甲状腺乳头状癌BRAF基因突变与临床病理特征间的关系及临床意义

目的 探讨中国甲状腺乳头状癌患者鼠类肉瘤滤过性毒菌(v-Raf)致癌同源体B1(BRAF)基因V600E点突变与其临床病理特征之间的关系及对临床的指导意义。 方法 采用多重突变等位基因PCR方法检测187例甲状腺乳头状癌石蜡包埋组织BRAF基因V600E点突变。利用BRAF基因V600E突变型甲状腺乳头状癌细胞系K1和BRAF基因野生型甲状腺乳头状癌细胞系RO82-W-1进行灵敏度检测。 结果 多重突变等位基因PCR方法可检测最低达1%含量的BRAF基因V600E突变。甲状腺乳头状癌样本检测发现BRAF基因V600E突变率为63.64%(119/187),在甲状腺良性病变中均未检测到BRAF基因V600E突变。单因素分析显示,BRAF基因V600E突变与甲状腺乳头状癌患者年龄(≥ 45岁)、肿瘤分期和预后有关(P<0.05);BRAF基因V600E突变在仅有中央区淋巴结转移组(49.32%)与中央区及颈侧区均有转移组(75.34%)的分布差异具有统计学意义(P<0.05);多因素回归分析显示,BRAF基因V600E突变(OR=2.471,95%CI:1.149~5.312)和颈淋巴结转移(OR=0.333,95%CI:0.114~0.973)是肿瘤远处转移/复发的独立因素(P<0.05)。 结论 BRAF基因V600E突变与甲状腺乳头状癌发生年龄、肿瘤分期相关,是判断甲状腺乳头状癌预后的独立因素。     

细针穿刺样本BRAF基因突变检测在甲状腺结节风险分层管理中的应用价值

目的　探讨甲状腺细针穿刺（fine needle aspiration,FNA）样本的BRAF V600E基因突变检测在甲状腺结节术前风险分层管理中的应用价值。　方法　收集甲状腺结节患者手术前经超声引导下细针穿刺（ultrasound guided fine needle aspiration,US-FNA）样本141例（155个结节）,用实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR,Q-PCR）方法检测FNA样本的BRAF V600E突变情况,同时对US-FNA样本行液基细胞薄层制片、细胞病理学诊断;以术后病理诊断结果为金标准,比较FNA样本BRAF V600E突变检测与术后病理诊断的一致性,并分析FNA样本BRAF V600E突变检测和细胞学检查两种方法在甲状腺结节术前风险分层管理中的优劣。　结果　141例（155个结节）术前FNA样本BRAF V600E突变检测结果显示BRAF V600E突变阳性率为79.4%（123/155）;与术后病理诊断结果比较,FNA样本BRAF V600E突变检测对甲状腺乳头状癌诊断敏感性87.9%、特异性100%、阳性预测值100%、阴性预测值45.2%、准确性89%。FNA细胞学检查对其诊断的敏感性87.9%、特异性78.6%、阳性预测值97.6%、阴性预测值39.3%、准确性87%。BRAF V600E突变检测联合FNA细胞学检查对甲状腺结节良恶性诊断的敏感性94.3%,与单一FNA样本BRAF V600E突变检测和细胞学检查方法的敏感性比较,差异具有统计学意义（P＜0.05）。　结论　甲状腺FNA样本BRAF V600E突变检测联合细胞学检查可作为第一推荐纳入甲状腺结节风险分层管理措施中。     

甲状腺乳头状癌中BRAF V600E突变及其与甲状腺超声表现的关系

目的:探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中BRAF V600E突变及其与甲状腺超声表现的关系。方法:采用PCR反应扩增及DNA直接测序法检测34例PTC患者手术切除的新鲜甲状腺组织及其癌旁组织的BRAF V600E突变情况,比较PTC发生和未发生BRAF V600E突变患者的甲状腺超声检查影像。结果:34例PTC癌组织标本中有18例发生BRAF V600E突变,16例未发生突变;34例PTC癌旁组织标本均未检测到BRAF V600E突变。PTC BRAF V600E突变患者与未发生突变患者甲状腺超声检查的癌块大小、边界是否清楚及有无钙化差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:PTC中BRAFV600E突变率较高;BRAF V600E突变与甲状腺超声表现无明显关系。甲状腺超声表现不能预测PTC中BRAF V600E突变的存在。     

BRAF基因突变检测在甲状腺乳头状病变中的临床意义

目的探讨BRAF基因在甲状腺乳头状病变中的突变情况及临床意义。方法提取石蜡肿瘤组织中DNA,采用直接测序法分析24例甲状腺乳头状癌和30例甲状腺不典型乳头状腺瘤石蜡组织中BRAF基因突变的情况。结合临床资料进一步分析。结果 24例甲状腺乳头状癌,16例发现BRAF基因15外显子第600位密码子A/T杂合（V600E）,突变率为66.7%（16/24）。而30例甲状腺不典型腺瘤中未发现V600E病理性突变（0/30）。结论 BRAF V600E位点突变仅见于甲状腺乳头状癌,具有一定的特异性,可以用于帮助临床甲状腺乳头状增生良恶性的鉴别。     

BRAF V600E基因检测对超声高危、细胞学Bethesda Ⅰ类甲状腺结节良恶性的鉴别诊断价值

目的 探讨BRAF V600E基因检测对超声高危、细胞学BethesdaⅠ类甲状腺结节良恶性的鉴别诊断价值，以及与BRAF V600E基因突变相关的临床超声特征。方法 回顾性分析郑州大学第一附属医院2018年3月至2019年6月经超声诊断为高危且细针穿刺判读为细胞学BethesdaⅠ类的甲状腺结节共780例，其中行BRAF V600E基因检测且有组织病理结果的共70例，将这些患者纳入研究。计算BRAF V600E基因检测在诊断超声高危、细胞学BethesdaⅠ类甲状腺结节的特异度、敏感度、阳性预测值、阴性预测值以及阳性率，构建受试者工作特征(ROC)曲线分析BRAF V600E基因检测对这类结节的诊断效能；应用χ²检验分析与BRAF V600E基因突变相关的临床超声特征。结果 BRAF V600E基因检测诊断超声高危、细胞学BethesdaⅠ类甲状腺结节的特异度为88.2%(15/17),敏感度为90.5%(48/53),阳性预测值为96.0%(48/50),阴性预测值为75.0%(15/20),阳性率为71.4%(50/70),曲线下面积为0.894。χ     

安徽省皖南地区甲状腺乳头状癌患者BRAF和K-ras基因突变的调查

目的:调查安徽省皖南地区甲状腺乳头状癌（PTC）的主要基因突变。方法:收集PTC石蜡包埋组织33例,进行DNA提取,聚合酶链反应法扩增和基因测序检测鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1基因（BRAF）中的缬氨酸（V）被谷氨酸（E）替代（V600E）和K-ras基因的12和13密码子基因突变。所有患者术前均采用发光免疫法检测血清总三碘甲状腺原氨酸、游离三碘甲状腺原氨酸、总四碘甲状腺原氨酸、游离四碘甲状腺原氨酸和促甲状腺激素。结果:33例样本中有13例检测出BRAF基因V600E突变,突变率39.4%;而K-ras基因的12和13密码子没有发现突变;BRAF基因V600E突变与患者性别、年龄和肿瘤直径无关;BRAF基因突变患者血清总三碘甲状腺原氨酸、游离三碘甲状腺原氨酸和促甲状腺激素水平均低于基因非突变患者（P<0.05～P<0.01）,基因突变患者血清游离四碘甲状腺原氨酸水平明显高于非突变患者（P<0.01）,而两者总四碘甲状腺原氨酸水平差异无统计学意义（P>0.05）。结论:BRAF基因V600E突变是皖南地区PTC患者的高发基因突变。     

BRAF V600E和TERT启动子突变与甲状腺乳头状癌临床病理特征的关系

  目的  探讨鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)V600E和端粒酶逆转录酶(TERT)启动子突变与甲状腺乳头状癌(PTC)临床病理特征之间的关系。  方法  采用聚合酶链式反应(PCR)直接测序检测326例PTC患者肿瘤组织的BRAF V600E和TERT启动子的突变情况,并分析其与临床病理特征之间的关系。  结果  BRAFV600E突变率为82.52% (269/326),TERT启动子突变率为3.37%(11/326),其中C228T位点突变9例,C250T位点突变2例,BRAF V600E和TERT启动子同时突变者10例(3.07%)。单因素分析结果显示BRAF V600E基因突变与PTC患者年龄及是否肿瘤复发/远处转移有关(P＜0.05),TERT启动子突变与患者年龄、肿瘤最大径、是否甲状腺腺外侵犯、T分期、AJCC分期及是否肿瘤复发/远处转移有关(P < 0.05)。BRAF V600E和TERT启动子同时突变与患者年龄、肿瘤最大径、是否甲状腺腺外侵犯、T分期及AJCC分期有关(P＜0.05)。  结论  PTC患者肿瘤组织BRAF V600E和TERT启动子同时突变时提示肿瘤侵袭性高。     

甲状腺微小乳头状癌中BRAF V600E基因突变的临床意义

目的 探讨甲状腺微小乳头状癌(PTMC)中BRAF V600E基因突变与淋巴结以及其他临床病理学特征的关系。方法 利用荧光PCR法检测经过手术切除及中央区和/或患侧淋巴结清扫的PTMC患者中BRAF V600E基因的突变情况,深入研究BRAF V600E基因和PTMC淋巴结转移两者之间的联系。结果 在患者性别、年龄以及伴有结节性甲状腺肿或桥本甲状腺炎中BRAF V600E突变没有显著差异(P＞0.05);在伴有淋巴结转移的PTMC中BRAF V600E突变率为100%,明显高于没有淋巴结转移的PTMC(P＜0.05)。结论 在PTMC中,BRAF V600E的突变与淋巴结转移密切相关,通过检测BRAF V600E突变情况可指导临床手术方式的选择。     

肝素结合细胞因子Midkine与甲状腺乳头状癌肿瘤生物学特征和BRAF突变的关系

目的 研究肝素结合因子Midkine(MK)在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达,探讨其表达与肿瘤生物学特征和BRAF突变的关系.方法 采用免疫组化染色法检测100例PTC、30例甲状腺腺瘤和20例癌旁正常甲状腺组织中MK的表达,应用直接测序检测PTC中BRAF基因突变,分析PTC中MK的表达水平与肿瘤生物学特征及BRAF突变的关系.结果 癌旁正常甲状腺组织中未检测到MK的表达,甲状腺腺瘤的MK表达率和平均表达评分分别为6.7%和0.07,PTC中MK的表达率和平均表达评分分别为87%和1.98.伴甲状腺腺外侵袭、淋巴结转移或恶性程度较高的Ⅲ/Ⅳ期PTC中MK表达呈强阳性,且其阳性率和平均染色评分均显著高于无侵袭、无转移或Ⅰ/Ⅱ期PTC(P<0.05).癌旁正常甲状腺组织中未检测到BRAF突变,PTC中BRAF突变率为63%.BRAF突变的PTC中MK表达量显著高于野生型BRAF组(P<0.05).结论 MK在PTC中表达增加,其表达量与PTC恶性程度及BRAF突变密切相关.     

甲状腺乳头状癌BRAFV600E基因突变的研究

目的研究甲状腺乳头状癌（PTC）BRAFV600E基因的突变情况,分析突变与临床特点之间的关系。方法提取42例甲状腺乳头状癌石蜡标本DNA,对BRAF基因第15外显子进行聚合酶链反应（PCR）,产物进行直接基因测序。结果在42例PTC中,检测到19例存在BRAFV600E突变。突变患者组的年龄更轻,而突变组与无突变组间肿瘤大小、是否多灶性、包膜浸润、淋巴结转移、肿瘤分期和组织亚型差异均没有统计学意义。结论BRAF基因突变可能与甲状腺乳头状癌的发生有关。     

中国期刊全文数据库节点文献BRAF^V600E基因突变及p27蛋白表达与甲状腺乳头状癌颈淋巴结转移的关系

目的：研究甲状腺乳头状癌（PTC）中BRAFV600E基因突变及p27蛋白表达并评估在PTC颈淋巴结转移危险因素中的意义。方法：采用PCR-SSCP、DNA序列分析、免疫组化等技术,检测83例PTC标本中BRAFV600E基因突变和p27蛋白染色状况。结果：单因素结果提示PTC颈淋巴结转移情况在年龄、临床分期、BRAFV600E基因突变和p27蛋白表达的差异上有统计学意义（P〈0.05）。而在性别、原发肿瘤直径和病灶单双叶的差异则无明显意义（P〉0.05）。多因素分析结果提示年龄（P=0.009）、BRAFV600E基因突变（P=0.031）和p27蛋白表达（P〈0.001）作为评估甲状腺乳头状癌颈淋巴结转移危险因素上的差异有显著性。结论：BRAFV600E基因突变与甲状腺乳头状癌的发生发展密切相关,BRAFV600E基因突变及p27蛋白低表达可以作为评估PTC颈淋巴结转移的危险因素。     

甲状腺乳头状癌基因突变与其侵袭性相关性研究

  目的  收集就诊于昆明医科大学第三附属医院的甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）患者的临床、病理及基因资料并整理分析,探究PTC基因突变与其侵袭性的相关性,并探讨BRAF V600E单基因突变与中央区淋巴结隐匿性转移的相关性,以期细化PTC的精准治疗。  方法  选择2018年4月至2022年4月就诊于昆明医科大学第三附属医院符合入组标准且同意入组的PTC患者,收集入组患者临床病理及基因资料并整理分析:（1）各基因突变作观察组、野生型作对照,对比各基因型突变与野生型的差异;（2）多基因突变作观察组,单基因突变作对照,对比多基因突变与单基因突变的差异; （3）cN0患者中:BRAF V600E单基因突变作观察组,无基因突变作对照,分析BRAF V600E突变与中央区淋巴结隐匿性转移的相关性。  结果  （1）BRAFV600E突变:中央区淋巴结转移（Central Lymph Node Metastasis CLNM）、N1占比大,转移淋巴结数目多,TPO-Ab降低（P < 0.05）;TERT突变:高龄、男性、侧颈淋巴结转移占比大,侧颈淋巴结转移数目多,T分期晚（P < 0.05）;RET突变:侧颈淋巴结转移占比大、侧颈转移淋巴结数目多,T分期晚（P < 0.05）,NTRK3与ETV6均融合突变,结果一致:突变组侵犯甲状腺包膜占比大（P < 0.05）;RAS突变:Tg-Ab水平低（P < 0.05）;TP53,CCDC6:突变组与野生型组未见明显差异（P≥0.05）;（2）多基因突变组侵犯包膜、侧颈淋巴结转移占比大、侧颈转移淋巴结数量多,M分期晚（P < 0.05）;3.cN0患者中:BRAF V600E单基因突变组CLNM占比大,中央区转移淋巴结数目较多（P < 0.05）。  结论  （1）PTC中,BRAF V600E突变与中央区淋巴结转移相关;（2）多基因突变较单基因突变表现出更强的侧颈淋巴结及远处转移能力;（3）cN0 PTC患者中,BRAF V600E单基因突变与隐匿性中央区淋巴结转移有关。     

新鲜穿刺样本和HE染色细胞样本在甲状腺穿刺BRAF基因V600检测中的价值

目的评价以新鲜穿刺样本和经苏木精-伊红(HE)染色后的细胞样本作为甲状腺穿刺鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)基因V600突变检测样本的适用性。方法收集370例甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)患者的临床资料,及术前细针穿刺(fine-needle aspiration, FNA)细胞学样本和术后福尔马林固定石蜡包埋(formalin-fixed, paraffin embedded, FFPE)样本,并按照FNA样本类型的不同,分为两个亚组。采用扩增阻滞突变系统(amplification refractory mutation system, ARMS)法进行BRAF基因V600的突变检测,并分析其与临床病理特征的关系。结果在术后FFPE样本的分析中,BRAF基因V600的突变率与大多临床病理特征无关,但与病灶数显著相关(P=0.028)。在FNA细胞学样本的分析中,BRAF基因V600的突变率与其细胞学诊断分类极显著相关(P=0.002)。新鲜穿刺样本和HE染色后的细胞样本与术后FFPE样本相比,灵敏度分别为95.7%和98.8%;一致性分别为93.7%和95%。结论不论是新鲜穿刺样本还是HE染色的细胞样本,在BRAF基因V600突变状态检测方面均有很高的灵敏度。在甲状腺的细胞学诊断中,二者均可以成为BRAF基因V600检测的有效补充样本。     

内蒙古地区甲状腺乳头状癌中BRAF V600E基因的表达及意义

目的：测定内蒙古地区蒙古族与汉族甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)患者BRAF V600E突变率及分布情况,进而评估基因突变与临床病理特征的关系。方法：从内蒙古医科大学附属医院甲乳外科及病理科收集2017-1~2019-12行手术治疗的20例汉族与40例蒙古族甲状腺乳头状癌患者的临床资料及存档石蜡组织进行基因检测及分析。结果：蒙古族PTC患者BRAF V600E突变率显著高于汉族患者(P<0.05)。蒙古族BRAF V600E突变与PTC患者是否合并桥本、淋巴结转移及被膜侵犯有关,而与年龄、性别、肿瘤直径、病灶数目、有无钙化无关。结论：内蒙古地区蒙古族与汉族BRAF V600E突变率不同,蒙古族患者BRAF V600E突变与PTC患者是否合并桥本、淋巴结转移及被膜侵犯有关,这些发现可为PTC患者手术方案的制订及预后评估提供参考。     

甲状腺乳头状癌患者临床病理特征和BRAF V600E基因突变对其颈部淋巴结转移的影响

探讨甲状腺乳头状癌（PTC）患者颈部淋巴结转移与原发灶临床病理特征和BRAFV600E基因突变的关联性，阐明PTC患者颈部淋巴结转移的影响因素。     

BRAFT1799A基因突变甲状腺乳头状癌超声特征

目的研究甲状腺乳头状癌（PTC）组织中BRAFT1799A突变与结节超声特征之间的关系。方法选择行甲状腺切除的PTC病人160例,应用聚合酶链反应及DNA直接测序法检测新鲜组织标本中BRAFT1799A基因突变情况,结合甲状腺超声检查结果分析BRAFT1799A基因突变与结节边界、钙化、血流、淋巴结转移及结节大小等超声特征的关系。结果160例PTC病人中,BRAFT1799A突变阳性者46例,突变率为28．75％。BRAFT1799A突变阳性病人血流丰富的比例大于阴性者（x2=4．88,P〈0．05）;Logistic回归分析显示,血流丰富与BRAFT1799A突变呈正相关（0R=3．368,P〈0．01）;BRAFT1799A突变阳性组与阴性组其他超声特征比较差异无显著性（P〉0．05）。结论PTC组织中BRAFT1799A基因突变与结节血流关系密切,而与其他超声特征无明显相关性。