HLA表型与肿瘤逃逸

HLA Ⅰ类分子表达缺失是肿瘤细胞针对HLA分子具有向T细胞递呈免疫原性多肽这一作用而选择的一种逃逸机制。然而不同类型的肿瘤细胞或同一肿瘤在不同的发展阶段均呈现出不同的HLA Ⅰ类表达类型。目前 ,肿瘤组织及肿瘤细胞系中HLA Ⅰ类分子丢失的类型主要有 4种 :①HLA Ⅰ类分子全部丢失 ;②HLA单倍型丢失 ;③HLA单个座位丢失 ;④HLA等位基因丢失。此外 ,在肿瘤发展过程中非经典HLA Ⅰ类HLA E、 G及MHC类似物的异常表达可以抑制NK细胞对肿瘤细胞的溶解 ,则反映了肿瘤细胞针对NK细胞的免疫监视作用而选择的一种逃避机制。每一个荷瘤病人都是一个独特的整体 ,都将产生一个特殊的有助于逃逸的变异体 ,因此 ,检测HLA抗原在肿瘤细胞上的表达是一个新的指标 ,有助于制定未来的肿瘤生物治疗策略。     

HLA-G分子表达调控及其功能研究进展

HLA G分子是一种非经典HLA Ⅰ类抗原 ,相对于经典的Ⅰ类抗原 ,它的组织分布非常局限 ,具有有限的多态性。它的表达调控与经典Ⅰ类抗原存在着很大的差异 ,HLA G基因内经典Ⅰ类基因反式活化的3个主要元件增强子A、ISRE和SXY均发生变异 ,导致NF κB、IRF1、CⅡTA介导的反式激活途径对HLA G基因不能发挥作用。最早在母胎界面发现存在HLA G分子表达 ,它可以与NK细胞和CTL表面相应的杀伤细胞抑制性受体 (KIR)结合 ,从而抑制它们的杀伤作用 ,这可能是母胎耐受的重要机制。近来的研究表明HLA G分子还可表达于少数类型肿瘤细胞、一些受到感染的细胞和一些正常细胞。它的表达调控及其可能的功能是近来的研究热点。     

HLA—G结构与功能研究进展

胎盘组织外绒毛洋养层细胞不表达经典的ＨＬＡⅠ类分子，使这此细胞易感于ＮＫ细胞的攻击，但由于表达非经典的ＭＨＣⅠ类分子ＨＬＡ－Ｇ可以防止ＮＫ细胞识别这些细胞，ＨＬＡ－Ｇ至少是３种ＮＫ细胞抑制受体的配体；表达ＨＬＡ－Ｇ的滋养层细胞可能递呈肽类给Ｔ细胞，转染膜结合型ＨＬＡ－Ｇ１，－Ｇ２及可溶性ＨＬＡ－Ｇ分子的细胞能抑制同种Ｔ淋巴细胞的增殖反应抗原特异性的ＣＴＬ反应；以及ＨＬＡ－Ｇ基因的多态性程度是有限，     

杀伤细胞抑制性受体研究进展

杀伤细胞抑制性受体为细胞表面糖蛋白受体 ,其表达在NK细胞和一部分T细胞表面 ,能特异性地与靶细胞表面HLAⅠ类分子相应的等位基因产物结合 ,诱导负反应信号 ,抑制NK及T细胞的细胞毒活性。NK细胞表达抑制受体 ,有利于防止自身免疫的发生以及裂解肿瘤或病毒感染的靶细胞。T细胞表达抑制受体 ,可能对自身抗原起交叉反应的CTL克隆有抑制作用 ,但其很可能拮抗CTL的主要功能而不能有效地控制病毒感染或消除肿瘤细胞。理解抑制性受体有利于制订相应的治疗方案 ,并为防止移植物排斥反应开辟一条新的途径。     

HLA-G分子表达调控及其功能研究进展

HLA—G分子是一种非经典HLA—Ⅰ类抗原，相对于经典的Ⅰ类抗原，它的组织分布非常局限，具有有限的多态性。它的表达调控与经典Ⅰ类抗原存在着很大的差异，HLA—G基因内经典Ⅰ类基因反式活化的3个主要元件增强子A、ISRE和SXY均发生变异，导致NF—κB、IRFl、CⅡTA介导的反式激活途径对HLA—G基因不能发挥作用。最早在母胎界面发现存在HLA—G分子表达，它可以与NK细胞和CTL表面相应的杀伤细胞抑制性受体(KIR)结合，从而抑制它们的杀伤作用，这可能是母胎耐受的重要机制。近来的研究表明HLA—G分子还可表达于少数类型肿瘤细胞、一些受到感染的细胞和一些正常细胞。它的表达调控及其可能的功能是近来的研究热点。     

002 HLA表型与肿瘤逃逸

HLA-Ⅰ类分子表达缺失是肿瘤细胞针对HLA分子具有向T细胞递呈免疫原性多肽这一作用而选择的一种逃逸机制.然而不同类型的肿瘤细胞或同一肿瘤在不同的发展阶段均呈现出不同的HLA-Ⅰ类表达类型.目前,肿瘤组织及肿瘤细胞系中HLA-Ⅰ类分子丢失的类型主要有4种①HLA-Ⅰ类分子全部丢失;②HLA单倍型丢失;③HLA单个座位丢失;④HLA等位基因丢失.此外,在肿瘤发展过程中非经典HLA-Ⅰ类HLA-E、-G及MHC类似物的异常表达可以抑制NK细胞对肿瘤细胞的溶解,则反映了肿瘤细胞针对NK细胞的免疫监视作用而选择的一种逃避机制.每一个荷瘤病人都是一个独特的整体,都将产生一个特殊的有助于逃逸的变异体,因此,检测HLA抗原在肿瘤细胞上的表达是一个新的指标,有助于制定未来的肿瘤生物治疗策略.     

HLA-G分子的最新研究进展

HL A- G属于一种非经典 HL A- I类抗原 ,主要表达于母胎界面的滋养层细胞。迄今为止的研究表明 ,HL A- G分子可以与相应杀伤细胞抑制性受体 (killer inhibitory receptor,KIR)作用 ,抑制 NK细胞和 CTL 的杀伤作用 ,这可能是诱导和维持母胎耐受的一个重要机制。与经典 I类分子类似 ,HL A- G的凹槽结构可结合九肽抗原 ,从而可能向 TCR提呈抗原或直接与 T细胞表面 KIR结合 ,进而调控 T细胞功能     

HLA-G研究进展

HLA-G分子属MHC Ⅰ类非典型分子(MHC Ⅰb),组织特异性地高表达于胎母界面的滋养层细胞,MHC Ⅰ、Ⅱ类抗原是缺乏的。HLA-G分子通过NK细胞受体抑制NK细胞杀伤活性,并作为CD8~+细胞毒抑制性T细胞的识别和激活因子,抑制CTL的杀伤作用,HLA-G在胎母耐受中发挥重要作用。     

HLA-G调控自然杀伤细胞免疫功能的研究进展

人白细胞抗原G(HLA-G)属于非经典的HLAⅠ类分子,正常情况下主要表达于母胎界面绒毛外滋养层细胞。一些肿瘤细胞系、肿瘤组织、感染的组织细胞及正常组织细胞也可检测到HLA-G的表达。自然杀伤(NK)细胞是重要的固有免疫细胞,在免疫应答与免疫调节过程中发挥重要作用。HLA-G参与免疫调控引发了越来越多的关注,其功能由最初的"母胎耐受"逐渐扩展到肿瘤免疫逃逸、器官移植耐受等多个方面,本文重点回顾了HLA-G参与调控NK细胞免疫功能的各种机制:通过与受体相互作用抑制NK细胞的杀伤作用、调节NK细胞表面受体及细胞因子的表达、通过胞啃作用(trogocytosis)广泛引发免疫抑制、引发NK细胞凋亡。     

HLA-G与移植免疫

非经典HLA Ⅰ类分子(HLA-Ⅰb)HLA-G参与抗原递呈,通过相应受体调节NK细胞及T淋巴细胞功能,是一个 重要的免疫调节分子。HLA-G分子的免疫调节作用已从母胎免疫耐受扩展到肿瘤免疫、抗感染免疫和器官移植免疫等领域, 近年来在移植免疫方面取得了重要进展。     

表达HLA—G1的K562细胞抵抗外周血NK细胞杀伤作用的研究

目的 研究HLA－G1分子对NK细胞杀伤活性的影响。方法 供助脂质体介导的DNA转染技术,将本室构建的真核南闰pcDNA3-HLA-G1转染人K562细胞;通过G418筛选,获得克隆化细胞株K562－G1;应用RT－PCR及流式细胞术分别在RNA水平和蛋白质水平检测HLA－G1的表达;最后,应用MTT比色法检测转染细胞对不同个体外周血NK细胞杀伤活性的抑制效应。结果 与转染了空质粒的对照组相比,外周血NK细胞对K562－G1的杀伤率降低32.43%（P＜0.01）。结论 靶细胞表达HLA－G2分子可明显抑制NK细胞的杀伤效应。     

HLA-G反义寡核苷酸对绒癌细胞免疫逃逸的影响

采用非经典MHCI类免疫耐受分子HLA G反义基因 ,封闭和阻断肿瘤细胞上HLA G分子的释放 ,逆转肿瘤细胞的免疫抑制作用 ,为肿瘤生物治疗提供新的理论和实验依据。利用反义核酸技术 ,合成HLA G反义寡核苷酸 (ASODN ) ,硫代化修饰与脂质体形成复合物 ,转导入表达HLA G的绒毛膜癌细胞系JEG 3。采用RT PCR方法检测HLA GmRNA表达水平的变化。流式细胞术检测细胞表面HLA G蛋白表达水平的变化 ;ASODN处理后 ,对JEG 3诱导外周血单个核细胞凋亡的影响 ;MTT法检测ASODN作用后 ,JEG 3作为第 3种抑制细胞对同种异体混合淋巴细胞反应的影响。结果表明 ,HLA GASODN可显著抑制JEG 3细胞HLA GmRNA和蛋白水平的表达 ,逆转HLA G分子诱导的免疫效应细胞的凋亡作用 ,逆转HLA G分子对同种异体混合淋巴细胞反应的抑制作用     

不同IL-15转染对NCI-H446 HLA-Ⅰ和HLA-Ⅱ表达及NK敏感性的影响

目的探讨不同形式IL-15基因转染对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446细胞HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达及NK杀伤敏感性的影响。方法在本室已构建的3种细胞模型（转染IL-15成熟肽基因的NCI-H446／IL-15mp细胞、转染原型IL-15基因的NCI-H446／IL-15细胞和转染以IL-2信号肽替代IL-15信号肽的改型IL-15基因的NCI-H446／IL-2sp-IL-15mp细胞）基础上,以野生株细胞为对照,流式细胞分析仪（Fluorescence-activated cell Sorter,FACS）分析这3种细胞HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定它们对NK杀伤的敏感性。结果野生株NCI-446细胞表面阳性表达HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子;转染IL-15成熟肽基因或改型IL-15基因后,这两种分子的表达均被抑制为阴性;转染原型IL-15基因后,这两种分子的表达均被显著上调。5名不同健康志愿者的外周血单个核细胞（PBMC）对野生株NCI-H446细胞的平均NK杀伤率最低,对NCI-H446／IL-15、NCI-H446／IL-15mp和NCI-H446／IL-2sp-IL-15mp细胞的平均NK杀伤率依次升高。结论转染不同形式IL-15基因对NCI-H446细胞的免疫生物学特性影响不同。转染IL-15成熟肽基因或改型IL-15基因,抑制NCI-H446细胞表面HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达;转染原型IL-15基因,上调这两种分子的表达;转染不同形式IL-15基因均可增强NCI-H446细胞对NK杀伤的敏感性,但程度不同;以改型IL-15者最高,IL-15成熟肽者次之,原型IL-15者最低。     

Raji细胞逃逸NK细胞免疫杀伤机制的初步探讨

目的 探讨人B细胞淋巴瘤Raji细胞逃逸NK细胞免疫杀伤的机制.方法 以K562细胞作为对照,应用LDH释放法检测不同效靶比时同种异体NK细胞杀伤Raji细胞的活性.并分别用PCR方法和流式细胞仪检测K562和Raji细胞MICA/B、ULBP1-3、HLA基因型和分子的表达情况.效靶比20∶1时用单抗分别阻断K562和Raji细胞表面MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3和HLA-Ⅰ类分子,观察NK细胞对其杀伤活性的变化.结果 不同效靶比时NK细胞杀伤Raji细胞的活性明显低于杀伤K562细胞的活性,二者之间差异有统计学意义(P<0.05).K562细胞表达MICMB和ULBP1～3基因和分子,不表达HLA-Ⅰ类分子,Raji细胞表达ULBP1～3基因和HLA-Ⅰ类分子,不表达MICA/B和ULBP1～3分子.Raji细胞HLA基因型为A*3、3.B*71、71,Cw3、4.用单抗封闭MICMB和ULBP1～3分子后,NK细胞对K562细胞的杀伤活性明显降低,对Raji细胞的杀伤活性无明显改变.结论 Raji细胞逃逸NK细胞免疫杀伤机制和Raji细胞高表达HLA-Ⅰ类分子,不表达NKG2D的配体MI-CA/B和ULBPI～3有关.     

阻断内源性IL-15的表达对人胚胎横纹肌肉瘤细胞的影响

目的　观察应用反义RNA阻断胚胎横纹肌肉瘤细胞内源性IL 15表达后 ,肿瘤细胞对NK细胞杀伤敏感性及其体内、外增殖的变化。方法　应用流式细胞技术检测RD细胞及转染IL 15反义RNA的RD 10细胞表面MHCⅠ类 (包括HLA ABC重链及β2M链 )分子的表达 ;应用LDH释放法检测NK细胞对RD和RD 10细胞的细胞毒活性 ;通过对转染细胞的细胞周期分析以及接种到裸鼠体内来评价IL 15对肿瘤细胞增殖的影响。结果　①阻断IL 15的表达可使HLA ABC分子阳性细胞百分率从 19.5 %升至 95 .5 % ;β2M分子阳性细胞百分率从 31%升至 90 .6 %。由于MHCⅠ类分子表达的增高 ,RD 10细胞对NK细胞的杀伤敏感性低于RD细胞 (P <0 .0 1)。②RD 10细胞的增殖减慢 ,阻滞在G0 /G1期。动物实验的结果也表明RD 10细胞在体内的致瘤性低于RD细胞。结论　阻断RD细胞内源性IL 15的表达可抑制该细胞的增殖 ,从而提示IL 15在肿瘤发生及发展过程中作用的多样性     

中国汉族群体KIR基因多样性的研究进展

人杀伤细胞免疫球蛋白样受体分子(killer cell immnoglobulin-like receptor,KIR)主要表达于NK细胞和部分T细胞表面.KIR分子的配体是表达于靶细胞上的某些HLA Ⅰ类分子,两者可形成配体/受体复合物.HLA-Ⅰ/KIR分子相互识别,通过传导活化或抑制信号调节NK细胞的杀伤功能,这是NK细胞参与适应性免疫应答的重要机制之一.在免疫应答过程中,HLA-Ⅰ/KIR分子的相互作用,可保护机体抵御各种各样病原体的侵袭.本文就我国汉族群体KIR基因多样性的研究进展作一综述.     

HLA-G分子在体外抑制NK细胞杀伤效应的研究

在获得稳定表达HLA G分子的K5 62细胞克隆的基础上 ,观察 4h及 16h不同效靶比例时NK细胞对靶细胞的杀伤效应 ,结果显示 ,NK细胞对转染HLA G基因的K5 62细胞的杀伤作用较未转染细胞明显降低 (P <0 0 1) ,用W6/ 32及BFL 1单克隆抗体阻断HLA G分子 ,可以恢复NK细胞的杀伤活性。用Y9/Z2 70及XA185 /Z2 70单抗特异性阻断抑制性受体CD94/NKG2A ,未观察到明显影响     

K562细胞转染HLA-B分子对NK细胞杀伤功能的影响

为了研究不同HLA B分子对NK细胞杀伤活性的影响 ,我们分别构建pcDNA3 HLA B 390 5 2、B 2 70 4、B 5 1 0 2 2基因真核表达载体 ;借助脂质体将各质粒转染入K5 6 2细胞 ,经G4 1 8筛选 ,分别获得阳性表达细胞株 ;并应用LDH法检测转染细胞对不同个体外周血NK细胞杀伤活性的抑制效应。结果显示 :与转染了空质粒的对照组相比 ,外周血NK细胞对K5 6 2 B39的杀伤率无明显影响 ,而对K5 6 2 B2 7,K5 6 2 B5 1的杀伤率降低。当使用针对NK细胞受体KIR3DL1的单抗DX9封闭NK细胞后 ,此抑制效应大部分消失。提示靶细胞表达HLA Bw4分子可明显抑制NK细胞的杀伤效应 ,而表达HLA Bw6分子对NK细胞杀伤功能无明显影响     

HLA-G的遗传、功能及临床意义

HLA－G属非经典的HLA Ⅰ类分子，与经典的HLA Ⅰ类分子相比它有3个特点：（1）多态性水平低；（2）体内分布局限于特定组织；（3）由于内含子和外显子间的剪接位点改变可形成4种膜结合型和两种可溶型HLA－G异构体。过去几年大量研究结果表明，HLA－G是一种免疫耐受分子。在此将系统地介绍HLA－G的遗传多态性、表达、功能、对免疫相关疾病的影响、演变及HLA－G的临床应用前景。     

肿瘤细胞HLA分子的表达及IFN—γ的调控作用

目的 研究肿瘤细胞表达HLA分子及IFN－γ的调控作用。检测TIL细胞中T细胞亚群的变化,并与PBMC比较。方法 采用FACS检测细胞表达的CD抗原,采用ABC免疫组化染色检测肿瘤细胞HLA－Ⅰ,Ⅱ类分子的表达。以IFN－γ诱导建系的卵巢癌细胞表达HLA分子。结果 明细胞癌患者TIL细胞中的T细胞明显多于大肠癌患者。肿瘤患者PBMC中的T细胞数少于正常对照;肿瘤组织HLA－Ⅰ类抗原的表达明显低于正常组织,HLA－Ⅱ类抗原泊表达高于正常组织。与正常组织相比较,大肠癌患者比肾细胞癌患者HLAⅠ类抗原的表达更低。IFN－γ可诱导建系卵巢癌细胞表达HLA－Ⅰ类抗原,但不能诱导HLA－Ⅱ类抗原的表达。结论 肿瘤组织HLA表达的变化与肿瘤组织中TIL的数有关;IFN－γ能选择性地诱导卵巢癌细胞表达HLA－Ⅰ类分子,在抗肿瘤免疫中具有重要的意义。