槲皮素对人脑胶质瘤干细胞生物学行为及miR-29s家族的影响分析

目的探讨槲皮素对人脑胶质瘤干细胞生物学行为及微小RNA-29s(miR-29s)家族的影响。方法采用悬浮细胞培养人脑胶质瘤SHG44干细胞。根据槲皮素浓度不同分为0μg/ml(对照组),6μg/ml组、12μg/ml组、24μg/ml组、48μg/ml组、96μg/ml组,采用MTT法检测人脑胶质瘤SHG44增殖活性。用0μg/ml、12μg/ml、24μg/ml、48μg/ml培养48 h,采用细胞迁移实验和细胞侵袭实验检测细胞迁移数目和细胞侵袭数目;采用RT-PCR检测miR-29s家族表达。结果培养24 h和48 h,槲皮素各组抑制率高于对照组,且随着浓度增加抑制率不断增加,差异均有统计学意义(P 0. 05);培养48 h,槲皮素各组抑制率高于培养24 h,差异均有统计学意义(P 0. 05)。与对照组比较,槲皮素各组细胞迁移数目和细胞侵袭数目减少,差异均有统计学意义(P 0. 05);槲皮素48μg/ml组细胞迁移数目和细胞侵袭数目少于12μg/ml组和24μg/ml组,且24μg/ml组少于12μg/ml组,差异均有统计学意义(P 0. 05)。与对照组比较,槲皮素各组miR-29a和miR-29b表达升高,差异均有统计学意义(P 0. 05);槲皮素48μg/ml组miR-29a和miR-29b表达高于12μg/ml组和24μg/ml组,且24μg/ml组高于12μg/ml组,差异均有统计学意义(P 0.05)。结论槲皮素对人脑胶质瘤干细胞SHG44具有良好抑制作用,且具有剂量依赖性,降低体外迁移及侵袭能力,及促进miR-29a和miR-29b表达。     

血必净注射液对脓毒症肾脏损伤大鼠一氧化氮及其合酶作用的影响

目的 观察血必净注射液对脓毒症大鼠血浆及肾组织一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(iNOS)水平的影响,探讨血必净注射液的肾保护作用.方法 采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症动物模型.健康雄性SD大鼠40只被随机分为正常对照组(n=8)、假手术组(n=8)、模型组(n=12)、血必净组(n=12).术后6 h留取标本,采用生化法测定血浆和肾组织NO含量及iNOS活性,光镜下观察肾脏形态学变化,透射电镜下观察肾脏超微结构变化.结果 模型组血浆和肾组织NO含量[血浆:(94.00±15.18)μmol/L,肾:(0.50±0.07)μmol/g]及iNOS活性[血浆:(6.19±0.82)U/ml,肾:(0.20±0.02)U/mg]均明显高于正常对照组[血浆NO:(52.52±13.61)μmol/L,iNOS(3.69±0.89)U/ml;肾NO:(0.32±0.07)μmol/g,iNOS:(0.16±0.01)U/mg]和假手术组[血浆NO:(51.49±19.00)μmol/L,iNOS:(3.26±1.00)U/ml;肾NO:(0.35±0.04)μmol/g,iNOS:(0.16±0.02)U/mg,P均<0.01];血必净组血浆和肾组织NO含量[血浆:(77.16±14.49)μmol/L,肾:(0.43±0.03)μmol/g]及iNOS活性[血浆:(4.48±0.93)U/ml,肾:(0.18±0.02)U/mg]均明显低于模型组(P<0.05或P<0.01);正常对照组与假手术组各项指标比较差异无统计学意义(P均>0.05).光镜及电镜下观察假手术组肾小球、肾小管结构基本正常;模型组肾脏损伤明显;血必净组肾脏损伤较模型组显著减轻.结论 NO和iNOS在脓毒症大鼠肾损伤发病过程中发挥了重要的作用,血必净注射液干预治疗可使血浆及肾组织中NO含量和iNOS活性下降,并可使肾脏损伤减轻,对肾脏具有保护作用.     

慢性乙肝病毒感染者的甲状腺素结合球蛋白

作者检测了231例HBsAg阳性的慢性肝病患者之血浆甲状腺素结合球蛋白(TBG)。结果,正常对照组血清TBG 为22.4±4.5μg/ml,肝细胞癌(HCC)、慢活肝(CAH)及活动性肝硬化者的血清TBG 水平分别为44.2±15.2μg/ml、45.2±13.5μg/ml 及41.5±11.5μg/ml,均高于正常及其他疾病组(p<0.01)。     

血清血小板生成素及血浆糖萼蛋白浓度是血小板减少性疾病有用的诊断标志

作者应用酶联免疫吸附法测定了5例骨髓增生异常综合征(MDS),2例再生障碍性贫血(AA),和6例原发性血小板减少性紫癜(ITP)患者的血清血小板生成素(TPO)和血浆糖萼蛋白(GC)的浓度。患者在研究前均未接受治疗。结果,血清TPO水平MDS患者(16.9±8.2fmol/ml)和AA患者(40.7±7.4fmol/ml)均高于健康对照者(0.76±0.32fmol/ml),而在ITP患者,TPO水平(1.7±1.1fmol/ml)减低,但尚处于正常范围。血浆GC浓度MDS患者(0.18±0.12μg/ml)和AA患者(0.08μg/ml)均明显低于健康对照者(1.40±0.25μg/ml),而ITP患者(0.93±0.24μg/ml)处于正常水平。     

冠心病患者血浆凝血酶激活的纤溶抑制物的检测及其临床意义

目的　检测正常人群血浆中 TAFI:Ag和 TAFI:A的水平 ,确立正常人血浆中 TAFI:Ag和TAFI:A的参考值范围及其在冠心病患者血浆中的变化。方法　应用 ELISA方法测定 34名正常人、1 9例冠心病患者及 1 5例 DIC患者血浆中 TAFI:Ag的含量 ,应用发色底物法检测血浆中 TAFI:A的水平。对正常人、冠心病患者血浆中 TAFI:Ag和 TAFI:A的含量进行对照分析。结果　正常人 TAFI:Ag平均值为 ( 77± 2 8) % ,参考值范围为 2 1 %～ 1 33% ,TAFI:A平均值为 ( 2 4± 5 ) μg/ml,参考值为 1 4～ 34μg/ml。冠心病患者血浆中 TAFI:Ag为 ( 1 5 6± 32 ) % ,TAFI:A为 ( 4 3± 7) μg/ml。结论　正常人血浆中的TAFI:Ag含量具有很大变异性 ,正常人 TAFI的活性与 TAFI抗原含量呈剂量相关性 ,冠心病患者血浆中 TAFI:Ag和 TAFI:A显著增高 ,表明 TAFI在冠心病发病中起一定作用。     

慢性乙肝患者HLA-DRB1*07与IFN-γ、IL-4的检测及其意义

目的 :探讨广东地区汉族慢性乙型肝炎病毒患者HLA DRB1 0 7与Th1/Th2因子表达水平的相关性。方法 :收集 12 0名广东地区汉族慢性乙肝患者新鲜抗凝血各 8ml ,通过序列特异性引物套式PCR (PCR SSP)方法进行HLA DRB1 0 7检测 ,并同时用双抗体夹心法检测患者治疗前后外周血CD 4 T细胞分泌IFN γ、IL 4的水平。结果 :12 0例慢性乙肝患者中HLA DRB1 0 7携带者 31名 ,携带率为 2 5 8% ,明显高于广东地区汉族人群的平均携带率 7 84% ;HLA DRB1 0 7阳性患者IFN γ平均表达水平为 ( 1132 0 4± 75 36)pg/ml ,IL 4平均表达水平为( 876 79± 47 5 3)pg/ml ;HLA DRB1 0 7阴性患者IFN γ平均表达水平为 ( 12 32 10± 198 13)pg/ml ,IL 4平均表达水平为 ( 681 99± 61 5 9)pg/ml。HLA DRB1 0 7阳性患者IL 4表达水平高于阴性患者 (P <0 0 5 ) ,而IFN γ表达水平与阴性患者差异无统计学意义 (P >0 0 5 )。结论 :HLA DRB1 0 7( )慢性乙肝患者Th2因子表达水平高于HLA DRB1 0 7( -)慢性乙肝患者     

血浆D-二聚体检测在肺栓塞诊治中的应用

目的 通过对大连市第二人民医院急诊和呼吸内科就诊患者的血浆D-二聚体进行定量检测和分析,确立D-二聚体检测对于肺栓塞诊断和治疗的临床意义.方法 采用法国stago公司生产的全自动血凝仪及其配套试剂,利用免疫比浊法的原理,对患者血浆D-二聚体进行定量检测.结果 经实验发现,确诊为肺栓塞的45例患者血浆D-二聚体结果为(1.86±0.29)μg/ml高于正常临界值(0.5μg/ml);治疗4 d后血浆D-二聚体结果为(0.8±0.24)μg/ml,比治疗前降低;7d后测量的血浆D-二聚体结果为(0.45±0.19)μg/ml,基本恢复正常.结论 血浆D-二聚体升高是肺栓塞发生的敏感指标,同时也可作为观察肺栓塞治疗效果的指标.     

两个家庭亲/子代RhD血型差异的RHD基因型分析

目的　为中国汉族人群RhD(- )个体遗传规律和RHD基因结构研究提供资料。方法　采用 3个厂家不同批号的ABO、Rh抗血清和HLA单克隆抗体血清 ,分别对两个家庭的 7位个体进行ABO、Rh血型检定和HLA A、B、DR、DQ抗原配型 ;并对其RhD(+)父母和RhD(- )子女共 6位个体 ,采用PCR 序列特异性引物 (SSP)试剂 ,直接鉴定Rh血型基因。结果　两例表型RhD(- )的子代个体 ,PCR SSP法显示例 1为RHD基因全部缺如 ;例 2为RHD基因部分携带。结论　本研究显示了 2个中国汉族家庭亲 /子代RHD基因遗传的个体情况。     

用免疫毒素和4-HC体外处理新鲜白血病骨髓祖细胞的效果

作者报告对12例急性T淋巴细胞白血病患者的新鲜骨髓标本(原始细胞75—100%)的T系白血病祖细胞用三种纯化方案处理的临床前期研究结果。三种方案为:(1)用免疫毒素(IT,1μg/ml)处理(IT是把单克隆抗体抗-CD5和抗-CD 7结合到完整的蓖麻蛋白上,它对白血病T细胞毒性很强而对正常骨髓祖细胞毒性很弱;(2)用4-HC(4-过氧化环磷酰胺,100μg/ml)处理;(3)IT与4-HC联合处理。结果:患者骨髓经方案1体外处理后8/12例残余原始T细胞克隆;经方案2处理后6/9例残余原始T细胞克隆;8例骨髓经方案3处理后清除全部原始细胞克降。IT对正常髓系及红系的造血祖细     

HLA-DR4基因与广西地区汉族IgA肾病关联性的研究

目的研究HLA—DR4等位基因与广西汉族IgA肾病的关系。方法采用聚合酶链反应一序列特异性引物法(PCR-SSP),对30名广西汉族IgA肾病患者及60名汉族正常人的HLA—DR4基因频率进行检测。结果广西汉族IgA肾病组的HLA-DR4基因频率与正常对照组比较,差异无统计学意义。广西汉族HLA—DR4基因阳性IgA肾病患者的临床、病理预后指标与广西汉族HLA—DR4基因阴性IgA肾病患者无明显差异。结论HLA—DR4基因与广西汉族IgA肾病的发病无关。     

人白细胞抗原-DRB基因多态性与特应性皮炎易感性的相关性研究

目的寻找特应性皮炎(AD)患者易感的人白细胞抗原(HLA)基因型,分析该易感基因的单链构象多态性与正常人的差别.方法用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)检测122例AD患者和80名健康献血员的HLA-DRB等位基因型,并分析该易感基因的单链构象多态性.结果外源性AD组和AD合并哮喘及变应性鼻炎组HLA-DR3与正常对照组比较,基因频率升高(RR＝5.27和3.59,均P<0.05),而HLA-DR6基因频率降低(RR＝0.10和0,均P<0.05),而HLA-DR3阳性的16例AD患者中,仅1例的单链构象多态性与正常人不同.结论HLA-DR6是AD的抗性基因,携带有HLA-DR6的个体较不易患AD,而HLA-DR3是易感基因,携带有HLA-DR3的个体,较易患AD,而携带HLA-DR3基因的个体与正常人比较无碱基差别.     

新型布尼亚病毒感染患者凝血功能异常及其临床意义

目的探讨新型布尼亚病毒感染后患者发热伴血小板减少症状(SFTS)发病期和恢复期的凝血和血栓相关指标及其临床意义。方法选择2020年4月12日至8月12日在安徽医科大学第一附属医院收治的新型布尼亚病毒感染后SFTS患者,其中SFTS发病期36例,SFTS恢复期18例,并招募36名健康人作为健康对照组,采集血浆标本。回顾性分析血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原含量(FIB)、血浆凝血酶时间(TT)、抗凝血酶-Ⅲ(AT-Ⅲ)、纤维蛋白降解产物(FDP)、D-二聚体(D-D)、血栓调节蛋白(TM)、凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)、纤溶酶-α2纤溶酶抑制物复合物(PIC)、组织型纤溶酶原激活剂-抑制剂1复合物(t-PAIC)浓度。统计比较3组间上述指标的差异。结果与健康对照组比较,SFTS发病组PT[12.5(12.1,13.6)s比10.8(10.5,11.5)s,P<0.05]较长,但仍在正常参考值范围内(14.0~21.0 s);APTT[49.1(42.0,58.2)s比28.5(26.6,30.4)s,P<0.05]较长;FDP[6.07(2.67,8.64)μg/ml比1.00(0.80,1.87)μg/ml]和D-D[2.27(1.04,2.98)μg/ml比0.30(0.21,0.47)μg/ml]较高(P均<0.001);血浆TAT[16.05(8.05,26.58)ng/ml比3.55(2.60,4.85)ng/ml]和PIC浓度[4.44(2.52,5.54)μg/ml比0.84(0.60,1.35)μg/ml]较高(P均<0.001);TM[(19.41±8.29)TU/ml比(9.33±1.89)TU/ml]和t-PAIC浓度[(37.52±21.10)ng/ml比(7.06±3.37)ng/ml]较高(P均<0.001)。SFTS恢复组患者血浆中TAT浓度为9.10(3.95,18.40)ng/ml,仍高于正常参考范围(<4 ng/ml),PIC浓度低于SFTS发病组[1.91(1.45,2.93)μg/ml比4.44(2.52,5.54)μg/ml,P<0.05],TM和t-PAIC低于SFTS发病组(P均<0.05)。结论SFTS患者发病期机体凝血系统激活,血管内皮受到损伤;恢复期血管内皮损伤情况减轻,但机体依然存在一定程度的凝血系统障碍,提示当体内病毒清除后,仍需继续监测凝血指标。     

注射丈夫的淋巴细胞治疗原因不明的流产

本文报道治疗原因不明流产的一种新方法.接受治疗的32例中,28例(87.5%)妊娠成功;对照组35例,9例妊娠成功.两组比较,有显著性差异(P<0.01).对22例接受治疗的妇女血清进行了HLA-DR抗体检测,治疗前均为阴性,治疗后12例(54.5%)阳性,妊娠期14例(63.6%)阳性.9对夫妇HLA分型.仅2对夫妇有1个DR位点相同的抗原.检测7例免疫后的妇女血清,其中4例有针对丈夫HLA特异性抗体的抗个体基因型抗体.     

右美托咪定与咪达唑仑对老年患者呼吸抑制时异丙酚EC_(50)的影响

目的研究右美托咪定与咪达唑仑对老年患者呼吸抑制时异丙酚的半数有效浓度(EC50)的影响。方法选择硬膜外麻醉下行下肢手术的老年患者,年龄65⁸0岁,性别不限,ASAⅠ80岁,性别不限,ASAⅠ^Ⅱ级,随机分为三组,D组、M组和C组分别静脉泵注右美托咪定0.4μg/kg、咪达唑仑0.03 mg/kg和生理盐水。之后开启靶控输注(TCI)异丙酚,D组、M组和C组第1例患者的血浆靶浓度分别设定为1.4μg/ml、1.2μg/ml和2.2μg/ml。根据呼吸抑制的发生情况确定下1例血浆靶浓度,相邻靶浓度的比值为1.1。计算出三组异丙酚TCI时患者呼吸抑制的EC50。结果 D组、M组和C组呼吸抑制时异丙酚EC50分别为1.64μg/ml(95%可信区间为1.52Ⅱ级,随机分为三组,D组、M组和C组分别静脉泵注右美托咪定0.4μg/kg、咪达唑仑0.03 mg/kg和生理盐水。之后开启靶控输注(TCI)异丙酚,D组、M组和C组第1例患者的血浆靶浓度分别设定为1.4μg/ml、1.2μg/ml和2.2μg/ml。根据呼吸抑制的发生情况确定下1例血浆靶浓度,相邻靶浓度的比值为1.1。计算出三组异丙酚TCI时患者呼吸抑制的EC50。结果 D组、M组和C组呼吸抑制时异丙酚EC50分别为1.64μg/ml(95%可信区间为1.52¹.78μg/ml)、1.18μg/ml(95%可信区间为1.151.78μg/ml)、1.18μg/ml(95%可信区间为1.15¹.21μg/ml)和2.35μg/ml(95%可信区间为2.191.21μg/ml)和2.35μg/ml(95%可信区间为2.19².51μg/ml)。D组、M组的EC50明显低于C组,M组低于D组。结论右美托咪定和咪达唑仑均能降低老年患者呼吸抑制时异丙酚的EC50,右美托咪定降低异丙酚的EC50的幅度显著小于咪达唑仑。     

应用免疫球蛋白重链可变区上框架区来源的抗原九肽获得的细胞毒T细胞功能分析

目的明确存B淋巴细胞肿瘤表面的免疫球蛋白重链可变区(IgHV)的框架区(FR)上是否存在可以激发细胞毒T淋巴细胞(CTL)的抗原表位，这些来源于FR的抗原肽是否能够激发家族特异性的免疫反应，探讨按照B淋巴细胞肿瘤的IgHV基因分型进行家族性的免疫治疗的可能性，方法利用生物信息学系统预测了40例B淋巴细胞肿瘤表面的免疫球蛋白序列的抗原表位，人工合成不同基因家族的抗原几肽，利用1、2细胞结合实验检测预测的抗原肽和HLA分子的亲合力利用体外CTL刺激扩增体系。诱导特异性的CTL细胞增殖，用肽／HLA四聚体检测特异性CTL的数目，应用LDH释放实验检测CTL的细胞毒活性并验证其家族特异性。结果在B淋巴细胞肿瘤的7个IgHV基因家族中找到了12个高亲和力的抗原九肽，其中10个(83％)位于FR，以HLA-A*0201正常供的外周血单个核细胞(PBMNC)负荷该九肽作为抗原呈递细胞去刺激自身PBMNC，经过4轮刺激，CD8和肽／HLA四聚体双阳性细胞从0．38％上升到49．38％LDH释放实验证明对HLA—A*0201( )、IgHV1( )靶细胞有明显的杀伤作用，并且被IgHV1肽刺激出的CTL不能识别负荷IgHV3肽的靶细胞：结论IgHV基因FR抗原儿肽可以刺激产生具有HLA限制性的并且肽特异性的CTL，同时这样的杀伤作用具有家族特异性，以此为靶位有望对B淋巴细胞肿瘤进行家族特异性的免疫治疗。     

大肠癌CA-50的临床意义

CA-5是1983年Lindholm 等发现的肿瘤标记物,用大肠癌细胞株colo-205作为抗原制成了单克隆抗体。本文作者收集了健康人67例(男35、女32例)和大肠癌术前患者46例(男女各23例,Ⅱ期15例、Ⅱ期11例、Ⅲ期5例、Ⅳ期5例和Ⅴ期10例)的血清,应用固相酶免疫分析法,研究了大肠癌患者CA-50的临床意义,同时对CA-50、CA19-9和CEA 进行了比较。结果:健康人CA-50平均值为10.6±6.1u/ml其中男性为8.6±5.3u/ml(0.8～21.0),女性为12.9±6.2μ/ml(2.0～27.0)。大肠癌患者平均值为31.7±55.2u/ml,其中男性为26.9±63.7μ/ml     

过敏性支气管哮喘患者血浆中IgE及IL-4的实验研究

对25例急性哮喘发作患．21例哮喘缓解期患及22例正常人分别检测其血浆IgE及IL-4，哮喘发作组IgE平均值为1271．844IU/ml．缓解组平均为345．214/ml．对照组平均值为142150IU/ml。且各组之间比较有显性差异(P<0.01），但各组IgE水平未发现和性别有关（P>0.05)哮喘发作组血浆IL-4平均值为37.2．ng/L．缓解组血浆IL-4平均值为35.4ng／L，对照组平均值为20.2ng／L。各组间IL-4比较无显性差异(P>0.05)．但IgE变化同IL-4增高有明显联系。     

FDP D-二聚体测定的临床应用

目的通过对不同疾病进行FDP D-二聚体(D-Dimer)的检测,探讨FDP D-Dimer在临床治疗和观察中的应用.方法以抗FDPD-Dimer特异性单克隆抗体标记乳胶颗粒,后者与待测血浆混合.当血浆中FDP含量≥5μg/ml,D-Dimer含量≥0.5μg/ml时,标记的乳胶颗粒则发生凝集呈现阳性反应.结果 DIC时,血浆FDP D-Dimer明显增高,呈阳性反应,要结合临床表现警惕DIC前状态的存在.D-Dimer在原发性纤溶时正常,继发性纤溶亢进时显著增高,是两者鉴别的重要指标.此外,急性粒细胞白血病,急性心梗,急性脑梗,肺栓塞,病毒性肝炎等均可见血浆FDP D-Dimer水平增高.深静脉血栓病人FDP D-Dimer 100%阳性,可作为溶栓治疗用药的指导及疗效观察.结论 FDP D-Dimer对高凝状态和血栓性疾病的诊断有重要意义,可作为血管内凝血,纤溶和血栓形成的标志物.     

免疫酶联抑制法对血清和尿中游离K轻链含量测定的评价

本文介绍了以生物素化的抗人游离κ链单克隆抗体为基础建立了一种酶免疫抑制测定法。这种单克隆抗体能同不与重链连结的人κ轻链单体和双体特异地结合。作者收集了13例κ链和5例(?)链骨髓瘤患者的血清和尿液标本(血和尿同时采取),正常人血清和尿液至少由5名健康献血员提供,用此法对其作了游离κ链含量的测定。测定结果如下:健康成人血清和尿中游离κ链的正常值分别是0.8-7.5μg/ml(平均1.2)和3-8μg/ml(平均4.9)。κ型骨髓瘤患者组血清游离κ链的含量范围为2-1700μg/ml,λ型骨髓病人的κ链含量都在正常范围内。本法是用纯化的κ链作标准;最小检出量是0.5μg/ml;还与临床免疫科电泳技术获得的结果作了对照,免疫电泳法检出BJP的病例,     

HLA-A Bw4表位与HIV-1病毒载量和CD+4T淋巴细胞计数关系的研究

目的 研究含Bw4表位的HLA-A抗原在HIV-1感染者疾病进展中的作用.方法 应用高分辨率人类白细胞抗原(HLA)分型方法对340例HIV-1感染者进行HLA-A和HLA-B位点的等位基因分型,确定Bw4表位的携带情况,分析HLA-A和HLA-B携带Bw4表位与感染者CD4+4T淋巴细胞计数和血浆病毒载量的关系.结果 与不携带Bw4者(0Bw4)(CD+4T淋巴细胞计数:中位数294个/μ1,病毒载量:中位数6.29×104拷贝/m1)相比,1Bw4-A基因型者和2Bw4-AA基因型者的CD+4T淋巴细胞计数水平(分别为307和308个/μ1)基本相当,而病毒载量(分别为1.53×105和2.68×105拷贝/ml)有增高趋势.与不携带Bw4表位的感染者相比,仅在HLA-B抗原中含Bw4表位的HIV-1感染者的CD+4T淋巴细胞计数(417:个/μ1)显著增高(P=0.013),而病毒载量(2.10×104拷贝/ml)显著降低(P=0.007).结论 含有Bw4表位的HLA-B抗原在HIV-1感染中具有延缓疾病进展的作用,而含有Bw4表位的HLA-A抗原对HIV-1感染者未见保护性作用.