化学发光法定量检测乙型肝炎病毒标志物临床应用评价

目的对化学发光法定量检测乙型肝炎病毒标志物的临床应用进行评价。方法用标准参考血清和定值质控血清,对化学发光法定量检测乙型肝炎病毒标志物进行评价,评价内容为符合率、分析灵敏度、分析特异性、批内和批间精密度、最低检出限等指标。结果HBsAg符合率为97．5％,其他四项符合率大于92％;HBsAg分析灵敏度100％、分析特异性96．15％;五项的批内和批间精密度均小于15％;最低检出限分别为HBsAg0．06IU／mL、HBsAb0．5mIU／mL、HBeAg0．05NCU／mL、HBeAb0．5NCU／mL、HBcAb0．5NCU／mL。结论化学发光法定量检测乙型肝炎病毒标志物各项性能指标能满足临床要求,但操作需注意标本质量。     

HBsAg弱阳性及HBsAg和HBsAb同时阳性的结果分析

目的对ELISA法检测乙肝五项结果中的HBsAg弱阳性结果及乙型肝炎HBsAg和HBsAb同时阳性的结果进行分析。方法从35 280例乙肝五项ELISA法检测结果中筛出HBsAg弱阳性115例,HBsAg和HBsAb双阳性结果95例,对筛出的210例标本再进行电化学发光(ECLIA)定量检测。结果 115例HBsAg弱阳性结果用ECLIA检测,结果一致为90例。符合率为78.3%。HBsAg和HBsAb双阳性结果95例用ECLIA检测,结果一致为11例。符合率为11.6%。结论 ELISA法检测乙肝五项对HBsAg弱阳性及HBsAg和HBsAb双阳性结果要慎重。HBsAg弱阳性结果中以HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性和HBsAg、HBcAb阳性标本占大多数。HBsAg和HBsAb同时阳性的结果可靠性差,要慎重发出报告。     

电化学发光免疫分析法检测低值HBsAg与乙肝五项检测结果比较

目的比较电化学发光免疫分析法(ECLIA)检测低值乙肝表面抗原(HBsAg)与酶联免疫吸附试验(ELISA)法乙肝五项[HBsAg、乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(HBeAb)、乙肝核心抗体(HBcAb)]的检测结果,为临床和科研提供一定的科学依据。方法根据ECLIA检测HBsAg的结果,将207例患者分为3组:A组,HBsAg为0.05~5.00IU/mL;B组,HBsAg为0.20~0.50IU/mL;C组,HBsAg为0.05~0.20IU/mL。采用ELISA法对3组进行HBsAg检测,对C组进行乙肝五项检测及6个月追踪HBsAg检测,对测定结果进行比较分析。结果A、B、C组ECLIA法和ELISA法测定HBsAg的阳性符合率分别为100.00%、98.08%、30.43%,C组显著低于A、B组,差异有统计学意义(P0.05)。对C组中ELISA法检测HBsAg为阴性,HBeAb、HBcAb同时阳性或HBcAb单项阳性的患者,进行6个月追踪检测,HBsAg阳性符合率提高至45.65%。结论 ECLIA法检测低值HBsAg的灵敏度明显高于ELISA法,能有效提高检测的准确性。     

酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎5项性能评价的改进与优化

目的验证乙型肝炎(简称乙肝)5项酶联免疫吸附试验(ELISA)定性检测的分析性能,改进和优化试验方案,为实验室选用合适的方法和试剂提供依据。方法通过梯度稀释定值样品测定检出限;依据美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP12-A2文件进行临界值验证;选取临界值样品评价分析精密度(包括重复性和中间精密度);通过与室间质评检测结果及雅培i4000SR化学发光仪比对评估符合率。结果乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(HBeAb)及乙肝核心抗原(HBcAb)的最低检出限分别为:0.2IU/mL、20mIU/mL、1NCU/mL、0.75NCU/mL、0.05NCU/mL。临界值(C50)±20%的浓度范围包含了多次重复试验阳性率5%~95%的浓度点区间。批内变异系数(CV)≤15%,夹心法批间CV≤25%,竞争法批间CV≤35%。准确度及与雅培i4000SR比对的阴、阳性符合率均大于或等于95%,其一致性检验κ≥0.75。结论本实验室乙肝5项ELISA检测方法性能符合检测分析要求,检测质量可满足临床需求。     

酶联免疫吸附试验与化学发光免疫分析法检测乙型肝炎5项血清标志物的对比分析

目的对酶联免疫吸附试验(ELISA)和化学发光免疫分析法(CLIA)检测乙型肝炎5项血清标志物的结果和重复性进行比较和分析。方法分别用ELISA和CLIA检测了500份临床血清标本,其中HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb各100例,对两种方法的阳性率和符合率进行了统计分析,对CLIA与ELISA结果不符的标本用第三种方法进行了复测;另用60例HBsAb标本对两种方法的重复性进行了比较。结果 CLIA检测HBsAg和HBcAb的阳性率高于ELISA的检测结果,差异有统计学意义(χ~2=4.308、5.637,P0.05);而HBsAb、HBeAg、HBeAb的阳性率与ELISA的检测结果相比差异无统计学意义(χ~2=0.361、0.785、0.180,P0.05)。重复性试验表明CLIA的批内CV(1.04%~2.8%)、批间CV(4.19%~8.19%)都明显优于ELISA的批内CV(3.81%~12.56%)、批间CV(10.31%~18.90%)。结论 CLIA检测乙型肝炎5项血清标志物比ELISA重复性好,HBsAg和HBcAb项目的灵敏度更高,总体结果更准确。     

雅培i4000化学发光分析仪肝炎标志物分析性能评价

目的 评价美国雅培i4000化学发光微粒子免疫分析仪(CMIA分析仪,简称i4000分析仪)对肝炎血清标志物的分析性能.方法 使用i4000分析仪进行HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb及抗HCV检测,根据美国临床和实验室标准化协会颁布的EP系列文件对仪器分析性能进行评价.结果 i4000分析仪模块一及模块二检测上述6个项目的批内及批间不精密度(CV％)均符合厂商要求;模块一检测HBsAg的线性范围为0.04～286.18 IU/mL(r2=0.966 2),模块二线性范围为0.04～259.3 IU/mL(r2=0.976 8);模块一检测HBsAb线性范围为0.18～1 016.39 mIU/mL(r2 =0.985 7),模块二线性范围为0.28～1 055.67 mIU/mL(r2 =0.987 0).HBeAb检测临界值标本稀释度为1:59.65,(临界值±20％)标本阳性、阴性结果出现频率均大于0.95.雅培i2000分析仪与i4000分析仪模块一、二HBsAg检测结果r2值分别为0.991 0、0.996 1,HBsAb检测结果r2值分别为0.983 5、0.989 1.ELISA与CMIA检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb及抗HCV结果符合率为100％.HBeAg、HBeAb、HBcAb及抗HCV检测下限分别为0.33、3.6、0.95、0.7 NCU/mL.结论 i4000分析仪检测肝炎血清标志物的精密度、线性范围、临界值重复性、比对结果、检测下限均达到要求,能满足临床需求.     

Sysmex HISCL5000化学发光分析仪检测乙型肝炎标志物性能评价

目的评价Sysmex HISCL5000化学发光免疫分析仪(以下简称HISCL5000分析仪)对乙型肝炎血清标志物检测的分析性能。方法用HISCL5000分析仪进行HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb检测,根据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)颁布的EP系列文件对仪器分析性能进行评价。结果 HISCL5000分析仪检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb低浓度和高浓度两个浓度批内不精密度变异系数(CV)%分别为1.24%、1.05%、2.56%、2.27%、2.19%、1.95%、2.37%、1.43%、2.49%、1.29%;总不精密度CV%分别为2.32%、1.74%、3.12%、2.45%、2.94%、2.96%、3.02%、1.82%、3.21%、1.54%。HBsAg检测线性r~2=0.976 5,HBsAb检测线性r~2=0.951 6,两者r~2均大于0.95。HISCL5000分析仪和e601分析仪HBsAg检测结果比对:r~2=0.982 2,HBsAb检测结果比对:r~2=0.974 8。HISCL5000分析仪与ELISA两种方法检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb结果的符合率分别为99.6%(550/552)、93.5%(516/552)、99.6%(550/552)、94.9%(524/550)、92.0%(508/552)。HISCL5000分析仪检测HBsAg携带污染X=0.070 8,3SD(L-L)=0.106 2,X3SD(L-L)。HISCL5000分析仪检测HBsAg、HBsAb下限分别为0.006IU/mL、0.213 6mIU/mL。结论 HISCL5000分析仪检测乙型肝炎血清标志物的精密度、线性范围、比对结果、携带污染、检测下限均达到要求,能满足临床需求。     

科华ELISA与雅培i2000sr检测系统对4种感染性疾病8项血清标志物检测的性能评价

目的 对科华ELISA和雅培i2000sr检测系统4种感染性疾病8项血清学标志物的性能进行评价和比较。方法 采用美国临床和实验室标准协会(clinical and laboratory standards institute,CLSI)评价方案(evaluation protocols,EP)评价两种检测系统性能。评价内容包括:准确度、检出限、一致性、精密度、线性范围。结果 两种检测系统的准确度均为100%。HBsAg,HBsAb,HBeAg,HBeAb,HBcAb,Anti-HCV,梅毒特异性抗体及(Anti-TP)Anti-HIV的检出限科华分别为0.08IU/ml,10mIU/ml,0.8NCU/ml,4.4NCU/ml,3.2NCU/ml,0.8NCU/ml,20 mIU/ml和0.5 NCU/ml; 雅培分别为0.05 IU/ml,10 mIU/ml,0.23 NCU/ml,1 NCU/ml,1.8 NCU/ml,0.45 NCU/ml,20 mIU/ml和2.88 NCU/ml。一致性验证:两种系统方法学比对Kappa值分布于0.8～0.9,定性项目仪器间比对Kappa值均为1, 定量项目(HBsAg,HBsAb)仪器间比对观察误差<1/2TEa,浓度误差指数绝对值<1。精密度评价:批内变异系数(CV)范围为1.10%～7.01%,室内CV范围为1.90%～10.03%。雅培i2000sr HBsAg,HBsAb线性范围分别为0.73～245IU/ml和4.21～960.89mIU/ml。结论 科华ELISA和雅培i2000sr准确度、检出限、一致性、精密度和线性范围与厂家声明一致并能满足实验室要求。两种系统HBsAg,HBsAb,Anti-TP检出限接近,但HBeAg,HBeAb,HBcAb,Anti-HCV和Anti-HIV检出限二者存在较大差异。     

Anytest 2000TRF检测乙肝两对半的性能验证

目的验证Anytest 2000 TRF时间分辨荧光免疫分析仪检测乙肝两对半(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)的性能。方法对该仪器精密度、正确度、线性范围、生物参考区间及分析的灵敏度进行评估,并与厂家提供参考标准进行比较。结果该仪器HBsAg、HBsAb精密度CV均15%;HBeAg、HBeAb、HBcAb精密度CV均20%;检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb标准品低值和高值的在厂家提供标准品范围内,正确度验证通过;HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb线性范围a值均在1±0.05范围内,相关系数r均≥0.975;检测我室所选20个参考个体HBsAg值均为0ng/ml,HBeAg值均为0PEIU/ml,HBsAb10m IU/ml,HBeAb0.2PEIU/ml,HBcAb0.9PEIU/ml;HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb分析的灵敏度(检测低限)值分别小于0.2ng/ml、5m IU/ml、0.5PEIU/ml、0.1PEIU/ml、0.5PEIU/ml。结论 Anytest2000TRF五个性能参数符合标准,满足临床需要。     

时间分辨荧光技术及酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎两对半指标的比对分析

目的通过比对时间分辨荧光技术(TRFIA)及酶联免疫吸附试验(ELISA)对血清标本中乙型肝炎两对半指标的检测结果,验证这两种方法是否具有等效性。方法分别用TRFIA及ELISA检测160份临床标本的两对半指标,记录检验结果并对检验结果进行统计学分析。结果经过配对资料χ~2检验分析,两种方法测定乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎e抗体(HBeAb)、乙型肝炎核心抗体(HBcAb)时结果差异有统计学意义(P0.05)。结论两种检测方法均可用于临床乙型肝炎两对半指标的检测,但TRFIA优于ELISA的灵敏度和特异度。     

时间分辨荧光免疫法乙型肝炎病毒e抗原定量测定试剂盒的研制与性能评价

目的 对自研时间分辨荧光免疫法(TRFIA)乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)定量测定试剂盒进行性能评价.方法 2株单克隆抗体分别用于固相包被和铕标记,固相双抗体夹心二步分析法检测人血清HBeAg,并对自研试剂盒线性范围、精密度、分析灵敏度、特异度等进行评价,与对照试剂盒平行检测1 020例样本,检验结果采用线性回归分析,一致性采用Kappa检验.结果 自研试剂盒线性范围为0.60～160 NCU/mL,相关系数达0.99,批内和批间变异系数均小于10%,灵敏度达0.05 NCU/mL,检测国家标准物质或自制参考品的效价比为0.90～1.10,检测国家参考品符合国家的质量检定标准,37 ℃恒温箱烘烤6 d后检测性能无明显改变,与同类试剂检测结果线性相关系数达0.95,临床研究试验总符合率达100%,Kappa指数为1.结论 自研试剂盒精密度好、灵敏度高、准确性好、线性范围宽、符合率高,可取代对照试剂盒,值得推广应用.     

时间分辨荧光免疫法定量检测乙肝病毒血清标志物的临床意义

目的探讨时间分辨荧光免疫法用于定量检测乙型肝炎病毒血清标志物的临床意义。方法采用时间分辨荧光免疫法(TRFIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)同时对196例患者HBV血清标本进行5项指标检测。结果 TRFIA法检测患者标本乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)、乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)的阳性率分别为59.7%、24.5%、25.5%、29.1%、78.6%。ELISA法检测患者标本HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb的阳性率分别为52.1%、18.4%、21.4%、23.5%、67.9%。TRFIA法检测的阳性率均显著高于ELISA法(P<0.05)。结论 TRFIA法测定乙肝病毒血清标志物的相对灵敏度高,的可为临床疗效观察及乙肝疫苗的接种提供科学依据。     

金标法和ELISA法检测乙型肝炎病毒血清标志物的比较

目的 探讨金标法检测乙型肝炎病毒(HBV)HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb五项血清标志物的敏感性、特异性.方法 采用ELISA法和金标法对256例血清样本同时进行HBV五项血清标志物的检测,并且对结果进行对比分析.结果 256例样本中:ELISA法“全阴性”(HBsAg,HBsAb,HBeAg,HBeAb,HBcAb均阴性)结果模式,金标法结果相同;ELISA法HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性,HBsAb、HBeAg阴性(简称模式1);HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性,HBeAb、HBsAb阴性(简称模式2)结果模式,金标法检测样本的结果模式发生改变.256例样本两法各单项指标检测结果经x2检验:HBsAb和HBeAg两项结果的差异无统计学意义(P＞0.05);HB-sAg,HBeAb,HBcAb三项结果的差异有统计学意义(P＜0.05),少数ELISA法阳性或OD为临界值的样本金标法检测结果为阴性;无ELISA法阴性而金标法为阳性的标本.结论 两种方法对HBV五项血清标志物测定的特异性相近,但是金标法敏感性不如ELISA法.     

HBcAb单项或HBcAb与HBeAb二项阳性时HBsAg定量检测分析

目的用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测乙型肝炎病毒(HBV)标志物,若乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)单项或HBcAb与乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)二项阳性,再进行乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)定量和HBV载量测定,了解HBV携带及病毒复制情况。方法 ELISA检测HBV标志物HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb,选取1 098例HBcAb阳性、966例HBeAb和HBcAb二项阳性样本及832例HBV标志物全阴性标本为对照,用化学发光法定量复检HBsAg,并用PCR的方法检测HBV载量。结果 1 098例HBcAb单项阳性检测出HBsAg定量436例(39.7%)、PCR-DNA230例(20.9%);966例HBeAb、HBcAb二项阳性的标本分别定量检测出HBsAg定量387例(40.1%)、PCR-DNA 212例(21.9%),HBV标志物全阴性的HBsAg定量和PCR-DNA比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论 ELISA法检测HBV标志物时,若只HBcAb阳性或HBcAb与HBeAb二项阳性,仍可检出表面抗原和病毒的复制,需做进一步的检测,以免漏检,造成医疗风险。     

两种检测法对乙肝表面抗原弱阳性及少见模式标本的对比分析

采取ELISA法对31200例乙肝五项进行检测，并从结果中选出132例比较少见模式及110例HBsAg弱阳性，采取电化学发光定量对242例标本进行检测。结果110例采取电化学发光进行HBsAg弱阳性的检测结果中，90例一致，符合率为81.7%的；132例采取电化学发光进行少见模式的检测结果中，符合率为10.05%，均为HBsAb阳性与HBsAg阳性。对于HBsAg弱阳性的乙肝五项采取ELISA检测法，需慎重的虑其检测的结果；电化学发光法灵敏度优于ELISA法；HBcAb、HBsAg、HBsAg、HBcAb、HBeAb阳性是HBsAg弱阳性结果中比较主要的指标；HBsAb与HBsAg均为阳性是比较少见的模式，其发生概率较小。     

乙型肝炎病毒标志物的免疫层析法在社区卫生服务中的应用

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)标志物的免疫层析法在社区卫生服务中的应用。方法对364例血清标本分别用免疫层析法、酶联免疫法(ELISA)进行HBV标志物的检测。结果两种检测方法的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)的总符合率、阳性符合率、阴性符合率都是100%,HBeAb的总符合率、阳性符合率、阴性符合率分别为99.18%、97.86%、100%,HBcAb的总符合率、阳性符合率、阴性符合率分别为99.45%、99.10%、100%。结论社区卫生服务中对个体患者或少量患者的乙型肝炎筛查或快速诊断,用免疫层析法检测比用ELISA法检测更具优越性能。     

化学发光免疫分析法检测乙型肝炎标志物的应用分析

目的探讨化学发光免疫分析法(CLIA)检测乙型肝炎标志物在临床上的应用效果。方法收集该院2015年3月至2016年3月接收的疑似乙型肝炎患者260例,采用CLIA和酶联免疫吸附试验法(ELISA)分别检测患者的乙型肝炎病毒血清标志物。结果乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎e抗体(HBeAb)、乙型肝炎核心抗体(HBcAb)的检出率CLIA高于ELISA法,差异有统计学意义(P0.05)。当HBsAg低水平检测值大于1.0IU/mL时,ELISA与CLIA法检测结果相同。小于1.0IU/mL时ELISA检测结果低于CLIA法,差异有统计学意义(P0.05)。ELISA法与CLIA法检测低水平HBsAg相关性良好(r=0.986)。结论采用CLIA法检测乙型肝炎病毒感染性标志物相比ELISA法更准确,可有效应用于乙型肝炎临床诊断和病情动态监测。     

乙型肝炎血清免疫学标志物与HBV DNA定量检测的相关性

目的探讨乙型肝炎病毒血清免疫学标志物(HBV-M)与HBV DNA定量的相关性。方法采用ELISA法和荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术分别对245例乙型肝炎患者血清进行HBV-M的定性检测及HBV DNA的定量检测。结果 ELISA检测结果为HBsAg(+)HBsAb(-)HBeAg(+)HBeAb(-)HBcAb(+)共83例(大三阳),其中77例(92.78%)为HBVDNA阳性(HBV DNA>1.0×102copy/mL)。ELISA检测结果为HBsAg(+)HBsAb(-)HBeAg(-)HBeAb(+)HBcAb(+)共150例(小三阳),其中78例(52.00%)为HBV DNA阳性(HBV DNA>1.0×102copy/mL)。大三阳组与小三阳组HBV DNA定量检测的差异具有统计学意义(P<0.05)。ELISA检测结果为HBsAg(+)HBeAg(+)的患者体内HBV DNA阳性率为96.55%,且81.60%的HBV DNA在1.0×105~1.0×108copy/mL。结论 HBV DNA的含量与HBV-M检测结果具有相关性,两者联合,对临床诊断、治疗及预后有重要的意义。     

全自动酶免疫分析系统检测乙型肝炎标志物的工作模式的优化研究

目前大多数医院利用酶免疫分析系统检测乙型肝炎标志物,为了使仪器在最短的时间内完成最大的工作量,我们对FAME自动酶免疫分析系统的工作表进行了优化设计,并对仪器的洗涤模式进行调整,寻找最佳的工作模式来提高仪器的灵敏度和特异度。一、材料和方法1.仪器辉煌之星全自动酶免疫分析连体机24/30(瑞士HAM ILTON公司),操作软件为M icrolab STAR3.2英文版,FAME2.2英文版和AusLab2.5酶标实验室管理系统。2.试剂乙型肝炎5项血清标志物(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(厦门新创生物有限公司)…     

HBsAg阴性HBV DNA阳性的无偿献血者血清学模式及其意义

目的探讨乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阴性,HBV DNA阳性的无偿献血者的其他乙型肝炎病毒标志物(HBVM)模式,分析HBsAg阴性血液的安全性。方法应用化学发光法检测乙型肝炎5项标志物;应用实时荧光PCR技术检测HBV DNA。结果 100 281例HBsAg阴性献血样本,HBV DNA检测总阳性率为0.71‰,在HBVDNA阳性的献血者中,单独HBsAb(+)阳性的模式比例是6.56%,乙肝5项均为阴性的模式组和HBsAb(+)、HBcAb(+)模式组分别占18.03%和13.11%,HBeAb(+)、HBcAb(+)模式组占14.75%,HBcAb(+)模式组占27.87%,HBsAb(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)模式组占19.67%。结论 HBsAg阴性的血液仍可能存在低水平的HBV复制,核酸检测(NAT)能增加血液筛查的检出率,降低输血残余风险率,保证血液安全。