原发性肾病综合征患儿肾组织P-gp170蛋白和mRNA表达与临床病理及预后的关系

目的 观察原发性肾病综合征患儿肾组织中P-糖蛋白170的表达,分析肾组织中P-gp170表达与临床和病理的关系,探讨P-gp170表达在PNS 患儿GC耐药中的作用。方法 采用肾活检术取得96例处于不同病程的PNS患儿肾组织标本,进行常规病理学诊断和肾脏病理定量分析;应用免疫组织化学及原位杂交法分别检测PNS患儿肾组织中P-gp170蛋白及mRNA的表达,比较不同肾脏病理类型及病理积分患儿P-gp170的表达;比较未用GC与应用GC后PNS患儿肾组织P-gp170的表达。结果 ①正常肾脏即有一定量的P-gp170表达;未用GC组即高于正常对照,差异有统计学意义(P＜0.05）;②病理积分较高者P-gp170表达阳性量高于病理积分低者,差异有统计学意义(P＜0.05）;不同病理类型P-gp170的表达有差异,局灶节段硬化(FSGS）、膜性肾病(MN）和硬化性肾病(SGN）表达较高,组间比较差异无统计学意义(P＞0.05）,微小病变(MCD）和系膜增生型(MsPGN）者表达较低,两者比较差异无统计学意义(P＞0.05）;而前三者与后两者差异有统计学意义(P＜0.05）;③未用GC者较应用GC后的PNS患儿肾组织P-gp170表达量低,差异有统计学意义(P＜0.05）。结论 P-gp170在PNS患儿肾组织的表达可能与肾病病损有关,可结合病理类型和病理损伤程度同时检测肾组织P-gp170预测不同患儿GC反应性; P-gp170的表达增高可能与PNS活动和复发有关,可作为临床预测预后的指标。     

慢性肾小球肾炎患者尿一氧化氮代谢产物测定及临床意义初步研究

目的 我们测定慢性肾小球肾炎患者尿中NO代谢产物的排泄,以了解慢性肾小球肾炎患者肾组织内NO合成是否降低.方法 参照Rosslli和Green测定.结果 ①慢性肾炎有高血压组尿中NO代谢产物与对照组和无高血压组尿中NO代谢产物比较均明显降低P<0.01;慢性肾炎无高血压组尿中NO代谢产物与对照组比较,无统计差异P>0.05.②MsPGN和FSGS组尿中NO代谢产物明显低于对照组和MN、MCD组P<0.01,而MN、MCD与对照组比较无差异P>0.05.结论 慢性肾小球肾炎合并高血压时尿中NO/Cr明显降低,提示肾组织内NO的产生可能不足,补充L-精氨酸会对其有利,这也许是测定肾小球肾炎患者尿中NOx-/Cr比值的临床意义所在.     

尿IL-18及NGAL在重症急性胰腺炎患者并发急性肾损伤的早期诊断价值

目的探讨尿IL-18及NGAL对急性重症胰腺炎(SAP)患者合并急性肾损伤(AKI)的早期诊断价值。方法 145例急性胰腺炎(AP)患者分为轻型、重型(MAP、SAP)2组,SAP组分非AKI亚组及AKI亚组,设正常对照组。采用ELISA法测定对照组及AP患者发病后12~18 h尿NGAL、IL-18水平。结果尿IL-18在MAP组高于对照组(P<0.05),SAP组明显高于MAP组(P<0.01);尿NGAL在SAP组的AKI亚组明显高于非AKI亚组(P<0.01)。结论尿IL-18水平可以反应AP炎症的严重程度,尿NGAL可以作为SAP合并AKI早期潜在的标记物。     

组蛋白H3K36me3与缺血再灌注诱导小鼠急性肾损伤的相关性研究

目的:研究组蛋白H3K36三甲基化(H3K36me3)在缺血再灌注(IR)诱导的急性肾损伤(AKI)小鼠肾组织中的表达,分析其与肾组织中N-赖氨酸甲基转移酶SMYD2及肾损伤程度的相关性,为临床治疗IR-AKI提供新的靶点。方法:30只ICR小鼠随机分为IR组(n=15)和假手术组(sham组,n=15),应用微动脉夹夹闭双侧肾蒂45 min构建IR模型,于造模后24 h收取小鼠血清和肾组织标本。生化法检测血尿素氮(BUN)和血清肌酐(SCr);HE染色检测肾组织病理学改变;免疫组织化学(IHC)染色检测肾组织中NGAL和cleaved caspase-3的表达;Western blot检测肾组织NGAL、SMYD2、H3K36me3、p-P53、P53、cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2、STAT3、p-STAT3、JNK和p-JNK1/2/3蛋白的水平。应用Pearson相关法分析H3K36me3与肾组织SMYD2及NGAL的相关性。结果:与sham组相比,IR组BUN和SCr水平显著升高(P<0.05);HE染色显示,IR组肾小管上皮细胞水肿、脱落、坏死,刷状缘脱落,管腔内大量细胞碎屑残留;IHC染色显示,IR组肾小管上皮细胞中NGAL和cleaved caspase-3明显增多;Western blot结果显示,IR组NGAL、SMYD2、H3K36me3、p-P53、cleaved caspase-3、Bax、STAT3、p-STAT3、JNK及p-JNK1/2/3蛋白的水平明显上调(P<0.05),Bcl-2蛋白水平明显下调(P<0.05);肾组织H3K36me3同SMYD2和NGAL的水平均呈显著正相关。结论:H3K36me3与IR-AKI小鼠肾损伤程度及肾组织SMYD2均密切相关,H3K36me3表达上调可能与STAT3和JNK信号通路活化共同参与调控IR-AKI的发生发展。     

糖尿病肾病患者血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的改变及其临床意义

目的:探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)在2型糖尿病(T2DM)并发肾病患者血清中的表达及临床价值。方法:90例T2DM和30例健康查体者为研究对象,90例T2DM患者根据24 h尿白蛋白水平分为4组:A组,正常蛋白尿组(24 h尿蛋白排泄量(uAlb)30 mg);B组,微量白蛋白尿组(24 h uAlb 30～300 mg);C组:大量白蛋白尿组(24 h uAlb300 mg)。测定血清NGAL水平、肾小球滤过率(GFR)、血肌酐(Scr)水平,常规检测血脂水平。结果:T2DM组血清NGAL水平和GFR与对照组比较显著下降(P0.05),TG、Scr与对照组比较显著上升;血清NGAL、TG水平和GFR为A组B组C组,三组间比较有显著性差异(P0.05);血清Scr水平为A组B组C组,三组间比较有统计学差异(P0.05)。T2DM患者血清NGAL水平与GFR、TG水平呈显著正相关(r=0.612,0.4510;P0.05);血清NGAL水平与血清Scr水平呈显著负相关(r=-0.4120,P0.05)。结论:T2DM并发肾损伤患者血清NGAL水平明显降低,且与肾损伤程度相关,因此,NGAL可以做为判定T2DM并发肾损伤的可靠指标。     

真武汤对阿霉素所致大鼠肾损伤的治疗作用

 目的：研究真武汤对阿霉素肾病模型（adriamycin nephropathy,AN）大鼠足细胞裂孔隔膜蛋白分子（podocin和nephrin）表达的影响,探讨其防治阿霉素肾病大鼠蛋白尿的机制。方法：采用常规生化、病理方法（包括HE染色、Masson染色及电镜）观察真武汤对AN模型所致纤维化大鼠肾功能、肾组织形态学变化及羟脯氨酸（Hyp）含量的改善作用;采用蛋白免疫印迹等方法探索真武汤对足细胞标志蛋白podocin和nephrin信号分子表达的影响。结果：模型组大鼠尿蛋白（TP）、血尿素氮(BUN)和血清肌酐（SCr）显著增加,肌酐清除率（CCr）显著下降（P<0.05）;Hyp显著增加（P<0.05）;肾组织podocin和nephrin蛋白表达水平显著降低（P<0.05）;肾小管萎缩,基底膜增厚;足突扁平、融合、消失。肾小球集中现象明显;部分肾小管扩张,肾小管上皮细胞变性,蛋白管型明显;肾间质纤维组织增生和较多炎症细胞浸润。与模型组相比,各治疗组TP、BUN和SCr均有一定程度的下降,CCr显著提高;Hyp明显下降（P<0.05）;真武汤组肾组织podocin和nephrin蛋白表达水平显著提高（P<0.05）;肾组织病变程度轻于模型组。结论：真武汤能减少阿霉素肾病大鼠肾组织羟脯氨酸含量,改善肾功能及减轻病理损伤。 真武汤降低模型大鼠蛋白尿的作用可能与其维持足细胞podocin和nephrin的表达有关。     

血清高敏C反应蛋白/白蛋白与急性冠状动脉综合征PCI术后对比剂肾病的相关性

目的 分析血清高敏C反应蛋白（hs-CRP）/白蛋白（Alb）与急性冠状动脉综合征患者经皮冠状动脉介入（PCI）术后对比剂肾病的相关性。方法 选取我院接受PCI的496例急性冠状动脉综合征患者作为研究对象,根据PCI术后是否发生对比剂肾病分为对比剂肾病组（n=56）和非对比剂肾病组（n=440）。采用ELISA法检测患者术前血清hs-CRP水平,使用血液分析仪测定术前血清Alb水平,并计算hs-CRP/Alb。Logistic回归分析急性冠状动脉综合征患者PCI术后发生对比剂肾病的影响因素;受试者工作特征（ROC）曲线分析血清hs-CRP/Alb对急性冠状动脉综合征PCI术后对比剂肾病的预测价值。结果 与非对比剂肾病组相比,对比剂肾病组患者术前血清hs-CRP水平、hs-CRP/Alb均明显升高（P<0.001）,Alb水平显著下降（P<0.001）。与非对比剂肾病组相比,对比剂肾病组患者术前肌酐水平、对比剂剂量明显升高（P<0.05）;对比剂肾病组患者术后肌酐水平显著高于术前（P<0.05）,术后血尿酸显著低于术前（P<0.05）。Logistic回归分...     

微胶囊化儿茶素对阿霉素肾病大鼠VEGF表达的影响

目的： 研究微胶囊化儿茶素对阿霉素肾病大鼠血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法: 将120只雌性SD大鼠随机分为对照组、肾病组、地塞米松组、维生素E组、儿茶素组和微胶囊组共6组,尾静脉1次性注射阿霉素（5 mg/kg BW）制备肾病模型;利用酶联免疫吸附试验测定血清与尿中VEGF含量;利用免疫组织化学方法检测肾组织中VEGF表达。结果: 实验第4周末（维生素E组除外）与第6周末,各组大鼠尿、血清及肾组织中VEGF含量均显著高于对照大鼠、显著低于肾病大鼠（均P<0.01）,实验末，微胶囊组大鼠尿与血清中VEGF含量明显低于儿茶素组（分别P<0.01，P<0.05）,微囊组大鼠肾组织VEGF表达低于儿茶素组,但无显著差异。微囊化儿茶素治疗组24 h尿蛋白排泄量显著低于儿茶素治疗组（P<0.05）,24 h尿蛋白排泄与尿、血清及肾组织中VEGF含量均显著正相关（P<0.01）。结论: 儿茶素降低阿霉素肾病大鼠尿蛋白排泄可能是通过降低VEGF的排泄与分泌实现的，儿茶素微囊化后，有助于提高其降低VEGF的排泄与分泌，减少尿蛋白的排泄。     

M型磷脂酶A2受体及其抗体和Nephrin在不同类型膜性肾病患者的表达

目的:检测不同类型膜性肾病(membranous nephropathy,MN)患者肾组织PLA2R、Nephrin及血清anti-PLA2R的表达量,判断它们之间是否存在相关性及其意义。方法:收集MN患者37例为实验组,包括特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)患者23例、HBV相关性MN(HBV-MN)患者8例、V型狼疮性肾炎(stage V lupus nephritis,LN-V)患者6例,选取10例肾肿瘤行一侧肾切术患者为对照组。应用免疫组织化学法检测各组肾组织中PLA2R及Nephrin的表达,通过专业图像处理软件对其表达进行半定量分析,并应用ELISA检测各组血清anti-PLA2R的表达量。结果:1)各实验组及对照组均可见PLA2R及Nephrin沿肾小球毛细血管袢沉积。IMN组PLA2R较其余各组表达量明显升高,差异有统计学意义,而剩余三组比较无统计学差异。各组Nephrin相对表达量,对照组>LN-V>HBV-MN>IMN,差异有统计学意义;2)IMN组肾组织Nephrin相对表达量同肾组织PLA2R及血清anti-PLA2R浓度间均负相关,肾组织PLA2R相对表达量同血清anti-PLA2R浓度呈正相关;3)IMN组中血清anti-PLA2R阳性者其肾组织PLA2R均表达升高。结论:IMN患者肾组织中PLA2R的表达较继发性膜性肾病(secondary membranous nephropathy,SMN)及正常对照组高,IMN组中血清anti-PL A2R阳性者其肾组织PL A2R均表达升高,临床上可联合二者共同鉴别MN是否原发,结合肾组织中Nephrin的检测,可增强其敏感性。PLA2R同足细胞裂孔隔膜蛋白Nephrin于IMN患者肾组织表达量呈负相关,为IMN的发病机制的研究提供进一步支持。     

P53在急性肾损伤小鼠肾脏的表达及其与细胞凋亡的关系

 目的：探讨缺血再灌注致急性肾损伤（AKI）小鼠肾脏不同部位P53的表达及其与细胞凋亡的关系。方法：采用随机对照动物实验方法,将18只小鼠随机分为假手术组、AKI组及P53抑制剂pifithrin-alpha（PFT-α）组,每组6只。采用双侧肾蒂夹闭45 min后松开动脉夹的方法建立小鼠AKI模型,PFT-α组于建模前5 min腹腔注射PFT-α  2.2 mg/kg,并于建模后48 h采血检测尿素氮和肌酐,取肾脏组织行HE染色观察肾组织病理学变化,采用Western blotting法测定P53蛋白含量,免疫荧光法确定肾脏不同部位P53的表达,TUNEL法检测肾脏细胞凋亡,免疫组化方法检测肿瘤坏死因子受体（TNFR）、caspase-3及Bcl-2蛋白水平 。结果：（1）PFT-α组和AKI组小鼠血尿素氮和肌酐水平均明显高于假手术组,而PFT-α组与AKI组比较血尿素氮和肌酐水平明显降低（P<0.05）;肾组织HE染色显示假手术组肾组织细胞形态完整,排列整齐,无明显病理改变,AKI组肾小管上皮细胞刷状缘脱落、空泡及滴状变性,皮髓质间有明显淤血带;PFT-α组肾小管上皮部分刷状缘脱落消失,空泡及滴状变性减轻,皮髓质间无明显淤血带;（2）假手术组小鼠肾脏有少量P53表达且未检测到凋亡细胞,而AKI组小鼠缺血再灌注48 h后P53蛋白水平及凋亡细胞明显增加（P<0.05）,并且均主要定位在肾皮质,PFT-α组较AKI组小鼠肾脏P53蛋白含量及凋亡细胞指数均减少（P<0.05）;（3）与假手术组相比,AKI组小鼠肾脏TNFR蛋白及caspase-3蛋白水平升高（P<0.05）,Bcl-2蛋白水平下降（P<0.05）,PFT-α组较AKI组小鼠肾脏TNFR蛋白及caspase-3蛋白水平降低（P<0.05）,Bcl-2蛋白水平升高（P<0.05）。结论：急性肾损伤时,肾组织P53表达增加,主要定位于皮质,通过调控凋亡蛋白Bcl-2和TNFR的水平,促进caspase-3的释放,从而介导细胞凋亡。     

A case of severe acute kidney injury by near-drowning

Acute kidney injury (AKI) secondary to near-drowning is rarely described and poorly understood. Only few cases of severe isolated AKI resulting from near-drowning exist in the literature. We report a case of near-drowning who developed to isolated AKI due to acute tubular necrosis (ATN) requiring dialysis. A 21-yr-old man who recovered from near-drowning in freshwater 3 days earlier was admitted to our hospital with anuria and elevated level of serum creatinine. He needed five sessions of hemodialysis and then renal function recovered spontaneously. Renal biopsy confirmed ATN. We review the existing literature on near-drowning-induced AKI and discuss the possible pathogenesis.     

Neutrophil gelatinase‐associated lipocalin: pathophysiology and clinical applications

Neutrophil gelatinase‐associated lipocalin (NGAL), a 25 kDa protein produced by injured nephron epithelia, is one of the most promising new markers of renal epithelial injury. In contrast to serum creatinine and urinary output, which are the measures of kidney function, NGAL is specifically induced in the damaged nephron and then released into blood and urine, where it can be readily measured. Careful proof‐of‐concept studies using defined animal models have uncovered the sources and trafficking of NGAL in acute kidney injury (AKI) and have addressed the contributions of renal and non‐renal sources. Clinical studies indicate that NGAL, unlike creatinine, is a marker responsive to tissue stress and nephron injury, but less so to adaptive hemodynamic responses. In certain clinical settings, NGAL is an earlier marker compared with serum creatinine. In addition, clinical studies have shown that NGAL is a powerful predictor of poor clinical outcomes, which can be used to risk stratify patients when combined with serum creatinine. NGAL has important limitations, including its responsiveness in systemic inflammation, which is partially uncoupled from its response to kidney injury and which needs to be considered when interpreting NGAL results clinically. This review covers the biology and pathophysiology of NGAL and summarizes the results of the growing body of clinical studies that have addressed the utility of NGAL in the early diagnosis of AKI, in the distinction of intrinsic AKI and in the prognostic assessment of broad patient populations.     

芪苈强心颗粒对心肾综合征大鼠肾组织细胞凋亡的影响

目的:探讨芪苈强心颗粒对心肾综合征(cardiorenal syndrome,CRS)模型大鼠肾组织细胞凋亡的影响及可能作用机制。方法:采用左冠状动脉前降支结扎结合肾脏急性缺血再灌注损伤制备CRS模型,根据实验需要分为6组:2周假手术(2w sham)组、2周模型(2w CRS)组、2周药物(2w CRS-Q)组、4周假手术(4w sham)组、4周模型(4w CRS)组和4周药物(4w CRS-Q)组,2周和4周药物组分别给予芪苈强心颗粒(4 g·kg~(-1)·d~(-1))灌胃治疗2周和4周。ELISA法检测血清胱抑素C(Cys-C)、血浆血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)、尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)和尿微量白蛋白(UMA)含量;肌氨酸氧化酶法检测血清肌酐(Cre)含量;HE染色观察大鼠肾组织病理学变化;RT-qPCR法和Western blot检测大鼠肾组织中Ang Ⅱ、Bcl-2和Bax的mRNA和蛋白表达水平;TUNEL染色检测肾组织细胞凋亡。结果:与sham组比较,2w CRS和4w CRS组大鼠血清Cys-C、血清Cre、血浆Ang Ⅱ、UMA和尿NGAL含量均显著升高(P0.05),肾组织中Bax和Ang Ⅱ的mRNA和蛋白表达水平均显著上调(P0.05),Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均显著下调(P0.05),肾组织损伤均严重,肾组织细胞凋亡均明显;与CRS组比较,2w CRS-Q和4w CRS-Q组大鼠血清Cys-C、血清Cre、血浆Ang Ⅱ、尿NGAL和UMA含量均显著降低(P0.05),肾组织中Bax和Ang Ⅱ的mRNA和蛋白表达水平均显著下调(P0.05),Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均显著上调(P0.05),肾组织损伤均有所改善,肾组织细胞凋亡率均显著降低(P0.05)。结论:芪苈强心颗粒可抑制CRS大鼠肾组织细胞凋亡,改善肾功能,其机制可能与抑制Ang Ⅱ的表达有关。     

uIL-18、ET-1、persepsin联合检测在肾结石患者术后急性肾损伤诊断中的应用

目的分析尿液uIL-18及血中ET-1、persepsin联合检测在肾结石患者术后急性肾损伤诊断中的应用价值。方法将我院2016年1月至2019年1月间收治的100例肾结石术后急性肾损伤(acute kindey injury,AKI)患者作为观察组,100例肾结石术后非AKI患者作为对照组;采用酶联免疫吸附法检测受试者血中ET-1、persepsin及尿中uIL-18水平;绘制ROC曲线分析各指标单独及联合应用在诊断肾结石术后急性肾损伤诊断中的应用。结果观察组患者血中ET-1及persepsin水平明显高于对照组,尿中uIL-18水平明显高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05);以不同指标作为鉴别诊断的金标准,uIL-18作为诊断指标时AKI共98例,ET-1作为诊断指标时AKI共90例,persepsin作为诊断指标时AKI共99例,三指标联合应用作为诊断指标时AKI共96例;uIL-18、ET-1、persepsin三指标联合应用评估肾结石术后AKI的灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值及AUC均明显高于三指标单独应用,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论uIL-18、ET-1、persepsin水平联合检测有效提高肾结石术后急性肾损伤诊断价值。     

丙型肝炎患者肾小球病变的观察

为了明确丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染与肾脏疾病的关系，采用免疫组化技术和抗－ＨＣＶＮＳ３和抗－ＨＣＶＮＳ５单克隆抗体，检测了２１例丙肝患尸解肾组织中的ＨＣＡｇ，结果１３例阳性（６１．９％），其中１１例为膜增殖性肾炎（ＭＰＧＮ），１例为系膜增殖性肾炎（ＭｓＰＧＮ），１例肾组织大致正常。８例ＨＣＡｇ检测阴性，其中膜性肾病（ＭＮ）１例，膜增殖性肾炎２例，毛细血管内增殖性肾炎１例，余４例肾组织未见明显异常。与乙型肝炎对照组（３３．０％）相比，丙肝患者肾脏病变更为多见，形态多样，以ＭＰＧＮ为主。同时对丙肝患者有肾脏病变者的临床资料进行了分析，病人可表现为高血压，蛋白尿，血尿及早期血清尿素氮（ＢＵＮ）增高，因此认为同乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染后相同，也存在着丙肝相关性肾炎     

Effect of combination of vitamin E and umbilical cord-derived mesenchymal stem cells on inflammation in mice with acute kidney injury

Background: The objective of this study is to investigate the effect of combination of umbilical cord-derived mesenchymal stem cell (UC-MSC) and vitamin E (VitE) on inflammation in mice with acute kidney injury (AKI).

Methods: UC-MSCs were isolated from pregnant wistar mice and cultured. A total of 90 female wistar mice were randomly divided into control group, AKI group, AKI?+?VitE group, AKI?+?UC-MSC group, and AKI?+?VitE?+?UC-MSC group (18 mice in each group) which were given no treatment, normal saline, VitE, UC-MSC, and VitE?+?UC-MSC, respectively. The renal pedicles on both sides were clipped for 50?min with micro-artery clips to induce AKI. Six mice were sacrificed at days 1, 3, and 7, while blood and kidney tissues were collected to detect levels of blood urea nitrogen (BUN) and creatinine (Scr). Kidney tissues were stained by HE staining to observe pathological changes; levels of interleukin-lβ, TNF-α, interleukin-10, and β-FGF were measured by ELISA.

Results: Compared with the control group, AKI mice showed higher levels of serum BUN and Scr, tubular swelling and necrosis suggesting that AKI model was successfully established. Mice in AKI?+?VitE group, AKI?+?UC-MSC group, and AKI?+?VitE?+?UC-MSC presented better renal function than mice of AKI group. Mice from AKI?+?VitE?+?UC-MSC group showed the best renal function with the least renal tubular injury (p?p?p?Conclusions: Combination of UC-MSC and VitE significantly inhibited inflammatory reaction in kidney through the regulation of inflammatory cytokines in the microenvironment of kidney with AKI. Combination of UC-MSC and VitE presented therapeutic effect on AKI than the single use of UC-MSC or VitE.