Ｈ铁蛋白可抑制卵巢癌细胞生长，并阻止其从 Ｇ０／ Ｇ１；期进入 Ｓ期。     

硝苯吡啶和维拉帕米治疗肝纤维化细胞学研究

目的研究硝苯吡啶（ｎｉｈｅｄｉｐｉｎｅｃ，Ｎｉｆ）和维拉帕米（ｖｅｒａｐａｍｉｌ，Ｖｅｒ）对人胚肺成纤维细胞（ｈｕｍａｎｌｕｎｇｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ，ＨＬＦ）的ＤＮＡ和胶原合成的影响，从细胞水平评价钙拮抗剂防治器官纤维化并提供实验依据。方法采用ＭＴＴ比色法、３Ｈ－ＴｄＲ和３Ｈ－脯氨酸掺入法测定细胞增殖、ＤＮＡ合成和胶原合成。结果Ｎｉｆ和Ｖｅｒ在０～５０μｍｏｌ／Ｌ浓度范围内均以浓度依赖方式抑制ＨＬＦ增殖、ＤＮＡ合成及胶原合成（Ｐ＜０．０５～０．０１）。结论Ｎｉｆ和Ｖｅｒ具有抗纤维化作用     

C-myc反义核酸对内皮素诱导的人肺动脉平滑肌细胞增殖抑制作用的研究

应用不同浓度的Ｃ－ｍｙｃ反义寡核苷酸处理体外培养的经１０－８ｍｏｌ／Ｌ内皮素－１（ＥＴ－１）诱导的人肺动脉平滑肌细胞,通过细胞计数和３Ｈ－ＴｄＲ掺入值观察该反义核酸对细胞增殖及ＤＮＡ合成的抑制作用,应用斑点杂交法检测平滑肌细胞Ｃ－ｆｏｓ和Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ的表达水平。结果表明,１０、２０、５０μｇ／ｍｌ反义寡核苷酸对细胞计数和３Ｈ－ＴｄＲ掺入值与对照组相比抑制率分别为１１．９％和１２．３％（Ｐ＜０．０５）,２１．６％和１４．７％（Ｐ＜０．０１）,３６．３％和２７．２％（Ｐ＜０．０１）;对Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达抑制率分别为７１．３％（Ｐ＜０．０５）,８０．７％（Ｐ＜０．０５）,９２．５％（Ｐ＜０．０１）;５０μｇ／ｍｌ反义核酸对Ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ表达抑制率是７９．７％,１０、２０μｇ／ｍｌ组无抑制作用。Ｃ－ｍｙｃ反义核酸能显著抑制内皮素诱导的人肺动脉平滑肌细胞增殖,其作用系依赖反义核酸的序列特异性和剂量依赖。     

慢性活动性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群与血清HBV－DNA的关系

对３３例血清ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性，３９例ＨＢＶ－ＤＮＡ阴性的ＣＡＨ－Ｂ患者检测外周血Ｔ淋巴细胞亚群。结果显示：７２例患者的ＣＤ＿３、ＣＤ＿４、ＣＤ＿８、ＣＤ＿４／ＣＤ＿８比值均明显低于正常人（Ｐ＜００１）；ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性组的ＣＤ＿４低于正常人（Ｐ＜０．０１）又高于ＨＢＶ一ＤＮＡ阴性组（Ｐ＜０．０５）。提示，慢性ＨＢＶ感染可抑制Ｔ淋巴细胞亚群的增殖，而Ｔ淋巴细胞亚群的增殖低下、分化异常，尤其是ＣＤ＿４，又削弱了机体清除ＨＢＶ的能力。     

亮氨酸脑啡肽对缺氧时肺动脉平滑平细胞增殖的影响

目的：研究缺氧对肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）增殖、ＤＮＡ合成和细胞周期的作用,并观察亮氨酸脑啡肽（Ｌ－Ｅｎｋ）和阿片受体阻断剂纳洛酮（Ｎａｌ）的影响．方法：离体培养兔ＰＡＳＭＣ,采用四唑盐比色试验（ＭＴＴ）,３Ｈ－ＴｄＲ参入技术和流式细胞仪分析细胞周期等方法,观察ＰＡＳＭＣ增殖、ＤＮＡ合成和细胞周期的变化．结果：ＰＡＳＭＣ缺氧培养１２ｈ,２４ｈ后,ＭＴＴ的Ａ值和３Ｈ－ＴｄＲ参入量分别为（１７９±１９．１）％,（１８５±２０．３）％和（１５８±１３．６）％,（１６７±１７．４）％,比常氧对照组（１００％）显著增加（Ｐ＜０．０１）．缺氧培养２４ｈ后,在Ｇ２,Ｍ期的细胞比例显著升高,Ｇ０,Ｇ１期的细胞比例显著减少（Ｐ＜０．０１）．Ｌ－Ｅｎｋ（１×１０－４ｍｏｌ／Ｌ）可明显抑制缺氧促进ＰＡＳＭＣ增殖和ＤＮＡ合成的作用（Ｐ＜０．０１）,该抑制作用可被Ｎａｌ阻断．结论：Ｌ－Ｅｎｋ可抑制缺氧时ＰＡＳＭＣ的增殖和ＤＮＡ的合成作用,该抑制效应是通过阿片受体介导的．     

异搏定逆转骨肉瘤多药耐药的体外初步观察

目的：探讨异搏定是否能在体外逆转骨肉瘤多药耐药。方法：应用MTT法测定异搏定与阿霉素共同作用后骨肉瘤细胞的细胞活性。结果：1μg阿霉素单独作用24h，骨肉瘤细胞的细胞活性在90％左右，抑制率为10％，48h抑制率为50％左右，而加入异搏定后，骨肉瘤的细胞活性明显降低，特别是在1μg／ml细胞悬液浓度时，抑制率最高，24h细胞抑制率达50％左右。结论：异搏定体外可逆转骨肉瘤多药耐药。     

铁剥夺对化疗药物诱导HL-60细胞凋亡的影响

目的 :探讨铁剥夺诱导HL 60细胞及对化疗药物诱导HL 60细胞凋亡的影响。方法 :HL 60细胞与不同浓度的铁螯合剂 去铁胺 (DFO)、DFO加化疗药物、化疗药物、DFO加化疗药物及三氯化铁、三氯化铁共同培养 6h、12h、2 4h、48h。通过测定细胞活力 ,观察细胞形态学变化 ,应用流式细胞仪检测和DNA凝胶电泳等方法观察细胞凋亡 ;通过亲和免疫组化方法检测c myc基因表达 ,从而确定DFO及DFO与化疗药物联合应用对HL 60细胞的作用。结果 :DFO单用可降低HL 60细胞活力 ,抑制HL 60细胞增殖 ,诱导HL 60凋亡 ,并可使c myc基因表达增加 ,其作用强度随培养时间延长及DFO浓度增加而增加 ;DFO与化疗药物联合时 ,可增加化疗药物HL 60细胞凋亡的作用 ,该作用可被等摩尔的三氯化铁抵消。结论 :铁剥夺可影响HL 60细胞DNA的合成 ,诱导其凋亡 ,并提高HL 60细胞对化疗药物的敏感性。因此 ,铁剥夺可作为临床上白血病治疗或辅助治疗的方法之一 ,不适当补铁或升高血红蛋白将影响化疗疗效     

维拉帕米对烧伤后大鼠心肌肌球蛋白异构体转换的影响

目的　探讨烧伤后心肌细胞肌球蛋白异构体转换及维拉帕米对其影响。方法　 110只大鼠随机分为 4组 :单烧组 ( 3 0 %总体表面积Ⅲ度烧伤 ) ;维拉帕米组 (维拉帕米溶液 4mg·kg- 1 ) ;补液组 (乳酸林格氏液 4ml·kg- 1 ·1%烧伤面积 - 1 )和对照组。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)观察肌球蛋白异构体的改变。结果　烧伤后 12h(维拉帕米组 2 4h)开始肌球蛋白由V1向V3转换 ,与对照组比较 ,3个实验组存在显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,维拉帕米组 ( 2 4、72h)与单烧组和补液组之间存在显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,而单烧组和补液组之间无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　烧伤引起心肌收缩蛋白 肌球蛋白异构体V1向V3转换 ,维拉帕米部分阻止肌球蛋白异构体的转换     

维拉帕米通过下调硫氧还蛋白互作蛋白的表达抑制丙型肝炎病毒感染

目的 探讨抗高血压药维拉帕米是否可通过下调宿主硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)的表达而抑制丙型肝炎病毒(HCV)的感染.方法 用不同浓度梯度的维拉帕米处理人肝癌细胞系Huh7.5.1,用qPCR和蛋白质印迹法检测TXNIP的表达.用维拉帕米处理Huh7.5.1细胞,同时加入细胞培养产生的HCV (HCVcc),48 h后检测HCVcc感染情况.用TXNIP siRNA转染Huh7.5.1细胞,检测下调TXNIP表达后,维拉帕米对HCVcc感染的影响;用TXNIP启动子调控的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因表达质粒(pTXNIP-EGFP)转染Huh7.5.1细胞,分析维拉帕米对TXNIP启动子转录活性的影响.结果 与对照孔相比,维拉帕米(100、200、400 μmol/L)可下调Huh7.5.1细胞中TXNIP的表达,并呈现浓度依赖性(P＜0.05);并可抑制HCVcc对Huh7.5.1细胞的感染,且浓度越高抑制作用越明显(P＜0.05).进一步研究结果显示,与对照组相比,维拉帕米能够抑制pTXNIP-EGFP转染细胞中EGFP的表达水平(P＜0.05).结论 维拉帕米可下调TXNIP的表达从而抑制HCV感染,这可能是通过抑制TXNIP启动子的转录活性来实现的.     

维拉帕米对兔视网膜色素上皮细胞增殖的抑制作用

目的：观察维拉帕米对兔视网膜色素上皮细胞增殖的影响。寻找有效、安全、方便的药物以防治增增性玻璃体视网膜病变。方法：分别将不同浓度的维拉帕米加入体外的兔ＲＰＥ细胞,用噻唑蓝（ＭＴＴ）比色法在自动酶标测定仪测５４０ｍｍ处的吸光值Ａ「旧称光密度（ＯＤ）」,计算出不同浓度条件下的细胞增殖抑制率及５０％抑制浓度,同时用２％台盼蓝色,测定细胞活性。结果：Ｖｅｒ在所设浓度范围内均明显抑制血清诱导的兔ＲＰＥ细胞的     

维拉帕米对血栓形成及血清一氧化氮水平的影响

目的:探讨维拉帕米(Verapamil)对于血栓形成以及血小板聚集率的影响及其可能的机制.方法:大鼠体内分别给予不同剂量的维拉帕米(5,10,20 mg/kg)、赖氨匹林(4.5 mg/kg)以及溶剂(生理盐水2 ml).利用大鼠颈总动脉-颈外静脉血流旁路法观察维拉帕米对血栓形成的影响,并与赖氨匹林比较;同时观察维拉帕米对于血小板聚集率的影响;提取血清,通过硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)代谢产物,以反映NO的水平.结果:维拉帕米可以呈浓度依赖性的降低血小板的聚集率,明显降低血栓的形成,结论:维拉帕米可能通过提高NO的水平来改善血小板的功能.     

维拉帕米对脑膜瘤生长影响的实验研究

目的探讨钙通道阻滞剂维拉帕米对脑膜瘤细胞增殖的影响.方法将不同浓度的维拉帕米作用于培养的脑膜瘤细胞,MTT法观察其对细胞增殖的抑制作用.建立裸鼠皮下脑膜瘤模型,观察服用维拉帕米后肿瘤的生长情况,免疫组化检测皮下肿瘤增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果维拉帕米浓度呈依赖性地抑制脑膜瘤细胞增殖,浓度为1μ mol/L时即有抑制效应,100μmol/L时抑制作用最明显.服药组肿瘤的体积明显小于对照组(P＜0.01),其PCNA的表达也低于对照组(P＜0.05).结论维拉帕米在体外和体内均可抑制脑膜瘤细胞的增殖和生长.     

PDGF与肝素对动脉SMCI,Ⅲ型前胶原mRNA表达及胶原蛋白合成？…

目的 研究,探讨血小板源生长因子（ｐｌａｔｅｌｅｔｄｅｒｉｖｅｄｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＰＤＧＦ）和肝素对人主动脉平滑肌细胞（ｈｕｍａｎａｏｒｔａａｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅ,ｃｅｌｌ,ｈＡＳＭＣ）增殖,胶原蛋白的合成,分泌以及Ｉ,Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达和转移生长因子β（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ－ＴＧＦ－β）ｍＲＮＡ表达的调节作用,方法＾３Ｈ－ＴｄＲ,＾３Ｈ－脯氨酸掺入及Ｎ     

Cyclopamine对人乳腺癌细胞Bcap-37生长和增殖的影响

目的:研究Hedgehog信号通路特异性抑制剂Cyclopamine对人乳腺癌细胞Bcap-37生长和增殖的影响。方法:培养Bcap-37细胞系,加入Hedgehog(Hh)信号通路特异性抑制剂Cyclopamine作用72 h,观察光镜下细胞形态学的变化;采用单四唑(MTT)和溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入的方法,检测Cyclopamine对Bcap-37细胞系生长和DNA合成的影响;再用流式细胞仪检测Cyclopamine对Bcap-37细胞周期的影响。结果:与对照组相比,加入5×10-6mol/L的Cyclopamine后在倒置显微镜下可见细胞立体感消失,细胞内空泡增多;5×10-6mol/L的Cyclopamine使Bcap-37细胞的生长曲线下移,10-7~10-5mol/L的Cyclopamine可剂量依赖性地抑制Bcap-37细胞的生长;Bcap-37细胞系的DNA合成被Cyclopamine明显抑制,S期细胞比例降低,并出现了明显的G2期阻滞。结论:Cyclopamine可以有效地抑制Bcap-37细胞的生长和增殖,提示Hh信号通路可能在乳腺癌中被异常激活,抑制Hh信号通路的活性可能对乳腺癌的治疗起到一定的作用。