维生素E对老年雌性大鼠卵巢颗粒细胞形态及凋亡的影响

目的 观察维生素E对老年雌性大鼠卵巢颗粒细胞结构及凋亡的影响.方法 采用自然衰老雌性大鼠,实验组分别给予不同剂量维生素E,用电镜观察卵巢颗粒细胞超微结构的变化,TUNEL法检测颗粒细胞的凋亡.结果 给予外源维生素E组卵巢颗粒细胞形态和线粒体的结构趋于正常,老年对照组则发生明显异常改变,维生素E组卵巢颗粒细胞凋亡百分率降低,中、大剂量维生素E组尤为明显.结论 一定剂量的维生素E可抑制卵巢颗粒细胞超微结构的异常改变,减少颗粒细胞的凋亡,改善老年大鼠卵巢的功能.     

甲氧滴滴涕对大鼠雌性性腺的毒性作用

目的：通过亚慢性甲氧滴滴涕（MXC）染毒,观察MXC的雌性性腺毒性.方法：使用雌性SD大鼠作为实验动物,3mo龄,随机分为4组,每组10只,染毒剂量分别为0（对照）、16（低剂量）、32（中剂量）、64（高剂量）mg/（kg.d）,对照组给予等剂量芝麻油,所有实验大鼠均通过腹腔注射染毒,连续20d.每天用阴道脱落细胞涂片法连续观察并记录动情周期.染毒结束后于动情期将大鼠处死,观察指标包括体质量,卵巢、子宫的脏器系数; 运用光镜计数各级卵泡及黄体数目.结果：①染毒前后各组体质量增加未见显著差异; ②中高剂量染毒组动情期延长,周期数减少; ③中高剂量组卵巢体质量及卵巢指数显著降低; ④中高剂量组闭锁卵泡显著增加,且次级卵泡闭锁率显著升高; 结论：①甲氧滴滴涕可以使动情周期延长,卵泡闭锁增加,对雌性性腺产生毒性; ②低剂量组未对雌性性腺产生明显的影响.     

甲氧滴滴涕对小鼠颗粒细胞的毒性损伤及其卵巢组织线粒体的氧化应激机制

目的: 观察甲氧滴滴涕(MXC)对雌性小鼠颗粒细胞的毒性损伤及其卵巢组织的氧化应激机制.方法: 将40只雌性昆明小鼠随机分为16,32,64mg/(kg·d)组及溶剂芝麻油组(对照组),连续20天经腹腔注射染毒MXC,末次注射MXC24 h 内处死小鼠,TUNEL法、透射电镜观察卵巢颗粒细胞凋亡情况;激光共聚焦显微镜检测小鼠卵巢线粒体活性氧簇(ROS)、线粒体膜电势,紫外分光光度法检测线粒体呼吸链复合物Ⅰ活性变化.结果: TUNEL法显示32,64 mg/kg组凋亡细胞数(40.87±3.31),(47.12±7.20 )较16 mg/kg组(14.00±1.85) 及对照组(13.25±1.67)增加,电镜下见凋亡小体等典型凋亡形态学改变,卵巢组织线粒体膜电势,呼吸链复合物Ⅰ活性在32,64 mg/(kg·d)组低于对照组(P<0.01),线粒体ROS水平则较对照组增高(P<0.01).结论: MXC可以通过引起卵巢组织的氧化应激诱导颗粒细胞凋亡发挥其促进卵泡闭锁的毒性作用.     

大蒜素对2型糖尿病大鼠睾丸组织损伤保护作用

目的:研究大蒜素(Allitridi)对2型糖尿病大鼠睾丸组织损伤的保护作用。方法:将100只大鼠随机分为正常组,模型组,大蒜素低(5 mg/kg)、中(10 mg/kg)、高(20 mg/kg)剂量组,每组20只;采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法制备实验用2型糖尿病大鼠模型,造模完成后腹腔注射给药,每天1次,疗程4周。测定各组大鼠空腹血糖水平,称量体质量、睾丸重量并计算睾丸指数,测定血清睾酮含量,HE染色观察睾丸组织形态结构改变,通过透射电镜观察睾丸组织超微结构改变;通过TUNEL染色观察细胞凋亡状况并计算凋亡指数(Apoptosis Index,AI)。结果:与模型组比较,大蒜素高、中剂量组血糖水平显著降低,体重和睾丸重量显著升高,睾丸指数显著升高,血清睾酮含量显著升高,差异均具有统计学意义(P0.05,P0.01)。光镜下可见模型组大鼠睾丸曲细精管萎缩、生精细胞脱落且数量显著减少等病理性改变,电镜下可见模型组线粒体减少、内质网扩张、脂滴形成、细胞核固缩、染色质呈块状浓集等病理性改变,经TUNEL染色可见模型组睾丸组织凋亡细胞数量较正常组明显增多,经大蒜素治疗后上述病理性变化和细胞凋亡状况均明显改善,其中以大蒜素高剂量组最为显著,大蒜素高剂量组AI较正常组显著降低(P0.01)。结论:大蒜素对2型糖尿病大鼠睾丸组织损伤具有一定的保护作用,其机制可能与改善睾丸组织病变和睾丸细胞结构改变、抑制细胞凋亡有关。     

甲醛对雌性大鼠卵巢组织Fas凋亡途径 相关基因表达的影响

目的：观察甲醛对雌性大鼠卵巢组织Fas,caspase-8和caspase-3表达的影响,探讨甲醛对雌性大鼠卵巢毒性的分子机制。方法：将40只雌性SD大鼠随机分为正常对照组和3个不同浓度甲醛处理组, 腹腔注射甲醛, 剂量分别为20.0,2.0和0.2 mg/kg, 每天1次,连续14 d后处死所有大鼠后取卵巢组织,用RT-PCR检测Fas和caspase-8 mRNA表达,Western印迹检测Fas蛋白表达,分光光度法检测caspase-8和caspase-3的活性。结果：甲醛染毒组动物卵巢组织Fas与caspase-8 mRNA表达以及caspase-8和caspase-3活性明显高于对照组,且随剂量的增加而增加（P＜0.05）。结论：Fas基因表达与caspase活性的增强可能是甲醛诱导雌性动物卵巢毒性的重要机制。     

TUNEL法探讨以“肝脾”为核心对高催乳激素血症模型大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响

目的:运用TUNEL法探讨以"肝脾"为核心对高催乳激素血症(Hyperprolactinemia,HPRL)模型大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响。方法:将SD成熟雌性大鼠,随机分为空白对照组、模型组、溴隐亭组、中药高、中、低剂量组。除空白对照组外,其余组用甲氧氯普胺腹腔注射制作HPRL大鼠模型,各组完成相应30天灌胃治疗后,处死开腹取卵巢,运用TUNEL法检测凋亡阳性细胞数。结果:中药高剂量组能显著降低凋亡小体(P0.01),各剂量组呈量效关系;颗粒细胞生长量多、排列整齐、形态规则;中剂量组次之;低剂量组较差;结论:逍遥散加减方可降低凋亡小体的表达,改善卵巢颗粒细胞的形态,减少颗粒细胞凋亡。     

被动吸烟对大鼠卵巢组织结构的影响

目的 利用Wistar大鼠被动吸烟模型,观察被动吸烟对Wistar大鼠卵巢结构的影响,为提倡生育期妇女避免被动吸烟提供新的理论依据.方法 建立大鼠烟雾吸入模型.32只健康雌性Wistar大鼠,每只体重200～ 250g,随机分为实验组和对照组,每组16只.实验组被动吸烟3个月,对照组正常饲养.两组大鼠均于饲养3个月后处死,取双侧卵巢.常规石蜡切片,HE染色,光镜观察卵巢形态结构;以半薄切片为指导进行超薄切片,醋酸双氧铀染色,透射电镜观察卵巢超微结构.结果 ①光镜观察：吸烟组大鼠卵巢充血性囊性退变,皮质萎缩,卵泡颗粒细胞排列紊乱;生长卵泡的颗粒细胞松散变性,排列不整齐;卵泡数减少,成熟的卵母细胞数目明显减少;髓质血管收缩,减少;间质疏松.②电镜观察;对照组可见多个卵泡细胞,细胞内有空白颗粒及高密度颗粒.实验组可见多个颗粒细胞层,内有增粗的内质网、核糖体;核周隙局部增宽,线粒体模糊;线粒体水样变、空泡样变,线粒体嵴断裂、模糊;内质网脱颗粒样变.结论 ①成功建立了大鼠被动吸烟模型.②被动吸烟可破坏雌鼠卵巢的组织结构和超微结构,为吸烟对女性生殖功能的影响提供形态学基础.     

急性坏死性胰腺炎肠道超微结构改变和褪黑素的保护作用

目的 观察急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肠道超微结构及其通透性的变化,探讨褪黑素(MT)对肠道屏障功能(IBF)的影响.方法 将72只SD大鼠随机分成ANP组、MT组、假手术组(SO组),各24只.ANP组和MT组大鼠采用胰胆管末端穿刺逆行注入5%牛磺胆酸钠制备ANP模型.MT组于制模前腹腔注射MT溶液.术后4、12、24、48 h处死动物,用ELISA法测血清肠脂肪酸结合蛋白(IFABP),光镜下观察末端回肠病理改变,电镜下观察回肠组织超微结构变化,TUNEL法观察肠上皮细胞凋亡情况.结果 SO组大鼠胰腺及回肠黏膜未见明显病理改变,回肠组织超微结构无明显变化,TUNEL法检查未见明显细胞凋亡;ANP组大鼠光镜下可见回肠柱状上皮细胞坏死、绒毛脱落,回肠超微结构异常最明显,上皮细胞微绒毛排列紊乱且短矮,TUNEL法提示回肠上皮凋亡细胞较多,以绒毛顶端为主;MT组大鼠病理改变、超微结构异常均较ANP组减轻,上皮凋亡细胞较ANP组减少.ANP组大鼠各时点血清IFABP水平较SO组显著升高,差异有统计学意义(P均＜0.05);而MT组大鼠各时点血清IFABP水平较ANP组显著下降,差异亦有统计学意义(P均＜0.05).结论 ANP可导致IBF障碍,肠上皮细胞有不同程度的坏死和凋亡.提示ANP发病早期肠道上皮细胞凋亡和增生之间失去平衡是IBF障碍的病理机制之一.予以MT干预,可以改善ANP发病后的肠道病理改变和肠道超微结构异常,其作用途径可能是通过抗氧化作用及抑制炎症反应,有待进一步的研究证实.     

道地通管汤对卵巢早衰大鼠的影响机制研究

目的：探讨道地通管汤对卵巢早衰模型大鼠卵巢功能的影响机制。方法：将40只动情周期规律的SD雌性大鼠随机分为：空白组、模型组、阳性组（补佳乐0.099 mg/kg）、道地通管汤高剂量组（1.4 g/100g）、道地通管汤中剂量组（0.7 g/100 g）。模型组、阳性组、道地通管汤高剂量组、道地通管汤中剂量组采用雷公藤多苷片混悬液（50 mg/kg）连续灌胃14 d，构建卵巢早衰大鼠模型。造模结束后，各组分别给予相应干预剂，连续28 d。干预结束后，各组均取大鼠血清和卵巢组织。HE染色观察大鼠卵巢组织形态结构；ELISA法检测大鼠血清AMH水平；IHC检测卵巢组织中的Bcl-2、Bax及VEGF蛋白表达；TUNEL染色观察卵巢内的颗粒细胞凋亡情况。结果：与空白组相比，模型组大鼠各级生长卵泡均减少，闭锁卵泡增多；血清AMH水平显著下降（P<0.01）；卵巢组织Bax蛋白表达升高（P<0.01）;Bcl-2、VEGF蛋白表达降低（P<0.01,P<0.05），卵巢组织内卵泡颗粒细胞凋亡率升高（P<0.01）；与模型组相比，各中药剂量组血清AMH水平均有不同程度升...     

genistein后处理对缺血／再灌注损伤的大鼠心肌细胞凋亡和超微结构的影响

目的 观测genistein后处理对在体大鼠心脏局部缺血/再灌注模型大鼠心肌细胞凋亡、心肌组织病理形态学及超微结构变化的影响.方法 40只实验动物随机分为5组,分别为假手术组、缺血/再灌注组、genistein 0.1,1.0,5.0 mg/kg后处理给药组.光镜下观察各组心肌组织病理变化,电镜下观察各组心肌组织超微结构变化,DNA原位末端缺口标记法(TUNEL)检测各组心肌细胞凋亡数,观察凋亡指数变化,检测各组心肌组织中caspase-3活性,观察caspase-3的比活性变化.结果 各剂量genistein后处理组的凋亡指数与缺血/再灌注组相比均显著下降,各组caspase-3比活性变化趋势与凋亡指数变化趋势相吻合.心肌组织损伤的病理形态学和超微结构随给药剂量不同而变化,呈现出1.0 mg/kg组损伤最轻,0.1 mg/kg时损伤次之,5.0 mg/kg时损伤又较重.结论 genistein后处理对在体大鼠心肌缺血/再灌注损伤具有保护作用,保护机制与抑制心肌细胞凋亡有关,并且该保护效应与给药剂量相关.