离心超滤法测定蛋白质标记物的放射化学纯度

用高效液相色谱法(HPLC)、三氯醋酸(TCA)沉淀法和超滤法分离测定125I-AAFP(抗过敏融合蛋白)标记物的放射化学纯度(RCP),并对其进行比较。结果表明:三种方法均能有效分离标记物和游离碘,用超滤法、TCA沉淀法和HPLC三种方法测定125I-AAFP低、中、高放射化学纯度,样本的RCP分别为0.62%±0.21%、7.25%±1.38%、0.97%±0.12%,61.58%±0.52%、63.18%±1.98%、63.77%±1.23%,98.89%±0.31%、98.76%±0.41%、98.80%±0.82%。当RCP很低时,超滤法与HPLC法测得的RCP间无明显差异(P0.05),而要低于TCA沉淀法(P0.05);除此之外,三种方法无明显差异(P0.05)。这说明离心超滤法可用于分离测定蛋白质标记物的放射化学纯度。     

99Tcm-DTPA-DG标记物的制备

为了在合成二乙三胺五乙酸-脱氧葡萄糖（DTPA-DG）基础上，制备⁹⁹Tc^m-DTPA-DG标记物，以SnCl₂·2H₂O为还原剂，还原⁹⁹Tc^mO^-₄并与DTPA-DG形成⁹⁹Tc^m-DTPA-DG标记物。进行了DTPA-DG用量、SnCl₂·2H₂O用量、反应介质pH值、反应温度等对标记率的影响实验。结果表明，25mg DTPA-DG ，500μg SnCl₂·2H₂O，pH=6，加入Na⁹⁹Tc^mO⁴淋洗液0.5~4mL，在25℃以上放置30min或沸水浴反应10min时，用9g/L NaCl和丙酮作展开剂纸层析法鉴定标记物,放射化学纯度>99%。标记物在室温放置6h，放射化学纯度仍达98.6%。⁹⁹Tc^m-DTPA-DG标记率高，标记物的体外稳定性好，操作简便，便于临床应用。     

125I示踪法检测西夫韦肽在生物体内的代谢过程

采用 Iodogen法标记了西夫韦肽(sifuvirtide)，并用S-100 HR凝胶柱分离纯化标记物。125I-sifuvirtide放化纯度＞99.0%，比活为3.9 GBq•g-1；标记后的蛋白仍具有一定生物活性。三氯醋酸(TCA)沉淀法测定125I-sifuvirtide在生物样品中含量，血浆中125I-sifuvirtide 的放射性活度为286.5-26125.5 Bq•mL-1时，线性为0.9998±0.0005，回收率为72.3%±6.9%。猕猴静脉和皮下推注125I-sifuvirtide后，血浆TCA酸沉放射性浓度时间曲线符合二房室模型；皮下给药后平均消除半衰期为95.83 h，达峰时间平均为3.35 h，平均绝对生物利用度为85.2%。     

3-三甲基硅苄胍的合成及其125I标记

以3-溴甲苯为起始物，通过5步反应合成可用于放射性碘（砹）标记的3-三甲基硅苄胍，并用核磁共振（NMR）、质谱（MS）、高效液相（HPLC）等对产物进行了表征。以此化合物为前体，对其进行了¹²⁵I标记。¹²⁵I MIBG的标记率达66.7%，放化纯度＞98%。标记物在室温下放置3d后，放化纯度无明显变化，表明¹²⁵I MIBG具有较高的体外稳定性。     

13C3-三硬脂酸甘油酯的合成与表征

以¹³C₃-甘油和硬脂酸为原料,在无溶剂的条件下,采用Lipozyme酶为催化剂,直接酯化合成¹³C₃-三硬脂酸甘油酯,产率为80%,产物无需纯化。经差示扫描量热分析（DSC）、红外光谱（FT-IR）、核磁共振（H NMR）、质谱（MS）分析表征,结果表明,产物为目标产物¹³C₃-三硬脂酸甘油酯,化学纯度＞98%,同位素丰度＞99%,产物可作为同位素内标物使用。     

125I标记紫杉醇的方法

摘要:采用改良的氯胺T法,先用稳定的NaI与紫杉醇作用,再以放射性Na125I标记紫杉醇(paclitaxel),建立了125I标记紫杉醇的方法。采用纸层析及HPLC测定标记产物的标记率、纯化后放射化学纯度,采用纸层析测定标记产物在不同温度、储存溶剂条件下的体外稳定性,红外光谱鉴定产物。改良Ch-T法所得标记产物的标记率与硝酸氧化法和传统氯胺T法相比较。结果显示,采用改良氯胺T法标记率约63.1%±5.7%,放射化学纯度约96.3%±1.3%;标记物储存于4℃生理盐水或乙醇储存体系中24h、120h,放化纯度分别＞95%和约90%;在血浆中稳定性也较好,在4℃ 、37℃放置24h,放化纯度分别为92.3%±0.4%、89.5%±0.6% 。以上结果表明,改良氯胺T法标记紫杉醇方法简便,标记率高,标记产物稳定性较好,能够满足放射性示踪实验的要求。     

125I粒子组织间植入近距离治疗恶性肿瘤

采用¹²⁵I粒子植入法对20例恶性肿瘤患者的24个病灶进行治疗,以评价¹²⁵I粒子组织间植入恶性肿瘤的可行性及不良反应。术前制定肿瘤组织间三维立体定向放射治疗计划,在全麻剖腹直视下、全麻腹腔镜下或局麻CT、局麻彩色多普勒导向下经皮穿刺将¹²⁵I粒子植入恶性肿瘤病灶内。20例患者¹²⁵I粒子植入均顺利完成,术中及术后1周观察粒子在病灶内的分布基本与计划相符合,未观察到粒子迁移;术中及术后不良反应较为轻微且易于处理;多数患者临床症状得到不同程度的缓解,血清肿瘤标志物水平呈现不同程度的下降; 病情完全缓解（CR）20.00%（4/20例）, 部分缓解（PR）35.00%（7/20例）, 稳定（SD）30.00%（6/20例）,进展（PD）15.00%（3/20例）,总有效率（CR+PR）55.00%（11/20例）。以上结果表明,¹²⁵I粒子组织间植入近距离内放射治疗恶性肿瘤施术方便、安全有效,具有较高的临床价值,值得进一步推广及深入研究。     

13C-甲醇的制备

采用自制的催化剂和自行设计的高效催化反应器,用催化加氢的方法,以Ba¹³CO₃为原料制备了¹³C-甲醇。所得甲醇水溶液在微型高效精馏反应器中进一步提纯后,得到的¹³C-甲醇化学纯度＞99.5%。实验设计的合成路线反应条件温和,同位素利用率＞90%。¹³C-甲醇经色质联用（GC-MS）和核磁（¹H NMR）检测,¹³C同位素丰度＞97%,¹³C-甲醇的同位素丰度与原料相比降低＜1%。以上结果表明,采用自制的催化剂和自行设计的高效催化反应器,成功地用催化加氢的方法,制备得到了¹³C-甲醇。     

糖基化生长抑素99Tcm标记及生物学评价

以天然生长抑素(Somatostatin，SMS)、葡聚糖-10(Dextran¹⁰，Dx¹⁰)及巯基乙胺（Cysteamine）为原料，合成糖基化生长抑素配体化合物SMS-Dx¹⁰-Cysteamine；以¹²⁵I-奥曲肽（¹²⁵I-Tyr₃-Octreotide）为放射性配基，进行受体竞争结合实验，测定SMS-Dx¹⁰-Cysteamine的IC₅₀值；利用葡庚糖转换络合进行SMS-Dx¹⁰-Cysteamine 的⁹⁹Tc^m标记，重点探讨⁹⁹Tc^m标记条件及标记物体外稳定性；并用⁹⁹Tc^m-Cysteamine-Dx¹⁰-SMS进行正常SD大鼠体内分布、血浆清除及肿瘤模型动物显像实验。结果表明：配体化合物SMS-Dx¹⁰-Cysteamine保持了对生长抑素2型受体高亲和力，其IC₅₀值与SMS相近；在最佳标记条件：0.3 g/L SnCl₂，5 g/L SMS-Dx¹⁰-Cysteamine，标记介质pH=6.0，室温下反应30 min，⁹⁹Tc^m-Cysteamine-Dx¹⁰-SMS标记率约为85%，经分离纯化后，其放射化学纯度大于99%，标记物体外稳定；⁹⁹Tc^m-Cysteamine-Dx¹⁰-SMS在正常大鼠体内血浆半衰期为2.38 h，主要浓聚于肝、脾脏并经肾排泄；荷胰腺癌裸鼠显像表明，注射后6 h，肿瘤组织具有明显的放射性摄取，⁹⁹Tc^m-Cysteamine-Dx¹⁰-SMS有望成为一种生长抑素受体阳性肿瘤显像剂。     

237Np,238Pu,241Am和90Sr在中国和日本膨润土中迁移的野外试验

从1997年6月25日到2000年7月11日在中国辐射防护研究院试验场，在天然降雨和人工喷淋（15mm/d）两种条件下，在包气带黄土中进行了²³⁷Np,²³⁸Pu,²⁴¹Am和⁹⁰Sr在中国膨润土和日本膨润土中迁移的野外试验。试块由膨润土和砂子以质量比为15∶85组成，试块大小为150mm×150mm。试验结果表明，在两种条件下，核素在两种膨润土试块中分布状态和变化趋势相似，²³⁸Pu和²⁴¹Am在3a内没有明显移动，²³⁷Np和⁹⁰Sr在天然降雨条件下，分布曲线有所展宽；在人工喷淋条件下经1106d后，²³⁷Np和⁹⁰Sr在试块内分别向下迁移15mm和20mm，呈现出扩散为主的迁移。     

Ad-hING4联合~(125)I粒子对裸鼠胰腺癌移植瘤的抑癌增效作用

本工作探讨腺病毒介导的人ING4基因(Ad-hING4)联合~(125)I粒子对裸鼠胰腺癌移植瘤的抑癌增效作用及其可能的机制.将本室构建的Ad-hING4腺病毒感染QBI-293A细胞,扩增后获得高滴度的病毒.建立25只裸鼠胰腺癌PANC-1皮下移植瘤模型,分成PBS对照组、空病毒Ad组、~(125)I粒子近距离放疗组、Ad-hING4基因治疗组、~(125)I粒子和Ad-hING4联合治疗组,进行抑瘤治疗实验;此后每5天测量1次肿瘤体积,20天后处死,计算抑瘤率和金氏q值.常规病理切片观察细胞生长形态、组织损伤程度和范围,并进行凋亡细胞计数(AI);免疫组化SP法检测肿瘤标本中微血管密度(MVD)、生存素SurvⅣin和活化的Caspase-3凋亡相关蛋白的表达.结果发现, ~(125)I粒子组、Ad-hING4组、联合治疗组抑瘤率分别达到34.19%(P<0.01)、31.50%(P<0.01)、67.15%(P<0.01),联合治疗组抑瘤率明显高于~(125)I粒子和Ad-hING4治疗组(P<0.01);病理切片检查显示近粒子处肿瘤细胞变性坏死,远离粒子处可见存活肿瘤细胞;三个治疗组凋亡指数(AI)、Caspase-3阳性细胞数明显高于PBS组(P<0.05),且联合治疗组明显高于~(125)I粒子和Ad-hING4治疗组(P<0.01);三个治疗组MVD值、SurvⅣin阳性细胞明显低于PBS组(P<0.05),且联合治疗组明显低于~(125)I粒子和Ad-hING4治疗组(P<0.01);Ad组与PBS组的各指标无显著性差异(P>0.05).可见~(125)I粒子、Ad-hING4可显著抑制裸鼠PANC-1胰腺癌移植瘤的生长,两者联用具有抑癌增效的协同作用,Ad-hING4有望作为一种新的放疗增敏剂;其抑瘤机制可能是通过下调SurvⅣin和上调Caspase3的表达,以诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管形成.     

~(125)I-白蛋白融合干扰素α2b大鼠体内分布研究

采用氯胺-T法对白蛋白融合干扰素α2b进行125I标记,PD-10柱纯化,三氯醋酸沉淀法测定放化纯;体外以WISH/VSV系统比较白蛋白融合干扰素α2b和125I-白蛋白融合干扰素α2b的抗病毒活性;SD大鼠皮下注射125I-白蛋白融合干扰素α2b,分别于给药后0.5、2、6、24、48、90、180、300 h放血处死,取血和相关脏器,称重并测定放射性,计算每克脏器放射性占注入量的百分率(%ID·g-1).结果显示,氯胺-T法制备的125I-自蛋白融合干扰素α2b标记率为82.72%,放化纯95.53%,放射性比活度为0.26 MBq/gg;抗病毒活性比较结果表明标记前后的生物学活性几乎无变化;皮下注射大鼠体内分布研究表明,125I-白蛋白融合干扰素α2b在血中于6 h达高峰,消除缓慢,未见特异性组织或器官的浓聚.     

125I标记人血白蛋白及其在家兔体内代谢的研究

采用氯胺-T法标记了3种不同来源的人血白蛋白。用预饱和的Sephadex G50柱分离纯化125I标记人血白蛋白，并用HPLC法对标记物进行分析鉴定。取分离后的125I标记白蛋白配制示 踪液，进行家兔体内代谢试验。用氯胺-T方法，125I标记人血白蛋白的标记率>80%。代谢研究表明，成都生物制品研究所柱层析、低温乙醇工艺和加拿大柱层析工艺生产 的人血白蛋白，其生物半减期分别为96.11±0.01、85.75±2.62和90.00±1.69，三者之间无显著性差异(P>0.05)。     

用于放射性砹(碘)标记蛋白质的偶联剂SPC的合成及表征

以5-溴烟酸为起始物，通过3步主要反应合成了一种适用于蛋白质放射性砹(碘)标记的偶联剂——5-(三正丁基锡)-3-吡啶甲酸N-琥珀酰亚胺酯(SPC)，并用核磁共振(NMR)、质谱(MS)、高效液相色谱(HPLC)等进行了表征。以该试剂为双功能偶联剂，实现了IgG的^125I标记，标记率达30％以上。标记产物在体外具有较高的稳定性。     

125I在微量移液器检验中的应用

用移液器吸取不同刻度125I溶液，用GC-1200双探头γ计数仪测其放射性计数，并与精密天平称重法结果进行比较，探讨用125I检验微量移液器的可行性。结果显示，2支合格移液器放射性计数无差异，3支不合格移液器与合格移液器之间放射性计数差异显著，此结果与精密天平称重法结果相符，表明125I可用于室内微量移液器的经常性检验     

两种~(125)I标记的神经紧张肽类似物的动物体内分布

采用氯胺T法对神经紧张肽类似物NT1和NT2进行125I标记,并观察了125I-NT1和125I-NT2在正常小鼠和荷人结肠癌裸鼠体内的分布。结果显示,125I-NT1和125I-NT2标记率分别为68%和76%,经Sep-Pak-C18反相柱分离后,放化纯度>98%;两种125I标记的NT类似物血液清除较快,部分由肝、肾脏排泄,体内分布基本一致,对肿瘤具有相似的靶向性。这说明两种NT类似物N端Arg和Lys互换对其体内的分布特性没有明显影响。与125I-NT1相比,125I-NT2在体内的清除速度更快,在胃中更稳定,其T/NT也更高,更适于作进一步研究。     

H22肝癌细胞与正常小鼠肝细胞胰岛素受体表达的对比

本实验采用氯胺T法进行了胰岛素的     

Synthesis of serotonin transporter imaging agent [^125I]ADAM

The synthesis of serotonin transporter imaging agent [^125I] -2-((2-((dimethylamino)methyl)phenyl)thio)-5-iodophenylamine(^125I] ADAM) was reported. The chemical structure of the labeling precursor 5- (tributylstannyl) -2-((2-((dimethylamino)methyl)phenyl)thio)phenylamine and all its intermediates were verified by IR, ^1HNMR and MS. The radioiodinated compound was prepared using iododestannylation reaction by hydrogen peroxide. Final radiochemical purity was above 95% determined by TLC.