转化生长因子β1和基质金属蛋白酶在心室重构中的作用及卡维地洛的干预效果

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)和基质金属蛋白酶(MMPs)在兔心肌梗死(MI)后心室重构中的作用及卡维地洛的治疗效果.方法采用结扎兔冠状动脉左室支建立MI模型,术后24h存活的兔随机分为MI组(8只)、MI+卡维地洛组(9只),另以开胸后在相应部位挂线不结扎为假手术组(10只).4周后行血流动力学检查,测量体重及左、右心室重量,苦味酸-酸性品红染色(VG)检测非梗死区的胶原容积分数(CVF),免疫组化检测TGF-β1的表达,酶谱法测定MMPs的活性.结果MI后4周存活动物为假手术组10只,MI组8只,MI+卡维地洛组9只.MI组较假手术组左、右心室重量/体重比值(LVW、RVW/BW)、左室舒张末压(LVEDP)、非梗死区CVF均显著升高,非梗死区TGF-β1的表达及MMPs的活性亦增强(均P＜0.01);MI+卡维地洛组与MI组比较,RVW/BW、LVEDP、CVF显著降低(P＜0.05～0.01),TGF-β1表达和MMPs的活性明显减弱(P＜0.01).结论TGF-β1、MMPs可能与MI后心室重构有关,卡维地洛能缓解MI后非梗死区的重构,其机制可能与减低TGF-β1的表达和MMPs的活性有关.     

雷米普利对糖尿病心肌梗死大鼠葡萄糖转运体4的影响

目的 观察2型糖尿病合并心肌梗死大鼠室重构及葡萄糖转运体(GLUT4)表达及雷米普利对其影响.方法 46只雄性Wistar大鼠由哈尔滨医科大学第一临床医学院实验动物中心提供.高脂喂养加低剂量链脲佐菌素(STZ,30mg/kg)腹腔注射,血糖值≥16.7 mmol/L为2型糖尿病模型,结扎冠状动脉左前降支制备心肌梗死模型;糖尿病合并心肌梗死大鼠随机(随机数字法)分为安慰剂组(n,=9),雷米普利组(n=10),糖尿病假手术组(n=10);非糖尿病大鼠随机分为心肌梗死组(n=9)及非糖尿病假手术组(n=8).术后6周查心脏超声、测定心室重量指数、心肌梗死面积及左室非梗死区心肌胶原容积分数.取大鼠非梗死区心肌,采用实时定量RT-PCR技术测定GLUT4 mRNA.Western blot法测定GLUT4蛋白含量.用SPSS 13.0统计软件进行统计学分析;组间比较用方差分析,P<0.05为差异具有统计学意义.结果 与糖尿病假手术组和非糖尿病心肌梗死组相比,安慰剂组EF值显著降低[(32±3)%vs.(65±4)%,P<0.01;(32±3)%vs.(38±4)%,P<0.05];E/A比值(P<0.01)、左室非梗死区胶原容积分数(P<0.05)及心室重量指数(P<0.05)升高.与安慰剂组相比,雷米普利组盯值改善明显[(45±3)%vs.(32±3)%,P<0.01],且E/A比值显著降低(P<0.01),左室非梗死区胶原容积分数下降、心室重量指数减少[(3.1±0.2) vs.(4.2±0.4),P<0.01].安慰剂组GLUT4 mRNA及蛋白表达较非糖尿病心肌梗死组低,与糖尿病假手术组相比差异无统计学意义.与安慰剂组相比,雷米普利组GLUT4 rnRNA及蛋白表达升高.结论 雷米普利可防治心室重构并改善心脏收缩及舒张功能;2型糖尿病合并心肌梗死大鼠心肌GLUT4 mRNA和蛋白的表达下降,雷米普利可以改善糖尿病合并心肌梗死大鼠心肌GLUT4 mRNA和蛋白的表达.     

转化生长因子β1和基质金属蛋白酶在心室重构中的作用及卡维地洛的干预效果

目的：探讨转化生长因子β1（TGF-β1）和基质金属蛋白酶（MMPs）在兔心肌梗死（MI）后心室重构中的作用及卡维地洛的治疗效果。方法：采用结扎兔冠状动脉左室支建立MI模型，术后24h存活的兔随机分为MI组（8只）、MI＋卡维地洛组（9只），另以开胸后在相应部位挂线不结扎为假手术组（10只）。4周后行血流动力学检查，测量体重及左、右心室重量，苦味酸-酸性品红染色（VG）检测非梗死区的胶原容积分数（CVF），免疫组化检测TGF-β1的表达，酶谱法测定MMPs的活性。结果：MI后4周存活动物为假手术组10只，MI组8只，MI＋卡维地洛组9只。MI组较假手术组左、右心室重量／体重比值（LVW、RVW／BW）、左室舒张末压（LVEDP）、非梗死区CVF均显著升高，非梗死区TGF-β1的表达及MMPs的活性亦增强（均P〈0．01）；MI＋卡维地洛组与MI组比较，RVW／BW、LVEDP、CVF显著降低（P〈0．05-0．01），TGF-β1表达和MMPs的活性明显减弱（P〈0．01）。结论：TGF-β1、MMPs可能与MI后心室重构有关，卡雏地洛能缓解MI后非梗死区的重构，其机制可能与减低TGF-β1的表达和MMPs的活性有关。     

贝那普利及依贝沙坦对大鼠心肌纤维化的作用

目的研究血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensin converting enzyme inhibitor,ACEI)和血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(angiotensin II receptor blocker,ARB)对心肌梗死(myocardial infarction,MI)后大鼠结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)和纤溶酶原激活抑制物-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)表达及胶原沉积的影响。方法通过冠状动脉结扎建立wistar大鼠MI模型,分为假手术组(n=9),安慰剂组(n=6),ACEI组[贝那普利10mg/(kg.d)n=8],ARB组[依贝沙坦50mg/(kg.d),n=8]和ACEI ARB组[贝那普利10mg/(kg.d) 依贝沙坦50mg/kg.d,n=8),于术后8周处死大鼠,行心脏超声检查、检测胶原含量、分别采用逆转录多聚酶链反应和Western blot检测大鼠心肌转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGFβ1)、CTGF、PAI-1mRNA和蛋白的表达。采用方差分析和Turkey's检验进行统计学分析。结果(1)与假手术组比较,安慰剂组射血分数和短轴缩短率明显降低,左室舒张末直径和E/A升高(均为P<0.01);与安慰剂组比较,ACEI组、ARB组和ACEI ARB组射血分数(P<0.01)和短轴缩短率(P<0.05)升高,左室舒张末直径和E/A降低(P<0.05)。(2)与假手术组比较,安慰剂组的心室重量/体重和胶原总量显著升高(P<0.01);与安慰剂组比较,ACEI组、ARB组和ACEI ARB组重量/体重下降(P<0.05),胶原总量明显降低(P<0.01);与ACEI组比较,ARB组和ACEI ARB组胶原总量降低更为显著(P<0.01)。(3)与假手术组比较,安慰剂组TGFβ1、CTGF、PAI-1基因mRNA、蛋白表达明显升高(mRNA为0.69±0.07,0.60±0.07和0.61±0.06,P<0.01;蛋白为9.07±0.63,0.58±0.06,1.03±0.07,P<0.01),ACEI组,ARB组和ACEI ARB组可降低这三种基因表达,联合用药较ACEI和ARB单药治疗更有效地降低mRNA基因表达;与ACEI组比较,ARB组和ACEI ARB组降低蛋白表达更为显著。结论在心肌纤维化过程中,CTGF和PAI-1对细胞外基质过量沉积起主要作用,贝那普利和依贝沙坦通过抑制此作用阻止纤维化发生。与单用贝那普利相比,依贝沙坦单独用药和二者联合应用对阻止心肌纤维化更有效。     

不同剂量卡维地洛对急性心肌梗死后心衰大鼠胶原合成的影响

目的探讨卡维地洛对急性心肌梗死模型大鼠梗死区、非梗死区TGF-β1、胶原蛋白分子表达的影响.方法将结扎冠状动脉左前降支40只急性心肌梗死模型鼠随机分成3组:心梗对照组(MI-C)、小剂量卡维地洛治疗组(MI-LC,1mg/kg.d)、大剂量卡维地洛治疗组(MI-HC,10mg/kg.d).另设假手术组(MI-sham).同步药物干预8周后,RT-PCR检测梗死区胶原-ⅠmRNA、TGF-β1-mRNA.结果梗死区胶原-ImRNA的表达:与心梗对照组比较,小剂量卡维地洛组、大剂量卡维地洛组表达均下调,差别具显著性(P<0.05);小剂量卡维地洛组与大剂量卡维地洛组表达水平接近,差别无显著性(P>0.05);非梗死区胶原-ImRNA的表达:与心梗对照组比较,小剂量卡维地洛组与大剂量卡维地洛组表达均下调,差别具显著性(P<0.05);小剂量卡维地洛组与大剂量卡维地洛组表达水平接近,差别无显著性(P>0.05).TGF-β1 mRNA的表达如下:与假手术组比较,心梗大鼠的梗死区心肌组织中TGF-β1 mRNA的表达上调(P<0.001).与心梗对照组比较,小剂量卡维地洛组与大剂量卡维地洛组的TGF-β1mRNA表达下调(P<0.01),大剂量卡维地洛组TGF-β1 mRNA的水平与小剂量卡维地洛组接近,两组差异没有显著性(P>0.05).结论卡维地洛能减少梗死区胶原分子的合成,也能减少非梗死区胶原分子的合成,从而延缓整个心肌纤维化的进程,但无剂量依赖关系,其机制可能与抑制TGF-β1的表达有关.     

超声评价福辛普利和依贝沙坦对心肌梗死大 鼠心脏功能的影响

目的　本研究主要应用高频多普勒超声对比观察福辛普利和依贝沙坦对心肌梗死 (MI)后大鼠心脏结构和心脏功能的影响。方法　通过结扎冠状动脉左前降支诱导大鼠MI ,心肌梗死后 2 4h将MI大鼠随机分为 :①安慰剂组 ;②福辛普利组 ;③依贝沙坦组 ;④假手术组。分别于 2周和 6周时检查以下指标 :①左室舒张末期内径 (LVDd) ,短轴缩短率 (FS) ,射血分数 (EF) ,后壁 (PW )增厚率 ,E/A比值 ,及E峰减速度 ;②平均动脉压 ,左室舒张末压 ;③心室重量 /体重 ;心肌梗死面积。结果　安慰剂组与假手术组相比 ,左室舒张末压和心室重量 /体重、LVDd均明显增加 ;福辛普利和依贝沙坦可使动脉压下降 ,并有效地降低了左室舒张末压和心室重量 /体重及抑制LVDd增加。MI后FS、EF及PW增厚率明显降低、E/A及E峰减速度明显升高 ,福辛普利和依贝沙坦能明显改善这些异常。结论　多普勒超声结果表明依贝沙坦和福辛普利一样能在有效地防止MI后心肌肥大、改善血流动力学异常的同时 ,明显地防止心室扩张 ,改善心脏的收缩和舒张功能。     

运动训练对心肌梗死后心室重构及MMP-2,MMP-9表达的影响

目的:观察大鼠心肌梗死(MI)后早期运动训练对左心室(LV)重构、心室功能、心肌间质胶原、基质金属蛋白酶(MMPs)的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、MI对照组(AMI-Sed组)和MI+运动训练组(AMI-Ex组),结扎前降支建立MI模型。手术后1周Ex组进行8周跑台训练(运动强度相当于45%VO2max),术后第9周测量各组大鼠左心室重量、血液动力学参数,处死大鼠,用Masson染色检测左心室非梗死区心肌胶原容积分数(CVF),RT-PCR检测Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维mRNA表达,Westernblot检测非梗死区心肌基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达。结果:与Sham组比较,AMI-Sed、AMI-Ex组左心室重量指数(LVWI)和左心室长轴径(LVLA)均显著增加(P0.05),运动训练对LVWI和LVLA无明显影响;与AMI-Ex组比较,AMI-Sed组RVWI、肺含水率显著增高,左心室压峰值(LVSP)和左心室压力变化最大值(+dp/dtmax)显著降低,左心室压力负最大值(LVEDP)显著升高(P均0.05);与AMI-Sed组比较,AMI-Ex组大鼠左心室非梗死区CVF降低,Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维mRNA表达量均降低(P0.05),以Ⅰ型胶原纤维表达降低为著;与Sham组比较,AMI-Sed、AMI-Ex组MMP-2表达均显著升高(P0.05),MMP-9无显著变化;AMI-Ex组MMP-2蛋白表达显著低于AMI-Sed组(P0.05)。结论:AMI后早期运动训练可抑制非梗死区心肌纤维化、改善左心室重构及左心室功能,机制可能与抑制胶原纤维合成有关,MMP-2表达变化对此可能发挥一定作用。     

雷米普利对实验性心衰大鼠左心室重构及非梗死区胶原影响的研究

目的研究雷米普利对心肌梗死后心衰大鼠左心室重构及非梗死区胶原的影响。方法将结扎大鼠左冠状动脉前降支并饲养6周的24只存活大鼠随机分为假手术组（Sham group,n=8）、模型组（Modelgroup,n=8）及雷米普利组（Ramipril group,n=8）,连续灌胃给药4周后测定大鼠血流动力学参数,全心及左室肥厚指她（HW／BW,LVHW／BW）,ELISA方法检测血清血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的含量,RT-PCR法测定非梗死区心肌组织胶原蛋白I（col—I）及胶原蛋白Ⅲ（col-Ⅲ）mRNA表达水平。结果雷米普利能明显升高左心室内压最大上升和最大下降速率（±dp／dtmax）,降低左心室收缩压（LVSP）、左心室舒张末压（LVEDP）、心肌肥厚指数、血清血管紧张素Ⅱ的含量及下调col—I、col-Ⅲ mmRNA表达水平（P〈0．05—0．01）,但对心率（HR）、收缩压（sBP）、舒张压（DBP）无明显影响（P〉0．05）。结论雷米普利对心肌梗死后心衰大鼠心肌间质胶原重构有显著的抑制作用,抗心室重构的作用机制与下调胶原蛋白mRNA表达有关。     

β3肾上腺素能受体对大鼠梗死心肌保护作用的研究

目的:探讨心肌梗死大鼠梗死心肌中β_3肾上腺素能受体(β_3-Adrenoreceptor,β_3-AR)表达的变化及其是否对大鼠梗死心肌起保护作用。方法:将40只雄性SPF级SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、心肌梗死组(MI组)、MI+BRL组(经尾静脉注射β_3-AR特异性激动剂BRL-37344)[4 nmol/(kg.min),10 min,3次/周,共3周]、MI+SR组(经尾静脉注射β_3-AR特异性拮抗剂SR59230A)[0.56 mg/(kg.min),10 min,3次/周,共3周]。采用超声心动图检测心脏参数;采用Masson染色检测梗死区心肌纤维化程度及TUNEL染色检测梗死区心肌细胞的凋亡水平。结果:MI+BRL组大鼠LVEF较MI组显著升高(45.17±8.98 vs. 34.93±4.08,P0.05);MI+BRL组大鼠梗死区心肌细胞的凋亡水平较MI组显著减轻(16.236±1.76%vs. 28.336±2.33%,P0.05);MI+BRL组大鼠心肌梗死区β_3-AR mRNA表达较MI组明显增加(2.135±0.0235 vs. 1.690±0.012,P0.05)。结论:心肌梗死大鼠模型中梗死区心肌β_3-AR表达显著上调;β_3-AR对梗死心肌有保护作用。     

血红素氧合酶-1修饰骨髓间充质干细胞对大鼠梗死心肌炎症细胞因子及心室重构的影响

目的 探讨移植血红素氧合酶-1(Heme Oxygenase,HO-1)修饰的骨髓间充质干细胞(mes-enchymal stem cells,MSCs)对大鼠梗死心肌炎症细胞因子及心室重构的影响.方法 取大鼠骨髓,扩增培养MSCs;HO-1或GFP腺病毒转染、DAPI标记MSCs.结扎大鼠左前降支制造心肌梗死模型1 h后,分别将HO-1-MSCe、GFP-MSCs、PBS注射到大鼠心脏梗死区边缘,移植后第4天,Western Blot检测HO-1蛋白在梗死区边缘的表达,ELISA检测VEGF、bFGF、HGF的表达,RT-PCR检测炎症细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10 mRNA的表达.超声心动图检测大鼠心功能变化.移植4周后,梗死区心肌HE,Masson染色检测左室重构.结果 HO-1-MSCs移植组与GFP-MSCs、PBS移植组相比,HO-1蛋白在梗死区边缘稳定高效表达;细胞因子VEGF、bFGF、HGF表达增加(P<0.05);炎症细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达减少(P<0.05),而IL-10 mRNA表达增加(P<0.05);左室舒张末期和收缩末期内径缩短,左室前壁增厚,心室腔减小,梗死区血管密度上调,胶原形成明显减少.结论 HO-1-MSCS分泌多种生物活性细胞因子,协同HO-1蛋白改善炎症微环境,促进血管生成,减少胶原形成,从而延缓梗死区心窒重构,有效改善心功能.