用改良的单克隆抗体辣根过氧物酶标记方法提高ELISA的检测灵敏度

为了提高酶免疫法检测人卵泡刺激激素(hFSH)和人绒毛膜促性腺激素(hCG)的灵敏度,在制备酶标抗体时,作者研究了单克     

抗核抗体对不同抗原的免疫应答

目的　探讨体内产生抗核抗体的抗原。方法　分别以羊红细胞、伤寒沙门菌及鸡血清免疫小鼠 ,同时设立生理盐水对照组 ,每组 10只 ,采用商品化酶联免疫法检测抗核抗体试剂盒 ,将酶结合物 (酶标抗人IgG)换成酶标金黄色葡萄球菌A蛋白 (SPA) ,建立检测抗核抗体的SPA ELISA法 ,并使其性能保持不变 ,用其检测小鼠的抗核抗体。结果　新建立的检测抗核抗体的SPA ELISA法与原法检测同一批标本 ,相关系数为 0 931,P <0 0 1。小鼠血清抗核抗体检测结果 (阳性率 ) :羊红细胞组为 90 % (9 10 ) ,伤寒沙门菌为 70 % (7 10 ) ,鸡血清组为 10 0 % (10 10 ) ,生理盐水对照组未检出抗核抗体。各实验组与对照组比较差异有显著性 (P <0 0 1)。结论　体内抗核抗体可能是一类由不同抗原刺激非特异产生的抗体。     

微量PPA—ELISA与IHA用于人畜弓形体病血清学诊断的比较研究

在弓形体病血清学检测方面,国外报道酶联免疫吸附试验(ELISA)与染色试验(DT)、间接免疫荧光试验(IFA)及间接血凝试验(IHA)之间,具有较高的符合率,且ELISA有很高的特异性及敏感性。但由于该法第二抗体制备较麻烦,所以其推广应用受到一定的限制。本文用酶标PPA代替酶标抗体做ELISA试验,对人、兔和猪血清进行弓形体病诊断研究,并与间接血凝试验比较,现报告如下。     

应用酶联免疫吸附试验检测轮状病毒抗原

酶联免疫吸附试验(ELISA)是检测轮状病毒抗原较理想的方法之一,我们从本省婴幼儿的腹泻粪便标本中,抽取290份用ELISA双抗体夹心法(以下简称酶标试验)进行轮状病毒抗原检测,现报告如下。材料与方法一、标本:收集腹泻患儿及健康(无腹泻)儿童粪便,分别用氯仿等处理后即为粪便提取物,供酶标     

猪肠碱性磷酸单酯酶的免疫亲和层析及其某些性质

<正> 免疫亲和层析法常用于抗原(固定抗体)抗体(固定抗原)的分离纯化。以酶为抗原免疫动物,从免疫动物血清分离抗体,抗体固定在适当的载体上,制成的免疫吸附剂对粗酶制品中相应的酶(抗原)有特异的吸附作用,从而为简便、快速的制备高纯度、高活性的酶提供了新的手段,如激肽释放酶、人胎盘碱性磷酸单脂酶的精制等。碱性磷酸单酯酶(简称AKP)是核酸研究、遗传工程、核苷制备及酶标免疫检测中常用的工具酶之一,碱性碳酸单酯酶的同功酶与多种恶性病变有关。免疫亲和层析法纯化AKP的研究报道还不多。1975年Pitarra用静态吸附法从人胎     

乙型肝炎标本物检测中部分模式的抗HBc抗体阳性复检的意义

酶联免疫吸附试验(ELISA)竞争一步法检测乙型肝炎抗HBc抗体试剂盒通常是将乙型肝炎e抗原(HBeAg)包被于反应孔,待测样本中的抗HBc抗体与酶标抗体竞争结合包被的HBcAg,当样本中的抗HBc抗体浓度增高时,酶标抗体竞争结合的HBcAg较少,显色降低呈阳性.由此加样时差很容易导致不公平竞争从而对结果产生影响.     

紫外光谱在酶联免疫测定法中的应用

酶联免疫法是一综合性免疫化学测定技术,它将特异性抗原、抗体的免疫反应与酶的高效催化原理有机结合起来,其检测灵敏度相当于放射免疫测定法,且不需昂贵的仪器和有放射性危害的同位素物质。我们用紫外分光光度法检测双功能试剂成二醛的纯度,检测酶催化与免疫活性,检测酶标物的纯化过程。 材料与方法 1.材料( 1)试剂:化学纯戊二醛(25%),由中国医药公司北京采购供应站分装。辣根过氧化物酶-T4(HRPOD-T4)为天津医科大学制备。邻苯二胺为色谱纯,是Merk公司产品。SephadexG025(fine)为Pharmaic产品。(2)仪器:酶标检测仪、UV-300紫外扫描仪…     

麻疹、腮腺炎、风疹三联疫苗(MMR)的接种:18月龄组与12岁组抗体应答之间及不同的抗体滴定方法之间的比较

本文比较了麻疹、腮腺炎、风疹三联疫苗(MMR)对18月龄和12岁儿童的免疫效果;并对几种血清学试验进行了讨论.免疫前抗体情况:用血凝抑制(HI)试验检测麻疹抗体,18月龄儿童抗体阴性率为97%,学龄儿童为24%;而用溶血凝胶(HIG)试验检测分别为99%和11%.用HIG试验检测腮腺炎抗体,18月龄儿童抗体阴性率为     

免疫吸附剂类型对狂犬病抗体酶免疫测定的影响:纯化的糖蛋白优于全病毒

近年来,酶免疫测定(EIA)已用于狂犬病病毒抗体的测定。为确定最适当的免疫吸附剂,作者用3种不同的体外法来测定人二倍体细胞(HDC)疫苗和神经组织[乳鼠脑(SMB)和羊脑(SB)]疫苗免疫的人和小鼠血清中的狂犬病病毒抗体:(1)用3种类型免疫吸附剂(完整狂犬病病毒、纯化的糖蛋白和纯化的核衣壳)作EIA;(2)快速荧光灶抑制试验(RFFIA)测定中和抗体;(3)快速的细胞内抗原酶免疫滴定法(REITICA)测定中和抗体。3种试验结果经最小平方直线回归分析进行比较。用标准离差法来比较相关系数。     

经济的甲型肝炎疫苗体外效力试验

作者用直接和间接 ELISA免疫捕获试验检测甲型肝炎病毒 ( HAV)疫苗的抗原性 ,并进行了统计学比较。　　疫苗和参考品来自向欧洲销售 HAV疫苗的 4个厂家。非吸附参考品 ( Ref An、RefBn、Ref Dn)用来研究及标化 ELISA;吸附参考品 ( Ref Aa、Ref Ba、Ref Ca)用来评估疫苗的抗原性、建立对照表和进行精密度和准确性试验。在直接 ELISA免疫捕获试验中 ,用HAV抗体 Ig G1 - κ包板 ,第二抗体使用辣根过氧物酶标记的抗 HAV单克隆抗体 Ig G3( Ig G3- HRPO) ;在间接 EL ISA免疫捕获试验中 ,使用人 HAV多克隆抗体 Ig A包板捕…     

乙型、丙型病毒性肝炎患者血清可溶性白细胞介素2受体的检测

本用双抗体央心法间接ELA法检测乙、丙型病毒性肝炎患血清可溶性白细胞介素2受体(SIL-2R)的水平，结果显示各型肝炎患血清(SIL-2R)比正常人显增高(P<0.01）。因此．血清SIL-2R水平检测用来判断肝炎患免疫状态具有一定临床意义。     

用霍乱肠毒素和大肠杆菌不耐热肠毒素的特异性抗体作ELISA鉴别两种毒素

本文介绍了用两种酶联免疫吸附试验(ELISA)和家兔肠袢试验检测和鉴别霍乱弧菌肠毒素(CT)和产肠毒素性(ET)大肠杆菌不耐热肠毒素(LT).用免疫亲和柱层析法分别分离抗-CT和抗-LT单价特异性抗体以及抗CT和LT的共同抗体,用这些抗体建立了以下两种ELISA     

Ⅱ型糖尿病患者GAD-ab,ICA检出率与血清胰岛素和C肽含量的关系

对象及方法按 1985年ＷＨＯ标准诊为Ⅱ型糖尿病 (ⅡＤＭ )2 71例 ,男 10 1例 ,女 170例。年龄 34～ 76岁 ,平均 56 2 6岁。平均病程 4 37年 ,最短者初发 ,最长者 14年 ,均采用酶标免疫测定ＩＣＡ (胰岛细胞抗体 ) ,酶联免疫分析定性测定ＧＡＤ -ａｂ (谷氨酸羧酶 -抗体 ) ,碰性微粒分离免疫酶联测定 2 66例Ｉｎｓ (胰岛素 ) ,ｃ -ｐ (Ｃ肽 )。二、方法 :ＩＣＡ采用天津新传生物技术有限公司提供美国原装试剂盒定性测定血中胰岛细胞抗原自身抗体的酶标免疫法检测。ＧＡＤ—ａｂ采用北京福瑞生物工程公司提供酶联免疫分析试剂盒进行定性测定…     

利用重组抗原通过胶乳凝集试验检测HIV抗体

临床上通常使用以病毒作抗原的酶免疫试验(EIA)来检测人类免疫缺陷症病毒(HIV)抗体。EIA的优点是灵敏度高,但反应需数小时,并且有的实验室不具备相应设备。本文首次报道通过胶乳凝集试验,利用与聚乙烯微珠表面结合的HIV特异性抗原与抗体交联形成可见凝集物的现象,检测人血清中HIV抗体。用重组HIV包膜蛋白CBre 3包     

抗核抗体谱检测在自身免疫性疾病诊断中的应用价值

目的 探讨自身免疫性疾病患者血清抗核抗体谱检测及其临床意义.方法 将核抗原和相关胞浆抗原印迹于硝化纤维膜上.患者血清中的抗体与膜条上的相应抗原特异性结合.加入辣根过氧化物酶标记二抗,形成抗原-抗体-酶标二抗复合物.再加入底物后,即可显示其自身抗体是否存在.用该免疫印迹法(IBT)检测42例自身免疫性疾病患者血清抗核抗体谱.结果 在20例系统性红斑狼疮(SLE)患者中,抗dsDNA抗体、抗-Sm抗体、抗组蛋白抗体、抗核小体抗体阳性率分别为65％、50％、45％、45％.9例干燥综合征(SS)患者中,抗SSA60、抗SSA52、抗SSB阳性率分别为88.8％、77.7％、66.6％.6例混合性结缔组织疾病(MCTD)抗nRNP均为阳性.5例进行性系统性硬皮病(PSS)患者抗Scl-70均为阳性.2例皮肌炎(PM)患者均显示抗Jo-1抗体阳性.结论 抗核抗体谱检测对自身免疫性疾病的诊断和鉴别诊断具有重要意义.     

佳木斯口岸重点人群及进口血制品HIV抗体检测

为了对艾滋病进行有效的监测,我们对佳木斯口岸重点人群及进口血制品进行了HIV抗体的检测,现将结果报告如下。 1 检测对象:回国华侨16人,三资企业外籍工人2人,在国外居住一年以上的归国劳工255人,中心血站献血员120人,出国人员486人,进口血制品1份。 2 检测方法与试剂:①酶联免疫法(ELISA)。②试剂:酶标试剂盒(产地:上海生物制品研究所)。     

用特异性抗体酶免疫测定法检测百日咳杆菌抗原

实验室诊断百日咳的血清学方法敏感性较低,当前酶免疫测定法是检测百日咳抗原最灵敏的方法之一。作者试图采用百日咳特异性抗体竞争酶标抗原(竞争法)的方法来检测患儿体内抗原。本文报道用三氯醋酸裂解百日咳杆菌细胞获得有效的蛋白成分作为抗原,与弗氏完全佐剂(ΠAΦ)和二醛纤维素分别混合,分5组免疫2500～3000g家兔20只,制备高价免疫血清。用溴化氰活化Sepharose4B与百日咳杆菌抗原结合制成免疫吸附剂,     

在人类免疫缺陷症病毒感染危险性低的健康成人中蛋白印迹试验可疑结果的出现率

不少研究发现,在未感染1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)者的样品中出现蛋白印迹试验(WB)可疑结果。本文作者用酶免疫试验(EIA)、WB、HIV-1培养法、HTLV-Ⅲ抗原中和试验等对168名18～55岁健康志愿者进行检测。结果如下:用EIA和WB检测,所有志愿者的HIV-1抗体均未出现阳性,其中1人经EIA检测p24抗原阳性,但该结果未被HTLV-Ⅲ     

胃炎患者血清幽门螺杆菌分类抗体免疫印迹检测的临床意义

目的:研究胃炎患者血清幽门螺杆菌分类抗体免疫印迹检测的临床意义。方法:用14C呼气试验检测幽门螺杆菌感染;用免疫印迹法检测幽门螺杆菌分类抗体。结果:152例临床各型胃炎患者中,140人14C-呼气试验阳性(92.11%)。14C-呼气试验阳性组Hp分类抗体中CagA、VacA双阳性或单项阳性者127人(90.71%);阳性预测值90.7%,阴性预测值9.3%。结论:14C-呼气试验与幽门螺杆菌分类抗体两种方法组合检测,对临床幽门螺杆菌的诊断与治疗有重要作用;免疫印迹法检测幽门螺杆菌分类抗体,有简便、敏感、特异、快速的优点。     

麻疹抗体保护性滴度的再评估

麻疹抗体的存在意味着接触过麻疹病毒,同时也提示具有保护作用。作者通过用空斑减少中和(PRN)试验和酶免疫试验(EIA)对1985年美国波士顿大学麻疹爆发前后所采血样抗体水平的检测,研究了麻疹抗体与保护力之间的关系。应用较新的血清学技术已能检测到既往传统方法所不能检出的低滴度特异性抗体,但不知这种低水平抗体是否具有保护作用。