RGS5过表达腺病毒载体构建及其在神经元发育中作用的初步研究

目的:利用AdEasy腺病毒载体系统构建G蛋白信号调节蛋白5(regulator of G-protein signaling 5,RGS5)重组腺病毒载体,初步探讨RGS5在神经元发育过程中的作用。方法:以C57BL/6小鼠大脑皮层神经元cDNA为模板,利用PCR扩增RGS5基因,构建腺病毒重组质粒pAD-Track...     

趋化因子受体4基因重组腺病毒载体的构建及鉴定

背景：目前研究发现,基质细胞衍生因子1/趋化因子受体4轴具有介导骨髓间充质干细胞定向迁移的作用。 目的：构建小鼠趋化因子受体4基因重组腺病毒载体。 方法：从C57BL/6小鼠中提取总RNA,以RT-PCR方法获得小鼠趋化因子受体4基因全长1 080 bp的完整编码序列,通过穿梭质粒pAdTrack-CMV,将目的片段克隆入AdEasy-1腺病毒DNA中,获得重组腺病毒DNA,通过脂质体转染293细胞,经包装扩增后,获得重组腺病毒pAdTrack-CMV-CXCR4,并感染293细胞,PCR鉴定、Western blot检测蛋白表达。 结果与结论：含趋化因子受体4基因的重组腺病毒pAdTrack-CMV-CXCR4构建成功,经PCR鉴定鉴定重组病毒中含有趋化因子受体4cDNA全长,经序列测定表明趋化因子受体4cDNA序列正确无丢失和错配现象,病毒滴度高,Western blot检测感染后293细胞趋化因子受体4的蛋白表达较未感染293细胞明显增加。     

HPV16E7E6抗原表位嵌合体DNA抗肿瘤疫苗的研究

目的:探讨HPV16 E7、E6抗原表位与HSP70 N端重组DNA疫苗抗肿瘤活性.方法:以重叠PCR将HPV16 E7基因N端60个氨基酸的编码序列与E6基因的10个(48～57)氨基酸的编码序列及HSP70 N端序列进行融合.以pcDNA3.0为载体,构建真核表达载体pcD-E76HSP.重组质粒免疫C57BL/6小鼠后,通过淋巴细胞增殖实验和细胞毒性杀伤实验研究该疫苗激发的细胞免疫反应及反应强度;观察该疫苗对C57BL/6小鼠TC-1肿瘤细胞移植瘤的治疗效果.结果:重组DNA疫苗免疫C57BL/6小鼠后,小鼠脾淋巴细胞体外增殖明显,并可诱导产生针对TC-1肿瘤细胞的特异性CTL反应;体内抑瘤试验显示该疫苗对HPV16病毒转化的TC-1细胞小鼠移植瘤的生长有抑制作用.结论:该疫苗能激发特异性细胞免疫反应,显著抑制HPV16转化的TC-1肿瘤细胞生长.     

乙型肝炎病毒C基因重组逆转录病毒的构建和在真核细胞的表达

目的　构建含HBVC基因的重组逆转录病毒以用于慢性乙型肝炎的免疫治疗。方法　用PCR法扩增HBV的C基因片段 ,定向插入逆转录病毒质粒载体pLXSN中 ,重组质粒用脂质体转染包装细胞PT67,G418筛选抗性细胞 ,用抗性细胞培养上清液中的重组病毒感染NIH3T3、EL4和鼠骨髓来源的树突状细胞 (DC) ,用PCR检测目的基因的插入 ,用间接免疫荧光和流式细胞仪检测目的基因的表达 ,基因修饰的DC免疫C57BL 6鼠观察其诱导细胞免疫的能力。结果　含HBVC基因重组质粒载体经PCR、酶切和序列分析鉴定为阳性 ,转染PT67后经G418筛选获得抗性细胞 ,抗性细胞培养上清液中含有重组逆转录病毒 ,病毒效价达 3× 10 5CFU ml,感染NIH3T3和EL4细胞后PCR鉴定含目的基因 ,间接免疫荧光、流式细胞仪鉴定有HBcAg表达 ,基因修饰后的DC免疫C57BL 6鼠能诱导特异性CTL应答。结论　构建的HBVC基因重组逆转录病毒可将目的基因转移至真核细胞并得到有效表达     

肝癌靶向性SEA-CD80基因共表达重组腺病毒载体的构建及表达鉴定

目的:构建肝癌靶向性葡萄球菌肠毒素A(SEA)和CD80基因共表达重组腺病毒载体。方法:首先利用现有的腺病毒穿梭质粒pShuttle和pShuttleCMV,构建新的不带CMV增强子/启动子而带有polyA加尾信号穿梭质粒,命名为pShuttle2。将AFP增强子、启动子、SEA及CD80基因分别从已构建的pKSEP载体和pMD18TBIS载体上,分别亚克隆至pShuttle2中,再与腺病毒骨架质粒pAdEasy1共转化E.coliBJ5183。以获得的重组子转染HEK293细胞后制备重组腺病毒,然后感染高表达AFP的肝癌细胞系Hepa16和不表达AFP的黑色素瘤细胞系B16、成纤维细胞系NIH3T3。采用间接免疫荧光法,激光共聚焦显微镜观察和流式细胞术检测SEA和CD80在细胞膜表面的表达。采用3H掺入法检测膜表达的SEA诱导淋巴细胞增殖的活性。结果:以制备的重组腺病毒感染肿瘤细胞后,SEA和CD80能够靶向性地共表达在高表达AFP的Hepa16细胞膜上,而在不表达AFP的B16、NIH3T3细胞膜上不表达。结论:成功地构建肝癌靶向性SEA和CD80基因共表达重组腺病毒载体,为进一步研究SEA和CD80在肝癌靶向基因治疗中的联合应用及其抗肿瘤免疫机制奠定了基础。     

小鼠TERT启动子调控的CD80-SEA基因重组腺病毒载体的构建及在肝癌细胞中的表达鉴定

目的:构建小鼠端粒酶反转录酶(mTERT)启动子调控的葡萄球菌肠毒素A(SEA)和CD80基因共表达重组腺病毒载体,并观察其介导的SEA和CD80在小鼠肝癌细胞Hepa1-6中的表达情况。方法:采用AdEasy腺病毒体系,亚克隆mTERT核心启动子区至穿梭质粒pShuttle2,并在其上游插入myc-Max反应元件MMRE,用来调控SEA及CD80基因的表达,构建SEA和CD80基因共表达重组腺病毒载体Ad-MMRE-mTERT-BIS,制备病毒并纯化,然后将病毒以感染复数为100的浓度分别感染肝癌细胞系Hepa1-6和成纤维细胞系NIH3T3。采用免疫荧光染色法检测SEA和CD80在细胞膜表面的表达情况。结果:重组腺病毒载体Ad-MMRE-mTERT-BIS感染的Hepa1-6肝癌细胞膜上能够共表达SEA和CD80;而病毒感染的NIH3T3细胞不能表达SEA和CD80。结论:成功地构建了mTERT启动子调控的SEA和CD80基因共表达重组腺病毒载体,能够调控SEA和CD80基因在肝癌细胞中的靶向表达,为进一步研究肝癌的靶向基因治疗奠定了基础。     

重组腺病毒HIV-1 vpr基因的构建和表达

目的 构建携带HIV-1 vpr基因的重组腺病毒,使CD4 T淋巴细胞C8166内源性的高表达Vpr蛋白.方法 利用AdEasy-1系统, 通过将含有目的 基因片段的穿梭载体pAdTrack-CMV-vpr和骨架质粒pAdEasy-1在BJ5183细菌内同源重组的方法构建重组腺病毒质粒Ad-vpr, 用脂质体法将重组质粒转染至HEK293A细胞包装, 获得重组腺病毒Ad-vpr, 荧光显微镜观察Ad-vpr感染C8166细胞GFP的表达 , Western blotting鉴定Vpr在C8166细胞内的特异性表达,流式细胞术检测Ad-vpr感染 C8166细胞的效率.结果 成功构建携带HIV-1 vpr基因的重组腺病毒 ,Western blotting结果表明重组腺病毒Ad-vpr感染的C8166细胞内源性的高表达Vpr 蛋白,流式细胞术检测结果表明Ad-vpr感染C8166细胞效率高(44.07±3.62)%.结论 成功构建出携带HIV-1 vpr基因的重组腺病毒,使C8166细胞内源性的高表达Vpr蛋白.     

以肿瘤抗原BAP31为靶点的基因疫苗构建及其诱导小鼠免疫反应的研究

目的: 构建重组表达载体P-BAP31和P-L-BAP31基因疫苗并接种小鼠, 评价其诱导的体液和细胞免疫应答.方法: 利用分子克隆技术, 构建重组质粒P-BAP31和P-L-BAP31, 同时构建P-BAP31/EGFP和P-L-BAP31/EGFP重组质粒, 并将其以脂质体瞬时转染HeLa细胞, 通过荧光显微镜观察目的蛋白的表达;将重组质粒P-BAP31和P-L-BAP31免疫C57BL/6小鼠, 采用间接ELISA检测免疫小鼠血清中特异性抗体效价;通过酶联免疫斑点实验(ELISPOT)检测免疫脾细胞在受到BAP31抗原刺激后产生IFN-γ和IL-4细胞因子的频率;通过乳酸脱氢酶(LDH释放)试验检测小鼠特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的应答.结果: 酶切及测序结果表明, 成功构建了针对BAP31肿瘤抗原的P-BAP31和P-L-BAP31基因疫苗.通过荧光显微镜观察重组质粒转染的HeLa细胞, 可见EGFP报告基因表达的绿色荧光.ELISA检测免疫小鼠血清中特异性抗体效价发现, 带LAMP组明显高于不带LAMP组(P<0.05), 且两者均高于空质粒(P-LAMP)及正常对照(N)组(P<0.01).ELISPOT检测脾细胞分泌细胞因子IFN-γ和IL-4的频率, 带LAMP组与其他组相比显著提高(P<0.01).LDH释放试验显示, 带LAMP组的特异性CTL活性高于不带LAMP组, 且均高于对照组(P<0.01).结论: 构建了针对肿瘤抗原BAP31的全长基因疫苗, 以其免疫C57BL/6小鼠可诱导特异性体液和细胞免疫反应, 其中, P-L-BAP31基因疫苗各项免疫反应均优于P-BAP31.     

CCL20对HBV基因疫苗的免疫增强作用

CCL20为CC家族的趋化因子,对未成熟DC和T细胞具有较强的正向趋化作用。HBsAg是乙肝病毒中具有保护作用的结构抗原。以HBsAg为目的抗原进行基因免疫可诱导HBV特异性免疫应答。为进一步增强基因疫苗的免疫效果,研究中,应用基因重组技术,构建CCL20和HBsAg的真核表达载体,将重组体用肌肉注射方式免疫C57BL/6小鼠,通过ELISA方法检测C57BL/6小鼠的抗-HBs抗体水平、淋巴细胞增殖试验检测抗原特异性Th活性、FACS检测CTL效应。结果显示,用CCL20/HBsAg真核表达质粒共注射免疫后,100%小鼠能在第4、6周检测到抗-HBs抗体,CCL20可显著增强HBsAg基因疫苗诱导的体液免疫应答;Th活性和CTL效应检测也显示,CCL20增强了HBsAg诱导的特异性细胞免疫反应。这将为新型乙肝疫苗的分子设计和研制提供新的理论与实践依据。     

重组腺相关病毒载体介导的LacZ基因转染骨胳肌途径的研究

目的研究重组腺相关病毒载体(recombinantadeno-associatedvirusvector,rAAV)介导的β-半乳糖苷酶的结构基因LacZ,构建的rAAVLacZ病毒经不同途径给药后骨骼肌的转染效率、表达持续时间,为rAAV载体介导的目的基因对Duchenne肌营养不良的基因治疗探索合适的给药途径。方法采用报告基因LacZ、包装质粒PXX2、腺病毒成份辅助质粒PXX6三质粒共转染293细胞,包装重组腺相关病毒载体介导的rAAVLacZ,将rAAVLacZ局部腓肠肌肌肉注射转染至C57/BL6鼠骨胳肌,分别于单点注射后2个月、5个月取肌肉切片X-Gal染色。采用经股动脉注射rAAVLacZ观察LacZ基因在后肢骨骼肌的转染表达。结果(1)C57/BL6鼠局部肌注rAAVLacZ后,2个月和5个月时,均呈LacZ基因阳性表达,5个月时无表达减低。(2)经股动脉注射rAAVLacZ,C57/BL6小鼠后肢骨骼肌的肌膜及血管壁平滑肌LacZ基因广泛转染。结论重组腺相关病毒载体介导的报告基因LacZ可在C57/BL6鼠骨胳肌中高效持续表达5个月以上,经股动脉转染是有希望的下肢肌肉转染途径,此工作为神经肌肉遗传病,尤其是Duchenne肌营养不良基因治疗的进一步研究奠定了基础。     

HBV DNA及HBV抗原在血清HBV标志物阴性肝炎肝组织中表达的研究

目的 研究HBV DNA及HBV抗原在血清HBV标志阴性的肝炎肝组织中的表达。方法 对45例HBV血清标志阴性阴性肝炎患者，进行肝组织HBV DNA的原位杂交及免疫组织化学染色检测。结果 原位杂交表明，HBV DNA阳性者7例，（阳性率15．56％），阳性信号主要存在于肝细胞的胞核中，少数位于胞浆内；免疫组化染色表明，HBsAg及HBcAg均呈阴性。结论 血清HBV标志阴性的肝炎肝组织中可检出HBV DNA，有利于提高对HBV感染的诊断。     

A European multicientre study on the comparison of HBV viral loads between VERIS HBV assay and Roche COBAS® TAQMAN® HBV test,Abbott RealTime HBV assay,Siemens VERSANT HBV assay,and Qiagen artus HBV RG kit

BackgroundHepatitis B viral load testing is essential to treatment and monitoring decisions in patients with chronic Hepatitis B. Beckman Coulter has developed the VERIS HBV Assay (Veris) for use on the fully automated DxN VERIS Molecular Diagnostics System.¹ObjectivesTo evaluate the clinical performance of the Veris HBV Assay at multiple EU laboratoriesStudy designMethod comparison was performed with a total of 344 plasma specimens from HBV infected patients tested with Veris and COBAS^® TaqMan^® HBV Test (Cobas), 207 specimens tested with Veris and RealTime HBV Assay (RealTime), 86 specimens tested with Veris and VERSANT^® HBV Assay (Versant), and 74 specimens tested with Veris and artus^® HBV RG PCR kit (artus).ResultsBland-Altman analysis showed average bias of −0.46 log₁₀ IU/mL between Veris and Cobas, −0.46 log₁₀ IU/mL between Veris and RealTime, −0.36 log₁₀ IU/mL between Veris and Versant, and −0.12 log₁₀  IU/mL between Veris and artus. Bias was consistent across the assay range. Patient monitoring results using Veris demonstrated similar viral load trends over time to Cobas, RealTime, and artus.ConclusionsThe VERIS HBV Assay demonstrated comparable clinical performance, with varying degrees of negative bias, compared to other currently marketed assays for HBV DNA monitoring. This negative bias should be taken into consideration if switching monitoring methods to Veris.     

乙型肝炎病毒HBcAg免疫优势CTL表位多肽在HBV转基因小鼠体内的免疫学功能研究

目的 探讨基于乙型肝炎(Hepatitis bvirus ,HBV)核心抗原免疫优势细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位的治疗性多肽抗原组分、结构以及在HBV转基因小鼠体内的免疫学功能。方法 用分子设计的理论和方法，设计基于HBV核心抗原免疫优势性CTL表位、Pre—S2B细胞表位及破伤风类毒素通用TH表位的治疗性多肽疫苗候选分子，经Merri—field固相多肽合成技术合成，经高效液相色谱(HPLC)纯化、鉴定。以HBV转基因小鼠为试验对象，进行体内免疫学功能研究。结果 所设计治疗性多肽分子可在体诱导较强的抗原特异性CD8^ T细胞应答和适度的抗体反应，并抑制HBV特异性抗原的分泌和乙型肝炎病毒复制。结论 提示所设计基于HBV核心抗原免疫优势性CTL表位、Pre-S2 B细胞表位及破伤风类毒素通用TH表位的多肽分子可作为乙型肝炎治疗性多肽疫苗候选分子。     

Molecular therapeutics of HBV

The hepatitis B virus (HBV) infection is a public health problem worldwide, particularly in East Asia. The current therapy of HBV infection is mostly based on chemical agents and cytokines that have been shown to provide limited efficacy and are also toxic to the human body. Gene therapy is a new therapeutic strategy against HBV infection, involving the transmission of gene drugs into liver cells by specific delivery systems and methods. Although this new anti-HBV infection technique is under active investigation, various promising anti-HBV viral gene drugs have been developed for gene therapy, including antisense RNA and DNA, hammerhead ribozymes, dominant negative HBV core mutants, single chain antibody, co-nuclease fusion protein, and antigen. In order to optimize their antiviral effects and/or enhance anti-HBV immunity, various novel gene delivery systems have also been developed to (specifically) deliver such DNA constructs into liver cells; some of them are viral vectors, such as adenoviral vectors, retroviral vectors and poxviral vectors, and even hepatitis B viral for its hepatocellular specificity. Others are non-viral vectors, in which naked DNA and liposomes are frequently used for DNA vaccine or nucleotide analogs for inhibiting HBV DNA polymerase. This review addresses various aspects of gene therapy for HBV infection, including gene drugs, delivery methods, animal model, and liver transplantation with combination therapy. It also discusses the problems that remain to be solved.     

低浓度HBsAg人群HBV DNA与HBV M定量结果的关系及评价

目的:比较高、低浓度HBsAg阳性人群乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)与乙型病毒肝炎标志物(HBV M)含量之间的差异, 揭示低浓度HBsAg人群HBV DNA与HBV M之间的特点.方法:对264例慢性HBV感染者的HBsAg浓度(高浓度HBsAg组、低浓度HBsAg组)及自然史(免疫耐受期、免疫清除期、非活动期)进行分组, 采用实时荧光聚合酶链反应(PCR)和微粒子酶免疫试验(MEIA)对147例低浓度HBsA组和117例高浓度HBsAg组的血清标本进行HBV DNA和HBV M的定量测定并进行比较.结果:低浓度HBsAg组免疫耐受期7例、免疫清除期4例血清标本HBV DNA、抗-HBs、 HBeAg、抗-HBe之间的差异存在统计学意义(t=2.531～9.181, P<0.01～0.05), 非活动期136例血清标本中有94.1%(128/136)HBV DNA处于105copies/L以下, 直接法PCR、浓缩法PCR对HBV DNA检出率分别为10.3%(14/136)、 10.3%(47/136), 且HBV DNA与HBV M各指标之间均不存在相关性(P>0.05);高浓度HBsAg组免疫耐受期25例HBV DNA与HBeAg、抗HBe存在相关性(r=0.744～0.772, tr=3.858～4.207, P<0.01), 免疫清除期46例和非活动期46例HBV DNA则仅与抗HBs存在负相关性(r=-0.693～-0.598, tr=-4.616～-3.936, P<0.01～0.05).结论:低浓度HBsAg人群具有特殊的血清学特点, 可能与机体免疫耐受及免疫系统个体化反应有关.     

Occult HBV infection

The long-lasting persistence of hepatitis B virus (HBV) genomes in the liver (with detectable or undetectable HBV DNA in the serum) of individuals testing negative for the HBV surface antigen (HBsAg) is termed occult HBV infection (OBI). Although in a minority of cases the lack of HBsAg detection is due to infection with variant viruses unrecognized by available assays (S-escape mutants), the typical OBI is related to replication-competent HBVs strongly suppressed in their replication activity. The causes of HBV suppression are not yet well clarified, although the host’s immune surveillance and epigenetic mechanisms are likely involved. OBI is a worldwide diffused entity, but the available data of prevalence in various categories of individuals are often contrasting because of the different sensitivity and specificity of the methods used for its detection in many studies. OBI may have an impact in several different clinical contexts. In fact, it can be transmitted (i.e., through blood transfusion and liver transplantation) causing classic forms of hepatitis B in newly infected individuals. The development of an immunosuppressive status (mainly by immunotherapy or chemotherapy) may induce OBI reactivation and development of acute and often severe hepatitis. Finally, evidence suggests that OBI can favor the progression of liver fibrosis, in particular in HCV-infected patients. The possible contribution of OBI to the establishment of cirrhosis also implies its possible indirect role in the development of hepatocellular carcinoma. On the other hand, OBI may maintain most of the direct transforming properties of the overt HBV infection, such as the capacity to integrate in the host’s genome and to synthesize pro-oncogenic proteins.     

同步检测183例血清9项HBV标志物结果分析

探讨检测9项乙肝病毒（HBV）标志物对判断HBV复制及活动性的意义,以指导临床抗病毒治疗,选183例HBV感染者,同步检测其乙肝5项以及Pre-S2,PHSA-R,HB5Ag-IgM,HBV-DNA.HBV-DNA,Pre-S2,PHSA-R,HBsAg-IgM在“大三阳”中检出率分别为86．36％,96．97％,93．94％,95．45％;在小三阳中检出率分别为15．79％,44．74％,48．68％,HBeAg及HBsAg阴性时仍能检出HBV－DNA,HBV－DNA,Pre-S2,PHSA-R,HBsAg-IgM与HBeAg都可作为HBV复制指标。Pre-S2,PHSA-R,HBsAg-IgM同属乙肝病毒表面蛋白,其复制能力及传染性与滴度呈正相关,HBeAg及HBsAg阴性时仍可能有病毒复制。     

HBV携带者血清病毒标志物和HBV DNA与肝组织中HBVcccDNA相关性的研究

目的探讨HBV携带者血清病毒标志物和HBV DNA与肝组织中HBVcccDNA之间的关系。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测30例经肝组织活检病理检查确定为HBV携带者的肝组织中HBVcccDNA、HBVtDNA和血清HBV DNA,同时用化学发光免疫分析法检测HBsAg、HBeAg定量,分析感染者肝组织内HBVcccDNA与肝组织内HBVtDNA、血清HBVDNA、HBsAg及HBeAg定量水平之间的关系。结果HBV携带者肝组织中均可检出HBVcccDNA,范围在3．15×10^3拷贝／mg～1．06×10^7拷贝／mg（对数值：5．66±O．93）;肝组织cccDNA定量与肝组织总HBVDNA定量呈正相关（r=0．375,P〈0．05）,与血清HBVDNA无相关性（r=0．174,P〉0．05）。肝组织中HBVcccDNA水平与血清HBsAg定量呈高度正相关（r=0．562,P〈0．001）;而与血清HBeAg定量无相关性（r=0．152,P〉0．05）。结论HBV携带者肝组织内HBVcccDNA成稳定的中等水平复制;血清HBVDNA载量不能直接代表其肝组织中的HBVcccDNA水平;血清HBsAg定量可作为反映肝幺日织中HBVcccDNA水平的指标。     

HBV核心与前S1融合蛋白疫苗对HBV转基因鼠的免疫治疗效果观察

目的　观察乙型肝炎 (乙肝 )病毒核心与前S1融合蛋白疫苗 (HBVCS1)在HBV转基因小鼠中的免疫治疗效果。方法　 6只HBV转基因小鼠分成 2组 ,在 0周和 3周时实验组小鼠腹腔内注射HBVCS1与免疫佐剂 (弗氏完全佐剂 弗氏不完全佐剂 ) ,对照组仅注射弗氏完全佐剂与磷酸盐缓冲液PBS。采用 3H TdR掺入法检测转基因鼠脾淋巴细胞特异性增殖反应 ,以酶联免疫吸附试验检测血清中的乙肝病毒表面抗原HBsAg,采用荧光定量PCR检测血清中的HBVDNA。结果　实验组 (1 99± 0 35 )转基因鼠脾细胞抗原特异性增殖反应明显高于对照组 (1 5 6± 0 15 ) ;实验组第 6周 (3 5 8±0 80 )与第 9周 (3 4 5± 0 70 )血清中HBsAg终点滴度与第 0周 (4 36± 1 0 4 )及第 3周 (4 81± 0 98)以及同一时间实验组与对照组之间HBsAg终点滴度均差异有显著意义 ;实验组小鼠第 6周 (4 0 2± 0 2 9)和第 9周 (3 5 8± 0 17)血清中HBVDNA含量明显低于免疫前 (5 5 5± 0 88) ,而对照组各批血清无此差别。结论　HBVCS1蛋白疫苗在HBV转基因小鼠中能诱导特异性免疫 ,并具有抑制HBVDNA复制和HBsAg表达的治疗效果     

HBV重组抗原表位抗原性的研究

目的 在外源抗原表位表达载体系统中构建并表达HBV抗原表位,并对其抗原性进行研究.方法 人工合成编码HBV "a"抗原决定簇表位中24个氨基酸(S124-147)的寡核苷酸序列,克隆入外源抗原表位表达载体系统FHV-RNA2-I3位点,构建重组质粒,在原核pET系统(BL21细胞)中表达.以表达产物为包被抗原对其抗原性进行研究.结果 嵌和蛋白与抗-HBs血清可发生特异性结合反应.结论 在外源抗原表位表达系统中表达的HBV抗原表位具有良好的抗原性.