BN大鼠致敏动物模型研究

验证BN大鼠作为评价转基因食物蛋白致敏性动物模型的可行性。方法 48只雌性BN大鼠随机分为对照组(灭菌水)、马铃薯酸性磷酸酶组(PAP)、鸡蛋清粗提蛋白质组(HEWP)、卵清蛋白低剂量组(OVA-L)、卵清蛋白中剂量组(OVA-M)、卵清蛋白高剂量组(OVA-H),每组8只。各组依次分别每天经口灌胃1ml灭菌水、1mg/ml PAP、10mg/ml HEWP、0.1mg/ml OVA、1mg/ml OVA、10mg/ml OVA溶液,持续6周。分别于第14、28和42天取血分离血清,测定特异性抗体IgG和血清总IgE。于第21和35天取血分离血浆,测定组胺。测定各组动物的血压变化及胃肠道渗透性。结果 不同浓度致敏原OVA均可激发BN大鼠过敏反应,包括特异性IgG和血清总IgE升高、组胺升高以及血压下降,其中1mg/ml OVA溶液为致敏最佳剂量。弱致敏原HEWP过敏反应较弱;非致敏原PAP无过敏反应;各组胃肠功能均未发生明显的生理变化。结论 BN大鼠致敏动物模型是评价转基因食物致敏性较为理想的动物模型。     

BN大鼠食物过敏动物模型的实验研究

为了解挪威棕色大鼠(BN)作为食物过敏动物模型的可行性。将24只BN大鼠随机分为灭菌水组(对照组)、卵清蛋白组(Ovalbumin，OVA)、马铃薯酸性磷酸酶组(Potato acid plaosplaatase，PAP)、鸡蛋清粗提蛋白质组(hen’s egg-white protein，HEWP)，每组6只。对各组大鼠灌胃，1ml／只，OVA、PAP组蛋白质浓度为1mg／ml,HEWP组蛋白质浓度为10．0mg／ml，每天1次．共6周。检测血清中特异IgE抗体滴度，同时进行皮肤过敏反应试验(PCA)。在第28、42天，OVA、HEWP组BN大鼠32倍稀释血清中特异IgE抗体均较对照组升高，并有统计学差异，第14、28、42天的：PAP组及第14天的OVA、HEWP组BN大鼠32倍稀释血清中特异IgE抗体较对照组相比无统计学差异。BN大鼠对常见致敏食物蛋白质OVA和HEWP产生过敏反应，对无致敏史食物蛋白质PAP无过敏反应。BN大鼠模型可能是较为理想的食物过敏动物模型。     

利用BN大鼠动物模型评价S86转基因大米的致敏性

为研究S86转基因大米的致敏性,用BN大鼠致敏动物模型进行研究.40只BN大鼠随机分为4组,每组10只,分别为:阳性对照组,转基因大米组,非转基因大米组及阴性对照组.分别在第0和第7天,通过腹腔注射给予阳性对照组的大鼠0.1 mg/ml卵清蛋白(OVA)1ml,其它各组在相同时间腹腔注射相同剂量的生理盐水.以AIN-93G为依据配制各组饲料,阳性对照组和阴性对照组大鼠饲以AIN-93G饲料,转基因大米组饲以含转基因大米粉的饲料,非转基因大米组饲以含非转基因大米粉的饲料,时间为6周.在第2次腹腔注射OVA后,取血分离血浆进行组胺测定.分别在第14、21、28、35、42天取血分离血清,测定IgG及IgE水平;此外,分别在实验前和实验后测定各组大鼠的血压.血清学实验结果显示转基因大米全食品喂饲没有激发IgG及IgE反应,而OVA(阳性对照组)激发了明显的IgG及IgE反应;转基因大米组的组胺水平与阴性对照组及亲本对照组相比差异没有显著性,而阳性对照组组胺水平升高.另外转基因大米没有引起大鼠血压升高.该研究结果表明通过全食品喂饲的方式给予BN大鼠S86转基因大米没有发现该转基因大米对BN大鼠具有致敏性.     

亲代暴露致敏原对子代BN大鼠致敏模型的影响

研究BN大鼠亲代暴露致敏原后子代对致敏原免疫反应变化。方法 亲代分成暴露与非暴露致敏原,两组所产大鼠均随机分为卵清蛋白(OVA)组、空白对照组,分别每日经口给予1 mg/ml OVA溶液、灭菌蒸馏水1 ml,共6周;第2周、第4周、第6周取血分离血清,测定特异性抗体IgG和IgE;第3天和第5天取血分离血浆,测定组胺;最后测定两组胃肠道渗透性。结果 亲代非暴露致敏原的大鼠可激发较强的过敏反应,特异性IgG、特异性IgE、组胺水平均升高;亲代暴露致敏原的大鼠激发后免疫反应较弱。结论 BN大鼠亲代接触致敏原后,其子代致敏免疫反应减弱。     

利用BN大鼠致敏模型研究HPT蛋白的致敏性

目的用BN大鼠致敏模型对HPT(潮霉素B磷酸转移酶)蛋白的致敏性进行研究。方法40只BN大鼠随机分为4组,每组10只,分别经口灌胃给予卵清蛋白(OVA)(阳性对照组)、HPT蛋白(HPT蛋白组)、马铃薯酸性磷酸酶(PAP)(阴性对照组)及蒸馏水(溶剂对照),剂量均为1 mg/ml,每只动物1 ml,每日1次,连续28 d。于灌胃后第7天,取血分离血浆进行组胺测定。于第14天和第28天取血分离血清测定IgE水平。于试验结束后第10天分别对各组动物进行大剂量(5 mg/ml OVA、HPT、PAP或蒸馏水,2 ml/只)激发后测定各组大鼠的血压。结果血清学实验结果表明HPT蛋白没有激发任何IgE反应,而OVA激发了明显的IgE反应;HPT组的组胺水平与阴性对照组或溶剂对照组相比差异无统计学意义,而阳性对照组组胺水平升高,与HPT蛋白组相比差异有统计学意义(P<0.05)。OVA导致3只大鼠血压暂时降低,而HPT对大鼠血压没有影响。结论在该实验条件下,经口灌胃给予BN大鼠HPT蛋白,没有发现致敏性。     

BN大鼠经口致敏动物模型研究

目的 建立经口灌胃途经给予造模致敏原的挪威棕色(Brown Norway,BN)大鼠致敏动物模型.方法 选用不同周龄(4周龄和8周龄)及不同性别(雄性和雌性)的BN大鼠,每天经口灌胃给予不同剂量(10.0、1.0、0.1mg)的造模致敏原—卵清蛋白(OVA),共35天.在第28和35天分别进行内眦静脉取血并分离血清,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测血清中OVA特异性IgE(OVA sIgE)浓度.结果 中剂量组雌性4周龄和8周龄BN大鼠血清中OVA sIgE浓度在第28和35天较阴性对照组差异有统计学意义(P＜0.05);低剂量组雄性8周龄BN大鼠血清中OVA sIgE浓度在第28天较阴性对照组差异有统计学意义(P＜0.05);各组雄性4周龄BN大鼠血清中OVA sIgE浓度在第28和35天均较阴性对照组差异无统计学意义.结论 经口灌胃途径给予不同性别和周龄的BN大鼠不同剂量的OVA,雌性大鼠比雄性大鼠更敏感;周龄对敏感性无影响;1.0 mg的致敏剂量较适合.因此,选用雌性BN大鼠,每天经口灌胃给予1.0 mg OVA,28 ～ 35天即可建立比较理想的BN大鼠经口致敏动物模型.     

大米蛋白的BN大鼠致敏动物模型建立

以大米蛋白为过敏原,腹腔注射致敏雌性棕色挪威大鼠(BN大鼠),建立大米蛋白过敏BN大鼠动物模型。观察BN大鼠全身主动过敏反应及体重、体温、免疫脏器指数变化,检测其血清特异性Ig G、总Ig E和特异性Ig E水平,并测定血浆组胺释放水平及各组大鼠的血象变化。结果显示,实验第42 d大米蛋白激发实验后,实验组大鼠全部呈过敏反应阳性,且体温降低,脾脏指数显著增大(p0.01),体内白细胞和嗜酸粒细胞数目升高(p0.05);实验组血清特异性Ig G显著升高(p0.01),总Ig E以及血浆组胺释放量均高于对照组(p0.05),实验第14 d和42 d血清特异性Ig E高于对照组,第28 d无明显变化(p0.05)。本实验结果证明BN大鼠是评价大米蛋白致敏性较为理想的动物模型。     

果胶与双歧杆菌对Balb/c小鼠机体敏感性的影响

目的研究果胶是否能够降低Balb/c小鼠对OVA(鸡卵清白蛋白)的过敏反应水平,以及同时经口给予双歧杆菌是否能够调整小鼠肠道菌群,从而影响过敏反应的发生和反应强度。方法连续40 d经口给予小鼠20μg/只(低剂量)和200μg/只(高剂量)的果胶溶液或溶有双歧杆菌(2×106 CFU/只)的果胶溶液,每10 d腹腔注射OVA和铝佐剂致敏小鼠,10 d后进行大刺激,采血测定组胺、肥大细胞蛋白酶-1、免疫球蛋白E水平,并对脾脏T细胞进行体外刺激,检测IFN-γ和IL-4的水平,同时取小鼠粪便筛选双歧杆菌培养。结果果胶处理组小鼠血浆中组胺、肥大细胞蛋白酶-1水平与OVA致敏组相比无显著差异(P0.05);高剂量处理组小鼠血清总IgE水平显著低于OVA致敏组(P0.05),特异性IgE及细胞因子水平无显著差异(P0.05);双歧杆菌筛选培养可以看出,果胶有增加双歧杆菌数量的作用,但经口给予双歧杆菌活菌无显著作用。结论补充果胶不能降低Balb/c小鼠的肥大细胞脱颗粒情况、抗体水平以及细胞因子产生水平;果胶有增加肠道内双歧杆菌的作用,但经口给予活菌不能增加肠道内双歧杆菌水平。     

果胶与双歧杆菌对Balb/c小鼠机体敏感性的影响

目的：研究果胶是否能够降低Balb/c小鼠对OVA(鸡卵清白蛋白)的过敏反应水平,以及同时经口给予双歧杆菌是否能够调整小鼠肠道菌群,从而影响过敏反应的发生和反应强度。方法：连续40天经口给予小鼠20μg/只(低剂量)和200μg/只(高剂量)的果胶溶液或溶有双歧杆菌(2*10₆CFU/只)的果胶溶液,每10天腹腔注射OVA和铝佐剂致敏小鼠,10天后进行大刺激,采血测定组胺、肥大细胞蛋白酶-1、免疫球蛋白E水平,并对脾脏T细胞进行体外刺激,检测IFN-γ和IL-4的水平,同时取小鼠粪便筛选双歧杆菌培养。结果：果胶处理组小鼠血浆中组胺、肥大细胞蛋白酶-1水平与OVA致敏组相比无显著差异(P>0.05);高剂量处理组小鼠血清总IgE水平显著低于OVA致敏组(P<0.05),特异性IgE及细胞因子水平无显著差异(P>0.05);双歧杆菌筛选培养可以看出,果胶有增加双歧杆菌数量的作用,但经口给予双歧杆菌活菌无显著作用。结论：补充果胶不能降低Balb/c小鼠的肥大细胞脱颗粒情况、抗体水平以及细胞因子产生水平;果胶有增加肠道内双歧杆菌的作用,但经口给予活菌不能增加肠道内双歧杆菌水平。     

维生素E对致敏大鼠机体敏感性的影响

目的研究补充不同剂量、不同接触时间的维生素E对致敏SD大鼠机体敏感性的影响。方法取8周龄雌性SD大鼠,按体重随机分为5组,每组25只,每天经口分别给予不同剂量的维生素E(2.3、6.9、13.8mg/kg),在第2周、3周、4周、5周、6周时,每组分别取出5只动物,腹腔注射给予10 mg/只OVA致敏,一周后使用50 mg/只OVA刺激,检测各组动物血清中总Ig E、特异性Ig E和Ig G1、血浆中组胺、m MCP-1和细胞因子(IFN-γ,IL-4)的水平,大刺激后处死动物,取心脏、肝、脾、肾、胸腺、空肠、肠系膜淋巴结等脏器,并对这些脏器进行组织病理学观察。结果经口给予高剂量维生素E 6周,OVA产生的免疫学反应强度受到了显著的抑制作用,总Ig E、特异性Ig E、特异性Ig G1、IL-4以及组胺水平显著降低,IFN-γ水平显著升高,随接触时间的延长呈增高的趋势。且高剂量处理组动物免疫学反应强度显著低于OVA对照处理组,对致敏SD大鼠的机体敏感性起到了有效的调节作用。结论维生素E能够降低致敏动物机体对卵白蛋白的敏感性,也抑制了免疫系统对卵白蛋白产生的免疫学反应。