改革流加糖工艺提高谷氨酸发酵水平的研究

采用天津短杆菌Ｔ６－１３经多年经后的３２８＾＃菌株,以淀粉糖为糖质材料,生物素亚适量,当发酵残糖约为６０ｇ／Ｌ时,流加糖,效果好。在２００ｍ＾３发酵罐生产中,流加糖浓度分别为３００ｇ／Ｌ和４５０ｇ／Ｌ发酵周期３２小时,平均产酸分别达１０２．３ｇ／Ｌ和１１５ｇ／Ｌ,糖酸转化率５５．５％,提取收率９５．８％;单罐产理论谷氨酸由１６．２４吨提高至１８．２０吨。     

L－赖氨酸快速发酵新菌种及工艺研究

以我室选育的赖氨酸生产菌Ｓ－２１－２４为出发菌株,经硫酸二乙酯（ＤＥＳ）和紫外线（Ｕ．Ｖ．）的复合处理,选育到一株代谢速率高,发酵周期短的新菌株ＦＴＳ－１。对该菌的发酵条件作了研究,选择了最佳培养条件,该菌在５Ｌ发酵罐中发酵４８小时产酸８０ｇ／Ｌ以上,７２小时产酸可达１１０ｇ／Ｌ。     

L－赖氨酸快速发酵新菌种及工艺研究

以我室选育的赖氨酸生产菌Ｓ－２１－２４为出发菌株,经硫酸二乙酯（ＤＥＳ）和紫外线（Ｕ．Ｖ．）的复合处理,选育到一株代谢速率高,发酵周期短的新菌株ＦＴＳ－１。对该菌的发酵条件作了研究,选择了最佳培养条件,该菌在５Ｌ发酵罐中发酵４８小时产酸８０ｇ／Ｌ以上,７２小时产酸可达１１０ｇ／Ｌ。     

连续培养生产L－氨基酸

在５升发酵罐上对Ｌ－Ａｒｇ和Ｌ－Ｌｙｓ作了单级连续培养试验。从嗜醋酸棒杆菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍａｃｅｔｏａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｍ）产Ｌ－Ａｒｇ的突变型ＭＣ－１３的连续培养液中分离出的ＳＣ－１９０菌株能连续超过２５０小时稳定地产Ｌ－Ａｒｇ达６０ｇ／Ｌ。用谷氨酸棒杆菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍｇｌｕｔａｍｉｃｕｍ）产Ｌ－Ｌｙｓ突变株Ｂ－６进行连续培养,可稳定维持５００小时之久。连续培养产Ｌ－Ｌｙｓ·ＨＣｌ浓度达１０５ｇ／Ｌ,体积产率为５．６ｇ／Ｌ／ｈ,是流加培养的２．５倍。产率提高依赖于氧气的供应,实验表明连续培养是分离适于连续培养菌株和提高产率的有效手段。     

新型肌苷产生菌──产氨短杆菌GMBA—800选育和特性的初步研究

采用多种方法诱变获得一株新型肌苷产生菌──产氨短杆菌（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍａｍｍｏｎｉａｇｅｎｅｓ）ＧＭＢＡ－８００（具有腺嘌呤、生物素双重营养缺陷型和对８－氮杂鸟嘌呤、磺胺胍、６－流基嘌呤有抗性）,对其生长和发酵条件进行初步研究。肌苷产量从５ｇ／Ｌ提高到１８．４１ｇ／Ｌ,发酵周期从８４ｈ缩短为６３ｈ。菌株遗传性状稳定。     

~（60）Co－γ射线诱变柠檬酸产生菌黑曲霉Co9－6的研究

本试验采用￣（６０）Ｃｏ－γ射线对柠檬酸产生菌黑曲霉Ｃｏ９－６进行辐射,经两次处理后选育出Ｌ１２１７和Ｌ８０１两株优良柠檬酸产生菌。中试结果表明菌株Ｌ１２１７较Ｌ８０１更优：产酸率较菌株Ｃｏ９－６提高１７．６％、发酵周期缩短１３．４％、对糖转化率提高１３．３％。     

米根霉发酵生产L-乳酸

报道了Ｌ－乳酸菌株的分离与筛选,探讨了不同碳源、氮源、通气量、温度等发酵条件对产Ｌ－乳酸的影响,从７８株米根霉中筛选出１３株产Ｌ－乳酸较高的菌株,其中米根霉（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ｏｒｙｚａｅ）Ｒｓ９２８产Ｌ－乳酸最高,产酸最稳定。试验结果表明,该菌株最适发酵培养组成（％）：淀粉水解糖１６,ＭｇＳＯ４ ０．０８,ＫＨ２ＰＯ４ ０．０５,ＺｎＳＯ４ ０．０１,ＣａＣＯ３ ７,ｐＨ自然。在６０ｔ发酵罐中,     

产谷氨酸棒杆菌B9和T6—13的原生质体融合

棒杆菌Ｂ９和Ｔ６—１３两菌株经ＵＶ变处理得到Ｂ９—２（ＳｍＲ）和Ｔ６—１３—３（ＲｉｆＲ）两菌株,以此两菌株做为出发菌株。将对数前期的培养细胞经青霉素予处理及酶解制备原生质体,用４０％ＰＥＧ６０００为助融剂,进行原生质体融合。用间接法检出具有Ｓｍ、Ｒｉｆ抗性的融合子。融合频率为６．５５×１０－６－１．６４×１０－５,融合子双抗性稳定,产谷氨酸,经摇瓶实验筛选出一株产谷氨酸明显高于亲本的融合子ｆｕ３６。     

L-赖氨酸产生菌FH128菌株的研究(Ⅰ)FH128菌株的选育及摇瓶发酵

以赖氨酸产生菌Ａ１１１（ＨＳ－、ＡＥＣｒ）为出发株,经化学诱变剂ＭＮＮＧ（Ｎ－甲基－Ｎ′－硝基－Ｎ－亚硝基胍）及单氟醋酸处理获得单氟醋酸抗性突变株Ｆ７９,摇瓶发酵产Ｌ－赖氨酸盐酸盐７．０％～７．５％,对糖转化率３８％～４０％,分别比Ａ１１１株提高约２５％及２０％。然后,再以Ｆ７９菌为亲株经ＭＮＮＧ及噻唑丙氨酸处理获得噻唑丙氨酸抗性突变株ＦＨ１２８,在适宜的培养条件下,摇瓶发酵产Ｌ－赖氨酸盐酸盐８．５％～９．５％,最高产酸率１１％,对糖转化率４５％～５０％。在１６Ｌ自控发酵罐发酵,产Ｌ－赖氨酸盐酸盐１２％～１４％,对糖转化率４０％～４５％;在２０～１００ｍ３发酵罐发酵,产酸率为８．５％～９．５％,对糖转化率４０％～４２％,提取总收率８０％～８５％,成品（饲料级Ｌ－赖氨酸盐酸盐）质量符合国家标准（ＧＢ８２４５－８７）。ＦＨ１２８菌株遗传性能稳定,营养要求粗放,工艺较简单,便于工业化,二年前已应用于工业生产。     

N~ 离子注入热带假丝酵母对长链二元酸产量的影响

用热带假丝酵母（Ｃａｎｄｉｄａ ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ）ＳＣＢ４１２作为出发菌株,经能量５０ＫｅＶ、剂量１× １０~１１～５ ×１０~１５ ｉｏｎｓ／ｃｍ~２的Ｎ~＋离子注入诱变处理,以产生可遗传的诱变。 Ｎ~＋离子注入后,存活率与剂量呈指数衰减关系：ｌｏｇ（存活率％）＝ ８．２３－ ０．６０４ × ｌｏｇ（剂量）,在培养过程中可观察到酵母菌菌落和细胞形态均发生了变化。经筛选,获得了一株能够利用正十二烷烃发酵产生长链二元酸的高产菌热带假丝酵母ＳＣＢ６０９。在初始正十二烷烃浓度为１５％（ｖ／ｖ）下产酸量由４３．５ｇ／Ｌ上升到７３．２ｇ／Ｌ。比较两株菌发酵生长特性的差异,产酸过程有一定的变化。     

真养产碱菌利用甜菜糖蜜发酵产聚β－羟基丁酸的研究

探讨了以廉价原料甜菜糖蜜培养真养产碱菌（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓｅｕｔｒｏｐｈｕｓ）Ｈ１６生产聚β－羟基丁酸（ＰＨＢ）的可行性。对培养基优化试验表明,菌体产量可达２０ｇ／Ｌ,ＰＨＢ产量达９．８ｇ／Ｌ,糖转化率为２７．５％。用２升自控发酵罐进行验证,在良好的供氧条件和特定的ｐＨ值自控条件下发酵周期从４８小时缩短到４０－４２小时,菌体和ＰＨＢ量都有提高。菌体最高产量２６ｇ／Ｌ,ＰＨＢ最高产量１３ｇ／Ｌ,糖转化率为２０．４％。ＰＨＢ占细胞的含量,摇瓶和罐上结果都在５０％左右。     

细菌产木聚糖酶发酵条件的研究*

研究了碳源、氮源以及其他因子对木聚糖酶高产菌ＷＬＵＮ０２４（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ．）产酶的影响,结果表明在麸皮６ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４ ０．８ｇ／Ｌ、Ｋ２ＨＰＯ４ ０．４ｇ／Ｌ、接种量５％－１０％的条件下,３７℃培养３６ｈ,其木聚糖酶活力可达６００ＩＵ／ｍＬ。同时研究了在较优条件下该菌的摇瓶产酶曲线。     

黑曲霉产木聚糖酶发酵条件的研究

正交设计试验结果表明,黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ ｍ１２）产木聚糖酶活力达７６．６０ｕ／ｍｌ,合适的产酶发酵条件如下,培养基（ｇ／Ｌ）：麸皮４０,尿素６．６７,ＫＨ２ＰＯ４ １．０,ＭｇＳＯ４．７Ｈ２Ｏ０．５,ＮａＣｌ０．３,Ｔｗｅｅｎ－８０ ３．０,ＣａＣＯ３ ２．０,２８℃,１２０ｒ／ｍｉｎ水浴振荡培养５．５ｄ。     

温特曲霉转富马酸为L—苹果酸的初步研究

从大量霉菌在选育到一株具有较高富马酸酶活性的温特曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｗｅｎｔｉｉ）Ａ５－６１。在摇瓶培养条件下,３２℃ ９６小时,产Ｌ－苹果酸达１０．４９ｇ／１００ｍｌ,对富马酸的转化率达９０．８０％。利用菌体细胞,进行酶转化试验,结果表明：１．６ｇ湿菌体接入２５ｍｌ含富马酸１０．０％（用ＮａＯＨ中和至ｐＨ７．０）的转化液中,３５℃１６－２４小时,连续转化三次,分别产生Ｌ－苹果酸９．６１     

PGDH^L生化突变型谷氨酸生产菌株选育的生化模式

以Ｔｂｍ－３（ｉｃｌ＾－,异柠檬酸裂解酶活力的生化突变株）为出发菌株,经紫外一诱变,通过依据生人代谢所设计的选择培养基（Ｌ－阿拉伯糖平板与Ｄ－葡萄糖酸钠平板）对接的筛选方法,获得磷酸葡萄糖酸脱氢酶（ＰＧＤＨ,Ｅ．Ｃ．４．２．１．１２）忖突变型的生化突变型菌株Ｔｂｍ３．１８,该菌株经摇瓶发酵试验显示,比出发菌株Ｔｂｍ－３提高产酸率８．９％和转化率８．１％,表明ｐｇｄｈ或ｐｇｄｈ生在变型菌株的选育,对     

真养产碱菌利用甜菜糖蜜发酵产聚β—羟基丁酸的研究

探讨了以廉价原料甜菜糖蜜培养真养产碱菌Ｈ１６生产聚β－羟基丁酸（ＰＨＢ）的可行性。对培养基优化试验表明,菌体产量可达２０ｇ／Ｌ,ＰＨＢ产量达９．８ｇ／Ｌ,糖转化率为２７．５％。用２升自控发酵罐进行验证,在良好的供氧条件和特定的ｐＨ值自控条件下发酵周期从４８小时缩短到４０－４２小时,菌体和ＰＨＢ量都有提高。菌体最高产量２６ｇ／Ｌ,ＰＨＢ最高产量１３ｇ／Ｌ,糖转化率为２０．４％。ＰＨＢ占细胞的含量,摇     

L-谷氨酸温度敏感突变株的选育

采用黄色短杆菌TJ1为出发菌株,根据代谢控制发酵原理,利用紫外线、硫酸二乙酯进行诱变,定向选育出具有寡霉素抗性、谷氨酸氧肟酸盐抗性的温度敏感突变株TMGO106。然后,以温度敏感突变株TMGO106和产酸率高（10.5%以上）的天津短杆菌TG961为新株,通过原生质体融合技术,成功地选育出了产酸率高的融合子CN1021（13．6g/dl,糖酸转化率达60％）,在6m^3发酵罐上中试其L－谷氨酸产量达14．6％,糖酸转化率达62．8％,并且该菌株系温度敏感型菌株,可用于谷氨酸强度发酵。     

d－生物素代替玉米浆发酵生产谷氨酸的研究

用ｄ－生物素代替玉米浆的摇瓶发酵实验,筛选出高产酸菌株,测定了ｄ－生物素的亚运量可变范围。比较了单一玉米浆、单一ｄ－生物素与两者各半量发酵结果及不同接种量对产酸的影响。采用ｄ－生物素代替半量玉米浆的中糖发酵工艺应用于生产。结果证明此工艺可行,降低了成本,提高了产酸率,平均产酸率达７．８１％,平均转化率达５３．２％。     

米曲霉Aspergillus oryzae发酵生产曲梭的研究

分离到Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ１３个菌株,其曲酸产量变化幅度１６．６－４８．６ｍｇ／ｍｌ,从中选出４个高产菌株。在１％酵母提取物和１５％蔗糖培养液中３０℃发酵培养,８￣１０天菌体生长量和曲酸产量达到最大值,随后曲酸产量迅速下降。蔗糖浓度对菌体生长和曲酸产量影响甚大,最适蔗糖浓度为１５％。天冬氨酸、甘氨酸、赖氨酸、谷氨酸、吡哆醇、叶酸和抗坏血酸有利于菌体生长并显著提高曲酸产量。将在ＹＥＳ     

L—苹果酸产生菌筛选及高产突变株诱变选育

通过广泛收集和分离,获得根霉属、曲霉属及裂褶菌属等属菌侏８９７侏。产酸指示平板上的变色圈测定结果表明,它们中间６２８株为产酸菌。通过纸层析对产酸菌发酵液酸谱的分析,获得１２９株Ｌ－苹果酸产生菌,经进一步测定发酵液中Ｌ－苹果酸的含量,筛选出以葡萄糖为原料,摇瓶发酵１４０小时,Ｌ－苹果酸产率４８．３７ｇ／Ｌ,对糖转化率４８．３７×１０＾－２的菌株ＬＭ０２。经初步鉴定,这一菌株为曲霉。以ＬＭ０２作为出发