大肠癌中nm23—H1表达的量研究及临床意义

为研究肿瘤相关基因ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ在人大肠癌中的表达一临床病理的关系，应用ＲＴ－ＰＣＲ定量技术，对３６例大肠癌组织中ｎｍ２３－Ｈ１基因表达进行了定量研究。结果表明，大肠癌中ｎｍ２３－Ｈ１表达显著高于正常大肠粘膜；Ｄｕｋａｓ Ｄ期中其表达显著低Ｄｕｅｓ Ａ，Ｂ，Ｃ期；有远处转移者其表达亦显著低于无远外转移者。     

nm23-H1、p53、PCNA表达与大肠癌浸润转移的关系

目的：研究大肠癌中ｎｍ２３－Ｈ１、ｐ５３、ＰＣＮＡ的表达与浸润转移的关系。方法：应用ＬＳＡＢ免疫组织化学方法检测７４例大肠癌中ｎｍ２３－Ｈ１、ｐ５３、ＰＣＮＡ和Ⅳ型原的表达。结果：大肠癌中ｎｍ２３－Ｈ１、ｐ５３和ＰＣＮＡ的阳性率分别为７１．６％、５２．７％和８１．１％。大肠癌中ｎｍ２３－Ｈ１低表达与淋巴结转移有关（Ｐ＜０．０２５），ｎｍ２３－Ｈ１的表达在Ⅳ型胶原表达不同的肠癌中无明显差异（Ｐ＞０．０５）；ｐ５３和ＰＣＮＡ过表达与浸润程度和淋巴结转移有关（Ｐ＜０．０５），ｐ５３和ＰＣＮＡ的表达在Ⅳ型胶原表达不同的肠癌中有非常显著的差异（Ｐ＜０．００５）；大肠癌中ｐ５３过表达与ｎｍ２３－Ｈ１低表达有关（Ｐ＜０．０１）。结论：实验结果揭示ｐ５３基因突变对于ｎｍ２３－Ｈ１基因的失活有一定影响，其作用机制有待深入研究。ｎｍ２３－Ｈ１低表达可能仅在大肠癌转移过程中发挥作用，ｐ５３过表达可在大肠癌浸润转移过程及细胞增殖中起重要作用。     

nm23-H1、c-erbB-2基因表达与结直肠癌转移的相关性

目的：探讨ｎｍ２３－Ｈ１、ｃ－ｅｒｂＢ－２基因表达与结直肠癌转移的关系。方法：采用免疫组化ＳＡＢＣ法，检测了８５例结直肠癌中ｎｍ２３－Ｈ１、ｃ－ｅｒｂＢ－２基因的蛋白产物。结果：ＤｕｋｅｓＤ期结直肠癌中ｎｍ２３－Ｈ１基因表达显著低于ＤｕｋｅｓＡ、Ｂ、Ｃ各期（Ｐ＜０．０１），ｃ－ｅｒｂＢ－２基因表达则显著高于ＤｕｋｅｓＡ、Ｂ、Ｃ各期（Ｐ＜０．０１），两基因在ＤｕｋｅｓＡ、Ｂ、Ｃ各期间的阳性表达差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论：ｎｍ２３－Ｈ１与结直肠癌的肝转移呈负相关，ｃ－ｅｒｂＢ－２呈正相关，但两基因与淋巴结转移均无显著相关；两基因在蛋白水平上存在负相关性     

nm23—H1,c—erbB—2基因表达与结直肠癌转移的？…

目的：探讨ｎｍ２３－Ｈ１，ｃ－ｅｒｂＢ－２基因表达与结直肠癌转移的关系，方法：采用免疫组化ＳＡＢＣ法，检测了８５例结直肠癌中ｎｍ２３－Ｈ１，ｃ－ｅｒｂＢ－２基因的蛋白产物，结果：ＤｕｋｅｓＤ期结直场癌中ｎｍ２３－Ｈ１基因表达显著低于ＤｕｋｅｓＡ，Ｂ，Ｃ各期（Ｐ〈０．０１），ｃ－ｅｒｂＢ－２基因表达则显著高于Ｄｕｋｅｓ，Ａ，Ｂ，Ｃ各期（Ｐ〈０．０１），两基因在ＤｕｋｅｓＡ，Ｂ，Ｃ各期间的阳性表达差异     

4种癌基因mRNA在胃癌组织中的表达及意义

应用原位分子杂交（ＩＳＨ）技术，检测８８例胃癌组织中Ｋ－ｒａｓ、Ｈ－ｒａｓ、Ｃ－ｍｙｃ和肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３（Ｈ１）ｍＲＮＡ．其阳性结果分别为７８．４％、７０％、５８％和３８．６％，胃癌癌旁移行区正常粘膜和正常胃粘膜上皮的阳性率分别为１８．２％、１７％、１９．３％、２１．６％和０、０、０、３／５，与肿瘤区相比较，除ｎｍ２３外差异均非常显著（Ｐ＜０．０１）。Ｋ－ｒａｓ、Ｈ－ｒａｓｍＲＮＡ表达在在细胞膜内侧，Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ主要表达在细胞核内，ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达在胞浆内。４种癌基因表达与组织学类型无关，ｎｍ２３－Ｈ１的表达与胃癌病人有无淋巴结转移有关（Ｐ＜０．０１）。     

nm23基因产物／NDPK在大肠癌中的表达及其临床意义

应用免疫组化Ｓ－Ｐ方法，研究１０３例大肠癌手术标本中ｎｍ２３基因产物／ＮＤＰＫ的表达及其意义。结果显示：大肠癌原发灶中ＮＤＰＫ表达阳性率７６．７％；其中，无区域淋巴结转移者阳性率为９０．５％，伴区域淋巴结转移者阳性率６７．２％，差异具有显著性意义（Ｐ＜０．０５）；随着大肠癌浸润肠壁深度和Ｄｕｋｅｓ＇分期的进展，原发灶中ｎｍ２３／ＮＤＰＫ表达阳性率逐渐下降，统计学均具有显著性意义（分别Ｐ＜０．０１、Ｐ＜０．０５）；ｎｍ２３／ＮＤＰＫ表达阳性者术后３、５年生存率分别为６５．８％和５４．４％，明显高于ＮＤＰＫ阴性患者术后３年和５年生存率（３７．５％和２０．８％），统计学具有显著性意义（分别Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．００５）。我们认为：ｎｍ２３基因在大肠癌的浸润和淋巴结转移过程中发挥负性调控作用。测定大肠癌组织中ｎｍ２３基因产物／ＮＤＰＫ的表达状况，有助于对大肠癌生物学行为的进一步了解及对患者预后的判断。     

食管癌中Cath-D、nm23-H1蛋白的表达及其临床病理意义

目的：探讨组织蛋白酶Ｄ（Ｃａｔｈ－Ｄ）、肿瘤转移抑制基因表达蛋白（ｎｍ２３－Ｈ１）的表达与食管癌临床病理特点及预后的关系。方法：应用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法，以兔抗Ｃａｔｈ－Ｄ、鼠抗ｎｍ２３－Ｈ１抗体标记６０例食管癌和５例正常的食管粘膜。观察不同分化程度和组织类型食管癌的表达情况，并比较其阳性率。结果：癌组织Ｃａｔｈ－Ｄ阳性３６例（６０．０％），ｎｍ２３－Ｈ１阳性３５例（５８．３％）。Ｃａｔｈ－Ｄ的表达与癌组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移和预后均无关（Ｐ＞０．０５）；而ｎｍ２３－Ｈ１蛋白的表达则与癌组织分化程度及淋巴结转移有关（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１），与癌组织浸润深度和预后无关（Ｐ＞０．０５）。结论：ｎｍ２３－Ｈ１可作为一种食管癌淋巴结转移的重要生物学标记物，但Ｃａｔｈ－Ｄ、ｎｍ２３－Ｈ１与预后的关系仍需进一步研究。     

乳腺癌微血管数与转移和预后的关系

目的探讨浸润性乳腺癌中微血管数（ＭＶＱ）与转移、预后的关系,ＭＶＱ与增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）、ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｎｍ２３－Ｈ１、组织蛋白酶Ｄ的关系。方法应用免疫组织化学ＬＳＡＢ法检测浸润性乳腺癌中ＭＶＱ与ＰＣＮＡ、ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｎｍ２３－Ｈ１、组织蛋白酶Ｄ的表达。结果ＭＶＱ在７６例浸润性乳腺癌中的均数是５７．８２±２２．２２。ＭＶＱ与淋巴结转移、ｃ－ｅｒｂＢ－２、组织蛋白酶Ｄ（癌细胞）的表达无关;ＭＶＱ与远处转移（１０年内）、ＰＣＮＡ、组织蛋白酶Ｄ（间质细胞）表达呈正相关（Ｐ值均小于０．０１）;而与ｎｍ２３－Ｈ１、５年生存期呈负相关（Ｐ＜０．０１）。结论浸润性乳腺癌中ＭＶＱ与肿瘤的远处转移和生存期关系密切,可以作为一项独立的预后指标。     

肺腺癌中肿瘤转移抑制基因Nm23—H1的突变分析

本研究应用ＰＣＲ及ＰＣＲ双链ＤＮＡ循环测序技术分析了２２例肺腺癌中ｎｍ２３－Ｈ１基因。这２２例病例中有６例为转移病灶。我们的结果显示２例转移灶存在ｎｍ２３－Ｈ１基因突变,分别位于第１５２密码子（ＡＧＴ→ＡＧＧ）和第１７２密码子（ＧＴＡ→ＡＴＡ）,使原编码的氨基酸分别由丝氨酸与缬氨酸变成精氨酸和异亮氨酸。可见ｎｍ２３－Ｈ１基因是一类肿瘤转移抑制基因,ｎｍ２３－Ｈ１突变与肺癌转移灶的形成密切相关。     

肝细胞癌nm23—H1蛋白表达的研究

应用免疫组化检测８８例肝细胞癌中ｎｍ２３－Ｈ１蛋白的表达，癌旁肝组织强阳性表达，５１例肝癌组织阳性表达（５８％），阳性产物主要定位于肿瘤细胞胞浆。ｎｍ２３－Ｈ１蛋白表达与ＨＣＣ肿瘤体积，组织分型及Ｅ ｄｍｏｎｄｓｏｎ分级无关，而与肝内或肝外转移显著负相关，结果表明ｎｍ２３－Ｈ１在抑制ＨＣＣ肝内或肝外转移起着重要作用，有可能成为评价ＨＣＣ病人预凰的一项新指标。     

结直肠癌nm23基因表达、突变与侵袭、转移的相关性

目的　探讨nm2 3基因异常表达及突变与结直肠癌侵袭、转移之间的关系。方法　应用免疫组化LDP法、流式细胞术、PCR SSCP法对 1 5 0例结直肠癌标本及正常黏膜组织和 1 6例大肠腺瘤分 3组进行nm2 3蛋白检测和基因突变的筛查。结果　①免疫组化发现 73例结直肠癌中nm2 3 H1蛋白表达水平低于正常黏膜组织和良性腺瘤 (P <0 0 0 1 ,P <0 0 0 1 ) ,转移癌表达低于原发癌 (P <0 0 0 1 ) ,结直肠癌nm2 3 H1蛋白表达与组织分化、肠壁浸润、Dukes分期、转移均密切相关 (P <0 0 0 1 ) ,低表达组术后预后差于高表达组 (P <0 0 0 1 ) ;②流式细胞术研究表明 ,nm2 3 H1蛋白在癌组织表达低于癌旁组织 ;在结直肠癌伴有转移 (3/ 1 4 )时其表达低于未发生转移者 (1 1 / 1 4 ) ;③nm2 3 H1基因第 2～ 5位外显子在 6 3例结直肠癌组织中未发现异常突变。结论　结直肠癌中nm2 3基因突变可能是小概率事件 ,在结直肠癌的侵袭、转移中不发挥主要作用 ,而nm2 3 H1蛋白表达降低则与结直肠癌的侵袭、转移有关 ,提示检测nm2 3蛋白表达是判断结直肠癌预后有价值的指标之一。     

子宫内膜异位症中nm23-H1基因表达的意义

目的：探讨nm23-H1基因在子宫内膜异位症发生中的作用。方法：采用免疫组织化学SP法检测25例子宫内膜异位症和22例正常子宫内膜组织中nm23-H1的蛋白表达情况；采用RT-PCR检测研究33例子宫内膜异位症的异位子宫内膜组织和30例正常子宫内膜组织中nm23-H1基因的mRNA表达情况。 结果：25例子宫内膜异位症组中，nm23-H1的蛋白表达缺失为3例、弱阳性12例、强阳性10例，对照组中nm23-H1的蛋白表达缺失为0例、弱阳性3例、强阳性19例，两组差异显著（P<0.01）。33例子宫内膜异位症组中nm23-H1 mRNA表达缺失为4例、弱表达15例、强表达14例，30例对照组中，nm23-H1的mRNA表达缺失为1例、弱表达6例、强表达23例，子宫内膜异位症组明显低于正常对照组（P<0.05）。 结论：nm23-H1在子宫内膜异位症的发病过程中可能起重要的作用，进一步明确nm23-H1基因在子宫内膜异位症发生中的作用及其作用机制，对了解子宫内膜异位症的发病机制、临床诊断和治疗可能有一定意义。     

Reduced nm 23-H1 messenger RNA expression in metastatic lymph nodes from patients with papillary carcinoma of the thyroid.

The nm 23 gene product, which possesses nucleoside diphosphate kinase activity, is a possible mediator of cancer cell invasion and metastasis. It has been divided into two distinct gene products, nm23-H1 and nm23-H2. We have developed a method for detecting nm 23-H1 and nm 23-H2 RNA using the polymerase chain reaction, based on the amplification of complementary DNA copies of nm 23-H1 and nm 23-H2 RNA. Using this method, the nm 23-H1 and nm 23-H2 messenger (m)RNA levels in 35 thyroid papillary carcinomas, 11 metastatic lymph nodes from patients with thyroid papillary carcinomas, five thyroid follicular adenomas, and three normal thyroid tissue samples were studied. Both nm 23-H1 and nm 23-H2 mRNA were expressed ubiquitously in normal and malignant thyroid tissues. However, in metastatic lymph nodes no (3 of 11) or weak expression (8 of 11) of nm 23-H1 mRNA was observed, the extent of which was inversely proportional to the degree of cancer cell occupancy, whereas nm 23-H2 mRNA was expressed and the levels were similar to those in other tissue tested. These results show that nm 23-H1 only may play a role in cancer cell invasion and metastasis although the exact mechanisms involved have yet to be elucidated.     

E-cadherin在结直肠癌中的表达及其与侵袭转移的关系

目的：探讨E-cadherin在结直肠癌（colorectal carcinoma,CRC）中的表达及其与侵袭转移的关系。方法：采用免疫组织化学SABC法及原位杂交技术检测E-cadherin mRNA和蛋白在大肠正常黏膜、大肠腺瘤和CRC组织中的表达。结果： E-cadherin的mRNA和蛋白在CRC中的阳性率显著低于正常黏膜组织和腺瘤（P＜0.01）;随着CRC分化的降低和Dukes分期的增加,E-cadherin表达阳性率降低;E-cadherin的阳性率在有淋巴结和远处器官转移的CRC中均显著低于未转移组（P＜0.01,P＜0.05）。结论：E-cadherin表达减少或缺失在CRC的侵袭转移过程中发挥重要的作用。     

Role of the nm23-H1 gene in the metastasis of gastric cancer.

The nm23 gene is now generally accepted as one of the suppressor genes for metastasis in many types of human cancer. To investigate the role of the nm23 gene in gastric cancer, we examined the expression of nm23-H1 mRNA, mutations, and loss of heterozygosity (LOH) of the nm23-H1 gene in gastric cancers. The expression of nm23-H1 mRNA was examined by Northern blot analysis in eight paired sets of specimens. The expression was higher in primary cancer specimens and metastatic lymph nodes than their corresponding normal gastric mucosa in all eight sets of specimens examined, while it was similar between primary cancer specimens and metastatic lymph nodes. The mutations of the nm23-H1 gene were examined in an additional 11 sets of specimens, including eight sets of analysed by Northern blotting, by polymerase chain reaction single-strand conformation polymorphism analysis, no mutation being found in any of the 11 sets of specimens tested. LOH of the nm23-H1 gene was also examined in additional 12 sets of specimens, among which seven (58%) specimens were informative for LOH. LOH was identified in one (14%) out of these seven informative sets. These results suggest that nm23 may not be the metastasis suppressor gene and the alteration of this gene not play an important role in the process of metastasis of gastric cancer.     

nm23-H1 expression and loss of heterozygosity in colon adenocarcinoma

BACKGROUND: The discovery that genetic alterations in oncogenes and tumour suppressor genes accompany tumour formation in many human tumours has encouraged the search for genes that promote or suppress tumour spread and metastasis; nm23 is a promising candidate for a metastasis suppressing gene.AIMS: To evaluate whether expression of nm23-H1 protein or loss of heterozygosity (LOH) of the nm23-H1 gene is associated with colon cancer progression. MATERIALS/METHODS: Paraffin wax embedded tissue sections were analysed immunohistochemically. DNA isolated from normal and tumour tissue was used for LOH analysis using a variable nucleotide tandem repeat (VNTR) marker located in the untranslated 5' region of the nm23-H1 gene. RNA isolated from tumour and normal tissue was used for "real time" RT-PCR. RESULTS: Of 102 adenocarcinomas examined, 58.8% stained weakly for nm23-H1 protein. There was a negative correlation between nm23-H1 positivity and tumour histological grade. In VNTR analysis, 70.2% of patients were informative and 27.4% of tumours had nm23-H1 LOH. There was a positive correlation between nm23-H1 LOH and both tumour histological grade and Dukes's stage. Expression of nm23-H1 mRNA was increased in 22 of 30 colon tumours compared with normal tissue. No significant correlation was found between nm23-H1 mRNA expression and histological grade or Dukes's stage of tumours. CONCLUSIONS: These findings suggest that nm23-H1 protein expression in early stages may have a role in suppressing metastasis in sporadic colon cancer, whereas at a later stage both reduced nm23-H1 protein expression and LOH of the nm23-H1 gene may play role in colon cancer progression and metastasis.     

结直肠癌患者肠道UGT1A基因的多态性表达

目的：从mRNA水平及蛋白质水平分析结直肠粘膜UGT1A基因位点的多态性表达。 方法： 结直肠癌病例组40例，正常人肠道粘膜对照组20例。逆转录聚合酶链反应分析结直肠癌组、正常人群肠道粘膜UGT1A mRNA表达；免疫印迹法检测各组UGT1A蛋白的表达。 结果： (1)UGT1A mRNA量的差异表达：结直肠癌组织中UGT1A mRNA表达明显低于其周围正常粘膜，而后者低于正常人群肠粘膜组织的表达量，P<0.01。结直肠癌病例组、正常人群结直肠粘膜组织呈现个体差异表达。(2)结直肠粘膜组织UGT1A各同Ⅰ型的多态性表达：癌组织、癌周正常粘膜及在正常人群肠道粘膜中UGT1A各同Ⅰ型表达例数各不相同。UGT1A1、1A3、1A4、1A6、1A9 mRNA表达水平在癌组织表达低于周围正常粘膜，P<0.01；而UGT1A8、1A10在癌组织中mRNA表达量高于周围正常粘膜，P<0.01。(3)UGT1A蛋白的差异表达：其灰度值比值在癌组织显著低于周围正常组织，后者又显著低于正常人肠粘膜，P<0.01。各组蛋白表达的深浅度亦各不相同。 结论： (1)UGT1A基因位点的多态表达不仅存在于结直肠癌组织及周围的正常组织，亦存在于正常人群肠粘膜；(2)结直肠粘膜上皮UGT1A基因位点在转录水平及功能水平均存在着多态调节，不同个体对致癌物的易感性不同可能是这种差异表达的结果。     

大肠癌患者VEGF和NO血清水平及其与恶变程度的关系

目的:研究血清中血管内皮生长因子(VEGF)和一氧化氮(NO)表达水平及其与大肠癌恶变程度的关系。方法:分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定和分光光度法检测46例大肠癌患者术前和30例健康人血清中VEGF和NO的含量。结果:大肠癌患者血清VEGF和NO表达水平均较健康人明显增高(P<0.01),且随着大肠癌浸润深度增加、有淋巴结转移以及Dukes分期愈晚者而显著增高(P<0.01)。血清VEGF与NO含量呈明显正相关(r=0.8152,P<0.01)。结论:VEGF和NO与大肠癌的发生、发展及转移调控过程有关,术前检测血清VEGF和NO含量对判断大肠癌的浸润转移以及Dukes分期具有重要价值。