逆转灵巢式聚合酶链反应检测重型肝炎患者血清HGVRNA及分析

采用逆转录巢式聚合酶链反应技术检测重型肝炎患者血清ＨＧＶＲＮＡ并与临床病死率间关系进行了初步探讨。     

聚合酶链反应检测重型肝炎患者血清HBVDNA

采用ＰＣＲ法检测４８例重型肝炎患者血清中ＢＨＶＤＮＡ存在情况，并与斑点杂交检测进行比较，结果表明：ＰＣＲ检测３９例阳性，检出率为８１．３％（３９／４８）．ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）组ＰＣＲ检测均阳性（８／８），ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（－）组阳性率为８８．０％（２２／２５），抗体阳性组检出率为７２．７％（８／１１），检测灵敏度为１．０ｆｇ；斑点杂交检测１５例阳性，阳性率３０．２％（１５／４８），各组斑点杂交阳性率均低于ＰＣＲ法．提示：（１）大多数重型肝炎患者血清中存在低滴度的病毒颗粒，对重肝发病有一定作用；（２）大部分ＨＢｅＡｇ阴性，抗体阳性的重型肝炎患者血清仍有传染性，应考虑抗病毒治疗．     

逆转录——巢式聚合酶链反应检测戊型肝炎病毒核酸方法的建立

逆转录—巢式聚合酶链反应检测戊型肝炎病毒核酸方法的建立＊鲁学恒１李颖王占英乔光彦刘庆成（第二临床学院传染科，沈阳１１０００３）关键词戊型肝炎；戊型肝炎病毒；逆转录—巢式聚合酶链反应近来，聚合酶链反应方法已应用于ＨＥＶ的研究，但作为临床ＨＥＶ的诊断方法...     

重型肝炎患者血清肝炎病毒标志的检出及预后的关系

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对２０３例重型肝炎的血清肝炎病毒标志物进行检测，结果显示单纯ＨＢＶ感染１０８例（５３．２％）ＨＣＶ感染６例（２．９５％），ＨＥＶ感染８例（３．９４％），ＨＢＶ和ＨＣＶ混合感染１７例（８．３７％），ＨＢＶ和ＨＥＶ混合感染３６例（１７．７３％），１２例（５．９１％）未找到确切病因，表明ＨＢＶ感染仍是重型肝炎的最主要病因（１７６／２０３），其次     

重型肝炎血清中抗庚型肝炎病毒抗体的检测和分析

重型肝炎血清中抗庚型肝炎病毒抗体的检测和分析舒波窦晓光马力刘沛秦嘉新１（第二临床学院传染科，沈阳１１０００３）关键词重型肝炎；庚型肝炎病毒抗体；庚型肝炎病毒继甲、乙、丙、丁和戊型肝炎病毒后，１９９５年又发现了庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）［１］。１９９６年我...     

改良巢式逆转录聚合酶链反应检测大肠癌血中微转移

目的探讨改良巢式RT-PCR法检测大肠癌患者外周血中CK20mRNA的表达情况,并分析其与微转移的关系,建立一种简便、快速的检测血中癌细胞微转移的方法。方法采用改良的巢式RT-PCR技术检测大肠癌患者及正常对照组外周血CK20mRNA的表达。结果CK20mRNA在正常对照组中均无表达,在大肠癌患者中阳性表达率为55.4%（62/112）。不同细胞分化程度大肠癌患者其外周血中CK20mRNA阳性表达率无显著性差异（P〉0.05）;而不同Dukes分期大肠癌患者其外周血中CK20mRNA阳性表达率有显著性差异（P〈0.05）。结论改良的巢式RT-PCR技术检测血中微转移大肠癌细胞的CK20mRNA具有简便、快速、灵敏的优点,有助于癌细胞微转移的早期诊断,有助于指导辅助化疗和监测疗效。     

巢式聚合酶链反应检测血清HBV DNA对乙肝治疗的临床意义

【摘要】 目的 研究使用巢式聚合酶链反应检测血清中HBV DNA对治疗乙肝的临床意义。方法 筛选146例乙型肝炎病毒（HBV）感染者,先采用ELISA检测HBVM作为参照,再分别采用FQ PCR和nPCR检测参与研究的HBV病人HBV DNA,并判断HBV的复制和活动情况。另外选择49名健康者作为对照组。结果 PCR模板1和PCR模板4中的HBV DNA阳性率都很高,PCR模板1中ELISA检测的阳性率与套式聚合酶链反应（nPCR）和实时荧光定量PCR（FQ PCR）检测HBV DNA的阳性率差异显著（P＜005）。PCR模板2中ELISA检测阳性率与nPCR和FQ PCR检测HBV基因的阳性率,无明显差异（P＞005）。nPCR法和FQ PCR法的结果对比可见,nPCR的阳性率显著高于FQ PCR,具有明显差异（P＜005）。nPCR的阳性率要比ELISA的阳性率高很多,具有明显差异（P＜005）。ELISA阳性率比对照组高很多,具有明显差异（P＜005）。结论 采用nPCR检测技术诊断HBV疾病的检出率高、特异性强,对HBV疾病的诊断具有很高的实用价值,可在临床推广应用。     

聚合酶链反应检测HGV RNA方法的建立及应用

了解我国不同人群中庚型肝炎病毒感染的状况。方法；以ＮＢ５区序列分析为基础设计引物，建立了聚合酶链反应方法，并对我国几个地区，不同疾病状况的２６８例患者进行庚型肝炎病毒核酸的检测。结果；有输血史的健康人群，ＨＢＶ和ＨＣＶ感染者及慢性非乙非丙型肝炎患者的ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ ＲＮＡ阳性率均高于自然人群，分别为１３．３％，１８．４％，１９．８％，８．９％，其中有明显血液暴露史者的检出率达２０．１％。     

逆转录巢式多聚酶链反应对输血后肝炎HCV核酸检测及临床意义

本文采用逆转录巢式多聚酶链反应（ＲＴ一ｎＰＣＲ）等法，对４９例输血后肝炎（ＰＴＨ）患者同时检测ＨＣＶＲＮＡ、ＨＢＶＤＮＡ及其有关血清学标志，结果显示：ＨＣＶ与ＨＢＶ感染率分别为８１．６％、３４．６％，其中双重感染者占２２．４％。抗一ＨＣＶ与ＨＣＶＲＮＡ符合率为７９．４％，抗一ＨＣＶ阴性患者中，４０％可检出ＨＣＶＲＮＡ，表明检测抗一ＨＣＶ对诊断排除ＨＣＶ感染有一定意义，但抗一ＨＣＶ阴性并不能排除ＨＣＶ感染。     

37例病毒性肝炎患者庚型肝炎病毒RNA检测结果分析

应用ＲＴ－ＰＣＲ技术对３７例住院病毒性肝炎患者作庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）ＲＮＡ检测。结果７例阳性，阳性率为１８．９２％。其中１３例原因不明肝炎ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性４例，阳性率为３０．７６％。男、女均是ＨＧＶ的易感者，传播途径与丙肝、乙肝可能相似，有各种临床类型，肝功能损害程度较轻，ＨＧＶ可单纯感染，也可与其他肝炎病毒同时或重复感染。７例ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性者，其中４例作肝组织病理检查，例７见合胞体巨细胞     

丁型肝炎病毒RNA巢式逆转录PCR检测

为了提高丁型肝炎病毒的实验室诊断水平，建立一个高敏感性和特异性的丁型肝炎病毒的检测方法。根据ＧＥＮＢＳＡＮＫ中ＨＤＶ的核酸序列设计出巢式引物，采用逆转录巢式ＰＣＲ方法对４０例肝炎患者进行检测。结果：２０例丁型肝炎病毒抗原阳性的ＨＦＶ ＲＮＡ均为阳性，１０例丁型肝炎病毒抗体阳性中ＨＤＶ ＲＮＡ阳性６例，１０例单纯ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ和ＨＢｄ阳性均未检出ＨＤＶＲＮＡ。     

聚合酶链反应检测血清丁型肝炎病毒核酸

目的为建立一种特异性强、敏感性高的检测丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）感染的方法，提高丁型肝炎的诊断水平。方法根据ＨＤＶＲＮＡ保守区（６５４～９６３位核苷酸）设计合成两对引物，采用逆转录－套式聚合酶链反应（ＲＴ－“ｎｅｓｔｅｄ”ＰＣＲ）对３５例肝炎患者血清进行检测。结果二次ＰＣＲ扩增的特异性和敏感性均较一次ＰＣＲ高。１９例丁型肝炎抗原阳性者ＨＤＶＲＮＡ均为阳性，９例丁型肝炎抗体阳性者中有６例阳性，７例单纯ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ阳性者均未检出ＨＤＶＲＮＡ。结论这一检测方法特异性强、敏感性高，可广泛用于临床检测。     

丁型肝炎病毒RNA巢式逆转录PCR检测

为了提高丁型肝炎病毒的实验室诊断水平，建立一个高敏感性和特异性的丁型肝炎病毒的检测方法。根据ＧＥＮＢＡＮＫ中ＨＤＶ的核酸序列设计出巢式引物，采用逆转录巢式ＰＣＲ方法对４０例肝炎患者进行检测。结果：２０例丁型肝炎病毒抗原阳性的ＨＤＶＲＮＡ均为阳性，１０例丁型肝炎病毒抗体阳性中ＨＤＶＲＮＡ阳性６例，１０例单纯ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｃ阳性的均未检出ＨＤＶＲＮＡ。结论：巢式逆转录ＰＣＲ可以作为丁型肝炎病毒临床检测的一种方法     

聚合酶链反应检测血清HBV—DNA

评价聚合酶链反应法检测血清ＨＢＶ－ＤＮＡ的临床意义及其优越 性。方法：用ＰＣＲ法测定８１例血清ＨＢＶ标志物阳性的ＨＢＶ－ＤＮＡ，并与固相放射免疫测定法作比较。     

重型肝炎患者血清肝炎病毒标志的检出及与预后的关系

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对２０３例重型肝炎的血清肝炎病毒标志物进行检测，结果显示单纯ＨＢＶ感染１０８例（５３．２％），ＨＣＶ感染６例（２．９５％），ＨＥＶ感染８例（３．９４％），ＨＢＶ和ＨＣＶ混合感染１７例（８．３７％），ＨＢＶ和ＨＥＶ混合感染３６例（１７．７３％），１２例（５．９１％）未找到确切病因，表明ＨＢＶ感染仍是重型肝炎的最主要病因（１７６／２０３），其次为ＨＥＶ感染（５０／２０３），ＨＣＶ感染排第三。本文尚观察到ＨＢＶ混合ＨＥＶ感染病死率高。     

巢式聚合酶链反应对白血病融合基因的检测分析

目的:探讨并分析巢式聚合酶链反应在白血病融合基因中的检测与应用。方法:回顾性分析71例白血病患者的临床资料,运用巢式聚合酶链反应,检测患者包括bcr/abl、PML/RARa、AML/ETO所有融合基因融和变异的引物阳性率。结果:38例慢性粒细胞白血病患者,bcr/abl融合基因的总阳性率为83.4%。12例急性早幼粒细胞白血病患者,PML/RARa融合基因的总阳性率为57.1%。6例急性粒细胞白血病M2患者,AML/ETO总阳性率为27.9%。结论:巢式聚合酶链反应具有较高准确性、灵敏性、简便性,为临床治疗提供较高的参考价值。     

定量聚合酶链反应检测慢性乙型和丁型肝炎患者血清HBV DNA

本研究应用新型定量ＰＣＲＨＢＶ检测法－ＡｃｕＧｅｎ Ａｍｐｌｉｓｅｎｏｒ＾ＴＭ ＨＢＶ法对７０例慢性乙型与丁型肝炎病例进行血清ＨＢＶ ＤＮＡ水平测定，观察乙肝在丁肝病毒重叠感染时是否对ＨＢＶ ＤＮＡ复制存在抑制作用。实验结果：乙肝组（３４你）及丁肝组（３６例）定量ＰＣＲ测ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率为８８．２％（３０／３４）和９１．７％（３３／３６）（Ｐ〉０．０５）。乙肝组ＨＢｅＡｇ阳性与抗ＨＢｅ阳性病例