芹菜素对丙烯腈染毒大鼠脑组织氧化应激及炎症反应的影响

目的研究芹菜素(apigenin,AP)对丙烯腈(acrylonitrile,ACN)染毒大鼠脑组织氧化应激及炎症反应的干预作用。方法 50只SPF级健康成年雄性SD大鼠随机分为5组:对照组、ACN组(46 mg/kg·bw ACN)、低AP干预组(46 mg/kg·bw ACN+117 mg/kg·bw AP)、中AP干预组(46 mg/kg·bw ACN+234 mg/kg·bw AP)和高AP干预组(46 mg/kg·bw ACN+351 mg/kg·bw AP),按5 ml/kg·bw灌胃染毒,1次/d,6 d/周,连续4周;检测大鼠脑组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽(GSH)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。结果与对照组相比,ACN组大鼠脑湿重及脑脏器系数降低,脑组织中MDA含量升高,GSH-Px活性降低,IL-6含量增加,差异均有统计学意义(P0.05);AP干预后,与ACN组比较,低和高AP干预组大鼠脑湿重升高,低、中和高AP干预组大鼠脑脏器系数上升,中AP干预组大鼠脑组织SOD活性升高,低、中和高AP干预组GSH-Px活性及GSH含量增加,差异有统计学意义(P0.05),低AP干预组TNF-α含量降低,低、中和高AP干预组IL-6含量减少,差异均有统计学意义(P0.05)。结论 ACN染毒可诱导大鼠脑组织发生氧化应激及炎症反应,117和234 mg/kg·bw AP对ACN引起的大鼠脑损伤有一定的保护作用。     

美洲大蠊多肽PAP-2对Balb/c小鼠肝癌原位移植瘤免疫微环境的影响

目的 探讨美洲大蠊多肽PAP-2对肝癌免疫微环境的影响,及其作用机制。方法 通过给昆明种小鼠注入H22细胞悬液构建Balb/c小鼠肝癌原位移植瘤模型,将原位移植瘤小鼠随机分为10组：模型组,5-氟尿嘧啶组(20 mg·kg^-1 5-FU),美洲大蠊多肽PAP-2低、中、高剂量组(50、100、200 mg·kg^-1 PAP-2),5-氟尿嘧啶(20 mg·kg^-1 5-FU)+PAP-2低、中、高剂量组(50、100、200 mg·kg^-1 PAP-2),美洲大蠊CⅡ-3组(200 mg·kg^-1 CⅡ-3),脱脂膏组(200 mg·kg^-1脱脂膏),5-Fu组隔天给药1次,其余各药物组每天1次,腹腔注射。通过检测抑瘤率、胸腺指数及脾指数,检测肿瘤组织中γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和IL-1β的表达水平,检测小鼠脾细胞中相关淋巴细胞的变化水平。结果 模型组、5-氟尿嘧啶组、美洲大蠊多肽PAP-2高剂量组、5...     

番灵胶囊对小鼠免疫功能的调节作用北大核心CSCD

目的研究番灵胶囊对CKF1(BALB/c×KM)小鼠的免疫调节作用。方法采用经口灌胃分别给予80、160和480 mg/kg·bw的番灵胶囊30 d后,观察其体重,测定其免疫器官指数、脾淋巴细胞增殖能力、小鼠迟发型变态反应,血清溶血素、自然杀伤细胞(NK细胞)活性、抗体生成细胞水平及腹腔巨噬细胞吞噬功能的变化。结果 480 mg/kg·bw组可增强脾淋巴细胞增殖能力、提高抗体生成细胞水平、提高小鼠NK细胞和巨噬细胞吞噬活性;160和480 mg/kg·bw组可增加小鼠血清半数溶血值。结论在本试验条件下,番灵胶囊在480 mg/kg·bw剂量下有增强小鼠免疫功能的作用。     

番灵胶囊对小鼠免疫功能的调节作用

目的研究番灵胶囊对CKF1(BALB/c×KM)小鼠的免疫调节作用。方法采用经口灌胃分别给予80、160和480 mg/kg·bw的番灵胶囊30 d后,观察其体重,测定其免疫器官指数、脾淋巴细胞增殖能力、小鼠迟发型变态反应,血清溶血素、自然杀伤细胞(NK细胞)活性、抗体生成细胞水平及腹腔巨噬细胞吞噬功能的变化。结果 480 mg/kg·bw组可增强脾淋巴细胞增殖能力、提高抗体生成细胞水平、提高小鼠NK细胞和巨噬细胞吞噬活性;160和480 mg/kg·bw组可增加小鼠血清半数溶血值。结论在本试验条件下,番灵胶囊在480 mg/kg·bw剂量下有增强小鼠免疫功能的作用。     

天麻素对抑郁症模型小鼠抑郁行为及其相关细胞因子表达的影响

目的观察天麻素的抗抑郁作用,并探讨其可能作用机制。方法采用慢性不可预知性温和应激(CUMS)制备小鼠抑郁症模型,腹腔注射天麻素(gastrodin,200 mg·kg~(-1))和丙咪嗪(20 mg·kg~(-1))后,通过小鼠体重测试、旷场实验、悬尾实验、强迫游泳实验来评价天麻素对CUMS模型小鼠的抗抑郁作用,同时通过ELISA检测小鼠血清中TNF-α、IL-1β和海马组织炎性因子TNF-α、IL-6、IL-17、IL-1β以及脑源性神经营养因子(BDNF)的表达。结果与正常组比较,CUMS 42 d后,小鼠表现出明显的抑郁样行为,表现为体重变化减少,小鼠悬尾实验和强迫游泳实验中的不动时间增加,但对其运动能力没有影响;与模型组比较,天麻素组小鼠的抑郁样行为有所改善,表现为体重变化有上升的趋势,小鼠悬尾实验和强迫游泳实验中小鼠的不动时间有所下降,进一步检测显示,天麻素组小鼠血清中TNF-α、IL-1β和海马组织炎性因子TNF-α、IL-6、IL-17、IL-1β的含量明显降低,BDNF的含量显著升高。结论天麻素具有一定的抗抑郁作用,并且其作用机制可能与降低海马组织炎性因子TNF-α、IL-6、IL-17、IL-1β水平和增加BDNF的含量有关。     

葡多酚乙醇溶液对小鼠TNF-α与脾淋巴细胞增殖活性的影响

目的观察葡多酚(GPC)乙醇溶液对小鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与脾淋巴细胞增殖活的影响。方法将每天经口灌胃给予4 g/kg·bw乙醇的小鼠同时分别给予不同剂量的GPC,30 d后处死小鼠,采用ELISA法检测TNF-α水平,采用MTT法检测各组小鼠脾淋巴细胞增殖活性,以及测定小鼠体重并计算各组小鼠的脾脏指数及胸腺指数。结果 GPC高剂量组血清TNF-α浓度为(9.641±0.791)pg/ml,较乙醇对照组显著性降低(P0.05)。GPC高剂量组和乙醇对照组脾淋巴细胞增殖活性分别为0.437±0.014和0.181±0.020,二者之间差异具有统计学意义(P0.05)。GPC各组的脾脏指数及胸腺指数均较乙醇对照组显著性升高(P0.05)。结论 GPC可抑制乙醇诱发的TNF-α水平升高及脾淋巴细胞增殖活性的降低,可提高脾脏指数和胸腺指数,对乙醇引起的小鼠免疫功能损伤有保护作用。     

土木香水煎液急性毒性和遗传毒性的研究CSCD

目的探讨土木香水煎液的急性毒性和遗传毒性,为土木香临床安全应用提供实验依据。方法采用最大耐受剂量法评价土木香水煎液的急性毒性,观察小鼠体重变化,心、肝、脾和肾的脏器指数变化;采用精子畸形实验,微核实验和彗星实验评价土木香水煎液的遗传毒性。将小鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组和土木香水煎液高、中、低剂量组(分别灌胃蒸馏水,40 mg/kg·bw环磷酰胺,40、20、10 g/kg·bw土木香水煎液)。用药后取附睾制成精细胞悬液观察畸形精子数量。取骨髓细胞观察嗜多染红细胞的微核率。取肝、胸腺和脾细胞观察土木香水煎液对小鼠DNA的损伤。结果土木香水煎液经口给药小鼠最大耐受剂量为80 g/kg·bw,该剂量对小鼠的体重及各脏器指数无明显影响与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。高和中剂量组的精子畸形率明显高于阴性对照组(P<0.05),低剂量组精子畸形率与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。高剂量组的微核率明显高于阴性对照组,与之比较差异有统计学意义(P<0.05),而中和低剂量组与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。各剂量组肝细胞、胸腺及脾细胞头尾DNA百分比、尾长、尾矩及Olive尾矩与阴性组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论土木香的最大耐受计量为80 g/kg,属于无毒级。高和中剂量的土木香水煎液对生殖细胞有一定的毒性作用,且高剂量有潜在的遗传毒性。     

土木香水煎液急性毒性和遗传毒性的研究

目的探讨土木香水煎液的急性毒性和遗传毒性,为土木香临床安全应用提供实验依据。方法采用最大耐受剂量法评价土木香水煎液的急性毒性,观察小鼠体重变化,心、肝、脾和肾的脏器指数变化;采用精子畸形实验,微核实验和彗星实验评价土木香水煎液的遗传毒性。将小鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组和土木香水煎液高、中、低剂量组(分别灌胃蒸馏水,40 mg/kg·bw环磷酰胺,40、20、10 g/kg·bw土木香水煎液)。用药后取附睾制成精细胞悬液观察畸形精子数量。取骨髓细胞观察嗜多染红细胞的微核率。取肝、胸腺和脾细胞观察土木香水煎液对小鼠DNA的损伤。结果土木香水煎液经口给药小鼠最大耐受剂量为80 g/kg·bw,该剂量对小鼠的体重及各脏器指数无明显影响与阴性对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。高和中剂量组的精子畸形率明显高于阴性对照组(P0.05),低剂量组精子畸形率与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。高剂量组的微核率明显高于阴性对照组,与之比较差异有统计学意义(P0.05),而中和低剂量组与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。各剂量组肝细胞、胸腺及脾细胞头尾DNA百分比、尾长、尾矩及Olive尾矩与阴性组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论土木香的最大耐受计量为80 g/kg,属于无毒级。高和中剂量的土木香水煎液对生殖细胞有一定的毒性作用,且高剂量有潜在的遗传毒性。     

丹参酮对人工关节无菌性松动小鼠气囊模型中炎症反应的影响

目的:研究丹参酮对人工关节无菌性松动小鼠气囊模型中炎症反应的影响。方法:将小鼠随机分为空白对照组(生理盐水)、钛颗粒组(生理盐水)和丹参酮低、中、高剂量组(50、100、200 mg/kg),每组10只。所有小鼠建立气囊模型,除空白对照组小鼠气囊内注入0.5 mL生理盐水外,其余各组小鼠气囊内均注入0.5 mL钛颗粒悬液(10 mg/mL),24 h后按0.1 mL/10 g连续ig相应药物14 d。末次给药24 h后收集气囊,肉眼和苏木精-伊红染色显微镜观察气囊炎症情况,计算炎症细胞密度;实时定量聚合酶链式反应法检测气囊组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)m RNA表达量;酶联免疫吸附法检测气囊组织中TNF-α、IL-1β蛋白表达量。结果:与空白对照组比较,钛颗粒组小鼠气囊红肿明显,可见较多渗出及新生血管,炎症反应严重,炎症细胞密度明显增加(P<0.05);TNF-α、IL-1βm RNA及蛋白表达明显增强(P<0.05)。与钛颗粒组比较,丹参酮各剂量组小鼠气囊红肿减轻,渗出及新生血管减少,炎症反应减轻,炎症细胞密度明显减小(P<0.05);TNF-α、IL-1βm RNA及蛋白表达明显减弱(P<0.05),且呈剂量依赖性。结论:丹参酮可有效抑制人工关节无菌性松动小鼠气囊模型中的无菌性炎症反应。     

原花青素对环磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的 探究原花青素（PC）对环磷酰胺（Cy）致免疫抑制小鼠的免疫调节作用及其对白细胞介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响。方法 选用40只ICR小鼠，随机均分为正常对照组、Cy模型组、PC高剂量组（100 mg/kg）和PC低剂量组（80 mg/kg）。灌胃给药，7 d后测定各组小鼠胸腺（脾脏）指数、血清溶血素水平、迟发型超敏反应性；酶联免疫吸附测定（ELISA）检测外周血IL-10和TNF-α的表达；RT-qPCR测定小鼠脾脏TNF-α和IL-10 mRNA的表达。结果 PC能够提高小鼠胸腺、脾脏指数，一定程度恢复免疫抑制小鼠的迟发型超敏反应能力，提高血清溶血素含量；同时PC也可降低外周血IL-10的表达，升高TNF-α的表达；降低脾细胞IL-10 mRNA的水平，升高TNF-α mRNA的水平。结论 原花青素可以提升机体免疫功能，其调节机制可能是通过对细胞因子TNF-α和IL-10的调节来完成的。     

氧化应激与神经炎症在二溴乙酸致大鼠下丘脑损伤中的作用

目的探讨二溴乙酸(dibromoacetic acid,DBA)对大鼠下丘脑的毒性作用并通过氧化应激和神经炎症2方面对其损伤的可能机制进行研究。方法清洁级SD大鼠40只,随机分为4组,即阴性对照组(去离子水)和低(20 mg/kg·bw)、中(50 mg/kg·bw)、高(125 mg/kg·bw)剂量染毒组,每组10只。染毒组大鼠经口灌胃DBA 28 d后,进行Morris水迷宫实验,并比较其穿梭次数。取大鼠下丘脑组织,按照试剂盒方法测定下丘脑MDA和GSH含量变化,分别采用实时荧光定量PCR(q PCR)和蛋白免疫印迹技术(Western blot)分别检测血红素氧合酶(HO-1)、小胶质细胞标记物(IBA-1)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和白介素-1β(IL-1β)mRNA和蛋白表达量的变化,采用SPSS17.0进行统计学分析。结果与对照组相比,Morris水迷宫结果显示,染毒剂量组大鼠运动轨迹明显复杂,且穿梭次数显著减少,差异有统计学意义(P0.05);下丘脑MDA含量明显升高,GSH含量明显降低,与对照组相比,中、高剂量组差异有统计学意义(P0.05);q PCR结果显示,中、高染毒剂量组大鼠下丘脑中HO-1、TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA表达量显著上升,差异具有统计学意义(P0.05)。Western blot结果显示,中、高染毒剂量组大鼠下丘脑中HO-1、IBA-1、TNF-α、IL-6和IL-1β蛋白表达升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论暴露于DBA可能通过氧化应激和神经炎性两方面对大鼠产生下丘脑毒性作用。     

金莲花总黄酮提取物对脂多糖致大鼠急性肺损伤的影响

目的探讨金莲花总黄酮提取物对脂多糖(LPS)致大鼠急性肺损伤的保护作用,并讨论其可能的作用机制。方法将60只雄性SD大鼠随机分为6组,分别是正常对照组、模型组、金莲花总黄酮提取物低剂量组(125 mg/kg·bw)、中剂量组(250 mg/kg·bw)、高剂量组(500 mg/kg·bw)和地塞米松阳性对照组(2 mg/kg·bw),每组10只。金莲花总黄酮提取物各剂量组每天按设定剂量灌胃给予受试物,其余3组均灌胃给予相同体积的蒸馏水,连续30 d,阳性对照组在造模前1 h灌胃给予2 mg/kg·bw地塞米松。第31天,除正常对照组外,其余各组大鼠均经口气管插管后,采用雾化注射器喷入LPS溶液(3 mg/kg·bw)建立大鼠急性肺损伤模型。染毒3 h后,经腹主动脉采血处死大鼠。检测全血中性粒细胞百分比,检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)活性及丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量;检测肺泡灌洗液中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1-β(IL-1β)和白介素6(IL-6)含量;计算右肺中叶湿/干重比(W/D),苏木素-伊红(HE)染色观察右肺后叶病理组织学变化。结果与模型组比较,金莲花总黄酮提取物高剂量组中性粒细胞百分比明显降低(P0.05);金莲花总黄酮提取物高剂量组大鼠右肺中叶W/D比值明显降低(P0.05);金莲花总黄酮提取物高剂量组大鼠血清SOD和GSH活性明显高于模型组(P0.05),中、高剂量组MDA明显降低(P0.05);金莲花总黄酮提取物中、高剂量组NO含量低于模型组(P0.05)。在肺泡灌洗液检测中发现,与模型组相比,高剂量组TNF-α含量明显降低(P0.05),低、中和高剂量组IL-1β有不同程度的降低,但差异无统计学意义(P0.05),金莲花总黄酮提取物不同剂量组IL-6水平较模型组有明显降低(P0.05);病理组织学观察显示,与模型组相比较,金莲花总黄酮提取物不同剂量组的炎症反应程均有不同程度的减轻。结论金莲花总黄酮提取物对LPS致大鼠急性肺损伤具有保护作用,其作用机制可能与其抗氧化作用、减轻肺水肿和减少炎症因子的释放有关。     

PM_(2.5)通过激活Nlrp3炎性小体诱导小鼠肺炎症反应

目的本文比较了PM_(2.5)单次染毒和3次染毒后对小鼠血液学、细胞因子表达的影响,并对炎性作用机制进行了初步研究。方法用气管滴注法对BALB/c雄性小鼠染毒,PM_(2.5)剂量分别为对照组、0.5、2.0和5.0 mg/kg·bw。染毒结束后进行血细胞计数,用Elisa法测定肺组织匀浆白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-4和干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)含量,用RT-q PCR检测肺组织NLRP3(NACHT、LRR and PYD domains-containing protein 3)炎性小体相关基因的mRNA表达,HE染色法进行肺组织病理学检测。结果 PM_(2.5)染毒1次后,各剂量对小鼠血液中白细胞计数无显著影响,5.0 mg/kg·bw剂量组的中性粒细胞百分比较对照组显著升高(P0.01)。PM_(2.5)3次染毒后,3个剂量组均可使中性粒细胞百分比显著升高(P0.01),而淋巴和单核细胞百分比显著降低(P0.05或P0.01)。PM_(2.5)单次染毒和3次染毒后,2.0和5.0 mg/kg·bw剂量组均可引起小鼠肺组织IL-1β表达量的升高,5.0 mg/kg·bw剂量组可使IL-4和IFN-γ表达量下降(P0.05或P0.01)。此外,染毒3次后,2 mg/kg·bw剂量组比染毒1次同等剂量组白细胞计数和IL-1β表达量均降低(P0.05)。PM_(2.5)染毒3次的肺样本5.0 mg/kg·bw组与对照组比较,Nlrp3的表达量则明显升高(P0.05),但胱天蛋白酶1(Caspase-1)表达量未显著升高。组织病理学可见5.0 mg/kg·bw组与对照组比较,气管周边淋巴滤泡增大,肺泡内可见巨噬细胞。结论 PM_(2.5)能引起小鼠的炎症反应,反映在血中中性粒细胞百分比升高而淋巴细胞比例下降,且有较好的剂量-效应和时间-效应关系。同时PM_(2.5)染毒可使IL-1β升高,但IL-4及IFN-γ在染毒1次和染毒3次均降低。PM_(2.5)可能通过活化NLRP3炎性小体和IL-1β受体途径参加炎症反应。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇一次经口染毒对雄性小鼠的影响

目的通过检测急性暴露脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)后小鼠半数死亡数(LD50)值、生长指数,血液、血生化指标变化以及病理观察,探讨小鼠急性DON染毒的毒性效应,并通过检测染毒小鼠的淋巴细胞分群等指标,关注小鼠染毒DON对免疫系统的影响。方法选取清洁级昆明小鼠50只,20只用于上下法测定小鼠LD50值,另30只随机分为对照组、低剂量组(2 mg/kg·bw)、高剂量组(10 mg/kg·bw),每组10只,灌胃给予DON 1次,恢复喂养14 d后取材,观察指标为血液与血生化、主要脏器(心、肺、胸腺、脾、肾和肝)称重、脏体比与组织病理学观察,包括苏木素-伊红(HE)染色观察、Tunel法观察细胞凋亡,免疫组化观察细胞凋亡相关蛋白P53、Bax、bcl-2蛋白表达以及外周血淋巴细胞分型。结果上下法测定昆明小鼠DON的LD50值为17.5 mg/kg·bw。与对照组比较,低剂量组各指标无明显差别(P0.05);高剂量组小鼠部分血小板(PLT)增高、淋巴细胞(LYM)降低,血生化指标中天冬氨酸转氨酶(ALT)、丙氨酸转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP)明显下降,总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)、肌酐(CREA)显著升高(P0.05);高剂量组小鼠肝、肾、脾相对重量与对照组相比有统计学差异(P0.05);Tunel实验可见高剂量组小鼠肝、肾、脾、胸腺出现凋亡细胞增多,同时高剂量组小鼠脾NK细胞比值高于对照组,B细胞低于对照组(P0.05)。结论本试验条件下雄性小鼠急性经口毒性LD50为17.5 mg/kg·bw,一次急性染毒DON可以诱导肝、肾、脾、胸腺的细胞凋亡,造成小鼠的免疫毒性,其作用机制可能在于脱氧雪腐镰刀菌烯醇活化p53信号通路。     

煤燃烧排放的细颗粒物对大鼠肺的免疫损伤

目的研究燃煤细颗粒物(PM_(2.5))对大鼠肺部的免疫损伤。方法采集空气动力学直径≤2.5μm的PM_(2.5)并分析测试其化学成分,研究因燃煤而产生的PM_(2.5)对大鼠肺部的免疫损伤。将40只雄性6周龄Wistar大鼠随机分为4组,分别对4组大鼠气管滴注生理盐水、低浓度(1.5 mg/kg·bw)、中浓度(7.5 mg/kg·bw)及高浓度(37.5 mg/kg·bw)PM_(2.5)悬液,分别于24和48 h后处死动物,检测其血常规和肺泡灌洗液(BALF)中白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)及转化生长因子(TGF-β1)等氧化炎症因子,并制作肺组织病理切片。结果一定的染毒时间和染毒剂量可明显提高大鼠白细胞数(WBC)、明显降低红细胞数(RBC)。急性染毒48 h后,低浓度组和高浓度组染毒使大鼠肺组织中TNF-α升高(P0.05)。对大鼠肺部病理观察显示,急性染毒导致大鼠肺部产生病理变化,特别是中浓度和高浓度染毒24和48 h后,大鼠肺泡严重压缩、溃不成形,血管和支气管内产生结晶,炎细胞浸润。结论燃煤PM_(2.5)急性染毒24 h后,导致大鼠血液WBC升高、激发TNF-α的分泌,大鼠表现出积极的免疫应对;急性染毒48 h后,大鼠血液WBC和RBC数量降低,大鼠表现出免疫系统调节能力降低。随着染毒污染物浓度的升高,大鼠肺部组织的不利影响逐渐加重。     

黄芪皂甙Ⅳ对小鼠T、B淋巴细胞增殖和腹腔巨噬细胞功能的影响(英文)

目的:探讨黄芪皂苷Ⅳ(ASI)对小鼠T、B淋巴细胞增殖和腹腔巨噬细胞分泌的细胞因子的影响.方法:采用MTT法检测T、B淋巴细胞的增殖;采用分光光度计测定法检测抗体活性;IL-1活性用胸腺细胞增殖法测定;TNF-α活性用L929细胞杀伤法测定.结果:1)ASI50-200mg/kg ig 7天能够促进T淋巴细胞增殖和抗体生成,而ASI 50-100mg/kg能够促进B淋巴细胞增殖,但是220mg/kg对B淋巴细胞增殖无影响;2)ASI体外仅在100nmol/L对T、B淋巴细胞有促进作用;3)ASI 1 nmol/L可以促进腹腔巨噬细胞分泌IL-1,而100-1000nmol/L则抑制腹腔巨噬细胞分泌IL-1;4)ASI体外可以抑制LPS刺激或无LPS刺激下的腹腔巨噬细胞分泌TNF-α.结论:ASI能够促进小鼠T、B淋巴细胞的增殖和抗体生成,同时可以抑制腹腔巨噬细胞体外分泌IL-1和TNF-α.     

蛇六谷葡苷露聚糖对小鼠巨噬RAW264.7细胞免疫调节作用及机制研究

目的探讨蛇六谷葡苷露聚糖(KGM)对小鼠巨噬细胞RAW264.7免疫调节作用及机制。方法采用MTT法检测KGM对小鼠巨噬RAW264.7细胞存活率的影响,观察巨噬细胞形态的变化;采用吞噬中性红和流式细胞仪测FITC-dextran的方法检测KGM处理后小鼠巨噬细胞RAW264.7的吞噬活性;采用Griess法测定NO,ELISA法检测细胞培养液中IL-6,IL-1β和TNF-α等细胞因子的含量;采用qRT-PCR法检测小鼠巨噬细胞RAW264.7相关基因iNOS,IL-6,TNF-α,IL-1β,TLR4,My D88,TRAF-6,TRAM和NF-κB等的表达。结果 KGM在50～400 mg·L~(-1)对小鼠巨噬细胞RAW264.7没有细胞毒性。KGM处理24 h后,RAW264.7细胞体积增大,胞内颗粒小泡增多,呈不规则多边形,部分细胞伸出伪足,表现为典型的激活态;中性红吞噬实验和流式测定FITC-dextran实验结果表明,KGM 50～200 mg·L~(-1)能显著提升小鼠巨噬细胞RAW264.7的吞噬活性,与对照组相比,KGM 100 mg·L~(-1)分别使细胞吞噬活性提高101.4%和404.3%。Griess法检测表明,KGM能显著增加小鼠巨噬细胞RAW264.7合成和释放NO,其中KGM100 mg·L~(-1)处理组细胞NO含量与LPS 5 mg·L~(-1)作用相当,与对照组相比,NO含量提高318.1%。ELISA检测表明,KGM 50～200 mg·L~(-1)能诱导RAW264.7细胞分泌IL-6,TNF-α和IL-1β等细胞因子,与对照组相比,KGM 100 mg·L~(-1)明显使细胞因子分泌量分别增加415.5%,158.6%和458.0%(P<0.01)。qRT-PCR的结果显示,与对照组相比,KGM组IL-6,i NOS,TNF-α,IL-1β,TLR4,My D88,TRAF-6和NF-κB的mRNA表达水平升高(P<0.05),表明KGM可以激活小鼠巨噬细胞RAW264.7中的核转录因子NF-κB和TLR4。结论 KGM对小鼠巨噬RAW264.7细胞具有免疫调节活性,能够显著提升小鼠细胞RAW264.7的吞噬能力,促进分泌与释放NO和TNF-α等相关细胞因子,推测可能是通过激活TLR4/My D88/NF-κB信号通路发挥免疫调节作用。     

紫茎泽兰提取物对小鼠免疫毒性的研究

目的 观察紫茎泽兰提取物对小鼠免疫功能的影响。方法 小鼠分别以75、150和300 mg/kg的剂量连续7 d经口给予紫茎泽兰提取物,7 d后无菌取其胸腺和脾脏并称重,观察紫茎泽兰提取物对胸腺及脾脏指数的影响,并取胸腺和部分脾脏甲醛固定,光学显微镜下观察胸腺及脾脏组织病理学变化。将剩余部分脾脏制成脾细胞悬液,采用流式细胞术测定脾细胞凋亡率,MTT法检测脾细胞增值活性,乳酸脱氢酶(LDH)法测定NK细胞活性。结果 紫茎泽兰提取物各组与对照组相比胸腺指数明显降低(P<0.05),胸腺及脾脏组织均有明显的病理学改变。脾细胞凋亡率明显增加(P<0.05),脾细胞增值活性明显降低(P<0.05),紫茎泽兰提取物300 mg/kg组,效-靶细胞为50∶1及25∶1浓度组NK细胞活性明显降低(P<0.05)。结论 紫茎泽兰提取物对小鼠免疫功能有一定程度的抑制作用。     

当归精油对脓毒症小鼠的治疗作用

目的:观察当归精油对脓毒症小鼠的治疗作用。方法:i.v.给予细菌脂多糖复制小鼠脓毒症模型,i.v.给予不同剂量的当归精油,记录小鼠7 d生存率,ELISA法测定血清中细胞因子TNF-α和IL-6含量。结果:在100 mg/kg剂量下,当归精油可提高内毒素(25 mg/kg)攻击小鼠的生存率(P<0.01);在内毒素(25 mg/kg)攻击前、后2 h内给药能提高小鼠生存率,提前1 h预防性给药生存率最高(P<0.01);25～100 mg/kg当归精油能对抗0.125 mg/kg内毒素引起的TNF-α、IL-6水平增高,降低小鼠血清TNF-α、IL-6水平(P<0.05或P<0.01)。结论:当归精油能拮抗内毒素引起的炎症反应,对脓毒症有一定的治疗作用。     

藏药独一味抗类风湿关节炎的作用及其药效物质基础研究

目的:研究藏药独一味抗类风湿关节炎(RA)的作用及其药效物质基础。方法:将56只SD大鼠随机分为正常对照组(0.5%羧甲基纤维素钠溶液),模型组(0.5%羧甲基纤维素钠溶液),甲氨蝶呤组(阳性对照组,3 mg/kg),独一味水提液低、中、高剂量组(0.5、1、2 g/kg,以生药量计)和独一味总黄酮组(200 mg/kg,以黄酮提取物计),每组8只。除正常对照组外,其余各组大鼠均于右后足垫注射弗氏完全佐剂(FCA)复制佐剂性关节炎模型。注射FCA次日,各组大鼠灌胃相应药物,每天给药1次(仅甲氨蝶呤组每3天给药1次),连续给药30天。给药第15、30天时,分别测定大鼠左后足的足肿胀度,计算其关节炎指数。第30天给药结束后,采用酶联免疫吸附法测定各组大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、IL-10水平,计算其胸腺指数、脾指数,并采用苏木精-伊红染色法观察各组大鼠踝关节的病理学变化。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠给药第15、30天时的足肿胀度、关节炎指数以及给药第30天时的脾指数和血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平均显著升高(P<0.01);给药第30天时的胸腺指数、IL-10水平均显著降低(P<0.01);踝关节可见明显的滑膜细胞增生、浸润关节腔等病理学改变。与模型组比较,各给药组大鼠给药第15、30天时的足肿胀度、关节炎指数以及给药第30天时的脾指数和血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平均显著降低(P<0.01);给药第30天时的胸腺指数和血清中IL-10水平均显著升高(P<0.01);关节炎病理学变化明显改善。与独一味水提液高剂量组比较,独一味总黄酮组大鼠给药第15天时的足肿胀度以及给药第15、30天时的关节炎指数、胸腺指数、脾指数、炎症细胞因子水平、踝关节病理学变化等差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:藏药独一味具有良好的抗RA作用,总黄酮可能是其药效物质基础。