山萘酚通过下调ERRα 抑制非小细胞肺癌A549 细胞的侵袭和迁移

目的:探讨山奈酚（kaempferol）对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC）A549 细胞侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法：A549 细胞培养完成后,CCK-8 法检测不同浓度山奈酚对A549 细胞增殖的影响,Transwell 和划痕实验检测A549 细胞侵袭和迁移能力,Western blotting 检测EMT相关蛋白的表达,qRT-PCR和Western blotting 检测山奈酚对雌激素相关受体α（estrogen related receptor alpha, ERRα）mRNA和蛋白表达的影响。构建ERRα 过表达载体pLV-ERRα 转染A549 细胞后,Transwell实验、划痕愈合实验和Western blotting 检测A549 细胞侵袭、迁移和EMT相关蛋白的表达情况。结果：山奈酚浓度依赖性抑制A549 细胞增殖,选择5、10 和20 μmol/L山奈酚进行后续实验。经山奈酚处理后,A549 细胞侵袭细胞数目显著减少、划痕愈合率显著降低、N-cadherin 和Snail-2 的表达显著下调,E-cadherin 的表达显著上调,ERRa mRNA 和蛋白水平显著降低（均P<0.01）。转染pLV-ERRα 后,过表达ERRα 的A549 细胞的侵袭细胞数、划痕愈合率均显著增加,细胞中N-cadherin、Snail-2 表达上调,而E-cadherin 的表达下调（均P<0.05 或P<0.01）;该细胞再经山奈酚处理后,上述各指标均发生逆转变化（均P<0.05 或P<0.01）。结论：山奈酚通过抑制ERRα 降低NSCLC A549细胞侵袭和迁移能力,并抑制其EMT,为肺癌的临床治疗提供了实验依据。     

lncRNA LOC440173在非小细胞肺癌组织中的表达及其对癌细胞恶性生物学行为的影响

目的：检测lncRNA LOC440173在NSCLC组织和细胞中的表达及探讨其对癌细胞恶性生物学行为的影响。方法：选取河北医科大学第四医院生物标本库中2014至2017年手术切除的72例NSCLC患者的癌及癌旁组织标本,应用qPCR法检测NSCLC组织和癌旁组织中,以及6种NSCLC细胞株（H520、H358、A549、HCC827、H1703和H1299）中LOC440173的表达水平;构建LOC440173的敲低及过表达载体,分别转染H520 和 H1703 细胞,应用 MTS、克隆形成及Transwell小室迁移和侵袭实验分别检测敲低及过表达LOC440173对 NSCLC 细 胞 增 殖 、迁移及侵袭能力的影响,qPCR法检测 LOC440173 对于 EMT 过程相关标志物（E-cadherin、N-cadherin 及 vimentin）mRNA表达水平的影响,WB法检测其对 E-cadherin、N-cadherin 蛋白表达的影响。结果：LOC440173在NSCLC组织中的表达明显高于癌旁组织（P<0.01）,并与淋巴结转移、组织学分化程度、TNM 分期和肿瘤大小有关联（P<0.05 或 P<0.01）。敲低 LOC440173 可以抑制 H520 细胞的体外增殖、迁移和侵袭（P<0.05 或 P<0.01）,过表达LOC440173可显著促进 H1703 细胞的增殖、迁移和侵袭（P<0.05 或 P<0.01）。在转录水平上,敲低LOC440173后,E-cadherin的表达水平升高 ,间充质相关标志物 N-cadherin、vimentin 的表达水平降低（P<0.05 或 P<0.01）;而过表达 LOC440173 后,E-cadherin 的表达水平降低,间充质相关标志物 N-cadherin、vimentin 的表达水平升高（P<0.05 或 P<0.01）。在转录后水平上,LOC440173负向调节E-cadherin蛋白的表达、正向调节N-cadherin的蛋白表达（均P<0.05）。结论：LOC440173在NSCLC组织中的异常高表达可能与NSCLC的发生发展有关,LOC440173可显著提高NCSCL细胞的体外增殖、迁移、侵袭能力,且其作用机制可能与调控EMT相关基因表达有关。     

甘草酸通过调控miR-142/ZEB1 分子轴影响非小细胞肺癌HCC827 和A549 细胞的恶性生物学行为

目的：探讨甘草酸（GA）通过调控miR-142/锌指E 盒结合的同源盒蛋白1（ZEB1）分子轴对非小细胞肺癌（NSCLC）HCC827 和A549 细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法：HCC827 和A549 细胞培养和转染完成后,分成4 组：NC组（未经转染+3mmol/L GA）、miR-142 inhibitor 组（敲降miR-142+3 mmol/L GA）、pcDNA3.1-ZEB1 组（过表达ZEB1+3 mmol/L GA）和pcDNA3.1-ZEB1+miR-142 mimic 组（过表达ZEB1 及miR-142+3 mmol/L GA）。采用qPCR检测不同浓度GA处理后HCC827 和A549 细胞中miR-142 的表达水平,WB实验检测HCC827 和A549 细胞中ZEB1 蛋白的表达水平,采用MTT和Transwell 检测HCC827 和A549细胞的增殖、侵袭和迁移能力,采用双荧光素酶报告基因检测miR-142 与ZEB1 的靶向关系。结果：GA显著抑制HCC827 和A549 细胞的增殖、侵袭和迁移,且显著上调miR-142 的表达水平（P<0.05 或P<0.01）;miR-142 通过靶向结合ZEB1 的3''-UTR 区域下调ZEB1 的表达水平（P<0.05 或P<0.01）;进一步实验证实,GA通过上调miR-142 抑制ZEB1 的表达水平,进而抑制HCC827 和A549 细胞增殖、侵袭和迁移（P<0.05 或P<0.01）。结论：GA能够抑制NSCLC HCC827 和A549 细胞增殖、侵袭和迁移,其机制为GA通过上调miR-142对ZEB1 的抑制作用,从而抑制HCC827和A549 细胞的恶性生物学行为。     

非小细胞肺癌组织中高表达的miR-1269 对肺癌细胞A549 生物学行为的影响

目的:探讨miR-1269 在非小细胞肺癌（non-small-cell lung cancer, NSCLC）组织中的表达和对人NSCLC A549 细胞生物学特性的影响及其作用机制。方法：选取2017 年1 月至2018 年1 月在河北医科大学第四医院胸外科进行首次手术切除的34例新鲜NSCLC 癌组织及相应的癌旁组织,应用qRT-PCR 检测NSCLC 癌组织及相应的癌旁组织中miR-1269 的表达水平。将miR-1269 mimics 和mimics NC转染至A549 细胞后,应用MTS实验、细胞划痕实验和Transwell 实验检测A549 细胞增殖、迁移和侵袭能力,流式细胞术检测其细胞周期的变化。生物信息学软件预测miR-1269 的靶基因,并通过Western blotting 和双荧光素酶报告基因实验验证miR-1269 对靶基因的调控作用。采用Western blotting 检测已转染的A549 细胞的细胞周期依赖性激酶抑制剂p21、细胞周期蛋白D2 以及上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）相关蛋白ZEB2 和E-cadherin 的表达情况。结果：NSCLC癌组织中miR-1269 的表达水平显著高于对应的癌旁组织（2.81±2.27 vs 1.61±1.36,P<0.05）。miR-1269 mimics 转染组A549 细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著高于空白对照组和mimics NC转染组（均P<0.01）。转染miR-1269-mimics 的A549 细胞S期细胞比例明显高于mimics NC转染组[ （46.54±1.57）% vs（23.32±3.15）%,P<0.01]。miR-1269 可与FOXO1 基因3’端非翻译区的结合位点相结合,且过表达miR-1269 后,A549 细胞中FOXO1 的表达水平及荧光素酶报告基因的活性均明显降低（均P<0.01）。miR-1269 mimics 转染组A549 细胞中p21、E-cadherin 蛋白表达水平降低（均P<0.05）,而CyclinD2、ZEB2 蛋白表达水平升高（均P<0.05）。结论：miR-1269 在NSCLC组织中表达上调,并且能够促进A549 细胞的增殖、迁移、侵袭能力和影响细胞周期进程;其作用机制可能与靶向调控抑癌基因FOXO1 的表达有关。     

lncRNASNHG11通过吸附miR-193a-5p促进NSCLC细胞A549的恶性生物学行为

目的： 探讨lncRNA SNHG11对非小细胞肺癌（NSCLC）A549细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其可能机制。 方法:qPCR检测人胚肺细胞HEL-1和NSCLC细胞A549、H1299、HCC827中lncRNASNHG11和miR-193a-5p的表达水平,向A549细胞中转染SNHG11小干扰RNA（si-SNHG11）、miR-193a模拟物（miR-193a mimic）或miR-193a抑制剂（miR-193a inhibitor）后,CCK-8法检测其对细胞增殖的影响,Transwell小室和细胞划痕实验检测对细胞侵袭和迁移的影响,WB法检测对细胞增殖抗原Ki67、细胞周期蛋白D1 （cyclin D1）表达的影响,双荧光素酶报告实验验证lncRNASNHG11与miR-193a-5p的靶向关系。 结果： 与人胚肺细胞HEL-1相比,NSCLC细胞A549、H1299、HCC827中lncRNA SNHG11均呈高表达、miR-193a-5p呈低表达（均P<0.05）;沉默lncRNA SNHG11可抑制A549细胞的增殖、侵袭和迁移,降低细胞中Ki67和Cyclin D1蛋白的表达水平（均P<0.05）;过表达miR-193a-5p可抑制A549细胞增殖和侵袭迁移（均P<0.05）。lncRNASNHG11可靶向吸附miR-193a-5p,抑制miR-139a-5p可部分逆转沉默lncRNA SNHG11对A549细胞增殖、侵袭和迁移的作用（均P<0.05）。 结论：lncRNA SNHG11通过吸附miR-193a-5p促进NSCLCA549细胞的增殖、侵袭和迁移。     

miR-625 通过负向调控Resistin 的表达抑制非小细胞肺癌细胞的恶性生物学行为及其机制

目的：探究miR-625 和Resistin 对NSCLC细胞增殖、侵袭、迁移及裸鼠移植瘤生长的影响及其可能的机制。方法：qPCR 实验检测80 例NSCLC 及癌旁组织（标本收集自2018 年3 月至2019 年10 月于新疆维吾尔自治区人民医院手术治疗的NSCLC患者）和4 种细胞系中miR-625 与Resistin 的表达，生物信息学预测两者的靶向关系并用双荧光素酶基因报告实验进行验证；通过脂质体转染技术在NSCLC细胞中过表达或抑制miR-625 及Resistin 表达，实验分为miR-625 mimic 组、miR-625 inhibitor组、si-Resisitin 组、miR-625 inhibitor+si-Resisitin 组和NC组，利用CCK-8、Transwell 及划痕实验检测miR-625 与Resistin 对NSCLC细胞增殖、侵袭及迁移的影响，Western blotting 实验检测两者对NSCLC细胞中EMT相关的PI3K/AKT/Snail 通路蛋白表达的影响，裸鼠成瘤实验观察两者对A549 细胞移植瘤生长的影响。结果：miR-625 在NSCLC组织和4 种细胞系中呈低表达、Resistin呈高表达（均P<0.01），两者表达水平呈负相关（r=-0.7183，P<0.01），且Resistin 的表达与NSCLC分化程度、临床分期及淋巴结转移相关。Resistin 是miR-625 的靶基因。在NSCLC 细胞系A549 和H226 的增殖、侵袭、迁移能力及裸鼠移植瘤的生长方面，与Blank 组和NC组相比，miR-625 mimic 组与si-Resistin 组能力均显著降低（均P<0.05），miR-625 inhibitor 组显著提高（均P<0.05）；miR-625 inhibitor+si-Resistin 组显著低于miR-625 inhibitor 组（均P<0.05）；NC组与miR-625 inhibitor+si-Resistin 组之间无显著差异（均P>0.05）；p-AKT、p-PI3K、Snail、Twist1、Vimentin 等蛋白表达变化也有相同的趋势（均P<0.05），E-cadherin 蛋白表达则发生相反的改变（P<0.05）。结论：miR-625 在NSCLC组织和细胞中均呈低表达，其能负向调控Resistin 表达从而抑制NSCLC细胞的增殖、侵袭和迁移及裸鼠移植瘤生长，其机制可能与PI3K/AKT/Snail信号通路有关。     

miR-449a通过下调HDAC1表达抑制肺癌细胞的增殖、侵袭和迁移北大核心

目的:分析miR-449a对人非小细胞肺癌细胞株A549增殖、侵袭和迁移的影响。方法:通过Real-time PCR检测人肺成纤维细胞MRC-5、人非小细胞肺癌细胞株A549和HCC827中miR-449a和组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)的表达水平。利用CCK-8法和Transwell法分析miR-449a对A549细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。使用生物信息软件分析miR-449a的靶向集合位点,并构建荧光素酶报告基因质粒,通过荧光素酶报告基因法分析miR-449a对HDAC1的靶向调控作用。通过Western blot分析miR-449a和HDAC1表达水平对A549细胞增殖及EMT相关分子表达水平的影响。建立裸鼠皮下瘤模型分析miR-449a和HDAC1对A549细胞体内增殖的影响。结果:miR-449a在MRC-5细胞中表达水平显著高于A549(P<0.0001)和HCC827(P<0.01);HDAC1在MRC-5细胞中表达水平显著低于A549(P<0.0001)和HCC827(P<0.01)。CCK-8法检测显示在A549细胞中转染miR-449a能够显著抑制其增殖。Transwell法检测显示在A549细胞中转染miR-449a能够显著抑制其侵袭和迁移(P<0.0001)。生物信息学预测显示miR-449a能够靶向结合HDAC1的3'-UTR;双荧光素酶报告基因分析显示,miR-449a能够靶向作用于HDAC1的3'-UTR抑制萤光素酶表达,Real-time PCR的结果表明过表达miR-449a能够显著抑制HDAC1的表达。在A549细胞中转染miR-449a或针对HDAC1小干扰RNA(siRNA)均能够下调HDAC1的表达,抑制细胞体内、外增殖;同时E-cadherin和ZO-1的表达水平下降,而N-cadherin、Fibronectin和Vimentin的表达水平增加。结论:miR-449a通过靶向抑制HDAC1的表达,抑制肺癌细胞的增殖、侵袭和迁移。     

沉默泛素结合酶E2O对人非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭的影响

  目的  研究泛素结合酶E2O（ubiquitin-conjugating enzyme E2O,UBE2O）蛋白在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）细胞增殖、细胞周期、迁移、侵袭中的作用。  方法  通过慢病毒介导的shRNA靶向抑制人NSCLC细胞株A549中UBE2O基因的表达,应用CCK-8法、流式细胞术分别检测UBE2O对A549细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响,应用Transwell实验检测下调UBE2O表达后对A549细胞迁移、侵袭能力的影响,应用Western blot检测细胞上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）两种标志分子E-cadherin蛋白、N-cadherin蛋白和PI3K-Akt信号通路相关蛋白表达量的变化。  结果  下调UBE2O表达后,A549细胞UBE2O mRNA和蛋白表达均下调（均P < 0.01）,CCK-8实验结果显示沉默UBE2O可以抑制A549的增殖（P < 0.001）,Transwell实验显示下调UBE2O的表达能够抑制A549细胞的迁移、侵袭（均P < 0.001）。Western blot结果表明下调UBE2O的表达可使A549细胞中的E-cadherin蛋白表达水平升高、p-Akt蛋白表达水平下降。  结论  UBE2O蛋白能够促进NSCLC细胞侵袭和迁移,作用机制可能是通过诱导肺癌细胞发生EMT和促进pI3K-Akt信号通路的激活。      

lncRNA HCG18/miR-17-5p/HMGA2 分子轴调控非小细胞肺癌细胞增殖及迁移

[摘要] 目的：探讨lncRNA HCG18/miR-17-5p/HMGA2 分子轴调控非小细胞肺癌（NSCLC）细胞增殖及迁移的分子机制。方法：收集2017 年6 月至2018 年6 月承德市中心医院62 例NSCLC组织及对应的癌旁组织标本,以及NSCLC细胞系A549、NCIH1299、H1650、NCI-H460 和人肺上皮细胞BEAS-B,用qPCR法检测NSCLC组织及细胞系中HCG18、miR-17-5p 及高迁移率族蛋白A2（HMGA2）的表达水平。分别用Si-HCG18、miR-17-5p、miR-17-5p+HCG18 或pcDNA3.1-HMGA2 转染A549 和NCI-H460 细胞,用CCK-8 法、Transwell 实验、Wb检测转染细胞的增殖、迁移、侵袭和HMGA2 及EMT相关蛋白的表达。用双荧光素酶报告基因验证HCG18 对miR-17-5p 或miR-17-5p 对HMGA2 的靶向调控作用。构建敲降HCG18 的A549 细胞小鼠移植瘤模型,观察对移植瘤的影响。结果：lncRNA HCG18 在NSCLC 组织和细胞中均高表达（均P<0.01）,发生淋巴结转移及晚期NSCLC 患者中HCG18 的表达显著提高,且HCG18 高表达的NSCLC患者预后较差、生存率较低（均P<0.01）。转染Si-HCG18 显著抑制NSCLC细胞的增殖、迁移及侵袭能力（均P<0.01）,上调上皮钙黏蛋白的表达（P<0.01）、下调神经钙黏蛋白和波形蛋白的表达（均P<0.01）,小鼠移植瘤体积显著减小（P<0.05）。双荧光素酶报告基因验证了HCG18 与miR-17-5p 靶向结合,以及miR-17-5p 与HMGA2 靶向结合。转染miR-17-5p 后NSCLC 细胞的增殖、迁移及侵袭受到抑制（均P<0.01）,促进上皮钙黏蛋白的表达（P<0.01）、抑制神经钙黏蛋白和波形蛋白的表达（均P<0.01）,而转染miR-17-5p+HCG18 后可抑制miR-17-5p 的作用。结论：HCG18通过调控miR-17-5p/HMGA2 分子轴促进NSCLC细胞的增殖及迁移。     

LSD1抑制剂抑制非小细胞肺癌A549细胞侵袭、迁移及上皮间质转化

目的:探究赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶1（lysine-specific demethylase 1,LSD1）抑制剂对非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）A549细胞侵袭、迁移及上皮间质转化的影响。方法:将体外培养的人非小细胞肺癌A549细胞分为对照组和LSD1抑制剂组,在细胞进入对数生长期时,向实验组细胞中分别加入不同浓度的LSD1抑制剂,培养24 h。CCK-8法用于细胞增殖检测,划痕实验用于细胞迁移检测,Transwell小室法用于细胞侵袭检测,裂解细胞提取总蛋白后通过蛋白质免疫印迹技术（Western blot,WB）检测A549细胞中上皮细胞标志物E型钙黏蛋白（E-cadherin）、间充质细胞标志物N型钙黏蛋白（N-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）的表达水平。结果:与对照组相比,LSD1抑制剂组细胞增殖率、穿膜细胞数和划痕愈合率显著降低（P＜0.05）;LSD1抑制剂组相较于对照组,E-cadherin表达量升高,N-cadherin和Vimentin的表达量均降低（P＜0.05）。结论:LSD1抑制剂可抑制非小细胞肺癌A549细胞的侵袭、迁移及上皮间质转化。     

rIL－2/LAK细胞治疗晚期恶性肿瘤

 胎儿来源的LAK细胞/rIL-2对5例失去手术、化疗、放疗机会的晚期恶性肿瘤病人进行了过继免疫治疗。结果都取得了-定的疗效,黑色素瘤病人肺转移结节基本消失,局部瘤细胞全部坏死,组织细胞正常;淋巴瘤病人转移灶消退59%;小肠平滑肌肉瘤病人在没进行此疗法之前2年半复发、手术三次。第三次手术后用此疗法治疗-个疗程,三年后第-次复发。为晚期恶性肿瘤病人延长了生命,提高了生存质量争得了再次治疗的机会。     

rIL－2／LAK细胞治疗晚期恶性肿瘤

胎儿来源的ＬＡＫ细胞／ｒＩＬ－２对５例失去手术、化疗、放疗机会的晚期恶性肿瘤病人进行了过继免疫治疗。结果都取得了一定的疗效，黑色素瘤病人肺转移结节基本消失，局部瘤细胞全部坏死，组织细胞正常；淋巴瘤病人转移灶消退５９％；小肠平滑肌肉瘤病人在没进行此疗法之前２年半复发、手术三次。第三次手术后用此疗法治疗一个疗程，三年后第一次复发。为晚期恶性肿瘤病人延长了生命，提高了生存质量争得了再次治疗的机会。     

VASH2 Promotes Cell Proliferation and Resistance to Doxorubicin in Non-Small Cell Lung Cancer via AKT Signaling

Vasohibin2 (VASH2), a proangiogenic factor, has been demonstrated to play an oncogenic role in some common human cancers. However, the detailed function of VASH2 in non-small cell lung cancer (NSCLC) has not previously been studied. In this study, we found that VASH2 was significantly upregulated in NSCLC tissues and cell lines, and its increased expression was associated with NSCLC progression and poor prognosis of patients. Knockdown of VASH2 markedly inhibited cell proliferation and P-glycoprotein expression in NSCLC cells. Overexpression of VASH2 enhanced cell proliferation, P-glycoprotein expression, as well as doxorubicin resistance in NSCLC cells. Moreover, the expression levels of VASH2 were significantly increased in newly established doxorubicin-resistant NSCLC cells. Molecular mechanism investigation revealed that inhibition of VASH2 expression in NSCLC cells suppressed the activity of AKT signaling, and overexpression of VASH2 enhanced the activity of AKT signaling. We further showed that downregulation of AKT signaling activity using AKT inhibitor LY294002 markedly inhibited NSCLC cell proliferation and resistance to doxorubicin induced by VASH2. In conclusion, the findings in the present study indicate that VASH2 promotes NSCLC cell proliferation and resistance to doxorubicin via modulation of AKT signaling. Thus, we suggest that VASH2 may become a potential therapeutic target for the treatment of NSCLC.     

NSCLC患者血清Ang2与VEGF动态变化的关系

目的 探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者病程中血管生成素2（Ang2）和血管内皮生长因子（VEGF）的变化情况,评价在肿瘤发生、进展、预后的临床意义。方法 对82例首诊未经治疗的NSCLC患者行ELISA法定量检测外周血Ang2与VEGF水平。结果 NSCLC患者外周血Ang2与VEGF水平较对照组明显升高［Ang2：（1326.8±942.9）pg/ml vs. （445.0±213.0） pg/ml, P<0.01;VEGF：（846.8±459.6）pg/ml vs. （691.3±369.6） pg/ml, P<0.05］。Ang2在早期NSCLC开始明显升高,但在各进展期之间比较差异无统计学意义,进入晚期后在越接近死亡的患者Ang2又再有上升趋势。VEGF在早期未见升高,进入进展期后逐渐升高,在未有远处转移的患者,原发灶直径越大,VEGF越高。COX回归分析显示临床分期与VEGF是NSCLC生存预后的独立危险因素(P<0.05）。结论 NSCLC患者血清Ang2与 VEGF均明显升高, 对早期NSCLC患者检测血清Ang2较VEGF有更好的辅助诊断价值,在NSCLC进展期检测血清VEGF较Ang2更有助于评价肿瘤进展情况,在NSCLC晚期检测血清Ang2升高较VEGF更能提示临终期。     

环氧合酶-2、增殖细胞核抗原在胃癌组织中的表达及预后意义

目的 探讨环氧合酶—2(COX—2)、增殖细胞核抗原(PCNA)在胃癌、不典型增生及慢性萎缩性胃炎组织中的表达及预后意义。方法 采用免疫组织化学方法，检测COX—2及PCNA在232例胃癌组织中的表达情况，并分析它们的预后意义。结果COX—2、PCNA在慢性萎缩性胃炎中的表达率明显低于不典型增生者(P＜0．01)，在胃癌组织中的表达明显高于非癌组织(P＜0．05—0．01)；COX一2及PCNA表达与胃癌淋巴结转移、血管浸润均密切相关(P＜0．01)；COX一2阳性表达及PCNA高表达者5年生存率明显低于阴性或低表达者(P＜0．05)。多因素分析显示，淋巴结转移、COX—2表达、浸润深度、血管浸润均为胃癌独立的预后因素。结论 COX—2、PCNA在胃癌组织中过度表达，与胃癌的生长和浸润转移关系密切，可作为反映胃癌生物学行为和判断预后的有效指标。     

解偶联蛋白2对皮肤黑色素瘤预后和免疫微环境的影响

目的：探讨解偶联蛋白2（UCP2）在皮肤黑色素瘤（SKCM）中的预后价值,分析UCP2表达与SKCM肿瘤浸润免疫细胞（TIC）之间的相关性。方法：通过GEPIA在线数据库分析SKCM组织及正常皮肤组织中UCP的差异性表达,探讨UCP表达与SKCM预后之间的关系。HPA数据库分析UCP2在正常皮肤单细胞中的表达情况,使用TISCH分析UCP2在SKCM中单细胞水平的表达情况。TIMER分析UCP2表达与总SKCM、原发性SKCM和转移性SKCM患者肿瘤微环境（TME）中主要免疫细胞及其标志物的相关性。结果：UCP2在SKCM癌组织中高表达,UCP2高表达患者的OS和DFS均长于低表达患者（均P<0.05）。正常皮肤和SKCM单细胞分析显示,UCP2表达与免疫细胞亚群存在一定的正相关,同时与SKCM中趋化因子、受体、组织相容性复合物、免疫抑制剂和免疫激活剂五类免疫途径密切相关（均P<0.05）。亚组分析结果显示,UCP2高表达与总SKCM和转移性SKCM患者高OS密切相关（均P<0.05）。UCP2表达与总SKCM、原发性SKCM、转移性SKCM患者TME中TIC之间存在明显的正相关（均P<0.05）,但是与原发性SKCM相关性相对较弱。UCP2表达水平与3组SKCM患者TME中免疫细胞标志物存在明显的正相关（均P<0.05）。结论：UCP2在SKCM组织中高表达,UCP2与SKCM中TIC呈正相关,是TME中重要的调控因子,与其预后密切相关。     

喉鳞状细胞癌中COX-2和E-钙黏附素的表达及其意义

目的探讨环氧化酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）和E-钙黏附素（E-cadherin,E-cad）表达与喉鳞状细胞癌（LSCC）发生、发展的关系及其生物学意义。方法应用免疫组织化学方法,检测45例LSCC组织、12例喉不典型增生（AH）和10例正常喉黏膜（NLM）组织中COX-2和E-cad蛋白表达水平。结果 LSCC中COX-2表达阳性率高于喉不典型增生和正常喉黏膜组织（P〈0.05）,而E-cad表达阳性率低于喉不典型增生和正常喉黏膜组织（P〈0.05）。在LSCC组织中COX-2和E-cad表达阳性率分别为77.8%（35/45）和62.2%（28/45）。COX-2高表达和E-cad低表达与LSCC分级和淋巴结转移相关（P〈0.05）。LSCC中COX-2表达与E-cad表达呈负相关（P〈0.05）。结论 COX-2和E-cad表达水平可作为判断LSCC分级、淋巴结转移和预后的重要参考指标。     

三氧化二砷负向调控MDSC的肿瘤免疫抑制功能

目的:研究三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)是否通过抑制髓系来源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)负向调控MDSCs诱导的肿瘤免疫耐受作用.方法:C57BL/6小鼠皮下注射黑素瘤B16细胞和肝癌H22细胞构建移植瘤模型,As2O3处理,观察移植瘤生长情况,流式细胞术检测荷瘤小鼠脾脏内MDSCs和其他免疫细胞的免疫表型,流式细胞术检测2 μmol/L As2O3对B16模型小鼠来源的MDSCs分化的影响.取B16模型小鼠随机分为As2O3处理及对照组,混合淋巴细胞反应检测MDSCs对T细胞免疫抑制活性的改变,ELISA检测B16模型小鼠血清及MDSCs培养上清中TNF-α、IL-10的水平.结果:As2O3抑制B16和H22模型鼠的肿瘤生长,延长B16模型小鼠的生存期,并可显著下调小鼠脾脏内MDSCs的比例.体外经2 μmol/L As2O3处理5d后,B16模型小鼠来源的MDSCs中成熟DCs(CD11c+ CD40+)的比例较对照组显著升高[(27.38±4.57)％ vs (17.44±4.51)％,P=0.0078];As2O3组来源的MDSCs对T细胞的免疫抑制活性明显低于对照组(P =0.016);As2O3组小鼠血清及MDSCs培养上清中TNF-α(F=5.78,P=0.014)和IL-10(F=17.83,P=0.045)的含量均较对照组显著降低.结论:As2O3可通过诱导MDSCs向成熟表型分化、下调其免疫抑制活性等,负调控MDSCs的肿瘤免疫抑制功能.     

Increased BST-2 expression by HBV infection promotes HBV-associated HCC tumorigenesis

BackgroundThe majority of hepatocellular carcinoma (HCC) is closely associated with hepatitis B virus (HBV) infection, while the mechanism of HCC induced by HBV is debatable. Bone marrow stromal cell antigen 2 (BST-2), an N-glycoprotein, has been characterized as an oncogenic factor in several types of cancer. However, whether BST-2 plays an important role in HCC tumorigenesis remains unknown.MethodsA total of 182 HCC tumorous and adjacent nontumor liver tissues were collected. HepG2, Huh7, L02, HepAD38, and HEK293T cell lines were adopted in this study. Tumor proliferation was detected by CCK8, transwell, wound healing, colony formation assays in vitro, and in vivo tumorigenesis was measured by mouse xenografts. NF-κB activation was determined by luciferase assay and Western blot. Protein expression was detected by Western blot, ELISA, or qPCR. Immunoprecipitation was used to confirm the interaction between BST-2 and Syk.ResultsHere, we observed the higher BST-2 expression in HBV-infected HCC than their paired adjacent tissues and HBV-uninfected HCC tissues, particularly more aberrant non-N-glycosylated BST-2 in HBV-infected HCC tumors. We also observed the increased ER degradation-enhancing α-mannosidase-like protein 3 (EDEM3), which is trimming of N-linked glycans by sequential removal of mannose residues, might result in more non-N-glycosylated form of BST-2. Moreover, we demonstrated that BST-2 and non-N-glycosylated BST-2 N65/92A mutant, not only enhanced the tumor characteristics of hepatoma cell lines in vitro, but also enhanced the growth of mouse xenografts in vivo. Mechanically, N65/92A mutant has stronger ability to promote HCC than BST-2 via NF-κB/ERK1/2 but not NF-κB/anti-apoptotic factors pathway. NF-κB inhibitor attenuated BST-2-mediated tumorigenesis of HCC.ConclusionsOur findings illuminate the novel function of BST-2 as an oncogene of HBV-associated HCC, and highlight the novel relationship of N-glycosylation of BST-2 in regulating HCC tumorigenesis in vitro.     

膀胱癌组织中MMP-2与TIMP-2 mRNA的表达及临床意义

Objective:The aim of the study was to investigate the expressions of matrix metalloproteinase-2(MMP-2) and tissue inhibitor of MMP-2(TIMP-2) mRNA in transitional cell carcinomas of bladder and discuss their clinical significances.Methods:Using RT-PCR and real time quantitative PCR(RQ-PCR) technique,the expressions of MMP-2 and TIMP-2 mRNA of 45 cases of bladder carcinoma(tumor group) and 10 cases of normal bladder tissue(control group) were analyzed.Results:MMP-2 and TIMP-2 were not expressed in control gro...