燕麦麸蛋白ACE抑制肽的制备及性质研究

以燕麦麸为原料制备了燕麦麸蛋白,并利用蛋白酶对其酶解。测定了不同蛋白酶的水解产物的ACE抑制活性,以Alcalase和Trypsin酶解物活性最强。在此基础上进一步考察了Alcalase和Trypsin酶解物的DH对ACE抑制活性的影响,结果表明DH11.0%的Alcalase酶解物和DH12.2%的Trypsin酶解物有最大ACE抑制活性,分别达92.31%和86.36%。两种酶解物的肽组分相对分子质量均较低,大部分都低于1 000u。氨基酸分析表明ACE抑制肽中富含Glu、Leu、Pro和Phe。为了达到活性组分富集的目的,超滤技术是一种切实可行的方案。     

菜籽蛋白水解物及其膜分离组分的降血压相关活性

应用商业化蛋白酶Alcalase水解菜籽分离蛋白(RPI),并通过膜分离技术将水解物分离成4种不同分子质量大小的多肽组分(<1kD、1～3kD、3～5kD和5～10kD);评价水解物(RPH)和多肽组分的血管紧张素转化酶-Ⅰ(ACE)、肾素抑制活性和氧自由基吸收能力(ORAC)。结果表明:分子质量大小与菜籽肽的氧自由基吸附能力成负相关;<1kD的组分具有最大的ACE抑制活性(抑制率为(83.42±0.35)%)和氧自由基吸附能力;与膜分离组分相比,Alcalase水解物具有最高的肾素抑制活性。研究认为,菜籽蛋白Alcalase水解物及其<1kD的膜分离组分可能作为功能性成分用于降血压相关的功能食品和保健品的开发。     

鱿鱼肝脏蛋白水解液及ACE 抑制肽的制备

为高效利用鱿鱼及其下脚料肝脏蛋白水解物,采用酶解技术和凝胶过滤分离等技术对鱿鱼肝脏蛋白水解液中抑制肽进行研究。结果表明：胃蛋白酶为鱿鱼肝脏蛋白水解的最佳酶类,同时以水解度和ACE 抑制活性为指标,得出胃蛋白酶水解的最佳条件：在36℃条件下酶解22h,酶与底物的质量比2%,底物质量分数2.5%。经过上述条件处理的水解液再经超滤处理(截留分子质量为20kD)后,用Sephadex G-50 进行分离,洗脱得到5 个峰,其中组分B 的ACE 抑制活性最高,其半抑制浓度(IC50)达到1.80mg/mL。     

英红九号茶蛋白ACE抑制肽的制备、氨基酸组成及不同超滤组分的活性评价

以英红九号红茶渣经碱溶酸沉提取的茶蛋白为研究对象,血管紧张素转化酶（ACE）抑制率为评价指标,通过单因素试验和响应面优化得到茶蛋白ACE抑制肽的最佳制备工艺,并对酶解物进行氨基酸组成分析、超滤膜分离和不同分子量组分的ACE抑制活性分析。结果表明,英红九号茶蛋白ACE抑制肽的最优酶解工艺为酶解温度37 ℃、3.20 h、pH值7.20、底物质量分数3%、酶底质量比0.40%,在此条件下进行的验证试验ACE抑制率为83.38%,与理论值84.48%较相符。英红九号茶蛋白ACE抑制肽酶解物富含必需氨基酸（33.03%）和对ACE抑制活性有重要意义的疏水性氨基酸（47.20%）,且经超滤膜分离所得<3 ku组分的ACE抑制活性（IC50=0.85 mg/mL）要显著强于酶解物（IC50=1.37 mg/mL）和>3 ku组分（IC50=2.81 mg/mL）。该研究为食源性ACE抑制肽的研究开发和英红九号茶蛋白的高值化利用提供了理论依据。     

米糠蛋白源ACE抑制肽的酶解制备及活性研究

目的：开发米糠新产品。方法：以ACE抑制率为指标,通过单因素和响应面试验对米糠蛋白进行酶解工艺优化研究,并对最优酶解物活性肽进行超滤分离、活性评价和氨基酸组成分析。结果：米糠蛋白最优酶解工艺条件为：pH 7.2,底物质量浓度8.2 g/100 mL,酶解温度46 ℃,酶解时间3 h,酶添加量0.3 g/100 g米糠蛋白,在此条件下所得酶解物ACE抑制率为(73.15±0.64)%,而且酶解物含有丰富的疏水性氨基酸(23.09 g/100 g);活性分析表明,分子量＜3 kDa活性肽组分在同质量浓度(1.0 mg/mL)下ACE抑制活性[(81.68±1.08)%]优于分子量＞3 kDa活性肽组分[(58.65±2.21)%]和酶解物[(72.64±1.61)%]。结论：米糠蛋白酶解物具有显著的ACE抑制活性,活性肽组分的分子量对ACE抑制活性具有显著影响。     

酶法制备燕麦麸蛋白ACE抑制肽的研究

采用碱溶酸沉法制备了燕麦麸蛋白,并利用7种商业化蛋白酶对其进行酶解以考察生产ACE抑制肽的效果,结果表明Alcalase为最适用酶。优化了Alcalase水解燕麦麸蛋白的工艺条件,在[S]=5.0%,E/S=1.33%,pH7.5,温度60℃条件下酶解90min,酶解产物的ACE抑制活性最强(IC50=0.291mg/mL),此时水解度为11.0%,产物的相对分子质量主要集中在880Da以下。     

玉米ACE抑制肽的制备工艺及中试生产

以玉米黄粉为原料,利用Alcalase酶、Protamex酶和Flavourzyme酶酶解制备血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽,研究酶解条件、酶解方式对玉米肽ACE抑制活性的影响。同时,在试验的基础上,对100 kg玉米黄粉酶解制备ACE抑制肽进行了中试生产。实验结果表明:单酶水解制备ACE抑制肽的最适酶为Protamex酶,在酶解150 min时水解产物的ACE抑制率为(90.98±0.54)%,水解产物的分子质量集中在10 405.22~300 Da。Flavourzyme酶和Protamex酶的分步水解可进一步提高玉米蛋白的酶解效率和玉米肽对ACE的抑制活性,在先用Flavourzyme酶水解2 h再加入Protamex酶继续水解3 h后,水解产物的ACE抑制率达到(99.35±3.55)%(IC50=0.764 mg/m L),水解产物的分子质量集中在8 439.49~185.2 Da。采用双酶分步水解方式水解100 kg玉米黄粉时,肽粉得率为27%,ACE抑制率为(56.70±0.86)%(1 mg/m L)。     

马氏珠母贝肉酶解产物ACE抑制活性的研究

利用胰酶、枯草杆菌中性蛋白酶,在50℃、pH为7.0～8.0,m(贝肉)∶V水=1∶3的条件下,对马氏珠母贝肉进行双酶水解4h制备得到酶解产物及残渣。利用Alcalase2.4L、胃蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶对残渣进行再次酶解。结果表明:残渣蛋白质含量按干基计达54.2%;Alcalase 2.4L、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶对残渣的酶解效果较好;残渣的木瓜蛋白酶酶解产物ACE抑制活性较强;马氏珠母贝肉酶解产物清除自由基活性较强的组分分子量为944u,残渣木瓜蛋白酶酶解产物清除自由基活性较强的组分分子质量在1300～259u。     

高粱碱溶蛋白ACE抑制肽的制备及其稳定性研究

以高粱为原料,通过碱法提取制备高粱碱溶蛋白,利用不同蛋白酶对其进行酶解,结果表明Alcalase碱性蛋白酶水解高粱蛋白得到的水解产物水解度和血管紧张素转化酶(ACE)抑制率最高。在此基础上进一步考察了碱性蛋白酶酶量、pH值、温度、反应时间这4个因素对水解产物ACE抑制率的影响,并通过响应面实验优化酶解条件,得到Alcalase碱性蛋白酶水解高粱碱溶蛋白制备ACE抑制肽最优工艺为:酶解温度55.5℃,酶解时间1.68 h,pH值7.95,酶量2 360 U/g,此条件下实测ACE抑制率达到75.98%,该ACE抑制肽具有良好的热稳定性和酸碱稳定性,并且在体外经胃肠道酶系消化酶解后,依然能保持良好的抑制活性。     

酶解法制备条浒苔抗氧化肽工艺优化及其消化稳定性研究

本研究旨在优化中性蛋白酶水解条浒苔蛋白制备抗氧化肽的工艺条件,并对水解物的消化稳定性进行表征。以DPPH自由基清除率和水解度(DH)为指标,在单因素实验的基础上采用响应面分析法优化条浒苔抗氧化肽的制备工艺。通过三级膜分离系统将酶解物分离成不同相对分子质量的三个组分,采用体外模拟消化试验测试不同相对分子质量范围组分的消化稳定性。结果表明最佳酶解条件为:温度47℃、pH7.4、加酶量3300 U/g pro、时间3.3 h、固液比1:20 g/mL,在此条件下酶解物的DPPH清除率为84.33%±1.78%,模型预测值为85.53%,经检验,实测值与预测值无显著差异(P=0.444),模型可靠;相对分子质量小于10 kDa的两个组分具有较强的抗氧化活性和消化稳定性,大于10 kDa的组分抗氧化活性明显较低,经过消化酶消化后抗氧化性显著下降。条浒苔蛋白质经中性蛋白酶水解后可获得具有抗氧化活性和消化稳定性的蛋白肽,工艺模型可靠,水解物在食品中具有潜在应用价值。     

酶法制备鱼降血压肽的工艺优化及其组分分析

为了开发鲬鱼蛋白,以体外血管紧张素转换酶(ACE)抑制率为指标,通过适宜酶酶解鲬鱼蛋白质制备降血压活性肽。根据供试酶的水解进程筛选适宜水解酶,在单因素试验的基础上,采用响应面分析法优化水解条件,凝胶过滤层析法测定活性肽相对分子质量分布。结果表明,Alcalase是供试酶中最适的水解酶,最优水解条件为:温度48.9℃,pH7.93,加酶量为32396.6 U/g·pro,固液比1:5 g/mL,水解时间2.5 h。在此条件下,酶解液的ACE抑制率IC₅₀=0.269 mg/mL;酶解物经Sephadex G-15凝胶过滤层析得到三个组分,相对分子质量分别为635、258、67,其中的2号组分(C=0.74 mg/mL) ACE抑制活性相对较高,达到89.09%。     

菠萝蛋白酶水解泥鳅蛋白制备ACE抑制肽的研究

为了探讨利用泥鳅蛋白制备功能性肽的可能性,采用高效液相色谱法测定泥鳅肉水解物对血管紧张素转换酶(ACE)的抑制作用,从胰蛋白酶、胃蛋白酶、菠萝蛋白酶、复合风味蛋白酶、复合蛋白酶5种酶中筛选出菠萝蛋白酶作为酶解泥鳅肉制备具有降血压活性水解物的适宜水解酶。在单因素试验的基础上,采用L9(34)正交试验设计对该酶的酶解条件进行优化。结果表明最佳水解条件为：温度55℃,固液比1:3,pH6.5,加酶量1000U/g pro,水解时间90min。在该条件下,水解物的ACE抑制率IC50值为0.0184mg/mL,ACE抑制肽的相对分子质量主要集中在924左右。     

干酪乳杆菌胞壁蛋白酶的分离及水解酪蛋白产物特性

通过DEAE-Sephadex A-25和Sephadex G-100对干酪乳杆菌胞壁蛋白酶粗提物进行分离纯化,分离到酶比活力为12.50U/mg的CEP-1与16.67U/mg的CEP-2两种胞壁蛋白酶。CEP-1提纯倍数达到50,回收率为33.61%;CEP-2提纯倍数为66.68,回收率55.17%。对不同时间和底物浓度下CEP-1与CEP-2的α-酪蛋白和β-酪蛋白水解特性进行研究。结果显示,酪蛋白水解产物有显著的抗ACE与抗氧化活性,产生最高ACE抑制活性的水解条件为：CEP-2水解α-酪蛋白,时间6h,酶与底物质量比1:10,此时ACE抑制活性为84.66%;在酶与底物质量比1:40,水解时间4h条件下,CEP-2水解β-酪蛋白产生最佳的O2－ ·清除能力,其IC50为0.2138mg/mL。     

Optimization of peptic hydrolysis parameters for the production of angiotensin I-converting enzyme inhibitory hydrolysate from Acetes chinensis through Plackett-Burman and response surface methodological approaches

BACKGROUND: Angiotensin I‐converting enzyme (ACE) plays an important physiological role in regulating blood pressure. The elevation of blood pressure could be suppressed by inhibiting ACE. ACE inhibitory peptides derived from food proteins could exert antihypertensive effects without side effects. Acetes chinensis is a marine shrimp suitable for the production of ACE inhibitory peptides. The principal objective of this study was to screen for the significant variables, and further to optimize the levels of the selected variables, for the enzymatic production of ACE inhibitory peptides from Acetes chinensis. RESULTS: Plackett–Burman design and response surface methodology were employed to optimize the peptic hydrolysis parameters of Acetes chinensis to obtain a hydrolysate with potent ACE inhibitory activity. The peptic hydrolysis variables were subject to a Plackett–Burman design for screening the main factors. The selected significant parameters such as pH, hydrolysis temperature and enzyme/substrate (E/S) ratio were further optimized using a central composite design. The optimized conditions were: pH 2.5, hydrolysis temperature 45 °C, E/S ratio 17 800 U kg^?1 shrimp and substrate concentration 200 g L^?1. The results showed that 3–5 h hydrolysis could result in a hydrolysate with ACE inhibition IC₅₀ of 1.17 mg mL^?1 and a high DH of 25–27%. CONCLUSION: Plackett–Burman design and RSM performed well in the optimization of peptic hydrolysis parameters of Acetes chinensis to produce hydrolysate with ACE inhibitory activity. A hydrolysate with potent ACE inhibitory activity and high degree of hydrolysis was obtained, so that the yield of ACE inhibitory peptides in it was high. Copyright © 2011 Society of Chemical Industry     

Influence of degree of hydrolysis on functional properties, antioxidant and ACE inhibitory activities of egg white protein hydrolysate

Functional properties, antioxidant, and angiotensin-I converting enzyme (ACE) inhibitory activities of egg white protein hydrolysate (EWPH) prepared with trypsin at different degree of hydrolysis (DH) were investigated. The DPPH radical scavenging activity, reducing power, lipid peroxidation inhibitory activity, and ACE inhibitory activity increased with DH at first and then decreased gradually. Hydrolysates with 12.4% DH had the highest antioxidant and ACE inhibitory activities. As DH increased, the solubility of EWPH increased while the emulsifying and foaming properties decreased. The functional properties of EWPH were also controlled by pH. Ultrafiltration of the hydrolysate with 12.4% DH revealed that the fractions of molecular weight lower than 3 kDa exhibited the highest antioxidant and ACE inhibitory activities. The results indicated that EWPH with different DH have different bioactive and functional properties and EWPH by controlled hydrolysis may be useful ingredients in food and nutraceutical applications with potential bioactive properties.     

响应曲面法优化小黄鱼ACE抑制肽的酶解条件

以小黄鱼为原料,利用酶解技术制备高活性的ACE抑制肽。通过单因素及响应曲面分析,确定胰蛋白酶(PTN6.0S)的酶解工艺,利用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定酶解产物(0.05g/L)的ACE抑制率,研究pH值、温度、时间、底物质量浓度、酶与底物比等因素对ACE抑制肽活性的影响。结果显示：最佳工艺条件为pH7.0、温度50℃、时间16.5h、底物质量浓度5.6g/100mL、酶与底物比9‰,酶解产物ACE抑制率达87.36%。     

基于超声预处理的脱脂玉米胚芽ACE抑制肽的制备

为了研究超声辅助酶解制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽的较优工艺,通过三种超声设备对脱脂玉米胚芽预处理,碱性蛋白酶酶解,酶解液体外模拟胃肠消化,以消化液ACE抑制率和酶解过程中玉米胚芽水解度(DH)为指标对超声预处理和酶解的参数进行单因素逐级优化。实验结果表明,最佳超声工作模式为20~40 kHz聚能式逆流双频交替超声模式;超声工作参数为功率密度120 W/L,超声预处理时间15 min,初始温度30℃,物料浓度5%;酶解条件为加酶量3000 U/g,酶解时间30 min,pH9.0,酶解温度50℃。在此条件下,酶解液的IC₅₀为4.166 mg/mL,比对照组降低了5.08%;胃肠消化液的IC₅₀为3.986 mg/mL,比对照降低了4.44%。制备的酶解产物,经模拟胃肠消化后具有较强的ACE抑制活性。优化获得的制备脱脂玉米胚芽ACE抑制肽的工艺是可行的。     

Antihypertensive effect of alcalase generated mung bean protein hydrolysates in spontaneously hypertensive rats

Mung bean protein isolates were hydrolyzed by alcalase and neutrase, respectively, and the angiotensin I-converting enzyme (ACE) inhibitory activities of the enzymatic hydrolysates were determined at different hydrolysis times. The highest ACE inhibitory activity recorded was for a hydrolysate generated by alcalase (IC₅₀: 0.64 mg protein/ml) after 2 h of hydrolysis. A significant decrease in systolic blood pressure was observed in spontaneously hypertensive rats following a single oral administration of this hydrolysate at a dose of 600 mg/kg of body weight.