血清氯化物酶法测定

目的建立血清氯化物的α-淀粉酶及其底物2-氯-4-硝基苯-α-D-麦芽三糖苷(CNP-G3)直接测定方法。方法根据氯离子是α-淀粉酶的激动剂原理建立氯化物测定方法,并做方法学评价。结果测定结果的平均偏差率为0.46%;线性范围50~150mmol/L;平均回收率为100.62%;批内CV<1.24%,日间CV<1.86%,总CV1.45%~2.24%;加入高浓度的维生素C、葡萄糖、蔗糖、果糖、α-淀粉酶、三酰甘油、血红蛋白、胆红素、钙离子、溴离子、碘离子、氟离子、硫氰酸钾、对硝基酚、叠氮钠和硫酸铵均未显示干扰。与硫氰酸汞比色法(MTC)(x±s)比较:MTC法(x):(95.66±14.45)mrnol/L,酶法(Y):(95.62±14.93)mmol/L,t=0.078,P>0.5,Y=1.016X-1.587,r=0.984,n=93,P<0.001;与离子选择电极法(ISE)(x±s)比较:ISE法(X):(99.00±13.11)mmol/L,本法(Y)(98.61±12.70)mmol/L,t=0.140,P>0.5,Y=0.962X+3.375,r=0.993,n=44,P<0.001。溶解的工...     

免疫分离法测定血浆脂蛋白残粒胆固醇的临床评价

目的　对免疫分离法测定血浆脂蛋白残粒胆固醇 (RLP C)进行方法学评价 ,并探讨其临床应用价值。方法　分析免疫分离法测定血浆RLP C的精密度、准确度、干扰因素 ,并将该法与超速离心法 (UC)进行比较 ,同时用该法测定 80例正常人、70例冠心病患者、72例 2型糖尿病患者和2 5例Ⅲ型高脂蛋白血症患者空腹血浆RLP C水平。结果　免疫分离法测定血浆RLP C的批内CV为 2 .78%～ 4 .98% ,批间CV为 3.99%～ 7.5 7% ,RLP C浓度 2 .4 4mmol/L以下时线性良好 ,r =0 .992。分析灵敏度为 0 .0 5mmol/L ,回收率为 92 .1%～ 98.3% ,免疫分离法 (X)与超速离心法 (Y)具有良好的相关性 ,Y =1.0 2 2X +0 .0 2 1,r =0 .989。甘油三酯 (TG) <15 .3mmol/L ,血红蛋白 (Hb) <5g/L ,低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C) <7.0mmol/L ,高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C) <3.0mmol/L ,胆红素 <342 μmol/L ,抗坏血酸 <15 0mmol/L时对方法无显著干扰。冠心病患者、2型糖尿病患者和Ⅲ型高脂蛋白血症组空腹血浆RLP C分别为 (0 .4 4 5± 0 .2 5 1)mmol/L、(0 .336± 0 .172 )mmol/L和(0 .878± 0 .6 72 )mmol/L ,均显著高于正常人 [(0 .190± 0 .0 70 )mmol/L],P <0 .0 0 1。结论　免疫分离法测定RLP C操作简单 ,结果准确可靠 ,精密度好 ,符合临床常规使用     

糖化血红蛋白不同测定法的评价

目的　对 3种测定糖化血红蛋白的方法进行方法学评价。方法　用离子交换高效液相层析 (HPLC)法 (X)、微柱亲和层析手工法 (Y1)、胶乳凝集免疫法 (Y2 )测定糖化血红蛋白 ,进行线性范围、回收率、精密度、干扰因素及参考范围的分析。结果　X、Y1、Y2 法的线性范围分别为 2 .8%～ 18%、3.6 %～ 15 .3%、2 .3%～15 .5 %。3种方法的平均回收率均在 95 %～ 10 4 %以内 ,批内、批间平均变异系数 (CV )均 <5 %。 10 .2mmol/L三酰甘油、8.0mmol/L胆固醇、6 84 μmol/L胆红素、10 .1%的HbF对 3种方法均无干扰。Y1法测定结果显著高于X法 (P <0 .0 1) ,回归方程 :Y1=1.15X - 0 .17(r =0 .86 ,P <0 .0 1) ;Y2 法与X法的测定结果差异有显著性(P <0 .0 5 ) ,Y2 法的测定结果偏低 ,回归方程 :Y2 =1.0 4X - 0 .6 9(r =0 .92 ,P <0 .0 1) ;X、Y1、Y2 法的参考范围分别是 4 .3%～ 6 .7%、3.5 %～ 8.3%、3.6 %～ 6 .7%。结论　与HPLC法相比 ,微柱亲和层析手工法测定结果偏高 ,而胶乳凝集免疫法的测定结果偏低。     

脲酶和亮氨酸脱氢酶偶联法动力学测定血清或尿液中尿素

目的　建立适合于自动化分析血清和尿液尿素的脲酶和亮氨酸脱氢酶偶联的连续监测法。方法　对pH、2 酮基异乙烯酸钠、亮氨酸脱氢酶和脲酶浓度等反应条件进行实验研究 ,并对建立的方法进行评价。结果　用双试剂连续监测法 ,试剂Ⅰ :10 0mmol/LN ,N 二乙醇胺基乙酸缓冲液 (pH 8.80 ) ,含 2 酮基异乙烯酸钠 3.0mmol/L、NADH 0 .3mmol/L、亮氨酸脱氢酶 2 .0kU/L。试剂Ⅱ :试剂Ⅰ中加入脲酶 70kU/L。本法线性范围血清 0 .5～ 15 0mmol/L ,尿液 8.0～ 6 5 0mmol/L。血清和尿液的平均回收率分别为 10 2 .1%和 10 1.5 %。血清批内和批间平均CV分别为 1.0 2 %和 1.70 % ;尿液批内平均CV为 1.98%。本法 (Y)和脲酶偶联谷氨酸脱氢酶法 (X)对比相关良好 (血清Y =0 .992X +0 .0 4 0 ,r=0 .993;尿液Y =0 .990X +0 .6 1,r=0 .991)。胆红素 <32 5 μmol/L、血红蛋白 <5g/L、抗坏血酸 <80 0 μmol/L、三酰甘油 (TG) <7.5mmol/L和NH+ 4 <0 .5mmol/L对测定无明显干扰。结论　本法简便、准确、线性范围广 ,可用于常规自动分析。     

偶氮胂Ⅲ分光光度法测定血清镁

目的　建立一种简便、灵敏、试剂稳定性好的分光光度法测定血清镁。方法　用国产试剂偶氮胂Ⅲ作显色剂 ,乙二醇双 (α 氨基乙基 )醚四乙酸 (EGTA)掩蔽钙 ,在三乙醇胺 盐酸缓冲体系中以分光光度法测定血清镁。结果　该方法显色络合物最大吸收波长为 6 4 0nm ,线性范围达 2 .4 7mmol/L ,表观摩尔吸光系数为 1.5× 10 4L·mol-1·cm-1。回收率为 99.5 %～ 10 1.8% ,批内变异系数 (CV)和批间CV分别为 2 .7%与 3.3% ,与MTB法 (X)比较具有良好的相关性 ,Y =0 .982X 0 .0 18,r =0 .9839,P >0 .0 5 ,72名健康人血清镁含量为 0 .6 8～ 1.2 0mmol/L( x± 2s)。结论　该法具有快速、简便、灵敏可靠等优点 ,适于血清镁的常规手工分析和自动分析     

乳酸氧化酶法测定血浆中乳酸

采用乳酸氧化酶氧化乳酸产生丙酮酸和H2 O2 ,然后偶联Trinder显色反应测定血浆中乳酸。方法线性可达 13 2mmol/L ,批内变异系数 (CV)为 0 86 %～ 1 5 6 % ,回收率为 98 9%～ 10 1 5 % ,与LD NBT法比较具有良好的相关 ,r =0 989,Y =0 989X 0 0 3 ,5 0例健康人血浆乳酸参考值为 0 6 1～ 2 5 1mmol/L (x± 2s)。本法简便 ,可靠 ,适合作为乳酸的常规测定方法。     

SYNCHRON CX9 Systems测定葡萄糖和尿素的2种方法比较

目的　了解SYNCHRONCX9Systems全自动生化分析仪在检测葡萄糖 (Glu)与尿素 (Urea)中电极法与化学法性能。方法　分别对 2种方法测定Glu和Urea进行了精密度试验、线性评价试验及方法对比试验。结果　 (1)精密度 :电极法CV值为 1.4 9%～ 6 .4 1%。化学法CV值为 1.33%～ 3.0 5 %。 (2 )线性 :电极法测定Glu和Urea的线性范围分别为 0～ 2 5 .0mmol/L和 0～ 5 2 .0mmol/L ,而化学法为 0 .5～ 35 .0mmol/L和 1.5～35 .0mmol/L。 (3)方法对比实验 :以化学法为实验方法 (X) ,电极法为比较方法 (Y)。Glu :^Y =1.0 10X -0 .10 6 ;r=0 .996 6。Urea :^Y =0 .96 2X 0 .38,r =0 .9973。结论　SYNCHRONCX9Systems全自动生化分析仪在检测血样本Glu与Urea时 ,2种方法的精密度、线性及方法对比实验均符合临床要求。     

胆固醇脱氢酶测定血清胆固醇方法的建立

目的　评价胆固醇脱氢酶测定法在临床应用的可行性。方法　胆固醇酯在胆固醇酯酶的作用下 ,水解为游离胆固醇 ,后者被胆固醇脱氢酶还原为胆烷 4 烯 3 酮 ,同时 β NAD+ 还原为 β NADH +H+ 。联胺能清除其反应产物胆烷 4 烯 3 酮 ,使反应完全。结果　回收率为 99.9%和 10 0 .1% ,在 1.1～ 2 0 .2 8mmol/L内为线性 ;批内CV为 0 .2 9%～ 0 .39% ,批间CV为 0 .4 2 %～ 0 .4 5 % ;乳酸脱氢酶无影响 ;与化学比色法 (X1)和胆固醇氧化酶法 (X2 )比较 ,回归方程分别为Y =0 .992X1- 0 .0 0 6 ,r =0 .997;Y =0 .989X2 - 0 .0 4 8,r =0 .999。结论　本法结果准确、可靠、易自动化。     

酶循环法测定血清总胆汁酸

目的　建立血清总胆汁酸 (TBA)测定的酶循环法。方法　基于用脱氢酶 辅酶体系循环底物的原理 ,建立了本法。结果　本法灵敏度 5 0 μmol/L ,A40 5nm ,1cm>0 .15 ;线性达 180 μmol/L ;批内CV <1.87% ,日间CV <2 .94 % ,总CV <3 .64% ;与普通酶显色法比较 :Y =0 .92 1X - 1.4 2 6,r=0 .9982 ,n =64。胆红素 <85 0 μmol/L、血红蛋白 <5 g/L、抗坏血酸 <2 .84mmol/L、乳酸 <2 4mmol/L、乳酸脱氢酶 <10 0 0 0U/L时 ,对结果无显著干扰。结论　本法灵敏度高 ,线性、精密度好 ,几乎无干扰 ,是一种理想的TBA测定方法。     

吸烟对2型糖尿病患者糖代谢的影响

目的探讨吸烟对 2型糖尿病患者糖代谢的影响。方法用临床化学分析仪测定 2型糖尿病患者吸烟组 (n =1 2 8)与非吸烟组 (n =1 2 0 ,对照组 )的血糖和氨基果糖 (FA) ,放射免疫法测血清胰岛素 ,用稳态模型分析法 (HOMA)评价胰岛素抵抗 (IR)。结果吸烟组与对照组患者空腹血糖 (FPG)水平分别为 (1 0 .0 6± 3.2 6 )mmol/L和 (9.5 0± 3.34)mmol/L(P >0 .0 5 ) ;餐后 2h血糖 (2hPG)分别为 (1 5 .97± 5 .0 0 )mmol/L和 (1 4 .6 4± 4 .71 )mmol/L(P <0 .0 5 ) ;葡萄糖曲线下面积 (AUCglu)分别为 (2 9.2 5± 1 0 .2 2 )mmol/ (L·h)和 (2 5 .1 0± 8.82 )mmol/ (L·h) (P <0 .0 1 ) ;FA分别为 (2 .82± 0 .90 )mmol/L和 (2 .5 0± 0 .75 )mmol/L(P<0 .0 5 ) ;HOMA IR分别为 4 .88± 2 .2 0和 4 .2 1± 1 .83(P <0 .0 5 )。结论吸烟对 2型糖尿病患者的 2hPG、AUCglu和FA均有显著影响 ,可能与其导致的IR增加有关