肝吸虫病4种检查方法比较

目的 探讨采用4种不同检查方法对肝吸虫病的诊断价值.方法 采用直接涂片法、饱和盐水漂浮法、改良加藤厚涂片法(Kato-Katz法)和水洗沉淀法,检查1名成年女性肝吸虫病患者粪便中华支睾吸虫卵.结果 患者粪便中直接涂片镜下未见肝吸虫卵；饱和盐水漂浮法全片查见1个肝吸虫卵；Kato-Katz法镜下查见25个肝吸虫卵(每克粪便虫卵数EPG为600)；水洗沉淀法可见10个以下肝吸虫卵,所见肝吸虫卵壳内毛蚴清晰可见.结论 肝吸虫病患者粪便中华支睾吸虫卵检查,直接涂片法和饱和盐水漂浮法均易造成阳性标本漏检,Kato-Katz法和水洗沉淀法检出率高.     

基于胆结石患者胆汁、粪便和血清标本的4种诊断华支睾吸虫感染方法的评价

目的 比较并评价粪便改良加藤厚涂片法（Kato-Katz法）、胆汁离心镜检法、血清胶体金免疫层析法（colloid gold labeled immunochromatographic,CGIA）和酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测粪便、胆汁、血清诊断华支睾吸虫感染的价值. 方法 收集92例胆结石患者的胆汁、血清和粪便,分别采用镜检法检查胆汁华支睾吸虫卵、用Kato-Katz法检查粪便华支睾吸虫卵,用CGIA法和ELISA法检测血清华支睾吸虫IgG抗体,计算并分析各检测方法的阳性率、灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值和Youden指数. 结果 Kato-Katz法联合胆汁离心镜检法共确诊感染49例,阳性率为53.3％.与之相比,Kato-Katz法、胆汁离心镜检法、CGIA和ELISA的符合率分别为80.4％、84.8％、90.2％和96.7％.Kato-Katz法、胆汁离心镜检法、CGIA和ELISA法的灵敏度分别是63.3％、93.9％、98.0％和93.9％;特异性分别为100％、100％、69.8％和86.0％;阳性预测值则分别是100％、100％、78.7％和88.5％,阴性预测值分别为70.5％、93.5％、96.8％和92.5％,Youden指数为0.63、0.94、0.68和0.80. 结论 胆汁离心镜检是胆结石手术患者诊断华支睾吸虫感染的首选方法;但对于无法获得胆汁的受检者而言,血清IgG抗体检测在排除华支睾吸虫感染、粪便Kato-Katz法在确诊感染方面有较好的临床应用价值.     

DIGFA、ELISA与IHA平行检测血吸虫病流行区居民血清抗体的应用价值

目的探讨斑点金免疫渗滤法(DIGFA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)与间接红细胞凝集试验(IHA)在日本血吸虫病流行区平行检测居民血清抗体的应用价值。方法采用DIGFA、ELISA和IHA平行检测粪检血吸虫虫卵阳性血清、健康人群及其它3种寄生虫感染人群血清、血吸虫病流行区居民血清,并对检测结果进行统计分析。结果DIGFA、ELISA和IHA检测100例粪检血吸虫虫卵阳性血清的敏感性均为96.0%;检测188例健康人群及其它3种寄生虫感染人群血清的特异性分别为98.9%、96.8%和97.3%;平行检测血吸虫病流行区居民血清抗体的阳性率分别为9.35%(102/1091)、11.54%(125/1083)和11.00%(120/1091),检测结果在统计学上无显著性差异(P>0.05)。结论DIGFA、ELISA和IHA敏感性高、特异性强,交叉反应少,平行检测血吸虫病流行区居民血清抗体的阳性检出率较为符合。     

ELISA检测特异性IgG4诊断肺吸虫病的效果观察

目的探讨用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测特异性IgG4诊断肺吸虫病的效果.方法采用ELISA法检测了肺吸虫病病人血清中的特异性IgG和IgG4抗体及肝吸虫、囊虫、旋毛虫、日本血吸虫病病人和正常人血清中的交叉抗体.结果检测肺吸虫病病人血清中IgG4的敏感性为95.35%,检测正常人血清的特异性为100%,与常规使用的酶联葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)检测结果及检测IgG结果比较差异无显著性(P均＞0.05);与其他寄生虫病病人血清中的交叉反应率,IgG4显著低于用常规HRP-SPA检测结果. 结论ELISA法检测肺吸虫病病人血清中特异性IgG4具有较高的诊断应用价值.     

胶体金免疫层析试条法检测囊型棘球蚴病患者血清特异性抗体效果评价

目的 建它一种快速、简便诊断囊型棘球蚴病的胶体金免疫层析试条方法 ,并对其进行评价.方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,标记抗人IsG4单克隆抗体,并将其吸附于样品垫上;将羊肝棘球蚴包囊液抗原作为包被抗原包被于硝酸纤维素膜适当位置,制成检测特异抗体的免疫层析试条.用该试条检测确诊的囊型棘球蚴病患者血清155份,以评价其敏感性,检测健康者血清50份和其他寄生虫病患者血清50份(其中囊尾蚴病患者血清30份,血吸虫病、弓形虫病、并殖吸虫病、肝吸虫病患者血清各5份)以评价其特异性.均用单盲法检测,同时用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immu-nosorbent assay,ELISA)进行平行检测.结果试条法检测155份囊型棘球蚴病患者血清,133份为阳性,灵敏度为85.8%;其他寄生虫病患者血清50份,44份为阴性;50份健康者血清全部为阴性,总特异度为94.0%.该方法 与ELISA的符合率为97.1%,二者阳性检出率之间的差异无统计学意义(r=0.25,P>0.05).结论 快速诊断囊型棘球蚴病的胶体金免疫层析试条法灵敏度、特异度均较高.     

斑点金免疫渗滤法在检测囊虫抗体中的应用

目的　将斑点金免疫渗滤法用于检测囊虫抗体 ,以制备囊虫病诊断试剂盒。方法　经透析的猪囊尾蚴囊液作为检验抗原 ,对 71份囊虫病患者、90份正常人和 2 0份其他病患者血清进行了斑点金免疫渗滤法检测并与酶联免疫吸附法比较。结果　斑点金免疫渗滤法的敏感性为 90 .1% (6 4 / 71) ,特异性为 95 .6 % (86 / 90 ) ,其他病患者血清反应中仅 1例脑肿瘤患者血清阳性 ,其余为阴性。斑点金免疫渗滤法和酶联免疫吸附法的符合率为94 .4 % (15 2 / 16 1)。结论　斑点金免疫渗滤法有较好的应用于临床检测囊虫病的潜力     

检测华支睾吸虫特异性IgG4生物素-亲和素复合酶联免疫吸附法的建立及检测效能分析

目的探讨亲和素-生物素复合酶联免疫吸附法(ABC-ELISA)检测特异性Ig G4抗体用于诊断华支睾吸虫病的效果。方法建立检测华支睾吸虫特异性抗体Ig G4的ABC-ELISA法(Ig G4-ABC-ELISA),以此方法检测华支睾吸虫病、日本血吸虫病、卫氏并殖吸虫病、弓形虫病、棘球蚴病、囊尾蚴病和曼氏裂头蚴病患者血清样本。以Ig G4-ELISA和Ig GELISA法为对照,比较3种方法用于诊断华支睾吸虫病的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值及诊断效率。结果成功建立了用于检测华支睾吸虫特异性抗体的Ig G4-ABC-ELISA法,用此方法检测华支睾吸虫病患者血清特异性抗体Ig G4的敏感性为90.0%,特异性为98.2%,阳性预测值为93.8%,阴性预测值为97.0%,诊断效率为96.3%;Ig G4-ELISA法检测华支睾吸虫病患者血清特异性抗体敏感性为86.0%,特异性为98.2%,阳性预测值为93.5%,阴性预测值为95.9%,诊断效率为95.4%;Ig G-ELISA法检测华支睾吸虫病患者血清特异性抗体Ig G的敏感性为94.0%,特异性为88.1%,阳性预测值为70.1%,阴性预测值为98.0%,诊断效率为89.4%。Ig G4-ABC-ELISA法检测华支睾吸虫病患者血清特异性抗体的敏感性高于Ig G4-ELISA法(P0.05),特异性高于Ig G-ELISA法(P0.05)。结论 Ig G4-ABC-ELISA法检测华支睾吸虫特异性抗体IgG4具有高度敏感性与特异性,在华支睾吸虫病诊断中具有较好应用价值。     

快速诊断多房棘球蚴病胶体金免疫层析试条方法的建立与评价

目的建立快速、简便诊断多房棘球蚴病的胶体金免疫层析试条方法。方法提取多房棘球蚴原头节总RNA,通过RT-PCR获得编码Em18基因片段并克隆入pGEX-3X表达载体,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达得到重组蛋白;采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,标记抗人IgG单克隆抗体;将重组Em18抗原包被于硝酸纤维素膜适当位置,制成检测特异抗体的胶体金免疫层析试条。用该试条检测多房棘球蚴病(56份)、细粒棘球蚴病(87份)、囊尾蚴病(30份)、日本血吸虫病(10份)和弓形虫病(10份)患者血清,以及健康人(50份)血清,以评价其检测的敏感性和特异性,同时用ELISA法进行平行检测,以评价该试条的诊断性能。结果以重组蛋白Em18为抗原胶体金免疫层析试条检测多房棘球蚴病患者血清,敏感性为92.9%(52/56)。与细粒棘球蚴病和囊尾蚴病患者血清分别存在9.2%(8/87)和3.3%(1/30)的交叉反应,与健康人血清存在8.0%(4/50)的假阳性率,与日本血吸虫病和弓形虫病患者血清则无交叉反应,特异性为93.0%(174/187)。ELISA法检测的敏感性和特异性分别为94.6%(54/56)和92%(172/187),与试条法比较两者差异均无统计学意义(P>0.05)。kappa分析结果显示,试条法与ELISA法检测多房棘球蚴病患者血清的结果高度一致(κ=0.98)。结论以重组Em18抗原建立的快速诊断胶体金免疫层析试条,检测多房棘球蚴病的敏感性和特异性均较高。     

酶联免疫电转移印迹技术在囊尾蚴病诊断中的应用

目的　应用高度敏感、特异的酶联免疫电转移印迹技术(EITB)诊断囊尾蚴病。　方法　用双向电泳法对囊液抗原进行分离、纯化 ,并通过免疫印迹 ,用囊尾蚴病患者、棘球蚴病患者和其他异源血清筛选高免疫反应性和高特异性抗原组分 ,以此建立EITB诊断方法 ,与传统的ELISA法相比 ,并比较血清和滤纸干血浸出液两种样本的敏感性。　结果　得到了等电点为9.4,相对分子质量为14 000和16 600两组特异性抗原组分 ,以此为诊断抗原建立了EITB诊断方法 ,其敏感度和特异度分别高达92.5%和100% ,显著高于ELISA法。在EITB中血清和滤纸干血浸出液的敏感性相似。　结论　EITB诊断囊尾蚴病较ELISA法敏感性高、特异性强     

两种试剂盒快速检测斯氏狸殖吸虫抗体的研究

目的观察肺吸虫病金标渗滤试剂盒(DIGFA kit)和酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测斯氏狸殖吸虫抗体的敏感性和特异性。方法采用DIGFA kit和ELISA检测斯氏狸殖吸虫病流行区人群和病鼠血清抗体。结果 DIGFA和ELISA试剂盒检测斯氏狸殖吸虫病流行区人群和病鼠血清特异性抗体阳性率均为5.08%(54/1062)和100%(40/40);用两种试剂盒检测正常大鼠、旋毛虫病大鼠、血吸虫病兔和蛔虫病病人血清,除1例血吸虫病兔血清DIGFA出现阳性反应外,其他血清两种方法均为阴性。大鼠感染斯氏狸殖吸虫后第2周用两种方法检测抗体,阳性率分别为20.00%(8/40)和27.50%(11/40),第4周阳性率均达100%,并持续至第8周。结论 DIGFA试剂盒具有与ELISA试剂盒相同的敏感性和特异性,且有操作快速、简便、直观等特点,适合在基层和斯氏狸殖吸虫病流行地区推广使用。     

医院就诊华支睾吸虫病患者的流行特征及风险因素分析

目的探讨黑龙江省就诊患者中华支睾吸虫病的流行现状,并分析风险因素,为制定防治策略提供理论基础。方法收集就诊于黑龙江省哈尔滨医科大学人体寄生虫病研究所的疑似华支睾吸虫病患者2 359人,采用KatoKatz法和酶联免疫法分别检测疑似患者的6 718份粪便样本和2 359份血样,并通过问卷调查收集患者的相关信息。结果疑似患者中华支睾吸虫的感染者为513例;疑似患者感染率在≥29岁人群中较高(P0.05);农村疑似患者感染率和血检阳性率均高于城市(P均0.05);生食鱼虾是感染华支睾吸虫病的风险因素。结论华支睾吸虫病仍然是黑龙江省主要流行的食源性寄生虫病之一,生食或半生食鱼虾的饮食习惯是感染华支睾吸虫的风险因素。     

日本血吸虫抗体检测试剂盒（IHA法）现场筛查效果的评估

目的评估日本血吸虫抗体检测试剂盒（IHA法）的现场筛查效果。方法选择安徽省长江流域3个血吸虫病流行区7个流行村的6～65岁居民为查病对象,在用改良加藤厚涂片法（Kato—Katz法,一粪三检）合并尼龙绢集卯孵化法进行病原学检测的同时,采用日本血吸虫抗体检测试剂盒（IHA法）进行血清特异抗体检测,评估其现场筛查效果,并与胶体染料试纸条法（DDIA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测结果比较。结果7个村共有3004人同时接受2种病原学检测和3种血清免疫学检测,IHA、DDIA和ELISA法的阳性率分别为40．81％、59．79％和59．25％,与病原学检测阳性率2．46％比较差异有统计学意义（P〈0．005）。以病原学检测为金标准,IHA法的特异度、约登指数、一致率和阳性预测值高于DDIA和ELISA法,分别为60．48％、52．37％、61．25％和5．55％;敏感度和阴性预测值分别为91．89％和99．66％,均介于DDIA法和ELISA法之间。IHA法与DDIA和ELISA法的一致率分别为65．25％和69．91％,IHA检测结果与DDIA和ELISA比较差异均有统计学意义（P〈0．05）;病原学检测阳性者中,IHA法与DDIA和EI,ISA法的一致率均为90．54％,IHA检测结果与DDIA和ELISA比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论日本血吸虫抗体检测试剂盒（IHA法）适用于血吸虫病流行区人群筛查,但需进一步提高该试剂盒的特异度,最大限度地排除阳性者中已经治愈的中远期感染者。     

ELISA检测华支睾吸虫病患者血清特异性IgG_4的诊断价值

目的　探讨用ELISA检测华支睾吸虫病患者血清中特异性IgG4 的诊断价值。　方法　用华支睾吸虫成虫可溶性抗原进行ELISA分别检测华支睾吸虫病患者 (76例 )血清中的特异性IgG和IgG4 抗体及日本血吸虫病、并殖吸虫病、囊尾蚴病患者 (分别为 63、3 5、41例 )和健康者 (65人 )血清中的交叉抗体。　结果　检测 76例华支睾吸虫病患者血清中IgG4 的检出率为 93 .42 % ,检测 65例健康者血清中的IgG4 均为阴性 ,分别与检测IgG结果比较差异均无显著性意义 (P均 >0 .0 5 ) ;与其它寄生虫病的交叉反应率 ,IgG4 显著低于IgG ;诊断效率及阳性、阴性预告值分别为 96.45 %、10 0 %和 92 .85 %。　结论　用ELISA检测华支睾吸虫病患者血清中特异性IgG4 具有较高的诊断应用价值。     

日本血吸虫病常用诊断方法应用价值的评估IIHA筛查法对血吸虫病疫区人群感染率的评价

目的分析IHA筛查法评估血吸虫病疫区人群感染率的可靠性。方法在江西省鄱阳湖血吸虫病疫区选取一个村的居民为研究对象，对每位对象收集2次新鲜粪便标本各制作6张Kato片（2粪12片）进行病原学检测，同时采用IHA法进行血清学定量检测，分析常规1粪3张Kato片的阳性检出率与漏检率、IHA的诊断效率及IHA与Kato-Katz法结果的相关性。结果3张Kato片漏检率达19．7％～66．1％，1粪较2粪漏检率为23．0％。IHA的敏感度和特异度分别为69．6％、89．4％，与Kato-Katz法的总符合率为86．7％。IHA的阴性预测值为96．8％，但阳性预测值较低（36．8％），阳性漏检率高达30．4％；IHA筛查法对试点区人群感染率估算的漏检率达35．8％。结论IHA筛查法对疫区人群实际感染率估算有较大的偏差，IHA作为筛查工具仍需提高其敏感性和特异性，IHA阳性阈值有待进一步探讨。     

丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒的诊断性能评价

目的：通过与国产科华丙型肝炎病毒（HCV）抗体检测试剂盒比较,分析评价意大利Dia.Pro Diagnostic Bioprobes S.r.l公司生产的HCV抗体检测试剂的诊断性能。方法：应用意大利产Dia.Pro丙肝抗体第3代酶免试剂盒（考核试剂）和国产科华丙肝抗体第3代酶免试剂盒（参比试剂）对7948份样本进行检测,检测结果不一致时,应用美国ORTHO DiaGNOSTIC公司第3代重组免疫印迹法3.0试剂盒进行确证,以对结果进行综合分析。结果：考核试剂和参比试剂灵敏度都为100%;考核试剂特异度99.76%,稍稍低于参比试剂的99.99%。考核试剂对HBV感染的病毒性肝炎、类风湿抗核抗体阳性样本检测,特异度为100%。考核试剂的总符合率为99.79%,阳性预测值为98.13%,阴性预测值为100%。用SPSS13.0分析,考核试剂的阳性样本和阴性样本的频数分布图直观效果比较理想;KAPPA值为0.989（P〈0.01）;ROC曲线下面积为0.998。结论：Dia.Pro试剂灵敏度100%,特异度99.76%,对阴阳性有较好的预知能力,与参比试剂KH试剂有很好的一致性,以及较优越的检测性能,是一种优秀的抗-HCV酶免试剂盒,适用于血液筛查和丙型肝炎诊断。     

华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶ELISA检测方法的建立及其应用效果评价

目的建立重组华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶ELISA检测方法,观察该方法检测华支睾吸虫病的现场应用效果。方法根据江苏省第二次重要人体寄生虫流行现状调查结果选取6个调查点,采用整群抽样的方法每个村调查不少于500人,应用重组华支睾吸虫半胱氨酸ELISA检测血清特异性抗体。采用系统抽样方法抽取的10％的阴性者和全部阳性者开展病原学检测。ELISA试验通过设立阴性血清、阳性血清和PBS对照及重复试验进行质量控制。结果ELISA检测3105人,血清特异性抗体阳性21人,阳性率为0．68％。对ELISA阳性者做病原学检查,阳性18人,一致率为99．10％。质量控制结果显示ELIsA试验,每批次阴性和阳性平行对照A。均值差异无统计学意义（P〉0．05）,重复试验一致率为99．43％。结论重组华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶ELISA法重复性好,敏感性高,具有较高的诊断价值和广阔的应用前景。     

2种棘球绦虫IgG抗体检测试剂盒应用效果比较

目的 观察不同厂家生产的2种棘球绦虫IgG抗体检测试剂盒的检测效果。 方法 采用2种不同厂家生产的棘 球绦虫IgG抗体检测试剂盒检测相同数量的棘球蚴病人、 正常人血清, 以及卫氏并殖吸虫、 华支睾吸虫、 日本血吸虫和猪囊 尾蚴病人血清, 统计2种方法的特异性、 敏感性和交叉反应性。 结果 2个厂家生产的棘球绦虫IgG抗体检测试剂盒的特 异性和敏感性均为100％。深圳康百得公司生产的试剂盒与卫氏并殖吸虫病、 华支睾吸虫病、 日本血吸虫病和猪囊尾蚴病 的交叉反应率分别为25.00％、 26.09％、 10.00％和87.50％; 珠海海泰公司生产的试剂盒的交叉反应率分别为5.00％、 13.04％、 20.00％和93.75％。2种试剂盒间, 卫氏并殖吸虫病检出率差异有统计学意义 （P ＜ 0.05）, 其他检出率差异均无统 计学意义 （P均 ＞ 0.05）。结论 2个厂家生产的棘球绦虫IgG抗体检测试剂盒均具有敏感性高、 特异性强、 简便快速等优 点; 但需进一步解决与其他寄生虫病的交叉反应问题, 以提高早期诊断的准确性。     

肺吸虫特异性IgG4快速检测方法的建立与应用

目的创建简易、快速、准确的肺吸虫病免疫诊断方法。方法用卫氏并殖吸虫成虫粗提液为抗原,以胶体金标记抗人IgG4单抗为检测探针,采用自行设计的垂直流渗滤装置,创建快速检测人血清肺吸虫特异性IgG4方法(P-IgG4-DIGFA),平行检测IgG作比较分析;以经典ELISA为对照,评价其诊断价值,应用P-IgG4-DIGFA检测有效治疗后病人血清,评价其疗效考核价值。结果P-IgG4-DIGFA检测人血清中肺吸虫特异性IgG4的敏感性和特异性分别为95.2%(40/42)、100%(50/50),与血吸虫病患者血清的交叉反应率仅为2%(1/50),未发现与华支睾吸虫病有交叉反应。P-IgG4-DIGFA的敏感性和特异性略高于经典ELISA,差异无统计学意义(χ2=0.25,P>0.05);应用P-IgG4-DIGFA检测有效治疗后3个月、6个月和12个月病人血清特异性IgG4,阴转率分别为0%、16.7%(1/6)和100%。结论金标渗滤法快速检测肺吸虫特异性IgG4,不仅操作简便、快速,而且敏感性高、特异性强,适用于临床检验和现场查病,对治疗后1年病人具有疗效考核价值,有待进一步开发应用。     

胶囊内镜在不明原因消化道出血诊断中的应用

背景：胶囊内镜是明确不明原因消化道出血（OGIB）的检查手段之一,其诊断率可能受到检查时机和出血自然病程的影响。目的：探讨胶囊内镜在OGIB诊断中的应用价值和最佳检查时机。方法：收集2010年10月～2012年6月厦门大学附属中山医院46例接受胶囊内镜检查的OGIB患者。回顾性分析胶囊内镜检查诊断OGIB的阳性率、疑诊率、敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值,比较不同检查时机对OGIB检出率的影响。结果：胶囊内镜检查诊断OGIB的阳性率为71．7％,疑诊率为13．0％,阴性率为15．2％,诊断敏感性、特异性以及阳性预测值、阴性预测值分别为96．3％、75．0％、92．9％、85．7％。活动性出血组的检出率显著高于出血停止组（96．3％对68．4％,P=0．030）,显性出血者的检出率与隐性出血者相比差异无统计学意义（100％对75．0％,P=0．148）。出血停止≤2周者的检出率显著高于出血停止〉2周者（90．9％对37．5％,P=0．041）。结论：胶囊内镜是诊断OGIB的一种安全、有效的检查手段,出血后尽早行胶囊内镜检查可能提高阳性诊断率并为进一步干预创造条件。