慢性氟中毒大鼠脑组织氧化应激水平及学习记忆功能的变化

目的 观察慢性氟中毒大鼠脑组织及血浆氧化应激水平的改变,探讨氟中毒性神经损害发病机制中氧化应激水平与学习记忆的关系.方法 SD大鼠按体质量随机分为3组,每组8只.对照组:自由饮用自来水,自来水含氟量低于0.5 mg/L;低剂量染氟组:饮水含氟量为5 mg/L;高剂量染氟组:饮水含氟量为50ms/L.实验期为6个月.检测大鼠学习记忆功能、血浆和脑组织总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)水平.结果 高剂量染氟组大鼠逃避潜伏期[(14.37±3.48)s]长于对照组[(5.84±1.87)s]和低剂量染氟组[(7.18±1.42)s],两组间比较差异有统计学意义(P<0.05);高剂量染氟组、低剂量染氟组大鼠血浆和脑组织T-AOC水平[(1.37±0.27)×103 U/L、(0.24±0.06)×103 U/g Pr,(1.20±0.14)×103 U/L、(0.41±0.10)×103 U/g Pr]低于对照组[(2.17±0.11)×103 U/L,(0.79±0.11)×103 U/g Pr],两组间比较差异有统计学意义(P<0.05);高剂量染氟组大鼠血浆和脑组织MDA水平[(3.72±0.59)mmol/L、(4.01±0.21)mmol/g Pr]显著高于对照组[(2.34±0.16)nunol/L、(2.97±0.11)mmol/g Pr]和低剂量染氟组[(2.68±0.33)mmol/L、(3.38±0.21)mmol/g Pr],两组间比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 慢性氟中毒可使机体氧化应激水平升高,大鼠学习记忆能力减退可能与氧化应激水平的升高有关.     

氟铝联合中毒对小鼠骨代谢生物标志物的影响

目的 分析氟铝联合染毒小鼠骨代谢标志物的变化,探讨氟铝联合对骨毒性效应的特征和机制.方法 采用2因素3水平析因设计方法将昆明种小鼠分成9组,由氟化钠(NaF,0、50、150mg/L)、氯化铝(AlCl3,0、200、600 mg/L)经饮水染毒,24周后采集血清、尿液,测定血清钙(Ca)、磷(P)、镁(Mg)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)、甲状旁腺激素(PTH)及尿Ca、P.结果 氟铝联合对血清Ca、BGP和尿Ca的影响存在交互作用(F值分别为17.370、4.399、9.448,P<0.01),对血清P、Mg、ALP、PTH和尿P的影响不存在交互作用(F值分别为0.416、0.415、1.921、1.362、1.630,P0.05).高氟组血清Ca[(1.13±0.27)mmoL/L]、BGP[(6.56±5.74)μg/L]比对照组[(1.82±0.37)mmol/L、(23.45±15.40)μg/L]降低(P<0.05),高氟低铝组升高到(1.76±0.36)mmol/L、(10.57±4.28)μg/L,高氟高铝组升高到(2.10±0.51)mmoL/L、(15.73±3.15)μg/L;低氟组尿Ca[(6.24±2.61)mmol/mmol Cr]比对照组[(3.12±2.04)mmol/mmol Cr]升高(P<0.05),与低铝、高铝联合时降低[(0.81±0.44)、(1.23±0.41)mmol/mmol Cr],联合作用与氟单独效应相反.高铝组血清Ca为(1.07±0.68)mmol/L、BGP为(7.21±5.22)μg/L.低氟高铝组升高到(1.47±0.18)mmol/L、(10.98±4.35)μg/L,高氟高铝组升高到(2.10±0.51)mmoL/L、(15.73±3.15)μg/L,联合作用对BGP的影响与铝单独作用随剂量增高的效应趋势相同.结论 本实验条件下,铝拮抗氟对部分骨代谢标志物的作用,氟则促进铝的作用,氟铝联合染毒时骨代谢标志物均降低,联合作用抑制骨形成和骨矿化过程,造成骨代谢紊乱.     

氟铝联合对大鼠全血锌、铁、钙、镁、铜的影响

目的 探讨过量氟、铝及其联合作用对大鼠全血锌(Zn)、铁(Fe)、钙(Ca)、镁(Mg)、铜(Cu)的影响.方法 48只SD大鼠按体质量随机分为4组:对照组、高铝组、高氟组、高氟铝组,饮水含铝量分别为0,90、0.90 mg/L:饲料含氟量分别为5.2、5.2、106.0、106.0 mg/kg,含铝量分别为6.8、6.8 19.7、19.7 mg/kg;90 d后原子吸收光谱分析法测定全血Zn、Fe、Ca、Mg、Cu水平.结果 组间比较,全血含Zn、Fe、Mg、Cu量差异有统计学意义(F值分别为46.25、14.74、6.10、Z93,P<0.05),而全血含Ca量未见明显改变(F=2.81,P>0.05).析因分析显示.高铝摄入明显降低全血含Zn、Fe、Mg量(F值分别为42.66、5.41、7.04,P<0.05),高氟摄人明显降低全血含Zn、Fe、Mg、Cu量(F值分别为64.50、37.90、9.75、6.74,P<0.05),氟铝联合对全血含Zn量有交互作用(F:31.59,P<0.05),Fe、Ca、Mg、Cu均未见明显交互作用(F值分别为0.91、1.63、1.51、0.00,P>0.05).与对照组全血含Zn、Fe、Mg、Cu量[(131.30±13.86)μmol/L,(10.24±1.02)、(1.71±0.19)mmol/L,(20.43±4.42)μmol/L]比较,高铝组全血含Zn量[(90.84±9.98)μmol/L]明显降低(P<0.05),高氟组全血含Zn、Fe、Mg量[(85.85±10.92)μmol/L,(8.49±0.68)、(1.52±0.13)mmol/L]也明显降低(P<0.05),高氟铝组全血含Zn、Fe、Mg、Cu量[(82.82±11.00)μmol/L,(8.16±0.45)、(1.46±0.09)mmol/L,(15.69±2.38)μmol/L]均明显降低(P<0.05);与高铝组[(9.43±1.09)mmool/L]比较,高氟铝组全血含Fe量[(8.16±0.45)mmol/L]明显降低(P<0.05).结论 过量氟能引起全血含Zn Fe、Mg、Cu量下降,过量铝能引起全血含Zn、Fe、Mg量降低;氟铝联合对大鼠全血含Ca量无影响,仅对全血含Zn量有明显交互作用.     

茶多酚对饮茶型氟中毒大鼠关节软骨氧化损伤的保护作用

目的 探讨茶多酚对饮茶型氟中毒大鼠关节软骨的氧化应激损伤的保护作用.方法 120只雄性Wistar大鼠按体质量随机分为6组:对照组、加氟组、氟+茶多酚组、氟+铝组、氟+铝+茶多酚组和砖茶组.加氟组每日饮用含氟(F-)100.00 mg/L的氟化钠(NaF)水溶液;氟+茶多酚组每日饮用含F-100 mg/L、茶多酚10.0 g/L的水溶液;氟+铝组每日饮用含F-100.00 mg/L、铝(Al3+)200.00 mg/L的水溶液;氟+铝+茶多酚组同时饮用含有上述3种物质的水溶液:砖茶组饮用砖茶沏制而成的砖茶水(F- 100.00 mg/L、Al3+215.00mg/L、9.2 g/L);对照组饮用自来水(F- 0.33 mg/L).连续饲养3个月,处死动物,检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)、戊二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和细胞因子白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)的水平;RT-PCR和免疫组化法检测关节软骨中诱生型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA及蛋白表达.结果 氟 +铝+茶多酚组SOD水平[(664.009±29.589)kU/L]与加氟组、氟+销组[(625.328±27.199)、(652.282±13.926)kU/L]比较有升高趋势,但是差异无统计学意义(P均>0.05);氟+茶多酚组、氟+铝+茶多酚组、砖茶组T-AOC水平[(10.874±0.721)、(11.871±0.941)、(10.380±2.747)kU/L]与加氟组、氟+铝组[(8.849±1.887)(8.210±1.740)kU/L]比较,差异有统计学意义(P均<0.05);氟+铝+茶多酚组血清中MDA水平[(3.235±0.446)μmol/L]与加氟组、氟+铝组[(3.889±0.387)、(4.580±0.474)μmol/L]比较,差异有统计学意义(P均<0.05);氟+茶多酚组、氟+铝+茶多酚组、砖茶组血清中NO水平[(23.278±2.386),(20.643±2.623)、(24.367±6.072)μmol/L]与加氟组、氟+铝组[(32μ962±8.268)、(34.909±6.288)μmol/L]比较,差异有统计学意义(P均<0.05):加氟组、氟+销组、氟+茶多酚组、氟+铝+茶多酚组、砖茶组血清IL-1β水平分别为(4.728±0.297)、(4.412±0.229)、(4.432±0.285)、(4.516±0.351)、(4.614±0.2270)ng/L,组间比较,差异无统计学意义(F=2.314,P>0.05);氟+铝+茶多酚组、砖茶组IL-6水平[(7.231±0.596)、(7.325±0.290)ng/L]与氟+铝组[(8.256±0.635)ng/L]比较,差异有统计学意义(P均<0.05).氟+茶多酚组、氟+铝+茶多酚组、砖茶组iNOS mRNA相对表达量(0.482±0.021、0.447±0.021、0.491±0.022)与加氟组、氟+铝组(0.562±0.025、0.591±0.020)比较,差异有统计学意义(P均<0.05);对照组iNOS蛋白表达阳性细胞主要分布在关节表层,各实验组iNOS阳性细胞在关节面表层、中层均有分布.结论 茶多酚能通过清除氧自由基、提高机体总抗氧化能力、减少脂质过氧化产物等抗氧化作用减轻饮茶型氟中毒引起的大鼠氧化应激损伤,对饮茶型氟中毒有一定的保护作用.     

慢性氟中毒对大鼠精子活动度的影响

目的 探讨慢性氟中毒对大鼠精子活动度的影响,为氟的生殖毒性研究提供实验依据.方法 健康雄性Wistar大鼠32只,体质量150～180 g,按体质量随机分为4组:生理盐水(对照)组、低、中、高氟组(100、200、300mg·kg~(-1)·d~(-1)NaF),灌胃染毒90 d,每天称体质量.染毒结束后处死大鼠,摘取肝脏、肾脏、睾丸,称质量并计算脏器系数;取附睾游离精子,WLJY-9000型伟力彩色精子质量检测系统测定精子运动参数.结果 染毒第30天低、中氟组大鼠体质量[(235.00±14.56)、(235.44±24.99)g]高于高氟组[(206.00 ±18.16)g,P均<0.05)];第60、90天组大鼠体质量比较差异无统计学意义(F值分别为0.578、1.893,P均>0.05).大鼠肝脏系数、肾脏系数、睾丸系数组间比较差异无统计学意义(F值分别为2.148、0.907、1.801,P均>0.05).精子运动参数,平均路径速度(VAP)高氟组[(25.04 ±4.59)μm/s]较对照组[(20.22 ±3.29)μm/s]升高;直线速度(VSL)低、中、高氟组[(18.82 ±3.19)、(17.84 ±4.54)、(16.46 ±2.63)μm/s]较对照组[(12.48 ±1.73)μm/s]升高;直线性(LIN)低、中、高氟组[(23.84±1.58)%、(24.99±3.37)%、(26.75 ±5.07)%]较对照组[(33.29±4.00)%]降低,摆动性(WOB)中、高氟组[(47.03 ±3.98)%、(49.21±7.73)%]较对照组[(38.09 ±0.48)%]升高;平均移动角度(MAD)低氟组[(68.29 ±5.71)度/s]较对照组[(81.57 ±8.44)度/s]降低;鞭打频率(BCF)高氟组[(11.47 ±0.61)次/s]较对照组[(9.49 ±0.34)次/s]升高;精子密度(p)低、中氟组[(1.26 ±0.24)×10~9、(1.84 ±0.50)×10~9/L]较对照组[(3.94±1.10)×10~9个/L]降低(P均<0.05);曲线速度(VCL)、前向性(STR)、侧摆幅度(ALH),组间比较差异无统计学意义(F值分别为0.264、2.209、1.667,P均>0.05).结论 慢性氟中毒可影响大鼠精子活动度.降低精子密度.损害大鼠生殖系统.     

大豆、硒粉、螺旋藻对高摄铝下氟中毒大鼠的干预效果

目的 观察高摄铝状态下氟中毒大鼠大豆、硒粉、螺旋藻的干预效果.方法 将断乳2周的SD纯系大鼠40只(雌雄各半)按体质量随机分为5组:对照组、高氟铝组、高氟铝加大豆组、高氟铝加硒组和高氟铝加螺旋藻组,每组8只.对照组食用非病区玉米加工的饲料(含氟5.20 mg/L,含铝6.80 mg/L),饮用自来水(含氟0.70 mg/L,含铝0.20 mg/L).其余各组均食用以病区玉米为主加工而成的饲料(含氟110.00 mg/kg,含铝19.70mg/L),饮用自来水配制的高铝水(含氟0.70 mg/L,含铝90.00 mg/L).高氟铝加大豆组在实验开始即添加大豆(大豆占饲料的30%),高氟铝加硒组和高氟铝加螺旋藻组在动物出现氟斑牙后饲料中分别添加硒(3.00mg/kg)、螺旋藻(1000.00 mg/kg),实验期为22周.大鼠处死前收集24 h尿液,用于尿氟、铝的测定;大鼠处死后取四肢骨用于骨氟、铝测定;电镜下观察大鼠股骨松质骨的超微结构变化.结果 ①骨氟:高氟铝组的骨氟[(204.07±63.78)mg/kg]高于对照组、高氟铝加大豆组、高氟铝加硒组和高氟铝加螺旋藻组[(30.06±6.11)、(54.12±14.56)、(30.44±5.02)、(105.08±21.07)mg/kg,t=0.62、0.53、0.62、0.35,P均<0.01];高氟销加硒组骨氟低于高氟钒加螺旋藻组(t=0.27,P<0.01).②尿氟:高氟铝组尿氟[(4.52±3.09)mg/L]高于对照组[(0.89±0.37)mg/L,t=0.23,P<0.01],低于高氟铝加硒组[(10.38±1.58)mg/L,t=0.34,P<0.01];高氟铝加硒组尿氟高于高氟铝加大豆组、高氟铝加螺旋藻组[(5.56±1.69)、(4.38±3.36)mg/L,t=0.28、0.35,P均<0.01].③骨铝:对照组骨铝[(3.32±3.02)mg/kg]明显低于高氟铝组、高氟铝加大豆组、高氟铝加硒组和高氟铝加螺旋藻组[(374.21±56.11)、(118.20±23.59)、(114.01±22.84)、(67.11±11.53)mg/kg,t=1.42、0.44、0.42、0.24,P均<0.05];高氟销组骨铝也明显高于高氟铝加大豆组、高氟铝加硒组、高氟铝加螺旋藻组(t=0.56、0.57、0.68,P均<0.01);高氟铝加螺旋藻组骨铝低于高氟铝加大豆组、高氟铝加硒组(t=0.11、0.10,P均<0.05).④尿铝:高氟铝组尿铝[(1.14±0.32)mg/L]高于对照组、高氟铝加大豆组[(0.73±0.11)、(0.66±0.10)mg/L,t=1.92、2.24,P均<0.05].高氟铝加大豆组尿铝低于高氟铝加硒组、高氟铝加螺旋藻组[(1.03±0.22)、(1.10±0.28)mg/L,t=1.73、2.06,P均<0.05].⑤扫描电镜下高氟铝组骨胶原纤维排列紊乱,骨小梁发生融合成片,小梁吸收孔大多消失,其损害最为严重.在干预组其骨胶原纤维走向大致可见,小梁融合现象较高氟铝组为轻,其中以高氟铝加硒组改善为显著,高氟铝加螺旋藻组次之,而高氟铝加大豆组的作用稍弱.结论 饲料中加大豆、硒粉、螺旋藻对高摄铝状态下氟中毒大鼠的骨损伤具有缓解作用,其中以硒粉的作用最为显著.螺旋藻次之,而大豆的作用稍弱.     

氟中毒大鼠骨组织细胞核转录因子-kB相关基因mRNA和蛋白表达改变

目的 探讨氟对骨组织中细胞核转录因子-kB(NF-kB)相关基因mRNA和蛋白表达的影响.方法 健康SD大鼠36只,体质量100 ～ 120 g,按体质量随机分为3组,每组12只.对照组饮用自来水(含氟量＜1 ag/L),低氟组和高氟组分别饮用含5、50 mg/L氟化钠的自来水.大鼠饲养8个月,建立慢性氟中毒模型,股动脉放血处死.取大鼠股骨干骺端,光镜观察骨组织形态学改变;采用灰化-氟离子选择电极法检测骨氟;采用酶联免疫吸附法检测血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP 5b)水平;采用Real-time PCR和免疫组织化学方法检测骨组织中p50、p65、ⅠkBα mRNA和蛋白表达水平.结果 染氟大鼠股骨干骺端呈骨质硬化表现.低氟组、高氟组骨氟[(6.32±1.23)、(10.89±1.56)mg/kg]显著高于对照组[(3.06±1.01 )mg/kg,P均＜0.05],且高氟组显著高于低氟组(P＜0.05).低氟组血清TRACP 5b水平[(3.45±1.85)U/L]显著高于对照组[(1.26±0.23)U/L,P＜0.05],高氟组[(2.74±1.85)U/L]较低氟组降低(P＜0.05).低氟组p50、ⅠkBα mRNA表达水平(4.41±0.44、1.15±0.25)显著高于对照组(1.46±0.10、0.26±0.07,P均＜0.05),高氟组(0.69±0.09、0.14±0.03)较低氟组降低(P均＜0.05).低氟组p50、ⅠkBα蛋白表达水平(152.96±7.87、156.20±9.75)显著高于对照组(125.63±9.85、118.97±6.94,P均＜0.05),高氟组(120.56±9.57、114.50±7.61)较低氟组降低(P均＜ 0.05).结论 氟可致NF-kB通路相关基因表达改变,后者可能参与氟致骨骼损伤的发生机制.     

436例糖尿病足截肢相关因素分析

目的 研究与糖尿病足溃疡截肢相关的重要因素.方法 回顾性分析436例糖尿病足溃疡患者的人口学资料、糖尿病及相关疾病治疗、足溃疡严重程度、溃疡大小、是否合并感染和血生化结果.根据是否截肢将436例患者分为未截肢组和截肢组.结果 436例患者中有97例患者被截肢,截肢率为22.2%.与未截肢组患者相比,截肢组患者的年龄、性别、足病病程和血糖水平差异无统计学意义.但截肢组的外周血管疾病发病率更高(94.8%vs 86.1%,P<0.05),血白细胞计数[(10.80±6.03 vs 8.09±3.59)×10~9/L,P<0.01]、超敏C反应蛋白[(10.2+6.2 vs 6.9+6.1)mmol/L,P<0.01]明显增高,血浆白蛋白[(35.0±5.1 vs 36.8±5.0)g/L,P<0.01]、血红蛋白[(104.3±18.9 vs 114.1±21.0)g/L,P<0.01]、血清总胆固醇[(4.2±0.9 vs 4.7±1.3)mmol/L,P<0.01]、甘油=三酯[(1.2±0.5 vs 1.6±1.3)mmol/L,P<0.01]、高密度脂蛋白胆固醇[(1.1±0.5 vs 1.2±0.3)mmo/L,P<0.01]、低密度脂蛋白胆固醇[(2.7±0.8 vs 3.0±1.0)mmol/L,P<0.05]明显降低.多因素逐步logistic回归分析显示,外周血管病变、血白细胞计数、血清总胆同醇、超敏C反应蛋白为截肢的独立危险因素.结论 足溃疡严重程度、外周血管病变、炎症因素和营养不良可能是截肢相关的重要因素.     

氟铝联合对雄性大鼠性激素的影响

目的 了解氟铝联合对雄性大鼠性激素的影响.方法 选用断乳2周的健康SD雄性大鼠16只,按体质量随机分为4组,每组4只,分别为对照组及铝、氟、氟铝组.对照组和铝组喂饲的玉米饲料68%来自于非病区(含氟、铝各为5.2、6.8 mg/kg),分别给含铝0、90.0 mg/L的饮水;氟组、氟铝组给含68%的燃煤型氟中毒病区煤烘玉米饲料,含氟、铝量为106.0、19.7 mg/kg,并分别给予含铝0、90.0 mg/L的饮水.实验第90天后以出现明显氟斑牙为模型复制成功的判定指标.采集大鼠血样,用时间分辨免疫荧光法进行血清中睾酮(T)、雌二醇(E2)的测定.结果 大鼠血清T水平氟铝组[(15.994±6.558)μg/L]明显高于对照组[(3.317±0.635)μg/L],差异有统计学意义(P＜0.05),铝组[(8.134±3.134)μg/L]、氟组[(1.868±0.367)μg/L]、氟铝组[(12.687±2.979)μg/L]与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).大鼠血清E2氟组[(0.172±0.030)nmol/L]明显低于对照组[(0.319±0.072)nmol/L],差异有统计学意义(P＜0.05),铝组[(0.282±0.012)nmol/L]、氟铝组[(0.265±0.047)nmol/L]与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).氟和铝两因素存在交互作用(F=9.82,P＜0.05).结论 氟铝联合作用影响雄性大鼠性激素的水平.     

氟中毒大鼠骨组织中内质网应激实验研究

目的 观察内质网应激在氟中毒大鼠骨组织中的变化,探索内质网应激在氟骨症发病机制中的可能作用.方法 48只Wistar大鼠,按体质量分成4组,每组12只.对照组和低钙组分别饲以常食饲料(含钙量为0.790%)和自制低钙饲料(含钙量为0.063%),饮用自来水(含NaF＜1 mg/L);高氟组和低钙高氟组分别饲以常食饲料和自制低钙饲料,饮用加氟(NaF,221 mg/L)自来水.实验期间动物自由进食、进水,每周测体质量1次.实验期3个月.生化方法检测大鼠血清氧化应激酶、尿酸(URIC)和碱性磷酸酶(ALP)活性.抽提大鼠一侧股骨骨干的总RNA,利用RT-PCR技术分析内质网应激相关基因BIP、Xbp1、CHOP和PDI的表达水平.结果 低钙高氟组血清丙二醛(MDA)水平高于对照组[(14.74±3.11)μmol/L比(10.15±1.96)μmol/L,P＜0.05];高氟组血清谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的活性高于对照组[(3.87±0.41)×103 U/L比(2.85±0.55)×103U/L,P＜0.05];高氟组和低钙高氟组的尿酸(URIC)分别低于对照组和低钙组[(73.95±9.52)μmol/L比(110.43±25.48)μmol/L,(54.32±22.09)μmol/L比(101.71±17.01)μmol/L/L,P＜0.05].低钙高氟组大鼠的ALP活性高于对照组[(24.77±4.57)×103 U/L比(12.91±3.97)×103 U/L,P＜0.01)].低钙组和低钙高氟组BIP/GAPDH的表达高于对照组(1.38±0.24、1.35±0.12比1.14±0.06,P＜0.05).低钙高氟组的Xbp1/GAPDH的表达高于对照组和低钙组(1.48±0.20比1.02±0.25、1.07±0.25,P＜0.01);低钙高氟组的CHOP/GAPDH的表达高于对照组(0.84±0.18比0.52±0.07,P＜0.05).结论 氟中毒大鼠机体内氧化应激态和骨形成有明显的增强,并伴有骨组织细胞的内质网应激.说明内质网应激与氧化应激很可能都参与了氟骨症的发病机制.     

全身免疫炎症指数对失代偿期肝硬化患者预后的评估价值

目的 探讨全身免疫炎症指数(systemic immune-inflammation index,SII)评估失代偿期肝硬化患者预后的价值.方法 回顾性分析2016年2月至2019年9月宜宾市第一人民医院消化内科收治的196例失代偿期肝硬化患者的临床资料.收集患者性别、年龄、病史及病因等一般人口学资料和入院后首次实验室...     

弓形虫感染对大鼠脑组织神经丝mRNA表达和细胞免疫水平的影响

目的 探讨弓形虫感染对大鼠大脑组织神经丝(NF)mRNA表达和细胞免疫水平的影响.方法 将4周龄雄性SD大鼠分成两组(每组10只):弓形虫感染组腹腔感染2×10~(10)个/L弓形虫速殖子悬液2 ml;对照组腹腔注射灭菌生理盐水2 ml.9周后,应用RT-PCR法检测大鼠大脑组织中高相对分子质量NF(NF-H)、中相对分子质量NF(NF-M)和低相对分子质量NF(NF-L)mRNA表达水平:流式细胞术检测大鼠外周血CD3~+、CD4~+、CD8~+T淋巴细胞;酶联免疫吸附试验测定其血清γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素4(IL-4)水平.结果 大鼠弓形虫感染9周后,大脑组织NF-L、NF-H mRNA表达量(0.51±0.06、0.68±0.05)较对照组(0.79±0.03、0.76±0.05)明显下降(t值分别为3.41、2.17,P<0.01或<0.05);NF-M mRNA表达量(0.69±0.02)与对照组(0.72±0.03)比较.差异无统计学意义(t=2.09,P>0.05).弓形虫感染组大鼠的CD4~+T细胞[(32.19±5.01)%]和CD8~+T细胞[(20.06±2.28)%]与对照组[(35.82±3.71)%、(22.06±3.90)%]比较,差异均无统计学意义(t值分别为1.69、1.88,P均>0.05).弓形虫感染组大鼠血清IFN-γ[(6.03±0.16)ng/L]、TNF-α[(18.05±1.93)ng/L]、IL-4[(15.76±1.59)ng/L]水平均高于对照组((4.77±0.13)、(9.54±1.57)、(5.67±0.42)ng/L,t值分别为2.81、2.74、2.63,P均<0.05].结论 弓形虫感染可导致大鼠大脑组织中NF亚单位mRNA表达水平下降,血清IFN-γ、TNF-α、IL-4水平升高.     

卵磷脂对砷染毒非洲绿猴肾细胞细胞膜损伤的作用

目的 观察卵磷脂对亚砷酸钠(NaAsO2)染毒非洲绿猴肾细胞(Vero)细胞膜损伤的作用.方法 将体外培养Vero细胞分为4组:对照组(生理盐水)、砷模型组(2.20 mg/L NaAsO2)、卵磷脂高剂量+砷干预组(53.33 mg/L卵磷脂+2.20 mg/L NaAsO2)、卵磷脂低剂量+砷干预组(13.32 mg/L卵磷脂+2.20 mg/L NaAsO2),每组6瓶细胞,每2天换液1次,培养120 h.采用分光光度法测定细胞膜Na+,K+-ATP酶活性,高效液相法测定细胞膜磷脂组分磷脂酰丝氨酸(PS)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰胆碱(PC)和神经鞘磷脂(SM).结果 对照组、砷模型组、卵磷脂高剂量+砷干预组、卵磷脂低剂量+砷干预组细胞膜Na+,K+-ATP酶活性分别为(O.962 ±0.081)×106、(0.544±0.037)×106、(0.647±0.043)×106、(0.550±0.020)× 106 U·kg-1·h-1,各组间比较,差异有统计学意义(F=43.58,P<0.01).与对照组比较,其他3组细胞膜Na+,K+-ATP酶活性明显降低(P均<0.05);与砷模型组比较,卵磷脂高剂量+砷干预组明显增高(P<0.05),而卵磷脂低剂量+砷十预组未见明显改变(P>0.05).与对照组[(0.087±0.003)、(0.127±0.053)、(0.588±0.105)、(0.07l±0.029)g/L]比较,砷模型组PS、PE、PC、SM水平[(0.051±0.018)、(0.073±0.030)、(0.240 4-0.038)、(0.047±0.121)g/L]均明显降低(P均<0.05);卵磷脂高剂量+砷干预组PS、PE、PCI(0.084±0.011)、(0.109±0.363)、(0.591±0.476)g/L]未见明显改变(P均>0.05),而SM[(0.057±0.004)g/L]明显降低(P<0.05);卵磷脂低剂量+砷干预组PS、PE、SM[(0.058±0.020)、(0.086±0.177)、(0.048±0.103)g/L]明显降低(P均<0.05),而PCI(0.521±0.098)g/L]未见明显改变(P>0.05).与砷模型组比较,卵磷脂高剂量+砷干预组PS、PE、PC、SM明显增高(P均<0.05);卵磷脂低剂量+砷干预组PS、PE、SM未见明显改变(P均>0.05),PC明显增高(P<0.05).结论 高剂量卵磷脂对砷染毒Vero细胞膜损伤具有一定的保护作用.

Abstract：

Objective To observe the lecithin's effect on membrane of African green monkey kidney cells (Vero) exposed to sodium arsenite(NaAsO2). Methods Vero cells cultured in vitro were divided into 4 groups:control group (saline), model group (2.20 mg/L NaAsO2), high eoncentration of lecithin and arsenic group (53.33mg/L lecithin + 2.20 mg/L NaAsO2), low eoncentration of lecithin and arsenic group( 13.32 mg/L lecithin + 2.20 mg/L NaAsO2), 6 bottles of cells in each group, medium was changed every 2 days, cultured for 120 h. Na+ ,K+-ATPase activities of membrane were measured by spectrophotometry, and membrane phospholipids composition including phosphatidylserine (PS), phosphatidylethano-lamine (PE), phosphatidylcholine (PC) and sphingmyelin (SM) were measured by high performance liquid chromatography (HPLC). Results The Na~, K+-ATPase activities of membrane of control group, model group, high concentration of lecithin and arsenic group, low concentration of lecithin and arsenic group were (0.962 ± 0.081) × 106, (0.544 ± 0.037) × 106, (0.647 ± 0.043) x 106, (0.550±Compared with control group, the Na+ ,K+-ATPase activities of other 3 groups were significantly reduced (all P < 0.05). Compared with model group, the Na+ ,K+-ATPase activity in high concentration of lecithin and arsenic group was significantly higher (P < 0.05),but in low concentration of lecithin and arsenic group did not change significantly (P > 0.05). Compared with control group[(0.087 ± 0.003), (0.127 ± 0.053), (0.588 ± 0.105),(0.071 ± 0.029)g/L], PS, PE, PC, SM levels in model group[(0.051 ± 0.018), (0.073 + 0.030), (0.240 ±0.038), (0.047 ± 0.121 )g/L] were significantly lower(all P < 0.05) ;PS, PE, PC in high concentration of lecithin and arsenic group[(0.084 ± 0.011), (0.109 ± 0.363), (0.591 ± 0.476)g/L] did not change significantly(all P > 0.05), but SM[(0.057 ± 0.004)g/L] significantly decreased(P < 0.05) ;PS, PE, SM levels of low concentration of lecithin and arsenic group[(0.058 ± 0.020), (0.086 ± 0.177), (0.048 ± 0.103)g/L] significantly reduced (all P < 0.05), the PC did not change significantly [(0.521±0.098 )g/L, P > 0.05]. Compared with model group,the levels of PS, PE, PC, SM in high concentration of lecithin and arsenic group were significantly higher(all P <0.05);PS, PE, SM levels in low concentration of lecithin and arsenic group did not change significantly(all P > 0.05), and PC was significantly higher(P < 0.05). Conclusions High concentration lecithin has certain protective effect on Vero cell membrane exposured to sodium arsenite.     

血小板衍生生长因子和Ⅰ型胶原在饮水砷暴露小鼠肝组织中的表达

目的 探讨血小板衍生生长因子(PDGF)和Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)在饮水砷暴露小鼠肝组织中的表达及其意义.方法 50只昆明种雄性小鼠被分成对照组、iAs3+组、iAs5+组.分别饮用自来水,亚砷酸钠溶液(NaAsO2,含砷离子300 mg/L),砷酸钠溶液(Na2HAsO4·7H2O,含砷离子300 mg/L).10个月后处死小鼠,使用全自动生化分析仪检查肝功能,包括血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氧酶(AST)、球蛋白(GLB);Masson染色肝组织,检测单位视场内的纤维面积;免疫组化(SABC)法检测肝组织中PDGF和Col-Ⅰ的表达.结果 ①对照组、iAs3+组、iAs5+组,血清ALT水平分别为(36.67±3.51)、(61.46±13.85)、(43.31±4.21)U/L,组间比较差异有统计学意义(F=6.56,P<0.05),iAs3+组明显高于对照组(P<0.05);血清AST水平分别为(135.00±20.42)、(510.86±59.01)、(258.93±22.40)U/L,组间比较差异有统计学意义(F=83.33,P<0.05),iAs3+、iAs5+组均明显高于对照组(P<0.05),iA3+组明显高于iAs5+组(P<0.05);血清GLB水平分别为(20.86±0.61)、(26.94±3.73)、(24.59±5.27)g/L,组间比较差异无统计学意义(F=2.80,P>0.05).②光镜下染砷组小鼠肝组织出现明显的细胞变性、坏死、再生,汇管区炎细胞浸润,纤维增生.对照组(0.069±0.013)、iAs3+组(0.192±0.108)和iAs5+组(0.143±0.122)单位视场内的纤维面积组间比较,差异有统计学意义(F=1.91,P<0.05),iAs3+组明显高于对照组(P<0.05).③对照组、iAs3+组、iAs5+组PDGF、Col-Ⅰ光密度值分别为202.788±7.462、174.382±7.706、177.644±7.811,200.11±7.46、176.47±10.20、177.38±7.95,组间比较差异均有统计学意义(F值分别为102.91、78.51,P均<0.05),与对照组比较,iAg3+、iAs5+组PDGF、Col-Ⅰ光密度值明显降低(P<0.05).表明肝组织内PDGF、Col-Ⅰ表达明显增多.且PDGF在汇管区、间隔细胞、窦旁细胞内均有表达,而Col-Ⅰ表达广泛分布于血管及胆管周围,并自门管区向肝实质内延伸形成纤维间隔.结论 长期饮水砷暴露,可导致慢性肝脏损伤、肝纤维化形成.PDGF、Col-Ⅰ在砷敛小鼠肝纤维化形成中起重要作用.     

三七总皂苷对非酒精性脂肪性肝病小鼠肝组织脂质沉积及NO/iNOS/NF-κB通路的影响

目的 研究三七总皂苷(PNS)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠肝脏脂质沉积及一氧化氮(NO)-诱导型一氧化氮合酶(iNOS)-核因子κB(NF-κB)信号通路的影响.方法 随机将40只雄性BALB/c小鼠分为对照组、模型组、三七总皂苷(PNS)干预组和辛伐他汀干预组,每组10只.采用高脂饲料持续喂养法建立NAFL...     

非诺贝特联合热量限制饮食治疗非酒精性脂肪性肝病合并2型糖尿病患者疗效研究

目的 探讨应用非诺贝特联合热量限制饮食治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)合并2型糖尿病(T2DM)患者的疗效及患者血清人类软骨糖蛋白-39(HCGP39)、脂联素(APN)和非对称二甲基精氨酸(ADMA)水平的变化。方法 将128例NAFLD合并T2DM患者随机分为对照组64例和观察组64例,分别采用热量限制饮食或在此基础上给予非诺贝特口服治疗、观察12周。采用免疫层析法检测血清糖化血红蛋白(HbA1c)水平,采用葡萄糖氧化酶法检测血清空腹血糖(FPG)和餐后2h血糖(2 h PPG)水平,采用磁微粒化学发光法检测血清空腹胰岛素(FINS)水平,并计算胰岛素抵抗(IR)指数。采用ELISA法检测血清HCGP39、APN和ADMA水平。结果 在治疗结束时,观察组血清谷丙转氨酶(ALT)水平为(39.4±5.3)U/L,显著低于对照组【(46.8±7.9)U/L ,P<0.05】,血清谷草转氨酶(AST)水平为(46.3±4.4)U/L,显著低于对照组【(54.7±7.5)U/L,P<0.05】,血清谷氨酰转移酶(GGT)水平为(33.9±8.6)U/L,显著低于对照组【(43.7±14.6)U/L,P<0.05】;血清FBG水平为(5.9±1.9)mmol/L,显著低于对照组【(6.8±2.0)mmol/L,P<0.05】,血清2 h PPG水平为(7.4±2.2)mmol/L,显著低于对照组【(8.5±2.4)mmol/L,P<0.05】,IR水平为(4.1±0.4),显著低于对照组【(4.7±0.5),P<0.05】;血清总胆固醇(TC)水平为(1.5±0.2)mmol/L,显著低于对照组【(2.1±0.2)mmol/L,P<0.05】,血清三酰甘油(TG)水平为(4.0±0.7)mmol/L,显著低于对照组【(5.5±0.8)mmol/L,P<0.05】,血清低密度脂蛋白(LDL)水平为(2.1±0.5)mmol/L,显著低于对照组【(2.5±0.6)mmol/L,P<0.05】,而血清高密度脂蛋白(HDL)水平为(1.6±0.5)mmol/L,显著高于对照组【(1.4±0.3)mmol/L,P<0.05】;血清HCGP39水平为(61.4±7.5)ng/mL,显著低于对照组【(73.3±9.2)ng/mL,P<0.05】,血清ADMA水平为(1.8±0.3)μmol/mL,显著低于对照组【(2.2±0.5)μmol/mL,P<0.05】,而血清APN水平为(14.6±6.2)ng/mL,显著高于对照组【(11.3±4.9)ng/mL,P<0.05】。结论 应用非诺贝特联合热量限制饮食可降低NAFLD合并T2DM患者血清HCGP39和ADMA水平,而提高血清APN水平,可能与改善了IR,进而改善了肝功能和糖脂代谢有关。     

硫普罗宁联合多烯磷脂酰胆碱治疗酒精性肝病患者疗效及血清TLR4、MD-2和TGF-β1水平变化

目的 探讨应用硫普罗宁联合多烯磷脂酰胆碱治疗酒精性肝病(ALD)患者的疗效及对血清Toll样受体4(TLR4)、髓样分化蛋白-2(MD-2)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平的影响。方法 2018年1月～2019年12月我院收治的104例ALD患者,采用随机数字表法分为观察组52例和对照组52例。给予对照组患者多烯磷脂酰胆碱胶囊口服治疗,观察组则在对照组治疗的基础上予以硫普罗宁片口服治疗,两组均连续治疗3个月。采用 ELISA 法检测血清TLR4、MD-2和TGF-β1水平。结果 在治疗3个月末,观察组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平为(34.8±13.9)U/L,显著低于对照组【(73.5±25.1)U/L,P<0.05】,血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平为(43.1±14.2)U/L,显著低于对照组【(89.0±28.6)U/L,P<0.05】,血清总胆红素(TBIL)水平为(15.5±9.7)μmol/L,显著低于对照组【(28.3±12.9)μmol/L,P<0.05】,血清谷氨酰转肽酶(GGT)水平为(53.9±14.2)U/L,显著低于对照组【(82.2±29.1)U/L,P<0.05】;血清总胆固醇(TC)水平为(4.1±0.5)mmol/L,显著低于对照组【(5.4±0.7)mmol/L,P<0.05】,甘油三酯(TG)水平为(1.3±0.6)mmol/L,显著低于对照组【(2.7±1.0)mmol/L,P<0.05】,血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平为(1.2±0.3)mmol/L,显著高于对照组【(1.0±0.4)mmol/L,P<0.05】,血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平为(3.4±0.9)mmol/L,显著低于对照组【(4.1±1.1)mmol/L,P<0.05】;血清TLR4水平为(3.0±0.6)pg/mL,显著低于对照组【(4.2±1.0)pg/mL,P<0.05】,血清MD-2水平为(415.4±128.5)pg/mL,显著低于对照组【(531.7±145.8)pg/mL,P<0.05】,血清TGF-β1水平为(3.4±1.1)pg/mL,显著低于对照组【(5.8±1.6)pg/mL,P<0.05】。结论 应用硫普罗宁联合多烯磷脂酰胆碱治疗ALD患者近期疗效较好,可能与该联合治疗降低了血清TLR4、MD-2和TGF-β1水平,减轻了肝损伤,改善了血脂代谢紊乱有关。     

异甘草酸镁治疗慢性乙型肝炎重度患者外周血TregTh17细胞及其相关细胞因子水平变化*

目的 探讨应用异甘草酸镁治疗慢性乙型肝炎(CHB)重度患者疗效及其外周血调节性T淋巴细胞和辅助性T细胞Th17(Treg/Th17)的变化。方法 2017年10月～2018年9月我科诊治的CHB重度患者80例,被分为观察组(n=50)和对照组(n=30),给予对照组护肝和抗病毒治疗,观察组则加用异甘草酸镁治疗,两组均治疗30天。结果 在治疗30天末,观察组血清AST为(124.2±10.2)U/L,显著低于对照组[(179.3±13.5)U/L,P<0.05],ALT为(105.1±10.8)U/L,显著低于对照组[(135.6±14.8)U/L),P<0.05], TBIL为(34.8±4.8)μmol/L,显著低于对照组[(45.0±5.2)μmol/L),P<0.05];观察组血清TNF-α为(10.2±2.8)ng/L,显著低于对照组[(13.5±2.5)ng/L,P<0.05],IL-4为(49.1±7.2)ng/L,显著低于对照组[(62.2±6.2)ng/L,P<0.05],IL-10为(13.6±2.8)ng/L,显著低于对照组[(19.3±3.2)ng/L,P<0.05],而IL-2为(168.2±15.8)ng/L,显著高于对照组[(142.2±14.0)ng/L,P<0.05];观察组外周血Treg细胞为(3.1±0.4)%,显著低于对照组[(5.9±0.5)%,P<0.05],Th17细胞百分比为(3.2±0.4)%,显著低于对照组[(4.9±0.5)%,P<0.05],Treg/Th17细胞比值为(0.9±0.1)%,显著低于对照组[(1.2±0.3)%,P<0.05];观察组血CD4⁺为(42.2±4.3)%,显著高于对照组[(38.2±3.9)%,P<0.05],CD8⁺为(21.2±2.9)%,显著低于对照组[(26.2±2.2)%,P<0.05],CD4⁺/CD8⁺比值为(1.8±0.2),显著高于对照组[(1.6±0.5),P<0.05];观察组有45例(90.0%)患者病情好转,显著高于对照组的21例(70.0%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 应用异甘草酸镁治疗慢性乙型肝炎重度患者效果明显,促进了肝功能恢复,改善了机体免疫功能紊乱,减轻了机体炎症反应。     

恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎合并NAFLD患者临床疗效研究*

目的 观察应用恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎(CHB)合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者临床疗效。方法 2018年3月～2020年10月我院诊治的118例CHB患者,其中合并NAFLD患者42例,均接受恩替卡韦治疗12个月。使用流式细胞仪检测外周血CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞亚群水平,并计算CD4⁺/CD8⁺细胞比值,使用FibroScan 502型肝脏弹性检测仪检测肝脏受控衰减参数(CAP)。结果 在治疗12个月末,CHB合并NAFLD组血清天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和γ-谷氨酰转肽酶及CAP水平分别为(72.3±8.9)U/L、(63.3±9.2)U/L、(76.2±9.8)U/L和(301.1±10.7)dB/m,均显著高于CHB组【分别为(43.2±7.6)U/L、(45.1±8.3)U/L、(48.8±7.7)U/L和(262.7±7.6)dB/m,P＜0.05];合并NAFLD组血清总甘油三脂、胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平分别为(3.5±0.7)mmol/L、(6.1±1.0)mmol/L和(2.7±0.3)mmol/L,均显著高于CHB组【分别为(1.8±0.5)mmol/L、(4.7±0.9)mmol/L和(1.9±0.4)mmol/L,P<0.05],而血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平为(1.2±0.4) mmol/L,显著低于CHB组】(1.6±0.3)mmol/L,P<0.05];CHB合并NAFLD组血清ALT复常率为66.7%,显著低于CHB组的82.9%(P＜0.05),而两组血清HBeAg和HBsAg阴转率及HBV DNA阴转率比较,无显著性差异(P＞0.05);CHB合并NAFLD组外周血CD4⁺细胞百分比和CD4⁺/CD8⁺细胞比值分别为(32.6±4.9)%和(1.1±0.2),均显著低于CHB组】分别为(36.4±5.2)%和(1.4±0.3),P＜0.05],而CD8⁺细胞百分比为(29.1±3.6)%,显著高于CHB组【(26.9±3.1)%,P＜0.05】。结论 应用恩替卡韦治疗CHB合并NAFLD患者能收到同样的抗病毒效果,但会降低血清ALT复常率,其血脂和肝内脂肪变的问题也另需处理方法。