土壤拮抗细菌对茄病镰孢菌的抑制作用和防治研究

从云南，贵州，河北，吉林，黑龙江，北京，天津等地采集土样２８个，采用常规平板稀释法分离获得的细菌菌株４１４个。以茄病镰孢菌为主要靶标菌，对分离菌株进行抑菌测定，筛选出强拮抗菌１３株，并用附着在茄子，番茄等上９种病原菌对其进行拮抗作用测定，发现所获拮抗细菌具有广谱抗性。筛选出具广谱拮抗作用的生防菌株Ｂ０７３、Ｂ１５３，其发酵淮中活菌在温室内人工接种条件下进行温室接种防病试验，对茄病镰孢菌防治效果分别     

尖孢镰刀菌拮抗细菌的筛选

报道从土壤中分离到1株对棉花枯萎病致病菌尖孢镰刀菌（Fusrium oxysporum）的菌丝生长及孢子萌发均具有较强拮抗作用的革兰氏阴性细菌J4。并对该菌株进行了形态及部分生理生化鉴定试验。16srRNA序列分析结果表明，该菌株与国际上已报道的溶杆菌属（Lysobacter）中的L．antibioticus细菌的16srRNA序列同源性达到99％。J4菌的培养条件实验结果表明，最佳培养基配方为：葡萄糖10．6g／L，尿素3g／L，NaCl0．5g／L，MgSO4 0．5g／L。在该培养基中J4菌发酵液的抑菌活性最大，J4菌所产生的抗性化合物耐热性较差。     

棉花枯萎病菌的拮抗细菌筛选

以棉花枯萎病致病菌尖孢镰刀菌为靶标菌，从土壤中分离了184株细菌进行拮抗筛选，获得抗性菌株48株，其中4株拮抗性能强且抗性稳定的菌株具有较好的生防潜力。本试验对其中一株进行测试，初步判断属枯草芽孢杆菌。     

5种植物内生菌的分离及其拮抗月季黑斑病菌的筛选

[目的]获得高效拮抗菌株,防治月季黑斑病.[方法]采用常规方法分离月季、银杏、钩腾、黑老虎、山苍子5种植物内生菌,以月季黑斑病菌作为指示菌,采用平板对峙培养法进行初筛,并对拮抗圈大于5mm的内生菌进行复筛.[结果]5种植物共分离出内生菌69株,其中37株细菌,3株放线菌和29株真菌;初筛出20株菌对月季黑斑病菌有拮抗效果,拮抗圈大于5mm的有8株,其中细菌7株,放线菌1株;复筛表明菌株YJX2与菌株YXF1抑菌效果较好.[结论]研究表明,菌株YJX2与菌株YXF1可作为月季黑斑病生物防治备选菌株.     

一株拮抗绿脓杆菌的抗菌蛋白产生菌的分离与鉴定

获得了产生拮抗绿脓杆菌抗菌蛋白的菌株。从土壤样品中筛选拮抗绿脓杆菌的菌株,采用形态学和16S rDNA分析鉴定其分类地位,采用琼脂平板扩散法测定分离菌发酵产物拮抗绿脓杆菌的活性,采用硫酸铵沉淀、分子筛分离发酵上清中的目标蛋白,测定了目标蛋白的蛋白酶敏感性、高温耐受性。结果表明:从土壤中分离出的该株不动杆菌,从其发酵产物中纯化出的目标蛋白有拮抗绿脓杆菌的活性;该目标蛋白对蛋白酶K或高温敏感,处理后可降低或丧失抗绿脓杆菌的活性,该抗菌蛋白相对分子量约35 KD。     

西瓜枯萎病多功能生防细菌的筛选和抗病效果

由尖孢镰刀菌西瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp.niveum,FON)侵染引起的西瓜枯萎是一种毁灭性的土传病害,利用有益微生物是生产上防治西瓜枯萎病最具潜力的方法。采用耐酸耐盐培养基和平板对峙法筛选出一株既耐酸耐盐,又能拮抗西瓜枯萎病原菌的多功能生防菌株ZJT2,对其耐酸耐盐活性及抗病效果进行测定,并进一步对其进行分子鉴定。结果表明:菌株ZJT2可耐受pH值为4.0、NaCl质量分数为11%的培养条件,且在正常土壤中该菌株对西瓜枯萎病原菌的防治效果高达100%;在设施土壤(酸化和盐渍化土壤)中该菌株对西瓜枯萎病原菌的防治效果高达67%;16S rDNA鉴定表明菌株ZJT2与暹罗芽孢杆菌(Bacillus siamensis)具有很高的遗传相似性,同源性为99%。多功能生防菌株ZJT2有望成为酸化及盐渍化土壤中西瓜枯萎病生物防治的新材料。     

三七根腐病原菌拮抗菌的筛选与活性分析

中药材三七的种植产业发展受根腐病影响十分严重,通过筛选高效、稳定的三七根腐病原菌拮抗菌株可对三七进行生物防治。采用平板对峙试验,从三七植株中筛选出2株拮抗细菌菌株WZZ-6和WZZ-25,并对其进一步的活性测定。结果表明:WZZ-6和WZZ-25菌株对柱孢菌(Ilyonectria mors-panacis)病原真菌有较好的抑制活性,病菌菌丝的生长抑制率都超过50%,其中菌株WZZ-6抑菌率高达72%;对三七离体块茎、植株的根腐病均具有较强的拮抗作用,防治效果高达100%。16SrDNA鉴定结果显示:WZZ-6和WZZ-25分别为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)和枯草芽孢杆菌(B.subtilis),序列相似度分别为100%和99%。拮抗菌株WZZ-6和WZZ-25有望成为三七根腐病生物防治的新材料。     

甲醛降解菌的筛选与鉴定

为了获得具有降解甲醛能力的甲醛降解菌.采用平板法,从家具厂污水中筛选得到了甲醛降解能力较好的10株菌,并对其进行了复筛,得到6株降解能力较强的菌株,分别为L-1、L-2、L-3、L-4、L-5和L-6.对这些菌株进行了菌体形态、菌落特征观察,细菌生长曲线、细菌降解曲线的测定.并通过正交实验设计得到了菌株的最佳生长条件,以及真实降解实验.结果表明,这6株菌具有较强的甲醛降解效果.     

糖厂滤泥净化菌的筛选鉴定及净化条件

为减少环境污染同时使糖厂滤泥资源化利用,通过初筛和复筛从糖厂滤泥中筛选出两株净化滤泥能力较强的菌株,记为fv1和fv2。经形态学鉴定和分子生物学鉴定可知两株菌分别为根毛霉属菌和曲霉属菌。为提高菌株对滤泥的净化效果,对目的菌株的净化条件进行初步探讨。实验结果表明,复合菌种的最适作用体积比例为2∶3、最适作用pH 8、最适作用温度为28℃,在该条件下,复合菌种可在4d内将滤泥中总糖去除,去除率达到75%。     

聚丙烯酰胺降解菌筛选与分子生物学鉴定

从大庆油田聚驱后油藏采出水中筛选出一株降解聚丙烯酰胺的细菌菌株——QSJU001.该菌株能在以聚丙烯酰胺为惟一碳源的无机盐培养基中生长.对该菌进行16SrDNA序列的分子生物学鉴定,测得的16SrDNA序列与GenBank中最相近的前10个菌株的相似性均为99%.利用该菌属与最相近的前10个菌株构建该菌种的系统发育树,结果显示该菌株与Acinetobacter baumannii strain KK14菌株的碱基差别最小.该菌的形态特征观察、生理生化特征检测、16SrDNA分子生物学鉴定结果表明,菌株QSJU001与Acinetobacter baumannii strain KK14亲缘关系最近,属于不动杆菌属.降解率实验结果表明,菌株QSJU001对聚丙烯酰胺降解率基本稳定在33%左右,对聚丙烯酰胺的降解效果较好.     

一株降解石油烃假单胞菌的鉴定及降解特性

从松原油田石油污染土壤中筛选、分离出一株降解石油烃的菌株,观察其菌落形态,通过16S rDNA 序列分析对其进行鉴定。结果表明：该菌株的菌落呈白色不规则状、表面粗糙、边缘不整齐。16S rDNA序列分析鉴定为类产碱假单胞菌（Pseudomonas pseudoalcaligenes strain）。在温度为35℃、pH值为8时菌株对石油烃降解效果最好,降解率为75.4%。     

一株反硝化聚磷菌的筛选鉴定及特性研究

采用SBR反应器,通过间歇曝气方式对底泥体系中反硝化聚磷菌进行了筛选和富集.从底泥中分离出1株反硝化聚磷细菌SYJl,经过生理生化鉴定和16SrDNA测序,建立了系统发育树,鉴定出细菌SYJl属于Acinetobacter sp.菌株SYJl在好氧条件下培养48 h后,TP最终去除率为68.63%,在厌氧条件下培养48h后,NO2-N及NO3-N的去除率分别为94.56%和100%.     

油污土壤生物修复高效菌筛选鉴定

针对油污土壤生物修复技术特点,从不同污染程度土壤中分离和鉴定高效石油降解菌,并结合DGGE技术分析油污土壤中微生物种群动态,最终提出生物修复剂的配制方案.结果表明:石油污染土壤中存在主要的优势细菌包括微球菌属、节细菌属、芽孢杆菌属、产碱菌属、醋酸细菌属和黄杆菌属;优势真菌主要有黑曲霉、杂色曲霉、产黄青霉、常现青霉、绿色木霉、粉红头孢霉、出芽短梗霉和镰刀菌属;放线菌主要为链霉菌属.真菌菌株的降解活性高于细菌和放线菌,石油污染土壤的生物修复中真菌起着主要的降解作用.土壤性质影响微生物的生长,适量石油烃促进优势菌生长,过多石油烃则对优势菌有抑制作用.黑曲霉菌和镰刀菌适于轻度和中度油污土壤修复,出芽短梗霉适于重度油污土壤修复.油污土壤生物修复剂应包括石油降解优势菌剂、生物营养素、生物表面活性剂和土壤活化剂.     

一株螺螨酯降解菌的分离、鉴定和特性研究

从山东潍坊玉米种植地采集的土壤样品中分离筛选出1株螺螨酯高效降解菌。使用高效液相色谱(HPLC)法测定了分离菌株对螺螨酯、吡虫啉和丁醚脲等8种农药的降解率,对该菌株进行了菌种鉴定并测定了最佳生长条件。结果显示:通过对筛选出的菌株WF14-6形态学观察及16SrDNA序列分析,初步鉴定该菌株为肠杆菌属(Enterobacter sp.)。确定了该菌株最佳的生长温度为30℃、pH为7.0。在培养120h后对螺螨酯的降解率为76.42%,对吡虫啉、三氟羧草醚、乙嘧酚磺酸酯、丁醚脲和烯酰吗啉的降解率为20.81%~41.06%。     

氯氰菊酯降解菌的分离鉴定及降解特性研究

从浙江施用氯氰菊酯的茶园、果园采集的58份土壤样品筛选了1株能以氯氰菊酯为惟一碳源生长并具有降解氯氰菊酯能力的细菌LQK-14.通过生理生化特征和16SrRNA基因序列同源性分析,鉴定该菌株为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida).菌株LQK-14降解氯氰菊酯的最适温度为25~30℃,最适pH为7,外加氮源显著影响菌株的降解效能,无机氮比有机氮更利于农药降解,在适宜的培养条件下7d内将100mg/L氯氰菊酯降解了88%,其降解酶定域在胞内.     

降解PVA混合菌系的筛选及菌株的分离纯化

从4个样品中筛选出一能够高效降解聚乙烯醇（PVA）的混合菌系,并对其驯化培养及分离纯化,得到了7株菌株,均能够降解聚乙烯醇.通过菌落形态和生理生化实验对这些菌株进行了初步鉴定.同时考察了混合菌系与单菌株降解效果的比较.结果说明混合菌系的降解效率远远大于单菌株,48h降解率可达90%以上.     

高效石油烃降解菌的分离鉴定及降解特性

为获得更为丰富的石油降解微生物资源,从沈抚污灌区石油污染土壤和实验室高浓度柴油胁迫土壤中筛选出了4株高效石油烃降解菌SF-422、SF-428、SF-433和SYS-1.这4株菌总石油烃(Total petroleum hydrocarbon/TPH)生物降解率为67.4%~73.6%.经过16项生理生化特性实验和16S rDNA序列分析鉴定,SF-433,SF-428,SF-422和SYS-1分别为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus),木糖氧化无色杆菌(Achromobacter xylosoxidans),施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)和洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepacia).纯烃降解定性实验表明所筛选出的4株高效降解菌均能够利用正十六烷、苯、菲和环己烷为唯一碳源生长,其中菌株SF-428和SYS-1显示了对芳烃及环烷烃较强的利用能力.     

产壳聚糖酶菌株的筛选、鉴定及其产酶条件研究

利用以壳聚糖为唯一碳源的培养基从土壤中分离出两株具有产壳聚糖酶能力的菌株,采用平板分离初筛和摇瓶培养复筛,确定了菌种Y4为产壳聚糖酶较好的菌株.通过对菌株Y4生理生化试验、菌株形态特征和生物学特性研究,发现菌株Y4与<伯杰细菌鉴定手册>(第8版)上施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)相符,可以判断菌株Y4为施氏假单胞菌,同时,对菌株Y4产酶条件进行了研究,结果发现在pH为6.5,温度为40℃,培养时间为24 h时酶活力达到最大.筛选出来的施氏假单胞菌菌株Y4具有较好的壳聚糖酶活力,为壳聚糖的降解提供了一条新途径.     

冬枣储藏期致腐真菌分离鉴定及广谱拮抗菌株的筛选

从不同腐烂病症的冬枣中分离得到致腐真菌4株,经鉴定分别为根菌索菌(RhizomorphaRoth.ex Fr)、细极链格孢(Alternaria tenuissima)、橄榄色盾壳霉(Coniothyrium olivaceum)、扩展青霉(Penicillium expansum);采用稀释分离法从样品中分离得到细菌菌株142株,采用对峙培养法从中筛选到对4种致腐真菌均具有明显拮抗作用的细菌菌株7株,其中菌株LM2303的广谱拮抗效果最佳,其对上述4种致腐真菌的抑菌带宽度分别为(8.5±0.5)mm、(8.0±0.3)mm、(10.3±0.6)mm和(7.5±0.9)mm;通过形态学观察、生理生化特性分析及16S rDNA序列比对,菌株LM2303应为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).菌株LM2303对冬枣主要致腐真菌均具有显著的拮抗作用,为冬枣储藏期致腐真菌生物防控奠定了基础.     

石油高效降解菌的筛选及其降解特性

从石油污染土壤中筛选、分离得到三株高效石油降解菌GX1、GX2、GX3,初步鉴定分别为假单胞菌属(Pseudomonas sp.)、邻单胞菌属(Plesionmonas sp.)和动胶菌属(Zoogloea sp.).同时还研究了pH值、营养物质、油质量浓度对菌体生长和降油率的影响.结果表明,这三株菌在初始pH值为7-9对石油的降解率分别为86.7%,72.9%,64.7%;最佳氮源为NH4NO3,氮磷比大约控制在4∶1左右时,降解效果较好.在原油初始浓度较低时,降解率随石油浓度的升高而略有提高.不同菌株耐油程度不同.