噻萘普汀对吗啡处理大鼠内源性焦虑物质-苯甲二氮(艹卓)结合抑制因子mRNA表达的影响

目的:研究抗抑郁药噻萘普汀能否影响吗啡处理大鼠脑内内源性焦虑物质-苯甲二氮(艹卓)结合抑制因子(diazepam bindinginhibitor,DBI)mRNA的表达.方法:15只SD大鼠(四川大学动物实验中心提供),随机进入吗啡+生理盐水组、吗啡+噻萘普汀组和生理盐水组,每组5只.按照剂量递增每12 h给大鼠腹腔注射盐酸吗啡(10～80mg/kg,共10次),每次注射吗啡前0.5 h注射噻萘普汀(15 mg/kg),对照组给予同体积的生理盐水,各组于末次吗啡注射后2h,给与腹腔注射盐酸纳洛酮2mg/kg,促发戒断,2h后处死大鼠,提取脑内总RNA,进行RT-PCR,检测DBI mMRNA的表达.结果:吗啡+噻萘普汀组DBI mRNA表达(0.52±0.08)明显少于吗啡+生理盐水组(0.91±0.08),差异有显著性意义q=15.631 P＜0.01);与生理盐水组(0.40±0.06)差异无显著性意义(q=1.992,P＞0.05).结论:噻萘普汀能够影响吗啡处理大鼠脑内DBI mRNA的表达.     

噻萘普汀对吗啡处理大鼠内源性焦虑物质—苯甲二氮结合抑制因子mRNA表达的影响

目的:研究抗抑郁药噻萘普汀能否影响吗啡处理大鼠脑内内源性焦虑物质-苯甲二氮结合抑制因子(diazepambindinginhibitor,DBI)mRNA的表达。方法:15只SD大鼠(四川大学动物实验中心提供),随机进入吗啡+生理盐水组、吗啡+噻萘普汀组和生理盐水组,每组5只。按照剂量递增每12h给大鼠腹腔注射盐酸吗啡(10～80mg/kg,共10次),每次注射吗啡前0.5h注射噻萘普汀(15mg/kg),对照组给予同体积的生理盐水,各组于末次吗啡注射后2h,给与腹腔注射盐酸纳洛酮2mg/kg,促发戒断,2h后处死大鼠,提取脑内总RNA,进行RT-PCR,检测DBImMRNA的表达。结果:吗啡+噻萘普汀组DBImRNA表达(0.52±0.08)明显少于吗啡+生理盐水组(0.91±0.08),差异有显著性意义q=15.631P<0.01);艹卓与生理盐水组(0.40±0.06)差异无显著性意义(q=1.992,P>0.05)。结论:噻萘普汀能够影响吗啡处理大鼠脑内DBImRNA的表达。     

脊髓蛛网膜下腔植入海藻酸钠微囊化阿片肽能细胞对吗啡依赖大鼠戒断反应的影响

目的：观察海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊化阿片肽能细胞(alginate-polylysine-alginate microcapsule of spium peptide cell／B-1．A-PA-OPC／B-1)脊髓蛛网膜下腔移植后对吗啡依赖大鼠戒断反应的影响，证实APA-OPC／B-1对药物依赖所产生戒断症状的改善作用。方法：取成年健康雄性Wtstar大鼠35只，采用逐日多次增量注射吗啡的方法，造成吗啡依赖性模型大鼠，其中26只模型建立成功。将模型大鼠随机分为APA-OPC／B-1组(n=13)，美沙酮组(n=5)和生理盐水组(n=8)。在腹腔注射纳洛酮催瘾后，观察不同药物治疗组模型大鼠的戒断症状评分，体质量下降值，大鼠血液一氧化氮和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)水平变化。结果：APA-OPC／B-1组的模型大鼠体质量下降值[24h：(22．36&;#177;3．12)＆48h：(19．06&;#177;2．56)g，72h：(17．94&;#177;3．56)g,96h：(15．25&;#177;4．01)g]及第2次催瘾时戒断症状评分[(6．81&;#177;0．26)分]明显低于与生理盐水组[24h：(34．13&;#177;4.46)g，48h：(29.87&;#177;5．69)g，72h：(24．54&;#177;5．01)g，96h：(25．20&;#177;4．68)g，(7．63&;#177;0．48)分](t=-7．14- -3．54，P&;lt;0．01)。APA-OPC／B-1组的模型大鼠两次催瘾后戒断症状评分与美沙酮组比较，差异也有显著性意义(t=4．87～8．72．P&;lt;0．01)。吗啡依赖大鼠在给予美沙酮后1，48及96h时，其血液一氧化氮和SOD水平显著高于生理盐水组(P&;lt;0．01)；吗啡依赖大鼠植入APA-OPC／B-1后1，48及96h时血液中一氧化氮和SOD水平显著高于生理盐水组(P&;lt;0．05—0．01)；而吗啡依赖大鼠植入APA-OPC／B-1后1，48h及96h时血液中一氧化氮和SOD水平显著低于美沙酮组(P&;lt;0．05-0.01)。结论：APA-OPC／B-1植入脊髓蛛网膜下腔具有减轻吗啡成瘾大鼠的戒断反应的作用。     

神经肽Y2受体促进大鼠学习记忆的机制

目的：观察双侧海马插管注射神经肽Y2受体的反义寡核昔酸对大鼠海马c-fos基因mRNA和蛋白表达的影响，探讨Y2受体在学习记忆中可能的作用机制。方法：双侧海马插管注射Y2受体的反义、错义寡核苷酸或生理盐水，应用RT-PCR和免疫组化方法检测大鼠海马中c-fos基因在跳台法训练后的表达水平变化。结果：①反义组大鼠海马珊基因mRNA表达水c-fos平23．40&;#177;8．87明显低于生理盐水组60．38&;#177;15．52和错义组53．14&;#177;11．71，差异有显著性意义(F=22．54，P&;lt;0．001)。但错义组与生理盐水组之间大鼠海马c-fos基因的mRNA表达水平差异无显著性意义，(P&;gt;0．05)。②反义组大鼠海马c-fos蛋白阳性细胞数在海马CA1，CA3和齿状回分别为16．33&;#177;6．18，27．00&;#177;9．72和109．67&;#177;23．44，均低于生理盐水组和错义组，而错义组与生理盐水组之间。c-fos蛋白表达水平差异无显著性意义。结论：神经肽Y2受体可能是通过调节。如c-fos基因的表达参与大鼠的记忆形成过程。     

胶质细胞源性神经营养因子对脑出血大鼠神经功能的保护作用

目的：研究胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic faetor，GDNF)对脑出血大鼠的保护作用，探讨其发生机制。方法：克隆胚胎鼠的GDNF基因，构建pCDNA3-GDNF-GFP质粒，注射于大鼠脑出血部位。选用成年SD大鼠制备脑出血模型，共分9组，每组20只，假手术Ⅰ组，脑出血Ⅰ组，干预Ⅰ组观察大鼠行为学、脑组织含水量、Na^+，K^+离子浓度的变化；假手术Ⅱ组，脑出血Ⅱ组，干预Ⅱ组观察血脑屏障的改变；假手术Ⅲ组，脑出血Ⅲ组。干预Ⅲ组观察组织形态学和GDNF。阳性细胞的表达。结果：出血组和干预组相比，神经缺损评分在出血后24h为8．53&;#177;1．44和8．34&;#177;1．28(P&;gt;0．05)，72h，7d，14d为7．58&;#177;1．08，5．46&;#177;0．74，3．06&;#177;0．43和4．21&;#177;0．76，3．25&;#177;0．52，1．92&;#177;0．26(P&;lt;0．01)。72h，7d时脑组织含水量为(84．26&;#177;0．64)％，(80．38&;#177;0．86)％和(78．26&;#177;0．42)％，(77．51&;#177;0．33)％(P&;lt;0．01)。72h，7d时Na^+，K^+离子浓度两组比较，差异有显著性意义(P&;lt;0．01)。干预组坏死体积较出血组减小，GDNF阳性细胞表达明显增加(P&;lt;0．01)。结论：GDNF能改善出血大鼠行为学，减轻脑水肿，促进神经功能恢复，增加脑组织抗损伤能力，有一定的治疗意义。     

大鼠脑组织经反复高加速度暴露后bcl-2，bax，p53和白细胞介素1β转化酶的表达

背景：反复高正加速度(+Gz)暴露可引起脑损伤，但其病理机制尚不清楚。目的：了解反复高正加速度(+Gz)暴露后大鼠脑组织中bcl-2，bax，p53和白细胞介素1β转化酶基因的表达变化，探讨细胞凋亡在反复高+Gz暴露所致脑损伤中的病理作用。设计：以SD大鼠为研究对象的随机对照实验研究。单位：一所医院的航空医学研究中心。材料：选用体质量为180～220g健康雄性SD大鼠26只，随机分成对照组和+Gz暴露组，其中对照组4只，+Gz暴露组22只。干预：将大鼠固定于动物离心机的转臂上，头朝向离心机轴心，+Gz暴露组条件为G值+14Gz，增长率1．5G／s，峰值持续时间45s，共作用3次，两次中间间歇0．5h。对照组大鼠亦在动物离心机上经历类似实验步骤，所承受的G值为+1Gz。分别于暴露后0．5，6．0，24．0和48．0h断头取脑。用半定量反转录聚合酶链反应方法检测对照组和+Gz暴露后0．5，6．0，24．0和48．0h大鼠脑组织中bcl-2，bax，p53和白细胞介素1β转化酶mRNA表达水平，并用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法检测脑组织中凋亡细胞。主要观察指标：各组大鼠+Gz暴露后大鼠脑组织中bcl-2，bax，p53和白细胞介素1β转化酶mRNA表达水平。结果：+Gz重复暴露后6h，大鼠脑组织bcl-2mRNA表达水平(0．32&;#177;0．08)明显低于对照组(0．69&;#177;0．15)，bax，p53和ICE mRNA表达水平[(．55&;#177;0．09)，(0．48&;#177;0．12)，(0．79&;#177;0．12)]明显高于对照组[(0．33&;#177;0．09)，(0．31&;#177;0．05)，(0．51&;#177;0．09)]，差异有显著性意义(P&;lt;0．01)。+Gz重复暴露后24h，大鼠脑组织bcl-2mRNA表达水平(0．28&;#177;0．05亦明显低于对照组(0．69&;#177;0．15)，bax，p53和ICEmRNA表达水平[(0．61&;#177;0．15)，(0．54&;#177;0．07)，(0．84&;#177;0．15)]亦明显高于对照组[(0．33&;#177;0．09)，(0．31&;#177;0．05)，(0．51&;#177;0．09)]，差异有显著性意义(P&;lt;0．01)。+Gz重复暴露后0．5h和48h，大鼠脑组织bcl-2，bax，p53和ICEmRNA表达水平与对照组比较，差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。+Gz重复暴露后6h和24h在大脑皮质、海马CA1区和纹状体可见部分神经元细胞发生凋亡。结论：反复高+Gz暴露可引起大鼠脑组织中bcl-2，bax，p53和白细胞介素1β转化酶表达变化，细胞凋亡可能是反复高Gz暴露致脑损伤的机制之一。     

噻萘普汀预处理对甲基苯丙胺神经毒性的影响

背景：甲基苯丙胺对中枢神经系统具有毒性，5-羟色胺再摄取增强剂噻萘普汀对甲基苯丙胺所致5-羟色胺能神经元的损害是否具有保护效应尚不清楚。目的：探讨甲基苯丙胺的神经毒性及噻萘普汀的神经保护作用和机制。设计：以动物为研究对象，随机对照的实验研究。单位：一所大学的动物研究室和病理研究室。材料：实验于2003-06／08在四川大学实验动物中心、四川大学华西医院分子病理实验室完成。选择Wistar雄性大鼠25只，腹腔注射甲基苯丙胺建模，甲基苯丙胺由中国药品生物制品检定所提供。噻萘普汀为法国施维雅药厂惠赠(批号0E3086)。脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记检测试剂盒购自Boehringer mannheim公司。干预：设立对照组和实验组(A，B，C，D)，A组腹腔注射甲基苯丙胺；B，C，D组分别在给予甲基苯丙胺前7，4d和同时给予噻萘普汀；对照组注射等体积生理盐水。实验后采用苏木精-伊红染色、银染色，光镜观察神经元形态学变化；脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测凋亡细胞。主要观察指标：各组动物脑组织切片苏木精-伊红染色、银染色结果和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记阳性神经元计数。结果：甲基苯丙胺可损害神经元的轴突、树突，银染阳性细胞吸光度为50．74&;#177;1.86；并诱导凋亡，每高倍视野凋亡细胞计数为29．26&;#177;14．14，噻萘普汀保护7d组的凋亡细胞形成较少，每高倍视野计数为18．90&;#177;1.60。结论：甲基苯丙胺通过诱导凋亡引起神经毒性；预先给予噻萘普汀具有神经保护效应。     

亚低温对缺血再灌注大鼠海马CA1区Bcl-2和Bax表达动态变化的影响

目的：研究脑缺血再灌注后全身亚低温的脑保护作用及其对Bcl-2和Bax表达的动态影响，探讨亚低温脑保护作用的机制。方法：实验于2002-01／12在江苏省麻醉医学研究所(省级重点实验室)完成。实验动物选择126只SD雄性大鼠随机分为假手术组、常温缺血组和亚低温缺血组。采用Pulsinelli四血管阻断法制作大鼠全脑缺血再灌注模型，即刻全身亚低温4h，分别在再灌注后4，8，24，48，72，96h，7d，7个时间点取脑标本，进行Bcl-2和Bax免疫组织化学及苏木精-伊红染色。结果：与常温组相比，全身亚低温组海马CA1区死亡细胞数明显减少[常温比亚低温24h：(195&;#177;18)比(214&;#177;20)个／mm，P&;lt;0．05；48h：(185&;#177;17)比(215&;#177;21)个／min．P&;lt;0．01；72h：(130&;#177;20)比(200&;#177;17)个／mm，P&;lt;0．01)]；Bcl-2蛋白免疫反应强度峰值增高，持续时间延长[灰度值：常温比低温：24h(40&;#177;8比57&;#177;8，P&;lt;0．01)；48h(42&;#177;6比55&;#177;8，P&;lt;0．01)；72h(38&;#177;4比41&;#177;6，P&;lt;0．01)]。Bax蛋白免疫反应强度峰值减低，持续时间缩短[灰度值：常温比低温24h(32&;#177;4比24&;#177;5．P&;lt;0．05)；48h(30&;#177;7比24&;#177;6，P&;lt;0．05)；72h(26&;#177;4比22&;#177;5，P&;lt;0．05)]。结论：全身亚低温对缺血性锥体细胞损害有较好的保护作用。可增强具有抗凋亡的Bcl-2蛋白的表达，延长其表达持续时间，而减弱具有促凋亡的Bax表达，同时缩短其表达持续时间，此可能是亚低温对缺血性脑组织损害产生保护作用的分子机制之一。     

NMDA受体在慢性吗啡处理大鼠伏隔核神经元突触可塑性改变中的作用

目的：探讨N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid，NMDA)受体在慢性吗啡处理大鼠伏隔核神经元突触可塑性中的作用。方法：将15只雄性Sprague-Dawley大鼠随机等分为吗啡组(腹腔注射吗啡，起始剂量5mg／kg，2次／d，逐日递增5mg,至第10天为50mg／kg)、干预组(每次注射吗啡前30min腹腔注射NMDA受体拮抗剂地卓西平0．075mg／kg)及对照组(注射同体积的生理盐水)。末次注射后6d处死取伏隔核并制作电镜标本，日立H-600透射电镜下测量神经元突触界面结构参数。结果：吗啡组大鼠伏隔核神经元突触活性区长度[(226.46&;#177;21．10)nm]及突触后致密物厚度[(43．50&;#177;5．44)nm]显著小于对照组[(319．30&;#177;13．40)nm，(58．70&;#177;4．95)nm](F=49.528，6．725；P均&;lt;0．01)；干预组大鼠突触后致密物厚度[(57．30&;#177;1.02)nm]显著大于吗啡组[(43．50&;#177;5.44)nm](P&;lt;0．05)，与对照组差异无显著性。结论：NMDA受体在慢性吗啡处理所导致的伏隔核神经元突触可塑性改变中有重要作用。     

早期高压氧治疗对大鼠创伤性脑水肿的影响

目的：观测早期高压氧治疗对创伤性脑水肿(traumatic brain edema，TBE)的影响，并探讨其作用机制。方法：采用Feeney氏法建立大鼠自由落体TBE模型，测量脑损伤后不同时期高压氧治疗组与未治疗组大鼠脑组织含水量百分比、乳酸的含量、乳酸脱氢酶(LDH)及Na^+-K^+-ATP酶活性的变化。分析两组间的差异及脑含水量百分比与各指标变化的相关性。结果：高压氧治疗组脑含水量及乳酸含量在不同时期均较致伤组有不同程度的下降[伤后48h：(79．46&;#177;0．64)％比(80．37&;#177;0．66)％，P&;lt;0．05及(3．551&;#177;0.206)mmol／g比(3．833&;#177;0．199)mmol／g，P&;lt;0．01)]，而LDH及Na^+-K^+-ATP酶的活性较致伤组明显提高[伤后48h：(128．066&;#177;2．248)mkat比(120．136&;#177;2．702)mkat，P&;lt;0．01及(1．443&;#177;0．219)mmol／(g&;#183;min)比(1．108&;#177;0．152)mmol／(g&;#183;min)，P&;lt;0．01]。脑含水量与Na^+-K^+-ATP酶、LDH及乳酸有显著相关性(r=-0．615，-0．670，0．689，P&;lt;0．05)。结论：早期高压氧治疗通过降低脑组织中乳酸含量，提高LDH及Na^+-K^+-ATP酶活性，改善脑组织细胞能量代谢，从而减少脑损伤后损伤脑组织含水量，减轻TBE。     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时血红素氧化酶-1mRNA及其蛋白的表达

探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemia brain damage。HIBD)后海马区血红素氧化酶-1(heine oxygenase-1，HO-1)mRNA和蛋白表达的变化及作用。方法：7d龄sD仔鼠72只，完全随机分为HIBD组和假手术对照组。用原位杂交及免疫组化观测两组在不同时间点海马区HO-1mRNA及蛋白阳性细胞数量的变化。结果：HIBD组右侧海马HO-1mRNA表达4h开始升高(42．8&;#177;6．1，t=25，P&;lt;0．05)，12h达高峰(85．7&;#177;6．4)，48h开始略有下降(67．7&;#177;6．1)，72h后(52．3&;#177;5．2)仍高于对照组(25．0&;#177;5．1，t=9．2，P&;lt;0．01)。HO-1蛋白的表达与HO-1 mRNA表达变化规律相一致。结论：HO-l mRNA及其蛋白表达的增加在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的发病机制中有重要作用。     

促红细胞生成素对大鼠脑组织缺血再灌注海马CA1区神经元的作用

目的：观察促红细胞生成素对缺血再灌注大鼠脑组织海马CA1区神经元数量以及凋亡细胞数量变化、热休克蛋白70表达的影响。方法：实验于2003—03／2004-12在解放军第三军医大学新桥医院中心实验室完成。选择健康清洁级Wistar大鼠66只，随机分为正常对照组6只、缺血再灌注生理盐水组30只(生理盐水对照组)、缺血再灌注促红细胞生成素组30只(促红细胞生成素治疗组)。线栓法制备大鼠大脑中动脉阻断局灶性脑缺血模型，缺血2h后再灌注，促红细胞生成素治疗组经腹腔按200U／b注入生理盐水稀释的重组人红细胞生成素(200U／mL)，生理盐水对照组经腹腔注入等量的生理盐水。再灌注后观察时相点为2，6，12，24，48h，应用苏木精-伊红染色观察脑海马CA1区细胞数量情况，应用末端脱氧核苷酸转移酶缺口标记法检测海马CA1区神经元凋亡情况，应用免疫组织化学法测定热休克蛋白70表达情况。结果：66只大鼠全部进入结果分析。①脑海马CA1区细胞的计数：生理盐水对照组再灌注后12，24，48h比正常对照组细胞数明显减少[(268．6&;#177;44．5)个／视野。(240．8&;#177;22．5)个／视野，(201．8&;#177;30．7)个／视野，(337．3&;#177;45．3)个／视野，t=2．845—5．587，P&;lt;0．01]，促红细胞生成素治疗组再灌注后12，24，48h比生理盐水对照组细胞数明显增加[(286．7&;#177;33．8)个／视野，(271．9&;#177;30．4)个／视野，(258．3&;#177;29．5)个／视野，t=3．189—5．589，P&;lt;0．01]。②脑海马CA1区凋亡细胞计数：生理盐水对照组再灌注后2，6，12，24、48h比正常对照组脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记阳性细胞数明显增多[(16．5&;#177;3．5)个／视野，(28．4&;#177;6．5)个／视野，(48．8&;#177;7．6)个／视野，(60．7&;#177;10．2)个／视野，(81．6&;#177;12．3)个／视野，(8．8&;#177;2．1)个／视野，t=2．985—6．324，P&;lt;0．01]，促红细胞生成素治疗组再灌注后2，6，12，24，48h比生理盐水对照组脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记阳性细胞数明显减少[(12．7&;#177;3．4)个／视野，(21．5&;#177;5．8)个／视野，(32．7&;#177;4．6)个／视野，(42．8&;#177;6．6)个／视野，(51．8&;#177;9．5)个／视野，t=3．457—6．347，P&;lt;0．01]。③脑海马CA1区热休克蛋白70表达水平：生理盐水对照组再灌注后2，6，12，24，48h比正常对照组热休克蛋白70表达明显增多(0．264&;#177;0．027，0．328&;#177;0．053，0．475&;#177;0．067，0．587&;#177;0．095，0．512&;#177;0．063，0．225&;#177;0．024，t=3．254—6．028，P&;lt;0．01)，促红细胞生成素治疗组再灌注后2，6，12h比生理盐水对照组热休克蛋白70表达明显增多(0．335&;#177;0．033，0．448&;#177;0．055，0．647&;#177;0．078，t=3．262—5．483．P&;lt;0．01)。结论：促红细胞生成素治疗可增加大鼠局灶性脑缺血再灌注组织海马CA1区细胞存活数量，对海马CA1区细胞凋亡具有阻抑作用，使热休克蛋白70表达上调，从而起到了对神经细胞的保护作用。     

实验性高血糖大鼠血糖水平与基础痛阈的关系

目的：研究链脲霉素所致实验性高血糖大鼠血糖变化与热痛阈和机械痛阈的关系。方法：将20只SD雄性大鼠随机分为两组，链脲霉素组(streptozotocin，STZ，n=10)和生理盐水组(n=10)两组，STZ组腹腔注射链脲霉素(50μg／kg)，生理盐水组腹腔注射生理盐水(0．06mL)。先对大鼠的热刺激缩足反应潜伏期(paw withdrawal thermal latency，PWTL)、机械刺激缩足反应阈值(paw withdrawal mechanical threshold，PWMT)进行行为学测试，随后采血测血糖。结果：链脲霉素所致高血糖大鼠血糖水平明显升高[(3．43&;#177;0．10)mmol／L和(9．03&;#177;0．46)mmol／L，P&;lt;0．001]，机械刺激缩足反应阈值降低[(12．98&;#177;2．19)g和(7．21&;#177;1．26)g，P&;lt;0．01]，而热刺激缩足反应潜伏期未发生明显变化[(13．63&;#177;1．65)s和(15．31&;#177;0．95)s．P&;gt;0．05]。生理盐水组血糖、热痛阈和机械痛阈均未发生明显变化[(4．01&;#177;0．25)mmol／L和(3．86&;#177;0．22)mmol／L，P&;gt;0．05；(13．54&;#177;1．08)s和(13．08&;#177;0．91)s，P&;gt;0．05；(20．06&;#177;2．77)g和(19．75&;#177;3．18)g，P&;gt;0．05]。以上数据均以左足为例。结论：①中剂量链脲霉素(50μg／kg)腹腔注射，可以成功的诱导出SD雄性大鼠的实验性高血糖(7．0-16．7mmol／L)，并且持续12d左右。②链脲霉素所致高血糖大鼠模型血糖水平升高过程中可产生机械痛敏，热痛敏未发生明显变化。     

鞘内吗啡对大鼠足底皮下蜜蜂毒诱致伤害性反应的抑制作用

目的：在脊髓水平了解经典的镇痛剂吗啡对新型组织病理性痛模型-蜜蜂毒试验的多种痛行为学反应的抑制作用，方法：实验于2003—01／10在第四军医大学神经科学研究所疼痛研究中心行为学实验室进行。30只大鼠随机分为正常对照组(n=5)，鞘内生理盐水对照组(n=7)和鞘内吗啡给药组(n=18)，鞘内吗啡给药组根据吗啡剂量又分为0．33nmol组(n=7)、3.3nmol组(n=6)、33nmol组(n=5)。给大鼠鞘内注射不同剂量的吗啡，观察对大鼠足底皮下注入蜜蜂毒诱致的持续性自发痛反应、热和机械性痛敏的抑制效果。结果：①鞘内预先注射三个剂量的吗啡对大鼠皮下给予每50μL0．2mg蜜蜂毒诱致的同侧后肢自发缩足反射次数产生了剂量依赖性的抑制作用。容积均为10μL的0．33，3．3和33nmol吗啡给药组，1h内大鼠每5min的自发缩足反射次数分别是(29．48&;#177;2．84)．(19．90&;#177;2．35)和(5．81&;#177;1．04)次，与生理盐水对照组[每5min(43.18&;#177;3．28)次]比较差异均具有显著性意义(P&;lt;0.05)，抑制率分别为(32&;#177;7)％．(54&;#177;5)％和(86&;#177;2)％。②大鼠皮下注射蜜蜂毒还诱致原发性热和机械性痛敏和继发性热痛敏，表现为注射部位和对侧对称部位热刺激潜伏期缩短，注射部位机械刺激阈值下降。与对照组比较，鞘内吗啡能显著延长同侧和对侧的热刺激潜伏期缩短，减少机械刺激闽值下降(P&;lt;0.05)。结论：大鼠皮下蜜蜂毒诱致的持续性自发痛反应，长时程热和机械性痛敏可被吗啡在脊髓水平剂量依赖性的抑制。     

预先电刺激小脑顶核对缺血心肌神经生长因子基因表达的影响

目的：观察预先电刺激小脑顶核对心肌梗死大鼠心脏神经生长因子mRNA表达的影响。方法：实验于2003—03／06在重庆医科大学附属第一医院心血管疾病研究所完成。选用Wistar大鼠98只。将其中90只随机分为3组，每组30只：①心肌梗死组。结扎左冠状动脉前降支。②电刺激小脑顶核组，预先电刺激小脑顶核1h再予以左冠状动脉前降支结扎。③毁损小脑顶核组，毁损小脑顶核5d后电刺激小脑顶核1h，再行左冠状动脉前降支结扎。又分左冠状动脉前降支结扎后1。7，21d3个时间点，各10只。另设假手术组(n=8)。各组于相应时间点处死大鼠后，取心肌梗死区和非梗死区组织标本，用反转录一聚合酶链反应技术检测标本神经生长因子mRNA表达。结果：去除死亡、心肌未梗死、小脑顶核电刺激或毁损失败的大鼠。最终54只大鼠资料完整。心肌梗死组、电刺激小脑顶核组、毁损小脑顶核组、假手术组分别为13。20，13，8只。①结扎左冠状动脉前降支后1，7，21d，梗死区神经生长因子mRNA表达量：心肌梗死组明显低于假手术组(q=10．047，13．869。7．044，P&;lt;0．01)；电刺激小脑顶核组明显高于心肌梗死组(0．42&;#177;0．07，0．46&;#177;0．07，0．51&;#177;0．08；0．26&;#177;0．08。0．19&;#177;0．06．0．36&;#177;0．07，q=5．358，9．888，4．822，P&;lt;0．01)；毁损小脑顶核组与心肌梗死组比较无明显差异(P&;gt;0．05)。②心肌非梗死区1，7，21d神经生长因子mRNA表达：心肌梗死组均明显低于假手术组和电刺激小脑顶核组(0．36&;#177;0．07，0．30&;#177;0．07，0．36&;#177;0．07；0，56&;#177;0．07。0．56&;#177;0．07．0．56&;#177;0．07；0．49&;#177;0．09，0．46&;#177;0．08，0．59&;#177;0．09，q：4．099～8．947，P&;lt;0．01)；毁损小脑顶核组神经生长因子mRNA的表达量与心肌梗死组比较无明显差异(P&;gt;0．05)。结论：大鼠心肌梗死后梗死区与非梗死区神经生长因子mRNA表达下调，电刺激小脑顶核可上调神经生长因子mRNA表达，起到神经保护作用。     

针刺预处理脑组织提取液对小鼠缺氧存活时间的影响

目的：探讨针刺预处理脑组织提取液的抗缺氧损伤作用，为针刺效应物质的探讨提供初步的实验依据。方法：大鼠肾俞、百会穴针刺后不同时间段断脑提取脑组织液，行小鼠腹腔注射，广口瓶密闭缺氧，记录小鼠缺氧存活时间。结果：生理盐水腹腔注射对小鼠标准缺氧存活时间没有影响(F=1．93，P&;gt;0．05)；大鼠正常脑组织提取液使小鼠标准缺氧存活时间[(12．0633&;#177;2．6964)min]缩短(F=143.25，P&;lt;0．05)；针刺预处理后不同时间段[预处理即时：(38．2697&;#177;3．0043）min，针刺预处理后0．5h：(49．2961&;#177;4．9740)min，针刺预处理后1h：（31．0870&;#177;3．7730）min：针刺预处理后2h：(26．4465&;#177;3．4972）min]脑组织提取液均可使小鼠标准缺氧存活时间明显延长(F=143．25，P&;lt;0.05)，且呈现明显的时间变化规律，针刺预处理后0．5h脑组织提取液效果最好，使小鼠标准缺氧存活时间延长至(49．2961&;#177;4．9740)min(是空白组的2．3倍）。结论：针刺预处理脑组织提取液可提高机体的缺氧耐受能力，具有抗缺氧损伤作用。     

雄性大鼠肺损伤与小剂量地塞米松的防护作用

目的：观察小剂量地塞米松对大鼠肺损伤的干预作用。方法：实验于2000—01／06在解放军总医院南楼呼吸科实验室完成。实验选用54只雄性SD大鼠，随机将其分为对照组、损伤组、激素组。对照组：腹腔内注射生理盐水0．5mL，30min时气管内滴注0．5mL生理盐水。损伤组：腹腔内注射0．5mL生理盐水，30min时气管内滴注内毒素10mg／k(溶于0．5mL生理盐水)。激素组：腹腔内注射激素10mg／kg(溶于0．5mL生理盐水)，余同损伤组。以上各组18只动物，实验第2，6．24小时各6只。按时相处死并采集标本，观察大鼠支气管肺泡灌洗液总蛋白水平、支气管肺泡灌洗液细胞总数及支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子a水平。结果：做血气分析时激素组实验第2，6小时各有1只大鼠因实验结果不满意脱失；损伤组实验第2小时进行细胞总数计数检测因实验结果不满意脱失1只，损伤组和激素组实验第2小时中性粒细胞分类计数检测因实验结果不满意各脱失1只；支气管肺泡灌洗液总蛋白浓度测定损伤组和激素组实验2h因实验结果不满意各脱失1只。①损伤组3个时间点支气管肺泡灌洗液细胞总数明显高于对照组(P&;lt;0．05～0．01)；激素组3个时间点支气管肺泡灌洗液细胞总数明显低于损伤组[(3．18&;#177;1．43)，(8．70&;#177;2．29)，(18．37&;#177;7．73)&;#215;10^8L^-1；(8．70&;#177;1．62)，(16．76&;#177;3．76)，(65．75&;#177;9．85)&;#215;10^8L^-1，P&;lt;0．05～0．01]。②损伤组3个时间点大鼠支气管肺泡灌洗液的总蛋白水平明显高于对照组(P&;lt;0．01)；激素组大鼠支气管肺泡灌洗液的总蛋白水平明显低于损伤组[(0．32&;#177;0．13)，(0．32&;#177;0．14)，(0．29&;#177;0．08)g／L；(1、25&;#177;0、18)，(1．22&;#177;0．23)，(1．40&;#177;0．18)g／L，P&;lt;0．01]。③实验第2．6小时激素组大鼠支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α水平明显低于损伤组[(0．20&;#177;0．03)，(0．24&;#177;0．03)μg／L；(0．31&;#177;0．02)，(0．43&;#177;0．03)μg／L，P&;lt;0．05，0．0l]。结论：小剂量激素可减少蛋白漏出，抑制肿瘤坏死因子α释放，维持正常氧分压，减小肺系数增加，对肺损伤起到防护作用。     

内给氧改善缺血再灌注后脑组织能量代谢的实验研究

目的：探讨内给氧改善大鼠脑组织缺血再灌注后能量代谢障碍，起到脑保护作用的机制。方法：30只Wiatax大鼠随机分成3组：假手术组、缺血组、治疗组，制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型，予内给氧治疗后，分别测定各组大鼠脑组织中的三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、单磷酸腺苷(AMP)，乳酸含量及Na^+-K^+-ATPase活性，计算能量负荷值。结果：内给氧治疗组的ATP含量(2．3309&;#177;0．0866)mg／L、能量负荷值为0．0960&;#177;0．0052，Na^+-K^+-ATPase活性为(0．903&;#177;0．117)μkat／g，均高于缺血组[(0．8199&;#177;0．0591)mg／L，0．1663&;#177;0．0044，(0．465&;#177;0．064)μkat／g]差异存显著性意义(P&;lt;0．05)，乳酸含量(16．0342&;#177;1．0136)mmol／g低于缺血组(24．2513&;#177;4．3571)mmol／g，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。结论：内给氧可明显改善大鼠脑缺血再灌注后能量代谢，具有脑保护作用。     

银杏叶制剂对正常脑温脑缺血大鼠的脑保护作用

背景：在银杏叶提取物治疗脑缺血的实验研究中，由于使用全身麻醉药物，有可能诱导脑温改变，影响实验结果准确性。目的：研究常温状态下，国产银杏叶提取物对脑缺血再灌注组织抗氧化酶、脂质过氧化物及脑缺血组织含水量的影响。设计：随机对照的实验研究。地点和材料：实验在华中科技大学同济医学院完成。取24只Wistar大鼠，体质量为250～300g，将实验大鼠随机分为假手术组(n=8)、脑缺血对照组(n=8)、脑缺血银杏叶提取物治疗组(n=8)，对照组及治疗组参考Nagasawa方法，制备正常脑温大鼠左侧大脑中动脉缺血2h再灌注2h动物模型，进行对照研究。干预：实验大鼠的脑温用颞肌温度反映，将测温探头包埋人大鼠左侧颞肌深部贴近骨外膜，用半导体氧化物温度传感器连续监测。用60w白炽灯头部加温和自动双控颅脑降温仪调节脑温，使脑温维持在常温(36．5～37℃)水平。按设计方案制备正常脑温大鼠脑缺血再灌注损伤模型，脑缺血银杏叶提取物治疗组大鼠在手术前12，8，4h和脑缺血及再灌注即刻，分别腹腔内注射银杏叶提取物注射液，每次3mL，共5次。脑缺血对照组及假手术组大鼠腹腔内注射相同次数和剂量的生理盐水。主要观察指标：脑缺血组织超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、还原型谷胱甘肽、丙二醛含量及脑缺血组织含水量。结果：脑缺血对照组超氧化物歧化酶，谷胱甘肽过氧化物酶，还原型谷胱甘肽水平分别为(73．35&;#177;12.86)NU／mg，(167．37&;#177;54．34)μkat／g，(196．84&;#177;22．75)μg／g，明显低于假手术组的(96．02&;#177;16.83)NU／mg，(338．57&;#177;84．02)μkat／g，(337．51&;#177;34．89)μg／g(P&;lt;0．01或P&;lt;0．05)；脑缺血银杏叶提取物治疗组超氧化物歧化酶，谷胱甘肽过氧化物酶，还原型谷胱甘肽水平分别为(87．24&;#177;15．03)NU／mg，(316．56&;#177;93．52)μkat／g，(263．16&;#177;28．54)μg／g，明显高于脑缺血对照组(P&;lt;0．01或P&;lt;0．05)。脑缺血对照组丙二醛水平为(308．34&;#177;26．81)nmol／g，明显高于假手术组的(101．46&;#177;10．97)nmol／g(P&;lt;0．01)；脑缺血银杏叶提取物治疗组丙二醛水平为(125．86&;#177;13．90)nmol／g，明显低于脑缺血对照组(P&;lt;0．01)。脑缺血对照组脑缺血组织含水量为(80．45&;#177;0．44)％，明显高于假手术组的(78．20&;#177;0．25)％(P&;lt;0．01)；脑缺血银杏叶提取物治疗组脑缺血组织含水量为(79．63&;#177;0．46)％，明显低于脑缺血对照组(P&;lt;0．05)。结论：正常脑温状态下，国产银杏叶提取物能抑制脑缺血时自由基的过多产生和脂质过氧化反应，减轻脑水肿和血脑屏障破坏，保护脑缺血组织。     

复方金思维对阿尔茨海默病大鼠脑组织ProSAP／Shank蛋白表达的影响

目的：观察突触后蛋白ProSAP／Shank在模型大鼠脑内表达的变化，探讨复方金思维对阿尔茨海默病大鼠的神经保护作用。方法：实验于2004-11-15／2005-02在北京中医药大学东直门医院药理实验室及首都医科大学宣武医院神经生化室进行。取雄性SD大鼠32只，随机分为4组，每组8只：①生理盐水组：脑海马注入2μL生理盐水，3d后灌胃3mL的双蒸水。②模型组：脑海马缓慢注入2μL淀粉样B蛋白1～42(5g／L)，复制拟阿尔茨海默病模型，造模后3d灌胃3mL的双蒸水。③盐酸多奈哌齐组：造模同模型组，造模后3d灌胃盐酸多奈哌齐(0．92mg／kg)。④金思维组：同前造模，造模后3d灌胃复方金思维(由人参、肉苁蓉、石菖蒲，郁金等组成，浓度0．36g／mL，剂量0．7μL／g)。所有给药均1次／d，连续4周。4周后以Morris水迷宫测试大鼠学习期间的逃避潜伏期和游泳距离，记忆测定中的记忆能力，以进行行为学评价：检测大鼠脑海马CA1区、皮质突触后蛋白ProSAP／Shank的变化应用免疫组化方法。结果：经补充后32只大鼠进入结果分析。①Morris水迷宫的学习、记忆测试结果：模型组大鼠逃避潜伏期、游泳距离及记忆能力显著低于生理盐水组(P&;lt;0．01)，盐酸多奈哌齐组、金思维组大鼠逃避潜伏期、游泳距离及记忆能力较模型组高(P&;lt;0．05)，盐酸多奈哌齐组和金思维组无差异(P&;gt;0.05)。②脑海马CA1区ProSAP／Shank蛋白免疫组化测定结果：模型组平均面密度低于生理盐水组和金思维组(14．35&;#177;3．66，21．21&;#177;5.66，19．67&;#177;3．83，P&;lt;0.05)，模型组的平均吸光度也低于生理盐水组、盐酸多奈哌齐组和金思维组(68．74&;#177;5．98，121．93&;#177;8．69，84．36&;#177;13．56，84．58&;#177;8．24，P&;lt;0．01)。③脑皮质区ProSAP／Shank蛋白免疫组化测定结果：模型组的平均吸光度低于生理盐水组和金思维组(84．12&;#177;19．40，138．93&;#177;28．62，106．53&;#177;5．08，P&;lt;0．01)。结论：淀粉样B蛋白海马注射可致海马CA1区及皮质Shank蛋白表达下降，说明淀粉样B蛋白聚集损害了海马突触的功能和可塑性。而复方金思维不但显著提高了大鼠的学习、记忆能力，而且使Shank蛋白的表达明显增加，说明它对突触的功能和可塑性具有改善作用。