大白菜、青花菜和叶用芥菜体细胞杂交种形态学与细胞学特性鉴定

 为拓宽十字花科蔬菜育种种质资源,以大白菜（Brassica campestris L. ssp. pekinensis）、青花菜（B. oleracea L. var. varitalica）和叶用芥菜（B. juncea L. Czern）的子叶、下胚轴为材料,分离、纯化原生质体,采用40% 聚乙二醇（Polyethylene glycol,PEG）融合法进行原生质体融合。融合细胞在附加0.2 mg · L^-1 2,4-D + 0.5 mg · L^-1 6-BA + 0.1 mg · L^-1 NAA + 0.1 mg · L^-1 激动素（kinetin）的改良K8p培养基中液体培养,当细胞分裂至8 ~ 10细胞期时,将分裂的细胞包埋于0.15%琼脂糖,然后在添加0.3 mol · L^-1蔗糖和2 mg · L^-1 6-BA + 2 mg · L^-1 玉米素（zeatin）+ 1 mg · L^-1 NAA + 0.5 mg · L^-1 kinetin的Kao培养基中诱导愈伤组织。将培养获得的936个愈伤组织转到3种不定芽诱导培养基MS + 5 mg ? L-1 zeatin + 2 mg · L^-1 IAA;MS + 2 mg · L^-1 zeatin + 2 mg · L^-1 IAA;MS + 0.5 mg · L^-1 6-BA + 0.5 mg · L^-1 NAA上诱导芽分化,当芽长3 cm左右时,转到1/2 MS + 0.2 mg · L^-1 NAA的生根培养基上诱导生根,共获得了96株再生植株,对其进行形态学、细胞学和分子生物学鉴定。形态学观察显示再生植株表型变化大,包括3个亲本的中间型或两个亲本的中间型;PCR技术鉴定结果显示96株杂种植株中93株为细胞质雄性不育特性;染色体计数显示,再生的植株染色体数变化范围广（2n = 38 ~ 64）,但未发现染色体数总和与3种融合亲本染色体数总数（2n = 74）相一致的个体。基因组原位杂交（Genomic in situ hybridization,GISH）和扩增片段长度多态性（Amplified fragment length polymorphism,AFLP）分析结果表明,再生植株基因组中分别检测出大白菜、青花菜、叶用芥菜的DNA片段,证实了大白菜、青花菜、叶用芥菜种间体细胞杂交种的真实性。     

钙对盐胁迫下西瓜光合特性和果实品质的影响

 采用营养液水培方式,以小型西瓜（Citrullus lanatus Mansfeld）品种‘秀丽’为试材,研究了营养液增补Ca²⁺对盐胁迫（100 mmol · L^-1 NaCl）下西瓜幼苗光合特性,叶绿素荧光,花粉萌发,果实品质的影响。结果表明,当营养液中Ca2+浓度由4 mmol · L^-1升高到6 mmol · L^-1时：①显著提高盐胁迫植株叶片的气孔导度（G_s）、胞间二氧化碳浓度（C_i）、净光合速率（P_n）、PSⅡ的最大光化学量子产量（F_v/F_m）、PSⅡ的实际光化学效率（ΦPSII）、相对电子传递速率（rETR）、光化学猝灭系数（q_P）和非光化学猝灭系数（q_N）,降低气孔限制值（L_s）和光抑制（1–q_P/q_N）;②显著提高盐胁迫果实质量及果实中抗坏血酸、可溶性固形物、可溶性总糖、可溶性蛋白质和游离氨基酸的含量,降低有机酸的含量;同时降低果实中Na+含量,提高果实中Ca²⁺、Mg²⁺、Fe、Cu、Mn含量;③明显促进盐胁迫花粉萌发和花粉管伸长。表明Ca²⁺可有效降低盐胁迫对光合作用的气孔限制,缓解盐胁迫对光合器官的伤害,使叶片保持较高的光合性能;促进盐胁迫下西瓜的生殖生长,有利于果实的生长发育及矿质营养平衡,进而改善果实品质。因此,Ca²⁺可通过调节光合代谢和生殖代谢来提高西瓜植株的耐盐性。     

平邑甜茶叶片不定芽再生及NO的效应

以平邑甜茶继代组培苗叶片为材料,研究了一氧化氮供体——硝普钠(SNP)、6-BA、NAA、2,4-D、ZT和光暗条件对平邑甜茶叶片不定芽再生的影响。结果表明,6-BA、ZT、NAA和暗培养均有利于叶片不定芽的分化;在含有生长素和细胞分裂素的MS培养基中,加入6.0和12.0 mg·L^-1的SNP可极显著地诱导叶片不定芽的分化;以MS+ 6.0 mg·L^-1 BA + 0.5 mg·L^-1 NAA + 0.2 mg·L^-1 ZT+ 6.0 mg·L^-1 SNP为培养基,暗培养15 d,叶片不定芽分化效果最好,再生率达67.8%。     

外源NO对干旱胁迫下平邑甜茶幼苗叶绿素荧光参数和光合速率的影响

 以20%聚乙二醇（PEG6000）处理模拟干旱,利用一氧化氮（nitric oxide,NO）供体硝普钠（sodium nitroprusside,SNP）处理平邑甜茶[Malus hupehensis（Pamp.）Rehd.]幼苗,探讨外源NO对水分胁迫下平邑甜茶幼苗叶绿素荧光参数和光合速率的影响。结果表明：水分胁迫下平邑甜茶幼苗Fo显著上升,F_v/F_m、q_P、ETR、Yield、叶绿素含量和光合速率显著降低,q_N在胁迫的前3 d呈上升趋势,之后大幅度下降;通过外施不同浓度的SNP（100 ~ 700 μmol · L^-1）均使水分胁迫下平邑甜茶幼苗 F_o上升及F_v/F_m、ETR、q _P、Yield、叶绿素含量和光合速率下降幅度明显减小。不同处理缓解作用为：300 μmol · L^-1 SNP > 500 μmol · L^-1 SNP > 100 μmol · L^-1 SNP > 700 μmol · L^-1 SNP,其中300 ~ 500 μmol · L^-1 SNP处理缓解效应明显,但以300 μmol · L^-1 SNP处理效果最好。     

钙对水培大蒜光合特性和品质的影响

 在水培条件下,营养液设6个钙浓度（0、1.0、2.0、3.0、4.0和5.0 mmol · L^-1）,研究钙对大蒜光合特性、食用器官（蒜薹和鳞茎）钙含量及品质的影响。结果显示：蒜薹和鳞茎钙含量随营养液钙浓度的增加而增加;在钙浓度0 ~ 3.0 mmol · L^-1范围内,大蒜叶片色素含量、净光合速率（P_n）、蒸腾速率（E）及气孔导度（G_s）随钙浓度的升高而升高,而后则随钙浓度的升高而降低;蒜薹的鲜质量、直径及抽薹率和鳞茎的鲜质量及横径均随营养液钙浓度的升高而呈现先增大后减小的趋势,在3.0 mmol · L^-1钙浓度下最大;同时,蒜薹和鳞茎中大蒜素、可溶性糖、维生素C、游离氨基酸及可溶性蛋白含量的变化趋势也是先随钙浓度的升高而升高,而后随之下降,在3.0 mmol · L^-1钙浓度下达到最高值,比低钙浓度（1.0 mmol · L^-1）处理分别增加54.7%和72.1%、33.9%和33.9%、11.5%和5.2%、19.3%和21.5%、32.6%和29.6%。由此可见,水培条件下栽培大蒜的钙浓度以3.0 mmol · L^-1为好。     

中国石蒜SSR体系的建立及性状对应分析

 为开发利用石蒜属球根花卉资源和开展分子标记辅助选择育种,利用正交试验和单因素试验建立了中国石蒜的SSR分子标记体系：20 μL含Taq酶0.5 U、Mg ²⁺ 1.5mmol · L^-1、dNTP 0.125 mmol · L^-1、Primer 0.5 mmol · L^-1、DNA 50 ng。利用该体系对石蒜属的8个物种和中国石蒜种内35个无性系进行扩增,每对引物在种间平均得到7个多态性位点,在中国石蒜种内得到9.5个多态性位点,反映出该体系具有较好的通用性和稳定性。利用对应分析法对中国石蒜的花葶高度、开花期等性状和SSR扩增条带之间的对应关系进行关联分析,初步得到与迟花期‘Oct’性状相关的Ly97和Ly98条带,与中矮花葶高度‘Mid’、‘Low’性状相关的Ly84、Ly87和Ly97条带等,并提出开展进一步的杂交和遗传测定,对辅助选择标记的可靠性进行验证。     

外源NO对水分胁迫下平邑甜茶幼苗中几种氮代谢酶的影响

以平邑甜茶水培幼苗为试验材料,采用20%的PEG6000模拟水分胁迫,进行了外源NO对水分胁迫下平邑甜茶幼苗中几种氮代谢酶的影响研究。试验结果表明：水分胁迫下幼苗叶片NR、GS、GOGAT活性均大幅度下降,而300 和500 μmol·L^-1SNP处理对NR、GS和GOGAT活性下降明显缓解;不同处理前期均不同程度提高了GDH活性;300 和500 μmol·L^-1SNP处理显著提高了幼苗叶片可溶性蛋白含量和显著降低了叶片内肽酶活性。由此表明：不同外源NO浓度处理均具有缓解效应,300 和500 μmol·L^-1SNP处理缓解明显,其中以300 μmol·L^-1SNP处理效果最好。     

硒对酥梨叶片衰老及抗氧化酶系统的影响

 研究喷施Na₂SeO₃对砀山酥梨（Pyrus bretschneider Rehd.‘Dangshan Suli’）叶片衰老及抗氧化酶系统的影响。结果表明：与对照相比,喷施低浓度的硒（5 mg · L^-1）,可明显延迟衰老叶片含水量、干样质量、叶绿素和可溶性蛋白含量的下降,显著提高SOD和GSH-Px活性,降低H₂O₂、和MDA含量,平均延迟落叶7.25 d;喷施中等（10 mg · L^-1）和高浓度（20 mg · L^-1）的硒对延缓叶片衰老的效果变差,且浓度越高,效果越差;叶面喷硒对POD活性具有抑制作用。硒延缓梨树叶片衰老存在浓度差异,低浓度的硒可能通过提高SOD、GSH-Px等酶的活性参与叶片衰老进程的调控,从而降低膜脂过氧化水平,延长叶片功能期。     

白菜NRT2基因的克隆及表达模式分析

 以白菜（Brassica campestris ssp. chinensis Makino）品种‘苏州青’为试材,采用RT-PCR技术,获得1个高亲和硝酸盐转运蛋白基因（NRT2）的cDNA序列,全长1 593 bp,推断其编码530个氨基酸,命名为BcNRT2。序列分析表明：BcNRT2基因与甘蓝型油菜BnNRT2基因和拟南芥AtNRT2.1基因核苷酸序列的相似性分别为98%和90%,氨基酸序列的相似性分别为99%和95%,表明植物中NRT2基因保守度较高。实时定量PCR表达分析表明,BcNRT2在白菜根部的表达量最高,为诱导型表达。低浓度NO^₃-（0.2 mmol · L^-1 KNO₃）处理0.5 h后其表达量迅速上升,BcNRT2可能为NO₃^-感受器。高浓度NO₃^-（20 mmol · L^-1 KNO₃）处理后其表达量更高,持续时间较长,可能是受到低亲和硝酸盐转运蛋白NRT1.1的调控而产生的高水平响应。原生质体的瞬时表达显示,BcNRT2蛋白位于细胞膜上。     

扇叶铁线蕨孢子无菌繁殖技术研究

 研究了扇叶铁线蕨（Adiantum flabellulatum）发育过程和不同因素对孢子、原叶体无菌培养的影响。结果表明：孢子萌发为书带蕨型,原叶体发育为铁线蕨型;孢子在无光条件下不能萌发;适当时间的低温冷藏有利于孢子萌发;播种20 d 后,1/4MS 培养基中孢子萌发率最高,可达22.7%;在培养基中添加15 ~ 45 g · L^-1 的蔗糖有利于孢子的萌发,蔗糖有利于分生区的发育和性器官的分化;MS + 30 g · L^-1蔗糖的培养基中,原叶体的成苗率可达48.3%;外源生长素不利于原叶体的成苗,但NAA 0.5 mg · L^-1 促进原叶体的离体增殖;用无菌沙瓶做试管苗炼苗基质后的移栽成活率可达90%。     

利用茎尖离体嫁接获得大蒜体细胞嵌合体的研究

以‘阿城紫皮’大蒜和日本‘福地六瓣’白皮大蒜鳞茎茎尖为接穗、鳞茎盘为砧木,利用离体茎尖微体嫁接技术,研究了大蒜体细胞嵌合体的培育,用RAPD分子标记技术进行了嵌合体的鉴定。结果表明：最佳生芽培养基为MS+NAA 0.1 mg·L^-1+2ip 0.4 mg·L^-1;最佳生根培养基为1/2 MS + IBA 1.5 mg·L^-1。嫁接成活率达16.00%~26.67%。利用引物OPF-16鉴定表明白/紫、白·紫/紫、白·紫/白、紫/白4种嫁接方式获得了嵌合体。利用引物OPJ-12鉴定表明紫/白嫁接方式获得了嵌合体,而引物OPE-05鉴定未能检测出亲本与嫁接苗之间的差异。     

硼对“洋葱型”畸形大蒜形成及其生理的影响

 在水培条件下研究不同硼水平对“洋葱型”畸形大蒜发生率的影响及其生理生化指标的变化。研究结果表明：0和1.5 mg · L-1硼处理均可诱导“洋葱型”畸形大蒜的发生,降低鳞茎的干、鲜质量,而0.5和1.0 mg · L-1硼处理可防止“洋葱型”畸形大蒜的形成;发生“洋葱型”畸形大蒜的植株与正常植株相比衰老相对延缓,在鳞茎膨大后期其叶身的硼含量、色素含量、净光合速率（Pn）、蒸腾速率（Tr）、气孔导度（Gs）、抗氧化酶（POD、CAT和SOD）活性均高于同处理的正常植株;同时,“洋葱型”畸形大蒜叶身和假茎的可溶性糖、可溶性蛋白和游离氨基酸含量也均显著高于正常植株,但其鳞茎的上述指标比同处理的正常植株分别降低30.45%和51.99%、152.26%和258.34%、82.01%和56.09%。     

富贵竹室内加工技术研究

 设杀菌剂瑞毒霉锰锌、营养液爱多收和促根剂吲哚丁酸不同浓度9个处理组合, 研究其对富贵竹去叶植株修口、顶侧芽生长及生根的影响。结果表明, 瑞毒霉锰锌3水平间修口效果、爱多收3水平间顶侧芽生长、吲哚丁酸3水平间根系生长的差异均极显著; 最佳处理组合, 小竹为0. 8 g/L^-1瑞毒霉锰锌+ 0. 15 mL/L^-1爱多收+ 30 mg/L^-1吲哚丁酸, 大竹为0. 8 g/L^-1瑞毒霉锰锌+ 0. 30 mL/L^-1爱多收+ 30 mg/L^-1吲哚丁酸。     

硫对设施水培大蒜光合特性和鳞茎品质的影响

在设施条件下,采用营养液培养大蒜,研究不同施硫水平对其光合特性、鳞茎质量及品质的影响。结果表明,在施硫水平0 ~ 2.25 mmol · L-1范围内,光合速率（Pn）、叶绿素含量、气孔导度（Gs）、蒸腾速率（E）和鳞茎质量随施硫量增加而升高,至硫浓度2.25 mmol · L-1时达最高。鳞茎品质指标除可溶性蛋白质外,随植株生长而逐渐升高。在不同硫处理间,鳞茎中大蒜素、可溶性糖和游离氨基酸和蒜薹中大蒜素、可溶性糖、维生素C及游离氨基酸含量均以2.25 mmol · L-1硫处理最高,分别比不施硫处理增加48.82%、127.92%、63.58%、10.61%、63.30%、29.07%和74.16%。营养液中硫含量为3.75 mmol · L-1时,鳞茎中蛋白质含量最高。大蒜二次生长指数在一定硫浓度范围内,随硫水平的升高而降低,而后随施硫量的升高变化不显著。     

山杜英离体培养植株再生的研究

 研究了山杜英[Elaeocarpus sylvestris(Lour．)Poir．]带芽茎段的离体培养及植株再生。筛选出最佳培养基：(1)启动培养：Ms+BA 1.0～2.0 mg·L^-1 (单位下同)+NAA 0.05+蔗糖3%；(2)愈伤组织发生型丛生苗增殖培养：MS+BA 1.0+NAA 0.5+蔗糖3%；腋芽发生型丛生苗增殖培养：MS+BA2.0+IBA 0.1+蔗糖3%；(3)有效苗诱导培养：MS+BA 0.5+IBA 0.1+GA 1.0+蔗糖3%；(4)生根培养：1/2 MS+IBA 3.0+蔗糖2%。用透气膜封FI比用聚乙烯菌膜生根率明显提高，生根明显提前。     

硫对大蒜生理特性及主要矿质元素吸收的影响

通过Hoagland营养液水培大蒜,研究不同供硫水平对大蒜生理特性及氮、磷、钾吸收的影响。 结果表明：施硫处理大蒜的株高、叶长、叶面积和茎粗均明显高于不施硫对照。在0～2.25 mmol·L^-1硫浓度范围内,叶片光合速率和超氧化物歧化酶活性随营养液中硫浓度升高而增加,至硫浓度为2.25mmol·L^-1时达最大;过氧化物酶活性、过氧化氢酶活性和硝酸还原酶活性以硫浓度为1.50 mmol·L^-1时最高;大蒜鳞茎和蒜薹全硫和全氮含量均随营养液中硫浓度的升高而增加,与硫浓度呈显著正相关;鳞茎和蒜薹对磷和钾的吸收量以硫浓度为2.25 mmol·L^-1时最高。     

盐溶液引发对冬瓜种子活力及其生理变化的影响

用10 mmol·L^-1的CaCl₂、NaCl、KNO₃、KH₂PO₄、CaCl₂+NaCl（1∶1）、KNO₃+KH₂PO₄（1∶1）溶液分别对黑皮冬瓜种子进行引发处理,探究盐溶液引发对冬瓜种子活力及生理变化的影响。结果表明：10 mmol·L^-1 KNO₃溶液处理能显著提高冬瓜种子的活力,促进种子萌发,种子发芽势、发芽率、简化活力指数、SOD和CAT活性分别提高4.0 %、14.7 %、60.0 %、53.2 %和78.7 %,电导率降低51.2 %。     

核桃离体培养和植株再生

 以5个核桃品种(株系) 10年生植株的茎段为外植体, 进行了离体培养和植株再生的研究。结果表明, 附加2 g·L^-1聚乙烯吡咯烷酮的DKW + 6-BA 1.0 mg·L^-1 + IBA 0.01～0.10 mg·L ^-1是诱导茎段萌发最适宜的培养基, 5个品种(株系) 间的萌发率存在差异; DKW + 6-BA 110 mg·L^-1 + IBA 0.01mg·L^-1 + 蔗糖40 g·L^-1是最适宜的增殖培养基; 采用二步生根法最高生根率为41.67% , 生根试管苗移栽于草炭土∶河沙= 1 ∶1的基质中, 控制温度20～30 ℃, 保湿20 d, 期间遮荫, 40 d后成活率95%。