荧光谱客观分析在膀胱癌光动力学诊断中的应用

目的 探讨紫外激光激发膀胱癌组织细胞荧光谱分析对改进膀胱癌光动力学诊断的意义.方法 以不含细胞培养液和血卟啉单甲醚混合液为对照,分别取浓度为0、10、100、200 mg/L的血卟啉单甲醚作为光敏剂,孵育膀胱癌组织细胞株T24 1～3 h,再以全固态紫外激光作为激发光源(波长355 nm)激发,检测膀胱癌组织细胞特征荧光光谱并分析药物峰位置.结果 在可见光区域390～780 nm,不含细胞的培养液和血卟啉单甲醚混合液未出现特征峰;无血卟啉单甲醚光敏剂的膀胱癌组织细胞的自体峰在445～490 nm处;不同时间不同浓度血卟啉单甲醚光敏剂孵育的膀胱癌组织细胞除在445～490 nm处有自体峰外,在628.65 nm处均出现药物峰,200 mg/L血卟啉单甲醚孵育2 h时膀胱癌组织细胞药物峰及自体峰荧光强度达到最高,且药物峰的荧光强度超过了自体峰.结论 紫外激光激发的膀胱癌组织细胞荧光谱性质稳定、强度佳,对改进膀胱癌光动力学诊断具有确切价值.     

HMME-PDT对大鼠致龋模型中变形链球菌抑制作用的研究

目的 探讨不同参数光动力疗法(PDT)在大鼠口腔龋齿预防中的作用.方法 用变形链球菌感染Wistar大鼠口腔,建立龋齿模型.以0.9%生理盐水、0.2%氟化钠为对照组,单纯激光、单纯光敏剂、不同参数PDT为实验组.采用血卟啉单甲醚(HMME)为光敏剂,532 nm半导体激光为光源,每周处理牙齿1次,5周后处死大鼠,Ke...     

声化学激活血卟啉对S180肿瘤作用的研究

声化学激活血卟啉对Ｓ＿（１８０）肿瘤作用的研究马玉英，张伊立，张军平（陕西师范大学应用声学研究所，西安７１００６２）关键词：声化学；血卟啉；Ｓ１８０瘤细胞；抗肿瘤效应血卟啉是一种有机光敏剂，具有优先在肿瘤组织聚集的特点，用激光激活血卟啉的光动力学疗法...     

基于图像处理技术分析细胞吸收光敏剂过程的研究

目的 探讨利用图像处理技术分析细胞吸收光敏剂过程的可行性.方法 将光敏剂血卟啉单甲醚(HMME)注入喉癌细胞的培养皿中一定时间后,利用倒置荧光显微镜在不同时刻拍摄细胞的荧光图片,应用Matlab软件等进行图像处理得到反映不同时刻的细胞荧光强度的参数值L,并对计算结果进行对比.结果 细胞的荧光强度随着时间在15、90、300 min逐渐提高,Sobel算法与Otsu算法都可以较好地反映图像的荧光强度.结论 应用图像处理方法分析光敏剂进入细胞过程的方法简便、实用,具有重要的参考价值.     

不同组分的血卟啉衍生物光动力学效应的比较研究

血卟啉衍生物(HPd)是目前进行光动力学疗法(PDT)时使用的主要光敏剂,为一种含有多种卟啉类的混合物。Dougherty提出双血卟啉醚(DHE)是该混合物中最有效的组分。卟啉类光敏剂中除含DHE外,还含有血卟啉(HP)、原卟啉(PP)和羟乙烯乙     

研究不同光敏剂诱导的光动力疗法对人白血病细胞的杀伤作用

目的 研究并比较3种卟啉类光敏剂——血卟啉衍生物(HpD)、癌光啉(PsD007)和血卟啉 单甲醚(HMME)诱导的光动力疗法(PDT)对白血病细胞K562的杀伤效应.方法 以人白血病细胞K562为研究对象,分为对照组和PDT组,以梯度浓度的光敏剂与K562细胞共同孵育,经不同能量光照后,用噻唑蓝(MTT)法测定PDT对K562细胞的杀伤作用.结果 与对照组相比,PDT对K562细胞有明显杀伤作用,并随着光敏剂浓度的增加和光照能量的增大,效果增强.PsD007-PDT和HMME-PDT的效果都明显优于HpD-PDT(P＜0.05);而当光敏剂质量浓度较大(25 μg/ml)或能量密度较大(7.2 J/cm2)时,PsD007-PDT的作用效果优于HMME-PDT.结论 PDT对人白血病细胞K562具有明显的杀伤作用,其对细胞的抑制率具有显著的剂量效应关系;PDT对K562的杀伤效应与光敏剂种类有关,HpD-PDT的杀伤效果不如PsD007和HMME;在较高能量密度和较大光敏剂浓度的条件下,PsD007-PDT的效果优于HMME-PDT.     

HMME-PDT对人舌鳞癌Tca8113细胞的作用及影响因素初步研究

目的:初步探讨血卟啉单甲醚(HMME)介导的光动力疗法(HMME-PDT)对人舌鳞癌Tca8113细胞的作用及可能的影响因素。方法:以HMME作为光敏剂、发光二极管(LED)为光源的光动力疗法作用于Tca8113细胞。采用MTT法分别检测光敏剂孵育时间、光敏剂浓度、光剂量及光功率密度对Tca8113细胞抑制率的影响。HE染色观察细胞形态学改变,Hoechst 33342荧光染色观察细胞核凋亡情况。结果:细胞抑制率随光敏剂孵育时间延长而增大,呈时间依赖效应;并且随光敏剂浓度和光剂量增加而增大,呈浓度-光剂量依赖效应;在相同光剂量下,抑制率随光功率密度增加而增大,在高剂量时更明显。HE染色显示,与对照组相比,PDT处理组细胞密度明显降低,死细胞明显增多;Hoechst 33342荧光染色可见核染色质浓集、核固缩、核碎裂,出现凋亡小体,呈典型凋亡形态改变。结论:HMME-PDT能有效杀伤Tca8113细胞,光敏剂孵育时间、光敏剂浓度、光剂量及光功率密度以均是影响PDT疗效的重要因素,HMME-PDT主要通过凋亡方式诱导细胞死亡。     

ALA和HMME水凝胶栓剂的制备和体内外释药研究

目的 制备光敏剂5-氨基酮戊酸(ALA)和血卟啉单甲醚(HMME)水凝胶栓剂,评价其对直肠肿瘤组织的光敏剂递送效率.方法 将皮下移植人直肠癌细胞SW837的BALB/c小鼠随机分为水凝胶栓剂直肠局部给药组、皮肤局部给药组、瘤内注射给药组和静脉注射给药组.用荧光光谱仪测量直肠壁、皮肤和皮下肿瘤中原卟啉(PpⅨ)和HMME的浓度,荧光光谱系统测定相应的光敏剂分布情况.结果 ALA水凝胶栓剂直肠局部给药组的PpⅨ浓度分别是皮肤局部给药组的9.76倍(1 h)和5.80倍(3 h),差异均具有统计学意义(均P＜0.05).皮肤局部给药后2h,ALA在肿瘤组织内达到最大穿透深度(3～6 mm).而HMME水凝胶栓剂直肠局部给药后,直肠壁中的HMME浓度极低,且皮肤局部给药后的最大肿瘤穿透深度不足2 mm.结论 与皮肤相比,ALA更易穿透黏膜屏障,以水凝胶栓剂形式直肠局部给药有望成为ALA用于光动力疗法治疗直肠癌的一种给药方式.     

抗CEA McAb-血卟啉偶联物的制备及对肿瘤细胞的杀伤作用

利用抗CEA单克隆抗体(McAb)作为光敏剂血卟啉(HP)的特异载体。通过连接剂碳二亚胺将两者结合成一体,组成免疫光敏剂。反应产物经Sephadex-G_(25)凝胶过滤柱去除游离HP。薄层层析、SDS-PAGE、红外及紫外吸收光谱分析都证明连接是成功的。间接免疫荧光、红细胞溶血试验证明偶联物保持了两者的原有生物活性。进而以~(51)Cr释放试验证明在光照条件下,此偶联物明显增加血卟啉对分泌CEA的人结肠癌细胞的特异杀伤,而对非靶细胞影响较小。因此,免疫光敏剂有可能提高HP对消化道等分泌CEA的肿瘤的治疗作用,降低其毒副反     

激光共聚焦显微镜观察维拉帕米对HMME-PDT抑制混合菌菌斑生物膜作用的影响

目的 探讨细菌外排泵抑制剂(EPI)——维拉帕米对以血卟啉单甲醚(HMME)为光敏剂的光动力疗法(PDT)抵抗牙菌斑生物膜内主要致龋菌作用的影响.方法 以变形链球菌、血链球菌、嗜酸性乳杆菌和黏性放线菌为实验菌株,建立牙菌斑生物膜模型.以维拉帕米作为细菌外排泵抑制剂,根据在PDT过程中加入维拉帕米和光敏剂的先后顺序,实验分为5组:A组为同时加入光敏剂+维拉帕米组,B组为维拉帕米(先)+光敏剂组(后)组,C组为光敏剂(先)+维拉帕米(后)组,D组为单纯PDT处理组,E组为生理盐水处理组.激光照射后以激光共聚焦显微镜观察PDT作用后生物膜的变化.结果 生理盐水处理组:生物膜内活菌数量占据大多数.以此组为正常细菌活力组作对比,单纯PDT处理后,红色荧光显著增加,细菌失去了积聚能力,多呈散乱分散状态;与单纯PDT组相比,加入维拉帕米的PDT组绿色荧光染色增多,细菌活力增加,其中先加入维拉帕米后加入光敏剂组,绿色荧光染色明显增多,红色荧光减少,说明活菌相对活力较高.结论 实验表明,HMME-PDT在对混合菌菌斑生物膜中的细菌有抑制效应,细菌外排泵抑制剂对HMME-PDT抑制牙菌斑生物膜内主要致龋菌有抑制作用;且前期维拉帕米给药能够显著抑制PDT治疗龋病的效果.