草木樨状黄芪高频离体再生体系的建立

以草木樨状黄芪无菌苗茎切段为材料,在含１－２mg/L2,4-D和０－０．５mg/L６ＢＡ的MS培养基上培养获得大量愈伤组织,愈伤组织诱导率在９５％以上,愈伤组织在附加０．２mg/LＫＴ,１mg/L６ＢＡ,０或０．５mg/LＮＡＡ,５００mg/LＣＨ 和２００mg/L ＹＥ的ＭＳ培养基上诱导丛生芽,并进而发育成苗。苗的分化频率为１００％。分化苗或其茎的切段在不国源植物激素的１／２ＭＳ培养基上可出现根的分化,分化频率达９０％以上,再生植株经炼苗后移栽成活率达８０％以上。     

亚麻下胚轴离体培养和转化的研究

报道了亚麻（Ｌｉｎｕｍ　ｕｓｉｔａｔｉｓｓｉｍｕｍ）的高频率植株再生和细胞转化。亚麻下胚轴切段培养在ＭＳＢ分化培养基上,诱导分化出不定芽。最佳的激素组合是ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ,分化频率可达９７％。在附加ＢＡ１ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ０．０２ｍｇ／Ｌ的ＭＳＢ培养基上,亚麻下胚轴外植体的不定芽分化频率也可达９０％以上。用根癌农杆菌（Ａｇｒｏｈａｃｔｅｒｉｕｍ　ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）感染亚麻下胚轴外植体,在含卡那霉素５０ｍｇ／Ｌ的选择培养基上筛选获得卡那霉素抗性苗,并检测到ＧＵＳ基因活性表达。表明它们是转化植株,转化频率约为２％。     

可乐茄叶肉原生质体培养再生植株

本文报道茄属果树可乐茄（ＳｏｌａｎｕｍｑｕｉｔｏｅｎｓｅＬａｍ．）叶肉原生质体的分离、培养及植株再生。幼嫩叶片原生质体经酶游离、纯化后,以１×１０４个／ｍｌ密度培养于稍加改良Ｋ８ｐ（附加２,４－Ｄ０．５ｍｇＬ（－１）、ＮＡＡ１．０ｍｇＬ（－１）和ＢＡ０．５ｍｇＬ（－１））的培养基中,三天后开始分裂,一周分裂３—４次。一个月形成小细胞团,植板率为０．１—０．２％,小细胞团转培养于ＭＳ＋２,４－Ｄ０．５ｍｇＬ（－１）上增殖后进行分化。原生质体来源愈伤组织在ＩＡＡ（０．１—１．０ｍｇＬ（－１））与ＢＡ或ＺＴ组合的培养基中能诱导器官发生,芽分化率最高可达４２．９％;但ＩＡＡ、ＢＡ、ＺＴ三者一起使用未见任何器官分化。小芽在ＭＳ＋ＩＡＡ０．２ｍｇＬ（－１）中生根成植株。可乐茄叶肉原生质体的植株再生,可应用于育种和茄属植物遗传工程研究。     

马铃薯器官发生和植株再生研究

虎头、克４和Ｆａｖｏｒｉｔａ３个马铃薯品种的根、茎、叶外植体在附加ＮＡＡ和ＢＡ各１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上诱导出愈伤组织。在附加０．２ｍｇ／ＬＮＡＡ和１ｍｇ／ＬＢＡ的ＭＳ培养荐,愈伤组织上分化产生不定芽。１．５－２．５ｃｍ高的不定芽在ＭＳ＋０．０５ｍｇ／ＬＮＡＡ培养基上生根形成再生完整植株。３个马铃薯品种中,虎头茎的愈伤组织诱导频率最高,达９８％。Ｆａｖｏｒｉｔａ叶愈伤组织的不定芽分化频率和不定芽生     

土人参的组织和单细胞培养及试管苗开花结实

以土人参的花梗、茎和叶片为外植体在ＭＳ培养基上诱导出愈伤组织,诱导率为７５％－９０％。愈伤组织经分化和生根培养再生了完整植株。由组织培养再生苗的幼茎诱导的愈伤组织建立悬浮系。由悬浮系分离的单细胞在２／３ＭＳ液体培养基中振荡培养或振荡培养３周后转入双层培养均再生了愈伤组织,再生率分别为０．２８％和０．４１％。愈伤组织在含有较低浓度６－ＢＡ的培养基上分化出苗。幼苗生长迅速,每３周扩增６．７倍,再生植株     

扁蓿豆体细胞胚的诱导和植株再生

扁蓿豆实生苗的根、下胚轴、子叶、叶片和叶柄外植体,在含２,４—Ｄ２—０．２５ｍｇＬ－１与ＫＴ０．２５－２ｍｇＬ－１及２,４—Ｄ０．５ｍｇＬ－１与ＺＴ０．５ｍｇＬ－１或ＢＡＰ０．５ｍｇＬ－１与ＮＡＡ０．０５ｍｇＬ－１的ＭＳ琼脂培养基上均可产生愈伤组织．愈伤组织在含２,４—Ｄ０．５—０．１ｍｇＬ－１与ＫＴ０．５—０．１ｍｇＬ－１或ＢＡＰ０．２５＋ＮＡＡ０．０５ｍｇＬ－１的ＭＳ培养基上可诱导分化出体细胞胚．体细胞胚在无激素的培养基上发育成完整植株．用海藻酸钠包襄体细胞胚制成人工种子,其发芽率和植株转换率分别为９５％和５３％．     

影响木薯次生胚状体发生及植株再生因素的研究

研究了在外植体的不同发育阶段中,碳源以及不同的生长激素配比对木薯次生胚状体诱导及植株再生的影响。结果表明：以固体成熟培养基上生长１５ｄ的胚状体子叶为外植体,次生胚状体的产量最高,达２９．３个成熟胚状体／１个外植体。在次生胚状体的诱导阶段,以麦芽糖（４０ｇ／Ｌ）代替蔗糖作碳源,能同时提高次生胚状体的产量（３２．５个胚次体／１个外植体）及植株再生频率（７４．３％）。２,４－Ｄ与ＰＰ３３３;（０．１ｍｇ／Ｌ）配合能提高植株再生频率到７７．６％。２,４－Ｄ与ＢＡＰ（２ｍｇ／Ｌ）或激动素（２．０ｍｇ／Ｌ）配合则大大降低了胚状体诱导及植株再生频率。     

影响小麦成熟胚再生频率因素的研究(简报)

以小麦成熟胚为外植体,研究了基本培养基、预处理类型、接种方式、植物激素的浓度和不同组合以及分化培养基中是否添加抗生素对愈伤组织诱导和分化的影响．在此基础上建立了一套高效的小麦成熟胚植株再生系统。经过试验,我们选择在MS培养基上接种经无菌水预处理的纵切成熟胚作为起始的试验条件。在含2mg／L2,4-D的MS培养基上．初级愈伤组织的诱导频率可达80％以上．在继代培养基中添加0．5mg／L6-BA和0．2mg／LNAA可以显著提高胚性愈伤组织的产生。而在再生培养基中加入适当浓度的头孢霉素可以有效提高胚性愈伤组织再生出小植株的比例。利用该再生系统,我们从5个小麦优良主栽品种的成熟胚再生出了可育的植株,再生频率达15．3％-34．5％。     

胡杨离体器官发生及试管无性系的建立

研究了离体条件下胡杨（Ｐｏｐｕｌｕｓ　ｅｕｐｈｒａｔｉｃａ　Ｏｌｉｖｅｒ）茎段、叶片及愈伤组织的器官发生和植株再生技术。离体培养以ＭＳ为基本培养基并附加４０ｍｇ／Ｌ腺嘌呤和５００ｍｇ／Ｌ水解乳蛋白。离体叶片和茎段在ＢＡ为０．５ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ为０．５ｍｇ／Ｌ的培养基上诱导产生愈伤组织,并在含０．２５ｍｇ／ＬＢＡ和０．５ｍｇ／ＬＮＡＡ的培养基上继代增殖。ＢＡ为０．５ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ为０．１ｍｇ／Ｌ可诱导叶片和愈伤组织发生不定芽,诱导频率分别为１００％和８２．９％,对于茎段,ＢＡ和ＮＡＡ分别为０．１ｍｇ／Ｌ和０．０１ｍｇ／Ｌ时诱导不定芽频率可达８３％。试管苗在大量元素减半并附加０．０１５ｍｇ／ＬＮＡＡ的ＭＳ培养基上诱导生根,生根率达８６．２％。     

提高小麦愈伤组织分化频率的因素

研究了影响小麦愈伤组织诱导、芽分化及其植株再生的一些因素。结果表明：在愈伤组织诱导和继代过程中添加ＡＢＡ（１ ．０ｍｇ／Ｌ） 有利于小麦中晚期幼胚致密愈伤组织的诱导及再生能力的保持;外植体来源尤其是基因型对长期培养的愈伤组织再生能力有很大影响; 不同的外源激素（ ＫＴ、６ＢＡ、ＩＡＡ、ＴＤＺ和玉米素等） 也影响芽分化频率,其中ＴＤＺ可明显提高芽分化频率;在转入分化培养前对愈伤组织进行干燥处理可有效地提高其芽分化频率;在生根培养基中添加适量的ＩＡＡ 或ＮＡＡ 可有效促进生根。     

反向核不育水稻FHS组织培养高频率植株再生

以反向核不育水稻品系FHS为研究材料,对其成熟胚愈伤组织的诱导及其再生条件进行了研究。研究结果表明,通过选择合适的培养基和调节2,4-D的浓度,胚性愈伤组织的诱导率可以达到92.5%。通过调节MS培养基中KT和NAA的浓度,并加入适量的CuSO4,植株再生频率高达81.3%。由此可见,合适的激素浓度的高低与FHS植株再生频率的高低呈现出一定的相关性。     

江西铅山红芽芋脱毒苗球茎愈伤组织诱导及其再生体系的建立

以江西铅山红芽芋脱毒苗为试材,研究不同因素对红芽芋脱毒苗球茎愈伤组织诱导及其再生体系的影响,以期对红芽芋脱毒苗的再生体系进行优化。结果表明,红芽芋脱毒苗球茎愈伤组织诱导的最佳培养基是MS+TDZ 2 mg·L^-1+2,4-D 1 mg·L^-1。红芽芋脱毒苗球茎愈伤组织分化的最佳培养基是MS+TDZ 2 mg·L^-1+NAA 1 mg·L^-1。红芽芋脱毒苗不定芽生根的最佳培养基是1/2MS+NAA 0.5 mg·L^-1+PP₃₃₃ 0.5 mg·L^-1。红芽芋再生苗最好的移栽基质为发酵后的腐锯木屑。红芽芋脱毒苗球茎愈伤组织再生苗移栽时最佳的PP₃₃₃浓度为20～50 mg·L^-1。本试验成功建立了红芽芋脱毒苗球茎愈伤组织的再生体系,为红芽芋脱毒苗转基因的研究和种质创新奠定了基础。     

培养基成分和培养时间对匍匐翦股颖植株再生的影响

以匍匐翦股颖成熟种子为外植体,研究了培养基2,4-D浓度、2,4-D和6-BA组合配比、蔗糖浓度对匍匐翦股颖愈伤组织诱导的影响以及愈伤组织再生过程中继代时间、6-BA浓度、蔗糖浓度对愈伤组织分化的影响。结果表明:在MS培养基上,2 mg·L^-1 2,4-D和0.1 mg·L^-1 6-BA的组合最利于愈伤组织的诱导,诱导率高达94%。蔗糖浓度为30 g·L^-1时愈伤组织诱导率最高,为82%; 在再生过程中,当6-BA浓度为1 mg·L^-1时分化率最高(62%),蔗糖浓度为40 g·L^-1时,愈伤组织分化率最高(52%)。经过2次继代培养的愈伤组织(外植体放到培养基后40天)的分化率为最高(71%),随着继代次数增多,分化率逐渐降低,在经过5次继代后(培养100 d)分化率仅有18%。     

高羊茅组织培养再生体系及GUS基因瞬间表达研究

以成熟种子为外值体,对高羊茅纰织培养和植株再生体系进行了优化,分析了不同浓度2．4-D、6-BA和激动素对高羊茅愈伤组织诱导和愈伤组织分化成苗的影响．结果表明：9．0mg／L 2．4-L)对愈伤组织的诱导效果最佳．0．2mg／L激动素是愈伤组织分化成苗的最适浓度．二者的诱导率和分化率分别达到68．08%和45．83％。在愈伤组织继代培养基中附加1．0mg／L 2．4-D、0．5mg／L 6-BA和1．25mg／L CuSO4;有利于胚性愈伤组织的形成,可以明显促进愈伤组织分化。同时．采用基因枪法将GUS基因导入高羊茅愈伤组织中,通过组织化学染色检测到了GUS瞬间表达活性;并对影响CUS基因瞬间表达的因素进行了分析．以期为提高基因枪法遗传转化效率提供参考。     

Effects of different combinations of benzyl adenine and indole acetic acid concentrations on in vitro plant regeneration in hexaploid wheat

Development of a reliable in vitro plant regeneration procedure for hexaploid bread wheat (Triticum aestivum L.) is a prerequisite for its improvement by genetic transformation. Here, we report the effects of two growth regulators, benzyl adenine (BA) and indole acetic acid (IAA) on callus induction and plant regeneration from scutellum cultures of two commercial bread wheat cultivars: Giza 164 and Sakha 69. Callus induction was obtained from isolated embryos cultured on modified Murashige and Skoog (MS) basal medium. After four weeks of callus induction, all calli were plated on MS basal medium for regeneration. Wheat genotype and callus induction medium played a dominant role in plantlet regeneration. 2.0 mg/L BA and 0.2 mg/L IAA were the best combinations for inducing callus and let to highest regeneration frequency (81.67%) across the cultivars. Overall, based on our medium conditions, Giza 164 displayed higher regeneration frequency (81.11%) than Sakha 69. These results will facilitate genetic transformation for the economic varieties Giza 164 and Sakha 69.     

Genotype x culture media interaction effects on regeneration response of three indica rice cultivars

Interactive effects of genotypes with callus induction and regeneration media combinations on green plantlet regeneration response were studied for three indica rice (Oryza sativa L.) cultivars, IR-72, IR-54 and Karnal Local. Isolated mature-embryos were used to derive scutellar callus and fifteen media combinations involving MS, N6, R2, SK1 and some modifications were tested. Regeneration percentage as well as the shoot-bud induction frequency were influenced by genotype, callus induction medium, regeneration medium, interaction between genotype and the two media (callus induction and regeneration) as well the interaction between the callus induction medium and regeneration medium. Basal media combination of SK1m (callusing) and MS (regeneration) was found to be the best for cv. Karnal Local in which regeneration frequency of 88% and shoot-bud induction of 233% was observed. In IR-72, the highest regeneration frequency of 47.5% and shoot-bud induction frequency of 77% was obtained on MS-MS combination. In IR-54, highest regeneration frequency (25%) was recorded on MMS(N)-MMS(N) combination, whereas, highest frequency of shoot-bud induction (50%) was observed on MMS(S)-MS combination. Although genotype and the composition of the callus induction basal medium were the major determinants of regeneration response, an overall analysis of variation also revealed a significant interaction between the media used for de-differentiation (callusing) and re-differentiation (plantlet regeneration). This revised version was published online in June 2006 with corrections to the Cover Date.     

寿锦的离体植株再生及组培产业化增殖

以寿锦(Haworthia retusa×cooperi cv.‘Variegata’)的幼嫩花蕾为外植体,对其进行了离体植株再生及组培产业化增殖研究。结果显示,外植体在MS+5.0 mg·L~(–1) 6-BA+0.5 mg·L~(–1) IBA培养基上诱导产生愈伤组织;不添加激素的MS基本培养基最适宜寿锦愈伤组织的分化;再生芽在MS+0.2 mg·L~(–1) 6-BA培养基上增殖时,不定芽增殖率及斑锦类型不定芽的诱导率最高,分别为16.7和79.9%。研究结果表明,通过愈伤组织途径能够诱导寿锦不定芽的再生,适当浓度的细胞分裂素有利于提高寿锦的诱导率。研究结果对于珍稀斑锦多肉植物种质资源的保护及其产业化应用具有重要的指导意义。     

小叶龙竹（Dendrocalamus barbatus）愈伤组织诱导及植株再生

以小叶龙竹种子为外植体,通过研究MS培养基中不同植物生长调节剂浓度组合对外植体愈伤组织诱导和不定芽分化的影响以及不同配比对生根的作用,建立了稳定的繁殖再生体系。试验结果表明愈伤组织诱导的最适培养基为MS＋2,4-D5．0mg·L-1;不定芽分化的最适培养基为MS＋2,4-D0．5mg·L-1＋6．BA1．0mg·L-1＋KT0．25mg·L-1;小苗的最适生根培养基为1／2MS＋6-BA0．5mg·L-1＋NAA1．0mg·L-1＋IBA0．4mg·L-1,建立的繁殖再生体系将为进一步利用分子生物学技术对竹类植物进行遗传改良奠定基础。     

杯山药零余子愈伤组织诱导及植株再生的研究

对怀山药（Ｄｉｏｓｃｏｒｅａ ｏｐｐｏｓｉｔａ）零余子愈伤组织的诱导、分化、再生苗的生根和移栽进行了研究。结果表明：⑴在不同激素组合的培养基上怀山药零余子均能产生愈作组织,而且具有一次成苗的能力。ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ２ｍｇ／Ｌ的培养基对诱导愈伤组织最有利,其出愈率达１００％;⑵在愈伤组织的分化中,ＢＡ１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ１ｍｇ／Ｌ的激素组合是最佳的,其分化率为６３．６％,且多形成丛生芽;⑶再生植株     

玉米幼胚高效再生系统的建立

建立了玉米幼胚高效再生系统.经研究发现,苏玉1号、农大3138、农大108的幼胚培养在含有2,4-D(2 5 mg/L)的IM培养基上后,大多数幼胚能愈伤化并增大,形成基部相连、上部分开的微芽结构;微芽结构在转移到BM培养基上后,形成小植株;进一步转移到RM培养基上,它们长根并形成完整植株.玉米幼胚高效再生植株与下列因素有关玉米基因型、幼胚大小、幼胚长芽至分化时间、6-BA、IBA、Gelrite.不同品种玉米再生能力有显著差异,幼胚大小在1～2mm之间再生能力强,幼胚长芽至分化时间4～6 d最好.激素6-BA浓度在0.5～0.6 mg/L之间有利于微芽形成小植株,IBA浓度在0.6～1 0 mg/L促进生根.Gelrite可代替琼脂粉用于玉米生根.