益气化痰解毒中药对脂肪肝大鼠脂联素及肝脏瘦素受体mRNA的影响

[目的]探讨益气化痰解毒中药治疗脂肪肝分子生物学机制.[方法]将60只大鼠随机分为正常组与模型组(采用高脂饮食加白酒灌胃建立大鼠脂肪性肝炎模型),模型组所有大鼠再随机分为对照亚组、中药亚组、东宝肝泰亚组.用药4周后,观察并比较模型组及其各亚组与正常组对血清脂联素(APN)、瘦素(leptin)及肝脏瘦素受体(OB-R) mRNA、肿瘤坏死因子-α的影响.[结果]模型组与正常组比较血清leptin浓度升高,APN及肝脏OB-RmRNA表达显著下降(P＜0.01),治疗后中药亚组APN水平明显升高,肝脏OB-R mRNA表达上调,同时血清leptin、肝组织肿瘤坏死因子-α含量下降,明显优于东宝肝泰亚组(P＜0.01).[结论]益气化痰解毒中药通过提高APN,上调肝脏OB-RmRNA的表达,以调节leptin水平达到有效治疗脂肪性肝炎的作用.     

理气化痰祛瘀法对非酒精性脂肪性肝炎大鼠脂肪细胞因子表达的影响

[目的]观察理气化痰祛瘀中药对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）、瘦素（1eptin）及其肝组织mRNA水平的影响，探讨其防治NASH的作用机制。[方法]以高脂饮食喂养Wistar大鼠12周，建立大鼠NASH模型，同时以不同剂量的理气化痰祛瘀法中药干预12周，测定大鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）及游离脂肪酸（FFA）水平，观察肝组织的病理改变，原位杂交技术检测肝组织TNF-α、IL-6、leptinmRNA表达，放免法测定血清TNF-α、IL-6、leptin水平。[结果]NASH大鼠血清ALT、AST、FFA、TNF-α、IL-6、leptin水平较正常大鼠显著升高，肝组织TNF-α、IL-6和leptinmRNA表达显著增强，理气化痰祛瘀法中药能显著改善NASH大鼠肝组织炎症活动程度，显著降低ALT、AST、FFA、TNF-a、IL-6、leptin水平和肝组织TNF-α、IL-6、leptinmRNA表达。[结论]TNF-α、IL-6、leptin参与高脂饮食诱导的大鼠NASH的发生，理气化痰祛瘀中药能调节TNF-α、IL-6、leptin的分泌，防止NASH的进一步发展。     

枳黄方对急性酒精性肝损伤大鼠内毒素信号转导通路中白细胞分化抗原14的影响

[目的]探讨酒精性肝损伤时，枳黄方对内毒素信号通路中白细胞分化抗原14（CD14）表达的影响。[方法]将75只Wistar大鼠随机分为空白对照（正常）组、酒精攻击（模型）组、枳黄方（治疗）组，10d后，处死大鼠，取大鼠血清和肝脏测定丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST），苏木精-伊红染色观察肝脏病理变化，基质染色法测定血清内毒素，免疫组化法测定肝脏肿瘤坏死因子α（TNF-α），RT—PCR法测定肝组织CD14mRNA的变化。[结果]治疗组肝脏病理表现较模型组好，其血清内毒素、ALT、AST和肝组织TNF-α、CD14mRNA表达水平均高于正常组（P〈0．05，〈0．01，〈0．01，〈0．01，〈0．05），且均显著低于模型组（均P〈0．01）。[结论]枳黄方能显著降低内毒素信号转导通路上CD14基因水平的表达，减少肝组织TNF-α的表达，这可能是其对大鼠酒精性肝损伤有较明显保护作用的机制之一。     

肝康Ⅳ号对大鼠酒精性脂肪肝的保护作用

[目的]探讨肝康Ⅳ号对大鼠酒精性脂肪肝的保护作用。[方法]采用高脂饮食和白酒诱导大鼠酒精性脂肪肝模型,以不同剂量肝康Ⅳ号煎液灌胃治疗（治疗组）,于8周末处死鼠,采血检测血清天冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）及肝脏总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平,肉眼和显微镜下观察肝组织病理学变化及脂肪变程度计分,并与空白对照组、模型组和东宝肝泰组比较。[结果]模型组肝组织明显脂肪变性,治疗组和东宝肝泰组可显著降低血清AST、ALT和肝组织TC、TG、MDA水平,提高肝组织SOD活性,肝康Ⅳ号治疗效果优于东宝肝泰;肝组织病理检查显示,肝康Ⅳ号可减轻肝组织脂肪变和点灶样坏死,镜下计分显示肝康Ⅳ号中、高剂量组对肝组织改善优于东宝肝泰组。[结论]肝康Ⅳ号可对抗氧化应激和脂质过氧化损害,对大鼠酒精性脂肪肝有良好的治疗效果。     

葛花醒酒养胃颗粒对酒精性肝病内毒素损伤的防治作用

目的探讨葛花醒酒养胃颗粒对酒精性肝病(ALD)内毒素损伤的防治作用.方法Wistar大鼠48只随机分为正常组、模型组、葛花醒酒养胃颗粒治疗组(简称治疗组)和肝泰乐对照组(简称对照组).实验采用梯度酒精定量灌胃法制备酒精性肝病大鼠模型,造模同时治疗组予葛花醒酒养胃颗粒汤150mg·kg-1·d-1,分2次灌胃,对照组予肝泰乐水38mg·kg-1·d-1,分2次灌胃,正常组予同容积生理盐水,每日灌胃2次,连续灌胃8周后采血,检测大鼠血浆内毒素(LPS)、血清酶(ALT、AST、GGT)、血脂(Tch、TG)及血清肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量,同时用RT-PCR法测定肝组织中脂多糖结合蛋白(LBP)和脂多糖受体CD14mRNA的表达.结果模型组大鼠血浆内毒素和血清TNF-α水平明显高于对照组(P＜0.05),肝组织中LBP和CD14mRNA的表达明显高于对照组(P＜0.05);同时血清ALT、AST、GGT、TG明显升高(P＜0.05);治疗组血浆内毒素和血清TNF-α水平明显低于模型组(P＜0.05),LBP和CD14mRNA的表达明显低于对照组(P＜0.05),血清ALT、AST、GGT、TG水平明显降低(P＜0.05).结论葛花醒酒养胃颗粒对大鼠酒精性肝损伤有较好的防治作用.     

舒肝活血化痰方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠脂质过氧化的影响

[目的]探讨舒肝活血化痰方抗非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠脂质过氧化的作用机制。[方法]采用高脂饮食复制NASH大鼠模型，用舒肝活血化痰方治疗，以东宝肝泰为对照，观察其对模型大鼠肝功能、血脂、肝组织超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）、羟脯氨酸（Hyp）水平及细胞色素P4502E1（CYP2E1）活性的影响。[结果]舒肝活血化痰方显著改善肝功能，降低血清总胆固醇、三酰甘油及低密度脂蛋白胆固醇的同时升高高密度脂蛋白胆固醇水平，并显著降低肝组织Hyp，抑制肝组织CYP2E1的活性。[结论]舒肝活血化痰方可有效干预大鼠NASH，抑制肝组织CYP2E1的表达及与其密切相关的脂质过氧化是该方干预作用的主要机制之一。     

实验性酒精性肝病时脂多糖结合蛋白和脂多糖受体CD14的表达

目的观察大鼠酒精性肝病时脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharide binding protein,LBP)和脂多糖受体CD14的表达及其在酒精性肝损害中的作用.方法随机将Wistar大鼠分为乙醇喂养组和葡萄糖喂养对照组,分剐在饮水中加入乙醇(剂量5-12 g@kg-1@d-1)和相同量的葡萄糖.两组大鼠分别于4周和8周测定其血浆中内毒揪素(LPS)浓度及血清中ALT变化,同时用RT-PCR测定肝组织中LBP和CD14 mRNA的表达,并在光镜和电镜下观察肝脏的形态学改变.结果乙醇喂养组4周和8周时大鼠血浆LPS浓度分别为(129±21)pg/ml和(187±35)Pg/m1,明显高于对照组的(48±9)pg/ml和(53±11)pg/ml(f值分别为11.2和11.6,P＜0.05);乙醇组大鼠血清ALT浓度为(112±15)U/L和(147±22)U/L,也明显高于对照组的(31±12)U/L和(33±9)U/L(t值分别为5.9和20.6,P＜0.05).乙醇组大鼠肝组织中LBP和CD14 mRNA的表达水平明显高于对照组(P＜0.05),其肝组织发生显著的病理变化,主要表现为脂肪变性、炎性细胞浸润及细胞坏死.对照组肝组织中LBP和CD14mRNA无明显表达,其病理变化也不明显.结论乙醇能诱导大鼠血中LPS浓度升高和肝缝织中LBP与CD14 mRNA的表达显著增强,增高的LBP和CD14 mRNA能增加肝脏对LPS的敏感性,可能造成肝脏损害.     

姜黄素对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织TNF-α表达的影响

目的研究姜黄素防治非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的作用及其机制。方法采用高脂饮食制备大鼠NASH模型。大鼠分正常对照组、模型组、姜黄素防治组、东宝肝泰防治组，观察肝细胞脂肪变性、炎症活动程度；采用免疫组化和Western blot技术检测各组大鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）蛋白表达变化。结果与模型组相比，姜黄素防治组大鼠肝细胞脂肪变性、炎症活动程度皆有明显改善（P〈20．05），TNF-α蛋白含量显著减少（P〈0．01），部分作用明显优于东宝肝泰防治组（P〈0．01或P〈0．05）。结论姜黄素有防治NASH作用，作用机制考虑与纠正致炎因子TNF-α蛋白高表达相关。     

乳黄制剂对肝硬化模型大鼠肝组织脂多糖结合蛋白mRNA、CD14 mRNA及Toll样受体4 mRNA的影响

目的:研究乳黄制剂对肝硬化大鼠肝组织LBP(脂多糖结合蛋白)mRNA、CD14 mRNA、TLR4(Toll样受体-4)mRNA的影响.方法:SPF级雄性Wister大鼠88只随机分为6组:正常组、模型组、预防组、预防对照组、模型治疗组、模型治疗对照组.采用CCl4复合因素法制造肝硬化模型.用乳黄制剂进行预防和治疗,并与乳果糖对照药进行比较,分别检测大鼠肝组织LBP mRNA、CD14 mRNA、TLR4 mRNA的表达水平.结果:治疗组大鼠肝组织LBP mRNA、CD14 mRNA、TLR4 mRNA表达水平明显低于模型组(P＜0.05),预防组大鼠肝组织LBP mRNA、CD14 mRNA、TLR4 mRNA表达水平与正常组比较差异无显著性意义(P＞0.05).结论:乳黄制剂能有效抑制内毒素调节蛋白及其相关受体的表达,从而减少内毒素血症的发生.     

替米沙坦对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝纤维化基质金属蛋白酶-13及其抑制因子-1的表达和胰岛素抵抗的影响

目的观察替米沙坦对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠肝纤维化的疗效和对基质金属蛋白酶-13（MMP-13）及其抑制因子-1（TIMP-1）的表达和胰岛素抵抗的影响。方法30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和替米沙坦干预组。模型组和干预组给予高脂饲料喂养16周诱发脂肪性肝炎,其中干预组于高脂喂养12周后,给予替米沙坦[5mg／（kg·d）】灌胃治疗4周。16周末处死所有动物。检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）及空腹胰岛素（FINS）、空腹血糖（FPG）,并计算胰岛素抵抗指数（HOMA—IR）,RT—PCR和Westernblot法检测肝组织TIMP-1、MMP-13mRNA和蛋白的表达水平。病理切片观察组织学改变,免疫组织化学法检测a-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达情况。结果模型组血清ALT,AST,FPG,FINS及HOMA—IR较正常组均显著升高（均P〈0．01）。与模型组相比,干预组血清ALT,FPG,FINS及HOMA—IR均明显下降,差异具有统计学意义（均P〈0．01）。AST与干预组相比存在下降趋势,但差异无统计学意义（P〉0．05）。与模型组相比,替米沙坦可显著改善肝脏炎症活动度及肝纤维化程度（均P〈0．01）。干预组HOMA-IR较模型组明显降低【（3．59±0．29）VS（6．23±0．19）,P〈0．01]。干预组肝组织α—SMA的表达明显减少,肝组织MMP．13mRNA和蛋白的表达均增加,TIMP-1mRNA和蛋白的表达均降低（均P〈0．01）。结论替米沙坦对NASH大鼠具有改善胰岛素抵抗和抗肝纤维化的作用。     

超声直方图定量技术在酒精性脂肪肝中医疗效评价中的应用

目的探讨超声直方图定量测定方法在酒精性脂肪肝（AFLD）中医疗效评价中的应用价值。方法选取临床确诊为酒精性脂肪肝（痰瘀互结型）患者60例,随机分成中药组30例,西药组30例,并选取健康志愿者30例为健康对照组,中药组接受以健脾化浊、行气化瘀为主的中医治疗,西药组给予维生素B,、B2、B6及叶酸口服。观察两组患者药物治疗前后肝脏感兴趣区超声直方图灰阶值A及血清学指标（AST、ALT、AST／ALT、GGT）的变化。结果治疗前,中药组、西药对照组间各指标比较差异无统计学意义（P〉0．05）;两组分别与健康对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。治疗12周后,中药组灰阶值A、AST、GGT及西药对照组AsT低于治疗前（P〈0．05）;中药组灰阶值A、GGT低于西药对照组（P〈0．05）。结论超声直方图定量测定与血清生化指标在反映酒精性脂肪肝中医疗效上有较好的一致性。     

原发性肝癌不同血瘀证患者肝组织微小RNA表达差异的初步研究

目的对原发性肝癌中医辨证分型提供客观的量化标准。方法采用微小RNA（miRNA）芯片检测、实时定量PCR验证,对比观察原发性肝癌气虚血瘀证、肝郁血瘀证、肝胆湿热证及肝瘀痰结证患者（各3例,分别以证型命名组名）肝组织10种miRNA表达水平的差异;并与3例正常肝组织（正常组）进行比较。结果 miR-122-3p各证型组均明显高于正常组（P〈0.05）,气虚血瘀组明显高于其他各证型组（P〈0.05）;miR-30b-5p在肝胆湿热组明显低于其他各证型组（P〈0.05）,其他各证型组与正常组比较无显著性差异;miR-182-5p在气虚血瘀组、肝郁血瘀组和肝胆湿热组均明显高于正常组（P〈0.05）;miR-221-5p在肝胆湿热组和肝郁血瘀组明显低于其他各证型组及正常组（P〈0.05）,但这两组间无显著性差异;miR-221-3p在肝郁痰结组高于其他各证型组,但无统计学差异;miR-21-5p在气虚血瘀组、肝郁血瘀组和肝郁痰结组均高于肝胆湿热组和正常组,但无统计学差异。miR-222-3p、miR-214-3p、miR-491-3p、miR-422a各组间未见明显差异。结论原发性肝癌不同血瘀证患者肝组织miRNA水平存在显著性差异;本研究为原发性肝癌的中医辨证分型提供了客观的量化标准。     

中药不同组方对胃癌前病变模型大鼠胃黏膜细胞ROS、Ca2+表达的影响

[目的]探讨不同组方中药对胃癌前病变模型大鼠胃黏膜活性氧(reactive oxygen species,ROS)、钙离子(Ca2+)表达的影响。[方法]采用化学药物刺激的方法复制了慢性萎缩性胃炎伴不典型增生动物模型并分组用药物干预,用流式细胞仪检测各组大鼠胃组织中ROS、Ca2+表达的变化。[结果]无论是预防组还是治疗组,模型对照大鼠胃黏膜细胞中的ROS、Ca2+明显减少,中药、西药的干预均可以使ROS、Ca2+的表达增加,与模型对照大鼠比较均差异有统计学意义(P<0.05),健脾化瘀中药要好于其他药物。[结论]各组方中药均可以通过增加胃组织中ROS、Ca2+的表达达到对胃癌前病变的组方作用,健脾化瘀中药的作用要明显好于健脾益气方、活血化瘀方。     

针药联合治疗对非酒精性脂肪肝及胰岛素抵抗的效果

[目的]探讨针灸联合中药汤剂治疗非酒精性脂肪肝并发胰岛素抵抗患者的治疗效果及应用价值。[方法]选择我院治疗的非酒精性脂肪肝并发胰岛素抵抗患者144例,随机分为观察组和对照组,对照组采用水飞蓟宾葡甲胺片治疗,观察组在对照组基础上联合针灸和口服中药汤剂治疗,观察2组的治疗效果。[结果]观察组治疗总有效率为94.44%,对照组治疗总有效率为79.17%,组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）。观察组治疗后甘油三酯、总胆固醇、丙氨酸氨基转移酶与对照组治疗后比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。观察组治疗后空腹血糖、空腹胰岛素浓度、胰岛素抵抗指数与对照组治疗后比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。[结论]采用针灸联合中药汤剂治疗非酒精性脂肪肝并发胰岛素抵抗患者疗效可靠,能有效改善患者血脂和肝脏功能,同时可以改善胰岛素抵抗的状态,值得临床推广使用。     

理气化痰祛瘀法抗非酒精性脂肪性肝炎大鼠的脂质过氧化损伤

[目的]观察理气化痰祛瘀中药对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠脂质过氧化反应的影响，探讨其防治NASH的作用机制。[方法]高脂饮食喂养12周诱导Wistar大鼠建立NASH模型，以不同剂量的理气化痰祛瘀中药预防及治疗，检测大鼠血清及肝组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPX）的水平，光镜观察肝组织切片病理学改变。[结果]模型大鼠肝组织出现了严重脂肪变和不同程度炎症细胞浸润。模型大鼠血及肝组织中MDA水平较正常大鼠显著升高，而SOD、GSH-PX活性则较正常大鼠显著降低。应用理气化痰祛瘀中药进行预防和治疗后，大鼠肝组织脂肪变程度和炎症活动程度较模型大鼠显著降低，同时血及肝组织MDA水平显著降低，而SOD、GSH-PX活性则显著提高。[结论]理气化痰祛瘀法中药对NASH有防治作用，其作用机制可能与抑制脂质过氧化反应有关。     

易激灵2号方对大肠湿热型肠易激综合征T细胞亚群的影响

[目的]观察易激灵2号方对大肠湿热型腹泻型肠易激综合征（diarrheatypeirritablebowelsyndrome,IB孓D）患者T细胞亚群的影响,并探讨其作用机制。[方法]将174例大肠湿热型IBS-D患者随机分为两组,中药组采用易激灵2号方,煎取200ml,早晚分服;西药组采用马来酸曲美布汀片（商品名：舒丽启能）0．1g／次,枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊（商品名：美常安）0．5g／次,3次／d,口服;同时设立正常组24名,两组疗程均为4周。采用流式细胞仪测定外周血CD3^＋。、CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞分布百分率。[结果]与正常组相比,大肠湿热型IBS-D患者CD4^＋细胞水平显著降低（P〈O．01）,CD8^＋细胞水平显著升高（P〈O．05）,CD4^＋／CD8^＋比值下降明显（P〈0．05）。中药组和西药组治疗后,CD4^＋。细胞水平较治疗前均明显升高（P〈O．01,P〈0．05）,但中药组升高更为明显,组间差异有统计学意义（P〈0．05）;CD8^＋细胞水平较治疗前均有明显下降（P〈O．05）,CD4^＋／CD8^＋比值均有明显升高（P〈0．05）。与西药组相比,中药组治疗后CD8^＋细胞水平和CD4’／CD8’比值有一定程度升高,但差异无统计学意义。[结论]以抑肝扶脾清热利湿立法的易激灵2号方很可能通过调节T细胞亚群的变化,达到消除或减轻IBS-D患者临床症状的效果。     

枸杞多糖预防大鼠酒精性脂肪肝的实验研究

目的研究枸杞多糖(LBP)预防大鼠酒精性脂肪肝(AFL)的效果,探讨其作用机制。方法125只Wister大鼠随机分为4组,正常对照组:用蒸馏水灌胃;5%LBP预防组和10%LBP预防组:LBP与乙醇同时灌胃,酒精组:单纯乙醇灌胃。比较4组大鼠:肝脏病理形态,血清ALT、AST、GGT,肝匀浆脂质过氧化酶[谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX),超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)]以及过氧化氢(H2O2),肝细胞色素P4502E1(CYP2E1)基因及蛋白表达。结果10周时测定AST,5%和10%LBP预防组分别为(132.3±25.7)U/L和(127.5±29.1)U/L,GGT分别为(1.9±0.5)U/L和(1.8±0.7)U/L,酒精组AST为(245.7±32.1)U/L、GGT为(4.4±0.6)U/L,预防组与酒精组比较,差异有统计学意义, P<0.01,ALT预防组与酒精组比较,差异无统计学意义。10周时测定GSH-PX活性,5%和10%LBP预防组分别为(13.5±1.4)U·mg 1·min-1和(13.6±1.5)U·mg1·min1,SOD活性分别为(206.7±13.2)U/L和(203.2±18.8)U/L,酒精组GSH-PX活性为(7.2±1.6)U·mg 1·min 1和SOD活性为(116.5±13.6)U/L,预防组与酒精组比较,明显提高,差异有统计学意义,P<0.01。GSH含量,两预防组分别为(65.1±11.0)mg/g和(66.6±11.1)mg/g,酒精组为(30.5±10.7)mg/g,预防组与酒精组比较,明显增加,差异有统计学意义,P<0.01。MDA含量,两预防组分别为(5.1±0.3)nmol/mg和(5.1±0.4)nmol/mg,酒精组为(14.5±3.2)nmol/mg。H2O2两预防组分别为(135.4±23.5)mmol/g和(132.6±31.8)mmol/g,酒精组为(328.5±45.6)mmol/g,两预防组比酒精组明显减少,差异有统计学意义,P<0.01。CYP2E1基因表达,5周和10周两预防组分别为0.39±0.04,0.40±0.06和0.41±0.05,0.42±0.08,酒精组分别为0.74±0.05和1.02±0.08。蛋白表达水平两预防组分别为3.49±0.36,3.29±0.30和3.58±0.30,3.36±0.37,酒精组分别为5.63±0.44和7.90±0.26,两预防组比酒精组显著降低,差异有统计学意义,P<0.01。两预防组大鼠肝脏脂肪性病理变化明显轻于酒精组。结论LBP通过抑制CYP2E1基因及蛋白表达,减轻脂质过氧化反应,有效的预防AFL。     

中西医结合治疗非酒精性脂肪性肝炎的疗效观察

[目的]探讨中西医结合治疗非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的临床疗效。[方法]选择NASH患者90例。随机分为2组,对照组44例,口服多烯磷脂酰胆碱胶囊;治疗组46例,在对照组治疗基础上加服柴葛降脂汤,比较2组患者在临床症状、肝脏超声、肝功能及血脂方面的改善情况。[结果]总有效率治疗组为93．4％,对照组为77．3％,2组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;治疗组治疗后症状总积分、超声评分、肝功能及血脂均优于对照组（均P〈0．01,〈0．05）。[结论]中西医结合治疗NASH有较好的临床疗效。